牛猝死症诊断和防制

经流行病学调查,病原分离鉴定,病理学检查,临床症状观察确定黑龙江省猝死症的主要病原为Ａ,Ｃ型魏氏梭菌。在部分死亡病例中,也有因误食灭鼠药氟乙酰胺而引起的中毒,但数量较少,根据病原分离结果,魏氏梭菌和腐败梭菌,魏氏梭菌和巴氏杆菌,魏氏杆菌和链球菌可形成混合感染,使魏氏梭菌病疫情更加严重而呈地方性流行,这是近几年来牛魏氏梭菌病的新特点。     

贵州黑山羊猝死症的流行病学调查

贵州省惠水县龙塘山养殖基地的黑山羊于1998年11月至1999年3月期间发生猝死症死亡137只,死亡率18.03%(137/760).通过流行病学调查、临床症状、病理剖检与细菌学检测,结果表明该羊群爆发的猝死症主要是由魏氏梭菌与一些应激因素协同所致.     

对黑山羊肠内容物中魏氏梭菌的研究

通过分离纯化，培养特性和生化反应的观察，毒素溶血活性和最小致死量的测定及中和试验对正常和猝死黑山羊肠内容物中的魏氏梭菌进行了初步研究，结果表明，猝死黑山羊肠内容物魏氏梭菌的分离率为100％，而正常黑山羊肠内容物的分离率只有40％（16／40），肠内容物中魏氏梭菌主要是A型；魏氏梭菌不同分离株在培养特性，生化反应，毒素溶血活性和小白鼠最小致死量上存在一定的差异。     

鸡魏氏梭菌的分离和鉴定

为了研究鸡魏氏梭菌的生物学特性及其发病机制,从河南某鸡场临床症状、剖检病变疑似鸡魏氏梭菌病例进行细菌分离,从中分离到1株细菌。对分离的病菌进行形态培养、生化试验、动物试验等鉴定,鉴定为鸡魏氏梭菌。药敏实验表明鸡魏氏梭菌对青霉素、庆大霉素敏感性较高。     

鹿魏氏梭菌分离鉴定及部分生物学特性的研究

对猝死鹿脏器中分离的２４株魏氏梭菌进行研究表明：８７．５％（２１／２４）分离株为血清Ａ型,１２．５％（３／２４）分离株为血清Ｃ型。经毒力测定,筛选出了３株产毒素强的菌株,该项研究为魏氏梭菌疫苗研制奠定了基础。     

猪猝死病的诊治报告

猪猝死症又叫猪魏氏梭菌病。猪魏氏梭菌可出现在人畜粪便、土壤、水和尘埃中,该菌群属典型的条件性致病菌,它可引发地区性流行病,对畜牧业的生产具有重要意义。每年都有大量的动物因不同类型魏氏梭菌感染而死亡。尤其是近年来我国发生家畜猝死症与该菌有关,发病急、病程短、无任何前期症状而突然死亡,而且死亡率极高。一般发生于育肥猪、     

草食动物魏氏梭菌病的诊断及防治

正魏氏梭菌病又叫产气荚膜梭状芽胞杆菌病、肠毒血症、肠出血症、猝死症、软肾病等,对畜牧业造成很大损失。魏氏梭菌又名产气荚膜梭状芽胞杆菌,在自然界广泛存在,G+厌氧,是一种条件致病菌,主要感染猪、羊、马、牛、鸡和兔等畜禽,患病动物以出现     

我国家畜猝死症的研究进展

家畜猝死症又称暴死症或急性死亡综合症,它的病因是多方面的,但普遍认为魏氏梭菌感染或与其他病原混合感染是其致病的主要原因.目前,国外对魏氏梭菌外毒素的结构和生物活性研究比较透彻,对魏氏梭菌外毒素的防治研究主要集中在免疫预防方面;国内的研究工作主要是借鉴国外的研究技术和方法,从基因水平上研究了魏氏梭菌主要致死性毒素保护性抗原基因的克隆和表达.综述了我国家畜猝死症的研究进展.     

