一株拮抗香蕉枯萎病菌的链霉菌分离和鉴定

从海南温泉中分离到1株对香蕉枯萎病病原菌4号小种有强拮抗作用的链霉菌菌株HW1,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析。并对该菌株和香蕉枯萎病病原菌4号小种在土壤中进行了不同温度下的共培养试验。结果表明,其在PDA培养基上,内生菌丝无横隔、不断裂;孢子圆形,簇聚在气生菌丝上。在PDA培养基上,菌落生长开始为白色,培养成熟后,气丝逐渐由白色变灰,最后因为产生孢子变为褐色,并可产黄色可溶色素。以16S rDNA序列为基础构建了菌株HW1的系统发育树,其与模式链霉菌株的16S rDNA序列的同源性为99%。初步将该菌株鉴定为Streptomyces costaricanus。HW1菌株和香蕉枯萎病病原菌4号小种在土壤中的共培养试验表明,HW1菌株在45℃温度的生长环境中,表现出对香蕉枯萎病病原菌较好的抗性。     

油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性

从江苏句容市丘陵山区从未施用多菌灵（MBC）的白菜型油菜苗核病株上，采集了49个Sclerotiniasclerotiorum野生菌株，MBC抑制这些菌株的菌丝生长，平均EC50为0．2198±0．1083μg／ml，最低抑制生长浓度（MIC）值为5．0μg／ml。从镇江农科所油菜育种试验田中采集的S．selerotiorum菌核标样中，发现6个抗MBC的抗性菌株，其EC50值均大于2000μg／ml。抗性菌株对离体油菜叶片的致病力与野生的敏感菌株没有差异。油菜叶片经1000μg／mlMBC溶液浸渍后，敏感菌株对其不能侵染，而抗性菌株对这些叶片的致病力与对未浸药叶片的致病力无明显差异。     

甘蓝型油菜病原核盘菌菌核的结构观察

对菌核结构的详细研究有利于了解菌核超强的抗逆能力和开发防治菌核病的新方法。通过电镜扫描观察油菜核盘菌菌核的结构,结果表明,菌核可以分为3层：外表皮、皮层和髓部。外表皮最外层是菌丝体交织成的网状结构,这层菌丝体网覆盖在大小不同的凸面体上,不同大小的凸面体交错排列,与菌丝体网一起形成菌核的外表;皮层在外表皮下面,是由与外表皮平行生长的菌丝体紧密排列而成;髓部是由变形膨大的菌丝体构成的疏松蜂窝状结构,类似植物的储藏组织。     

江苏省油菜菌核病菌对多菌灵的敏感性

为监测目前油菜菌核病菌对多菌灵抗性现状，对从江苏省各地采集的油菜菌核病病原菌菌株以及海安、苏州和高淳三地的油菜菌核病病原菌田间群体菌株进行了多菌灵的敏感性测定。结果表明，江苏省油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性已经产生，不同地区菌株对多菌灵的抗性比率不同。在苏州的田间菌株群体中抗性菌株的比率达到28.12%，而在高淳等地的菌株中没有检测到抗性菌株的存在。抗性菌株都表现为高抗，其EC50 >100µg／ml。对抗性菌株的β-微管蛋白基因进行PCR扩增和酶切的结果表明，所有抗性菌株的β-微管蛋白基因的198位都发生突变，从而导致油菜菌核病菌对多菌灵抗性的产生。从江苏省范围来看，继续使用多菌灵防治油菜菌核病菌可能会导致抗性频率上升、抗性范围扩大。     

