DNA分子标记技术在水产养殖中的研究应用

分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种比较理想的遗传标记技术。本文综述了DNA分子标记的类型,基本原理和特点,以及分子标记辅助育苗在水产养殖方面取得的可喜进展。     

AFLP：一种适用于水产动物研究的分子标记技术

本文综述了AFLP分子标记技术的基本原理、技术流程和应注意的问题,并对其在水产动物的研究前景进行了展望。     

AFLP分子标记技术及其在水产动物中的应用

AFLP分子标记技术是DNA指纹技术的重大突破,由于其快速、简便、有效,因而在医学、农业、林业、畜牧业、渔业等领域中得到了广泛的应用。近年来人们不断地将这一技术完善和发展,使得AFLP成为迄今为止最有效的分子标记。本文简述了AFLP技术的基本原理、技术流程以及在水产动物中的应用情况。     

微卫星DNA标记技术的特点及其在动物研究中的应用

微卫星标记具有丰富的多态性、数量多且在基因组中分布均匀、易于检测、呈共显性遗传等特点,因些作为对生物性状进行遗传分析的主要工具已经被广泛应用于各种动物的研究当中,在动物遗传育种方面主要应用有鉴定个体亲缘关系或品系间的遗传结构、鉴定个体亲缘关系或品系间的遗传结构、构建遗传图谱等。     

DNA分子标记技术

本文概述了DNA分子标记技术的特点、种类,以及常用分子标记技术:限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性(RAPD)、扩增长度多态性(AFLP)的原理、特点和操作方法。     

分子标记技术在水产育种与种质鉴定中的应用

分子标记技术有限制性酶切片段长度多态性、DNA指纹图谱、扩增片段长度多态性、随机扩增多态性、序列特异性扩增区、DNA和RNA测序以及SSLP技术。综述了分子标记各种技术的研究方法和研究成果，介绍了分子标记技术在物种(品种)鉴定与系统发育研究、辅助育种、监测遗传渐渗等方面的应用成果。     

微卫星DNA标记技术及其在鱼类中的应用

微卫星存在于几乎所有真核生物的基因组中,且呈随机均匀分布;在染色体上,除着丝粒及端粒区域外,其它区域均有广泛分布。微卫星能参与遗传物质结构的改变、基因调控及细胞分化等过程,有自身特异结合蛋白,能直接编码蛋白质。通过PCR扩增并使用凝胶电泳分离可产生大量含有微卫星DNA片断。微卫星DNA标记技术可应用于分析鱼类物种遗传多样性、分析群体的遗传结构、建立遗传图谱和基因定位、鱼类种质资源的保护、建立微卫星DNA指纹库、亲子鉴定和血缘关系分析以及种群生态学研究。     

分子遗传标记技术在海洋动物遗传研究中的应用

概述了分子标记技术在海洋动物遗传学研究中的应用．尤其足在构建遗传连锁图谱、分析群体遗传结构及亲缘关系、检测种群的遗传多样性、品系鉴定及辅助育种等方面的应用进展。     

RAPD技术在水产动物种质资源研究中的应用

对水产动物的种质资源进行鉴定和评价 ,其方法主要是从形态学、经济性状、同工酶、线粒体DNA和核 DNA等几方面分析。对 DNA的研究以前主要测量 DNA的含量和分子量的大小 ,现在已深入到 DNA序列的测定和功能基因的标记等层次。 RAPD技术目前已被广泛应用。　　一、RAPD技术的原理　　随机扩增多态性 DNA(Random AmplifiedPolymorphic DNA,简称 RAPD)技术由 Williams等 (1 990 )首先运用 ,它是建立在聚合酶链反应 (Polyinerase Chain Reaction,PCR )技术基础上的一种检测基因组 DNA多态性、基因组遗传标记的方法。其原理是…     

DNA分子标记技术概述

综述了DNA分子标记技术的类型及代表性分子标记技术的基本原理和优缺点,对常用分子标记技术进行了对比,并对其发展趋势进行了展望。     

同工酶技术在水产动物生理及疾病研究中的应用

系统介绍了近年同工酶技术在水产动物生理及病理研究中的应用,主要包括生理生化及病理诊断2个方面,并对其应用前景进行厂展望。为同工酶技术在这2个领域中以后的应用提供参考。     

AFLP技术在水生动物遗传学研究中的应用

AFLP(Amp lifed Fragm ent Length P loymorphsim)技术是由荷兰Keygene公司科学家Zabeau和Vos发展起来的一种检测DNA多态性的一种方法[1],1993年获欧洲专利局专利,该方法是继RFLP(Restriction Fragm ent Length P loymor-phsim),SSR(S imp le Sequence Repeat)和RAPD(RandomAmp lified P loymorphsim DNA)之后发展最快的DNA指纹技术,是DNA指纹技术的重大突破,也是目前国际上最新最适用的DNA指纹技术。AFLP结合了RFLP和RAPD的特点,它兼有RFLP技术的可靠性和PCR技术的高效性,且具有快速、灵敏、稳定、所需DNA量少…     

流式细胞术在水产动物研究中的应用

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是20世纪70年代发展起来的对细胞的物理和化学性质进行快速测定的技术.它以大量的单个细胞为检测单位,研究结果客观准确,它还具有快速、灵敏和同时检测多个参数等优点.     