猪流行性腹泻病毒和魏氏梭菌混合感染的诊断

用PCR和序列分析等方法对从湖南湘潭某猪场送检的6份仔猪内脏和肠系膜淋巴结进行鉴定,同时进行细菌的分离、培养、鉴定。结果发现,所有样品中均检出猪流行性腹泻病毒(PEDV),序列分析发现为PEDV变异株;样品中均检出产气荚膜梭菌(魏氏梭菌)。病猪被诊断为PEDV与魏氏梭菌混合感染。采用PEDV疫苗紧急接种及综合防治措施后,疫情得到了有效控制。     

梅花鹿魏氏梭菌病的诊断与防治

为了诊断多个养殖场梅花鹿发病原因,并找到快速有效的防治措施。试验采用流行病学调查、临床症状、病理解剖、细菌分离鉴定和动物实验等方法对多个养殖场患病梅花鹿进行确诊,对分离病原菌进行药敏试验,并采取相应防治措施。结果表明,通过临床症状观察和病理解剖变化,初步诊断是魏氏梭菌引起梅花鹿死亡。分离得到的菌株,其菌落形态和革兰氏染色结果与以往报道的魏氏梭菌相符。对16S rRNA基因及毒素基因进行PCR扩增,测序结果发现,分离菌株与GenBank中魏氏梭菌16S rRNA同源性为98%,使用魏氏梭菌的5种主要毒素基因进行PCR扩增,只有Alpha基因有目的条带,测序结果发现,分离菌株与GenBank中魏氏梭菌Alpha基因同源性为99%,可确定是A型魏氏梭菌。将分离得到的魏氏梭菌接种小鼠,发现小鼠在短时间内全部死亡,且从小鼠体内分离到相同病原。综合以上结果得出,这些鹿场是A型魏氏梭菌感染引发的疾病。     

几起兔腹泻疫情的诊断研究

对山东省泰安等地的5起兔的腹泻疫情进行临床诊断,根据初步诊断结果进行了病原的分离培养,可疑菌经多重PCR鉴定为A型魏氏梭菌.根据疫情报爆发时出现的临床特征,结合实验室诊断结果,可以确定上述5起兔的腹泻疫情与兔魏氏梭菌感染密切相关,分离的魏氏梭菌的的血清型为A型.     

魏氏梭菌致奶牛猝死病例诊治与分析

由产气荚膜梭菌引起的牛魏氏梭菌病是一种发病十分迅速、病程较短且病死率高的急性传染病。该病致病原因复杂,无明显临床症状,病牛突然死亡,严重影响养殖户的收益和养牛业的发展。吉林省白城市某大型奶牛场14头奶牛突然猝死,死亡牛只抽搐休克、角弓反张、共济失调,根据临床症状、病理剖检、细菌分离培养及生化鉴定结果,确诊病死牛为魏氏梭菌感染,对发病原因进行了分析,提出了预防、治疗建议,有效控制了病情。     

产气荚膜梭菌的分离鉴定

从山西省太原市、阳泉市、昔阳县、绛县、太谷、榆次等地的鹿场发生鹿出血性肠炎的病死鹿体内分离到21株产气荚膜梭菌,鉴定均为A型。对A型产气荚膜梭菌的培养条件进行了研究。结果表明:最佳培养基为厌氧肉肝胃酶消化汤,最佳产毒条件为35℃7h。     

贵州猪细菌性腹泻的病原分离与鉴定

从贵州6个地区猪腹泻猪的粪便棉拭子和病死组织中分离到85株细菌,经形态学观察、染色特性、培养特性、生化特性分析鉴定为大肠杆菌,沙门氏杆菌、魏氏梭菌,初步鉴定出本地细菌性腹泻普遍存在的病理原因,对该病的防治有一定的指导作用。     