茶树炭疽病菌拮抗链霉菌的筛选及其抑菌特性研究

茶炭疽病菌刺盘孢菌（Colletotrichum camelliae）是引起茶树炭疽病的重要致病菌,为获得对C.camelliae具有拮抗作用的链霉菌,采用稀释涂布法和平板对峙法从茶园生境中分离筛选出对其具有明显拮抗作用的链霉菌菌株,并结合形态学观察、生理生化特征和16 SrRNA基因序列分析对其进行种属鉴定;开展基于链霉菌菌株的抗菌谱测定、茶炭疽病菌菌丝生长抑制试验和孢子萌发抑制试验;通过菌丝生长速率法测定其无菌发酵滤液对茶炭疽病菌的抑菌活性及其抑菌活性稳定性,并测定其产胞外降解酶能力、抗菌物质合成基因、挥发性与非挥发性代谢物抑菌活性。结果表明,筛选获得一株对茶炭疽病菌C.camelliae具有良好抑菌效果的菌株XS-4,对茶炭疽病菌的平板抑制效果为76.42%;结合形态学观察、生理生化特征,以及16 SrRNA基因序列分析,将菌株XS-4鉴定为多产色链霉菌（Streptomyces polychromogenes）;菌株XS-4对其他8种植物病原菌均具有较好的抑菌效果,抗菌性能具有广谱性。扫描电镜结果表明,菌株XS-4能抑制茶炭疽病菌菌丝生长。孢子萌发抑制试验发现,拮抗菌XS-4发...     

一株拮抗椰子茎泻血病菌的链霉菌鉴定

从文昌椰子园土壤分离筛选到一株对椰子泻血病菌奇异长喙壳菌（Ceratocystis paradoxa）有良好抑制效果的放线菌FXJ-258,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化特征以及16S rDNA序列分析。结果表明：该菌孢子方形至长圆形,表面光滑,在高氏培养基上,气丝初期白色,随着时间渐变为浅灰色,基丝无鉴别色素,无可溶性色素;能利用L-阿拉伯糖,D-半乳糖, D-葡萄糖,D-甘露糖,D-木糖,D-核糖,L-鼠李糖等碳源,不能利用D-果糖,肌醇,蔗糖,水杨苷等。以16S rDNA序列为基础构建了菌株FXJ-258的系统发育树,其与模式链霉菌株的16S rDNA序列的同源性为99.64%,初步将该菌株鉴定为Streptomyces murinus。     

油菜内生枯草芽孢杆菌BY-2抗油菜菌核病菌有效成分的鉴定和分离提纯

油菜内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BY-2产生2种类型的抗真菌物质，一种是挥发性的de物质，可以有效地抑制油菜菌核病菌的生长；另一种是分泌到培养液中的物质。重点研究第二类抗菌物质的提取和纯化分析方法。试验证明BY-2 产生和积累高效抑制油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)de Bary）生长的细胞外分泌型物质，其发酵上清液与油菜菌核病菌对峙培养形成了2.8 cm的抑菌圈；采用离心收集发酵液上清液、调节酸性条件、甲醇溶解和Sephadex G25葡聚糖凝胶柱层析等方法，可以沉淀、萃取收集和纯化该物质，而且收集率高、活性强、纯度高。     

戊唑醇对油菜菌核病菌作用机制的探讨

为探明戊唑醇对油菜菌核病的防治效果及作用机制,采用生物测定方法,研究戊唑醇的室内毒力、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)的菌丝干重、菌丝蛋白质含量、菌核萌发、菌核致病力和菌丝体细胞膜电导率。结果表明:戊唑醇对油菜菌核病菌具有极强的抑菌作用,EC50和EC90值分别为1.3μg/mL和11.2μg/mL;用戊唑醇处理后,菌丝体干重差异显著,蛋白质含量、菌核萌发率和致病力均随处理浓度的提高而降低;戊唑醇对菌丝体电导率无影响,但对菌丝体的生长有抑制作用。表明戊唑醇通过抑制菌丝干重、菌核萌发率、蛋白质含量和致病力而控制病害发生。     

抑制油菜菌核萌发的真菌分离及其生防研究初报

从武汉地区种植油菜的灰潮土土壤中分离得到三种真菌,分别是短帚霉(Scopulariopsis brevicaulis)、哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)和棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)。25℃共培养2周后发现,三种真菌的菌株对油菜核盘菌菌核的致死率分别为95.6%、78.9%和83.3%。用哈茨木霉菌Tri-1和棘孢曲霉Asp-1制作而成的生防制剂用于盆栽试验,结果表明盆栽芝麻(旱地作物)和水稻(水田作物)种植60d后,土壤中埋植的菌核萌发率分别下降27.3%和38.0%;继而后作油菜60d后,重新埋植的菌核萌发率分别下降16.1%和18.3%。     