固定化微生物技术及其在养殖水体中的应用

介绍了固定化微生物技术的定义,固定化微生物的制备方法,并重点介绍了固定化微生物技术在养殖水体中的应用以及存在的问题和展望。     

半滑舌鳎DNA的群体遗传变异

采用AFLP、RAPD和线粒体细胞色素b基因(Cytb)片段序列分析技术对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)群体遗传变异进行研究。分别采用5对选择性引物和18条随机引物对半滑舌鳎3个群体(黄海野生群体、渤海野生群体、养殖群体)进行分析。AFLP和RAPD分析结果表明,黄海群体的遗传多样性高于渤海群体,养殖群体的遗传多样性最低。利用Shannon多样性指数和基因分化系数进行遗传变异来源估算,结果表明,遗传变异主要来自于群体内。同其他鱼类相比,半滑舌鳎群体遗传多样性水平较低。对黄海、渤海野生群体共37个个体的线粒体Cytb基因片段序列进行分析,共检测出5种单倍型,渤海群体内个体序列完全相同,共享单倍型H1;在黄海群体中除检测到单倍型H1外,还检测到其余4种单倍型。Cytb序列分析结果表明,黄海群体遗传多样性较渤海群体丰富,个体间序列变异很小,个体间核苷酸差异数在0~1之间,两群体间无显著遗传差异。通过比较3种分子标记对半滑舌鳎群体间遗传差异的检测和群体间遗传距离的计算,显示AFLP标记对群体间遗传差异的检测最为灵敏,是一种理想的分子标记。     

Molecular characterization of the fish-pathogenic fungus Aphanomyces invadans

Aphanomyces invadans (Saprolegniaceae) is a peronosporomycete fungus associated with the serious fish disease, epizootic ulcerative syndrome (EUS), also known as mycotic granulomatosis. In this study, interspecific relationships were examined between A. invadans isolates and other aquatic animal pathogenic Saprolegniaceae, and saprophytic Saprolegniaceae from EUS-affected areas. Restriction fragment length polymorphisms and sequences of ribosomal DNA confirmed that A. invadans is distinct from all other species studied. A sequence from the internal transcribed spacer region ITS1, unique to A. invadans, was used to design primers for a PCR-based diagnostic test. Intraspecific relationships were also examined by random amplification of polymorphic DNA using 20 isolates of A. invadans from six countries. The isolates showed a high degree of genetic homogeneity using 14 random ten-mer primers. This provides evidence that the fungus has spread across Asia in one relatively rapid episode, which is consistent with reports of outbreaks of EUS. Physiological distinctions between A. invadans and other Aphanomyces species based on a data set of 16 growth parameters showed remarkable taxonomic congruence with the molecular phylogeny.     

DNA fingerprinting: application to conservation of the CITES-listed dragon fish, Scleropages formosus (Osteoglossidae)

Since 1975,CITES has listed the dragon fish, Scleropages formosus, as anendangered species. In 1995, a captive-bred population was set upby a commercial fish farm with assistance from the PrimaryProduction Department in Singapore. Other farms in Indonesia andMalaysia followed suit. These populations have contributed to animmediate conservation of the species. Due to very high demandfor this ornamental fish, these venues may be its last sanctuary.DNA fingerprints of the dragon fish were obtained by different methods from the green, red and gold varieties grown in a Singapore fish farm to determine which method was most suitable in providing information on genetic variability. Because a DNA fingerprint is a pattern made up of DNA fragments that are resolved by electrophoresis, each individual has its own unique fingerprint due to a genetic make-up different from another individual. Thus, genetic variability was best studied by developing DNA fingerprints.Firstly, restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) were obtained. DNA fragments formed by cleavage with nine restriction endonucleases used singly were hybridized individually to four non-radioactively labelled probes to give RFLPs. The RFLPs for each variety were similar and genomic DNA from each variety had many binding sites to the probes. This made differentiating RFLPs specific to individual varieties difficult. Secondly, random amplified polymorphic DNA (RAPD) fingerprints were developed. DNA fragments that were resolved on a denaturing polyacrylamide gel were hybridized to seven arbitrary primers used singly. RAPD fingerprints for each variety were different for each primer tested. The similarity index indicated low genetic variability between varieties. Lastly, DNA was screened for microsatellite loci which refer to short tandem repeats of two or three bases. The occurrence of other microsatellite loci, their chromosome location and frequency is being investigated while primers have been designed to detect more loci by the polymerase chain reaction. As this method provides undisputed and reproducible evidence of relatedness and stock identification, and can be applied for long-term management of domesticated populations through pedigree construction and evaluation of heterozygosity, it is the preferred choice to determine genetic variability     

现场围隔及其在水域生态学研究中的应用

现场围隔通过围隔水体建立一个相对封闭的生态系,与周围水体没有交换。使用现场围隔始于20世纪60年代,经过几十年的发展,其结构和功能得到了不同程度的改进和完善,已成为研究水域生态的有效工具,主要用于污染生态学、养殖生态学方面的研究。现场围隔主体结构包括围隔幔、固定支架和围隔幔支架等,附属设备包括防雨罩、电动机、浮力装置和...     

现场围隔及其在水域生态学研究中的应用

现场围隔通过围隔水体建立一个相对封闭的生态系,与周围水体没有交换。使用现场围隔始于20世纪60年代,经过几十年的发展,其结构和功能得到了不同程度的改进和完善,已成为研究水域生态的有效工具,主要用于污染生态学、养殖生态学方面的研究。现场围隔主体结构包括围隔幔、固定支架和围隔幔支架等,附属设备包括防雨罩、电动机、浮力装置和叶轮等,大型围隔容积>100m3,中型围隔容积10～100m3,小型围隔容积1～10m3。通过在目的水域现场开展围隔试验,从而模拟自然水域生态环境,能够大大缩小试验条件和自然环境的差异,使试验结果更加科学,针对性更加明显。现场围隔发展方向是多样化、实用化。