绵羊猝击的诊断

对2005年3月黑龙江大庆市某羊场绵羊发生的疫情，经临床诊断、剖检、细菌分离、鉴定和分子生物学诊断，确诊为C型魏氏梭菌感染。并给出了预防、诊治方案。     

一起犬猝死症的病原学诊断

对一起以呼吸困难为特征的死犬进行诊断表明，该起病例由Ａ型魏氏梭菌感染引起，从而进一步明确了魏氏梭菌引起犬猝死的一个重要原因。     

普氏野马肠毒血症的诊断与防治

从发病死亡的普氏野马无菌采集肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结和肠道内容物，在实验室进行病原分离与鉴定，在采集病料中未分离到病毒；在肝、脾、肾和肠涂片上发现大量有荚膜的G^＋大杆菌，涂片放置数小时后可观察到芽胞。在鲜血琼脂上分离到一株G^＋大杆菌，菌落周围呈β溶血环。在厌氧肉肝汤中增菌培养，分离到兼性厌氧的G^＋杆菌，有荚膜，有芽胞。取肠内容物加生理盐水稀释，离心取上清液，滤过除菌后分成两份；一份加热（100℃ 15min），一份不加热，分别注射小鼠尾静脉，12h后不加热组小鼠死亡，证明有毒素存在。另将滤液分成5份，分别加入A，B，C，D型魏氏梭菌抗毒素血清及生理盐水（对照），混合均匀后，在37℃下作用40min，然后分别尾静脉注射小白鼠，每组4只，观察24h。根据小白鼠死亡及存活结果，判定为D型魏氏梭菌。用该菌注射豚鼠可将其致死。根据临床症状和实验室检验结果，可确定该病为D型魏氏梭菌引起的普氏野马肠毒血症。     

SDS-PAGE法检测产气荚膜梭菌毒素型研究

为了探索一种快速、准确检测产气荚膜梭菌毒素型的方法,以便有效预防控制该病的流行和发生,利用SDS-PAGE方法,对通过ELISA鉴定的20株(A型16株、C型3株和D型1株)德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株,以及通过Multiplex-PCR鉴定的57株山东省疫区产气荚膜梭菌分离株外毒素蛋白的相对分子质量进行测定,以确定毒素的种类,进而确定菌株的毒素型。结果表明,产气荚膜梭菌标准株、德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株、山东省疫区产气荚膜梭菌分离株粗提外毒素的质量浓度分别为3.261,2.238~3.333,1.451~3.109mg/mL,精提外毒素的质量浓度分别为0.803,0.521~0.999,0.530~0.812 mg/mL。SDS-PAGE法检测的20株德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株中A型17株、C型2株、D型1株,与ELISA检测结果的符合率为95.0%;SDS-PAGE检测的57株山东省疫区产气荚膜梭菌分离株全部是A型,与Multiplex-PCR检测结果的符合率为100%。说明应用SDS-PAGE方法对产气荚膜梭菌的检测结果与ELISA方法的检测结果有一定的差异性,与Multi-plex-PCR方法的检测结果一致。     

兔流行性腹胀病样品中产气荚膜梭菌的分离鉴定

从发生典型病理特征的兔流行性腹胀病死亡兔盲肠内容物中分离到1株产气荚膜梭菌,命名为SD14-02。经革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA比对和毒素型特异性PCR等方法对分离细菌进行鉴定和分型,结果显示,分离株SD14-02为革兰氏阳性杆菌,生化鉴定显示其符合产气荚膜梭菌的生化图谱。经系统发育分析,SD14-02的16S rRNA基因序列与产气荚膜梭菌位于同一分支。经毒素型特异性PCR方法鉴定,SD14-02为A型产气荚膜梭菌,蛋白电泳显示其与A型产气荚膜梭菌疫苗株苏84-A存在一定差异。动物试验证明SD14-02对小鼠具有致病性。研究结果为兔流行性腹胀病致病原的进一步研究奠定了基础。     

魏氏梭菌贵州分离株α-毒素基因的克隆与表达

提取已鉴定的A型魏氏梭菌Clostridium welchii贵州分离株的染色体DNA，经酶切回收分子长2～4kb的DNA片段混合物，将其插入质粒载体pUCl9中，并转化至E．coli JMl09，通过Amp抗药性和显色反应的选择，再提取阳性重组细菌质粒进行探针检测、酶切分析和PCR鉴定，筛选出含魏氏梭菌α-毒素基因的重组大肠杆菌；经溶血与溶血抑制试验及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实，重组E．coli的表达产物符合α-毒素的生物学特性。