拮抗大豆疫霉菌植物内生细菌的筛选与鉴定

大豆疫霉根腐病是世界范围内危害严重的毁灭性大豆病害,筛选内生菌进行生物防治是未来该病害防治的重要发展方向。以大豆根系为材料筛选得到67株内生细菌,采用平板对峙生长实验,发现其中18株对大豆疫霉菌的菌丝生长具有抑制作用,其中以A2、A4、A7和B8效果最佳,抑制率分别达到72.8%、55.5%、76.0%和87.1%。利用无菌发酵滤液与大豆疫霉孢子共培养发现,A2和A4对孢子萌发具有明显抑制效果,抑制率达75.4%和85.8%。盆栽实验表明,A2和A4无菌发酵滤液能使经大豆疫霉孢子侵染后的大豆种子萌发率由63.1%分别提高到80.0%和80.3%,健康幼苗率由31.4%提高到45.7%和50.9%。根据16S rDNA序列系统发育分析,初步确定A2为假单胞菌(Pseudomonas sp.),A4、A7和B8皆为芽孢杆菌(Bacillus sp.)。     

寒地春油菜菌核病流行预测方法

为建立春油菜菌核病流行预测模型,利用逐步回归分析和通径分析研究1991-1998年春油菜不同生育期各气象因子与菌核病发病率间的关系,结果表明春油菜花期的气象因子对菌核病茎部发病率影响最大,其中6月下旬平均气温和7月中旬降水量是关键因子.利用花期各气象因子建立了春油菜菌核病茎部发病率回归模拟方程为:Y=-34.230056 0.405018X1-8.759353X2 9.274252X3 0.024760X4 0.1893376X5 2.835423X6同时组建了神经网络模拟模型,得到了较好的预测效果.     

红蛋巢菌属生防菌的筛选及其对油菜菌核病的防治潜能

通过对采自云南的红蛋巢菌属（Nidula)鸟巢菌标本进行平板筛选，获得BNF71等11个核盘菌具有较强抑制作用的菌株。温室防病试验表明，BNF71和BNF137菌株的代谢液对核盘菌引起的油菜菌核病具良好防治效果，发病率防效分别达98．8％和86．1％，病斑扩展抑制率分别达99．7％和97．9％。BNF71活菌接种对油菜出苗的防病效果达85．2％。除抑制核盘菌外，BNF71对Aspergillus niger,A.flavus,Pythium ultimum,Rhizoctonia solani和Drechslera sorokiniana等重要的植物病原菌亦有不同程度的抑制作用。Nidula菌株具有较高的木聚糖酶活性，BNF134具有显著的外几丁质酶活性。     

油菜菌核病菌系致病性研究

采用火柴棍菌丝接种法，将23个油菜菌核病菌系接种甘蓝型油菜植株茎秆内，通过比较病斑长度，评价不同菌系的致病能力。研究结果表明，不同菌系对感病和抗病品种均能致病，但病斑长度有明显差异，同源子囊孢子系以及不同来源菌系的致病力存在差异。     

核盘菌弱毒现象及其生防潜能的研究进展

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary)因其缺乏抗性资源、寄主广泛、抗药性等原因,在防治上存在极大困难.核盘菌种内存在明显的致病性分化现象,自然界中存在弱致病力菌株.本文对引起核盘菌致病力衰退的RNA病毒(SsDRV)、单链环状DNA病毒(SsHADV-1)和部分没有定性的双链dsRNA因子等真菌病毒进行了归纳;阐述了真菌病毒在病原菌群体中的传播方式;讨论了如何打破菌丝不亲和带来的界限,使得真菌病毒在菌丝间有效地传播,为探索用于核盘菌的生物防治提供新思路.     

Bacillus megaterium A6 suppresses Sclerotinia sclerotiorum on oilseed rape in the field and promotes oilseed rape growth

Sclerotinia sclerotiorum causes serious yield losses in oilseed rape and other crops worldwide. Field trials were conducted at two locations to evaluate two formulations of oilseed rape seed containing the plant-growth promoting bacterium Bacillus megaterium A6 for suppression of this pathogen. Treatments containing strain A6 in pellet and in wrap formulations resulted in oilseed rape seed yields that were similar to the chemical control and significantly greater than the untreated seed control at both locations. Treatments containing A6 in pellet and wrap formulations also resulted in an incidence of disease caused by S. sclerotiorum that was similar to the chemical control. Both of these treatments significantly decreased disease incidence relative to the untreated seed control and to the respective formulated seed controls (that did not contain strain A6) at both locations. Strain A6 applied to oilseed rape seed in these two formulations promoted growth in greenhouse pot studies conducted with autoclaved soil. In two experiments, these treatments resulted in significant increases in mean shoot dry weight per pot and mean % total N per plant relative to their respective controls containing formulated oilseed rape seed without strain A6 and to the untreated seed control. Both formulations provided stable B. megaterium A6 (≥10⁶ CFU) and seed germination (>85%) over a six month period at room temperature. Experiments reported here indicate the commercial potential of these formulations of B. megaterium A6 for suppression of S. sclerotiorum on oilseed rape.     

转基因油菜对节肢动物群落及菌核病发生的影响

以转基因抗除草剂油菜Ms8Rf3的F2代为试材，以CH05、华杂8号、青油14和中双7号为对照品种，研究了转基因油菜对节肢动物群落及菌核病发生的影响。结果显示，转基因油菜与对照之间群落的结构组成、群落主要参数（物种丰富度、Shannon-Winner多样性指数、均匀性指数、优势集中性指数）及时间动态基本无明显差异。可见，转基因油菜对节肢动物群落没有明显的负面影响。在油菜菌核病的发生情况上，转基因油菜在成熟期菌核病发生率较CH05、青油14和中双7号为高，但由于各品种油菜上菌核病的总体发病率都很低，评估品种对菌核病的影响可能会出现偏差。     

黑龙江省大豆菌核病菌生长特性及菌丝体亲和型测定

对来自黑龙江省伊春、绥化、鹤岗和佳木斯地区的88个大豆菌核病菌分离物进行了生长特性和菌丝体亲和型研究.结果表明,4个地区的分离物菌落形态、菌丝生长速率、菌核产生位置、菌核数量及重量均有差异.88个分离物按菌落特征分为5型,每种菌落形态分离物之间在菌丝生长速率、菌核数量及重量方面也存在显著差异.菌丝体亲和型测定表明,88个分离物共分为29个菌丝体亲和群(MCC),其中24个(82.8％)亲和群由自身亲和的单个分离物组成,最大的亲和群由来自绥化、鹤岗和佳木斯地区的43个分离物组成.同一亲和群内分离物的生物学特性也不一致.表明黑龙江省大豆菌核病菌具有较丰富的多样性和遗传异质性.     

油菜菌核病菌对腐霉利的抗性诱变及抗药菌株的生物学特性

从江苏省镇江市和扬州市采集菌核病植株的茎,从中分离获得油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）单菌核菌株。32个野生型菌株药剂敏感性（EC50）频率分布数据显示,病菌对腐霉利的敏感基线EC50值为0.1981 ± 0.0220 µg/mL,MIC（最小抑菌浓度）值为 1.1 ± 0.1595µg/mL。实验未发现田间抗腐霉利菌株。通过室内紫外线和药剂诱导,获得多株高抗腐霉利突变体（EC50>1000µg/mL）。这些抗性突变株经转管培养5~20代后抗药性稳定。它们对同类药剂异菌脲和有机磷类甲基立枯磷也表现高抗,但对苯并咪唑类多菌灵敏感。与野生型敏感菌株相比,抗腐霉利突变株菌丝生长较慢,对油菜茎杆和叶片的致病力均较弱。     

中油821接种菌核病菌丝体后的生化反应

以油菜第3片真叶人工接种菌核病菌丝体，研究中油821抗（耐）菌核病与植株叶片硫甙含量、POX活性的关系。结果显示，第3叶片接种区域的各种硫甙含量增加，以吲哚族硫甙表现突出，接种后7d吲哚族硫甙含量达1158nmol/ml，比不接种对照增加70倍，第3叶片非接种区域的吲哚族硫甙含量比不接种对照增加7－30倍，第5、6叶片及第3叶叶柄也表现接种后嘴哚族硫甙增加。所有接种材料均在第3d产生了芳香族硫甙，接种叶POX活性表现持续上升。