家蚕新病原性微孢子虫（Nosema SP）的研究

1990年秋从四川省阆中蚕种场种茧育家蚕(Bombyx mori)幼虫分离出一种不同于家蚕微粒子孢子(Nosema bombycis)的新病原性微孢子虫(Nosema SP)。该微孢子虫对蚕的寄生性强,侵染蚕幼虫的绢丝腺、马氏管、肌肉、脂肪体及中肠等组织。孢子为卵圆形,大小3.8～4.1×2.4～2.6μm,极丝长126±8.35μm(113～140μm),在抱予形成期产孢体(7～9×3～4μm),以二裂形成两个孢子母细胞。极丝一般为单层绕成14～15圈(偶有16圈),倾斜角40°以上。     

斜纹夜蛾微孢子虫一新种

 从广州的斜纹夜蛾幼虫体内分离到一种新的Nosema属微孢子虫。这种微孢子虫很容易接种到棉铃虫体内，对上述两种鳞翅目昆虫具有很高的致病力，引起整体侵染。交叉侵染试验发现这种微孢子虫还侵染另外8种鳞翅目试验寄主，但不侵染桑蚕、舞毒蛾、杨扇舟蛾和小菜蛾。典型的新鲜孢子长卵圆形，4.34±0.27×1.99±0.14μm。极丝平均长度为94.2±11.97μm。超微结构研究发现，极丝通常单层绕成12-13圈，与孢子长轴的夹角78-82°。研究发现这个种不同于以前报道的所有侵染鳞翅目昆虫的Nosema属微孢子虫，故定为新种N.liturae。     

蓝叶甲微孢子虫的特征及其对家蚕的病原性研究

从四川省阆中市蚕区捕捉的蓝叶甲(P(?)Baly)中分离到一种大型微孢子虫,孢子大小为4.75±0.40μm×2.85±0.25μm,孢子的超微结构及在家蚕体内的发育周期符合Nosema属的特征,对家蚕有强的食下传染,感染家蚕后的经卵传染频率很低。     

东方粉蝶微孢子虫M-Pc2的研究

从东方粉蝶成虫体中分离到一种卵圆形微孢子虫M Pc2 ,M Pc2孢子大小为 (3.38± 0 .35 ) μm× (2 .4 3± 0 .17)μm ,孢子双核结构 ,在家蚕体内可见到典型的Nosema型发育过程 ,认为M Pc2应归入Nosema属 .这种微孢子虫对家蚕具中度食下感染和弱胚种传染能力     

黑条灰灯蛾分离的一种微孢子虫生物学特性研究

从广东省曲江县蚕区捕捉的黑条灰灯蛾(Creatonotus gungis L.)成虫分离到一种微孢子虫.孢子大小为(3.03±0.17)μm×(1.90±0.07)μm;孢子的血清学类型、超微结构与传统的家蚕微粒子孢子(Nosema bombycis,简称N. b.)有差异;黑条灰灯蛾微孢子虫的发育周期符合Nosema属的特征;对家蚕有中等程度的感染能力,经卵传染频率较低.     

“脊尾白虾肌肉微孢子虫病”的病原和病理分析

江苏启东海水养殖脊尾白虾出现肌肉白化症状,虾腹部、头胸甲、步足、尾扇等部位病变明显,通过活体压片镜检发现肌肉中存在大量球形包囊,利用超显微技术对病原的形态和结构进行分析,确定其为微孢子虫,并对脊尾白虾的病变组织进行了病理分析。结果表明：该微孢子虫具包囊结构,包囊大小为（5.40±0.55） μm,一个包囊内含8个孢子,成熟孢子呈椭圆形,孢子长为（2.30±0.25） μm,孢子宽为（1.50±0.19） μm,孢内极丝一般环绕9~10圈。病理分析显示,脊尾白虾的鳃、胃、肠和肌肉内均发现微孢子虫寄生和不同程度的病变。其中,肌肉组织病变最严重：原肌纤维存在的空间被大量的球形包囊占据,肌纤维断裂,空泡数量增多,线粒体消失;鳃细胞膨大呈空泡状,鳃膜坏死,核质、细胞质和细胞器消失;胃细胞胞浆基质电子密度增大,孢子寄生在结缔组织中脂滴附近;肠外膜上皮细胞核质皱缩,部分肌层消失,孢子寄生在肠粘膜层和肌层之间。     

家蚕微孢子虫转宿主果蝇的研究初探

[目的]研究家蚕微孢子虫对果蝇的侵染性,为系统研究家蚕微孢子虫侵染机制提供新视野,也为探索微孢子虫的生物防治效果提供参考。[方法]用家蚕微孢子添食野生型和突变型果蝇,并用Calcofluor White M2R荧光染色法进行果蝇体液内的家蚕微孢子虫形态观察。[结果]结果表明,家蚕微孢子虫在转宿主情况下能够侵染果蝇,且被感染的突变型果蝇体内家蚕微孢子虫的数量多于野生型果蝇。[结论]家蚕微孢子虫能侵染果蝇,该研究结果为研究家蚕微孢子虫侵染其他宿主提供了初步参考,为进一步了解和认识家蚕微孢子虫侵染机制奠定了基础。     

家蚕病原微孢子虫SCM8的分离及其致病性研究

从四川省种茧育家蚕分离出的一种小型微孢子虫SCM8,仅感染寄生家蚕的中肠上皮组织 ;孢子卵圆形 ,大小2 .82± 0 .2 0× 2 .1 9± 0 .1 3μm。孢子致病力较弱 ,感染中量 (IC50 )为 1 .2 9× 1 0 5粒 /ml;病程 1 2天以上。病理组织学和胚种传染的研究表明 ,SCM8无胚种传染能力     

东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-11248及其靶基因SGT1的生物信息学和表达谱研究

【目的】对前期鉴定所获得的东方蜜蜂微孢子虫的nce-miR-11248进行表达和序列验证，预测、分析其靶基因，并检测nce-miR-11248及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中的表达谱，为进一步开展nce-miR-11248调控东方蜜蜂微孢子虫侵染的功能及作用机制研究提供参考。【方法】利用Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证nce-miR-11248的真实性；利用相关生物信息学软件预测nce-miR-11248的靶基因，并分析其编码蛋白的分子特性；使用MEME和TBtools软件预测SGT1蛋白的保守基序和结构域，通过Mega 11.0软件进行氨基酸序列多重比对，采用邻接法构建系统进化树。采集东方蜜蜂微孢子虫孢子侵染1,2,4,6和8 d的意蜂工蜂中肠组织，采用RT-qPCR检测nce-miR-11248及其靶基因SGT1的表达谱。【结果】nce-miR-11248在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在，其序列长度为25 bp。nce-miR-11248的靶基因为SGT1。SGT1蛋白分子式为C₇₆₅H₁₂₁₃N₁₉₅O₂₄₁S₄，分子质量约为17.10 ku，脂溶系数为82.67，等电点为5.50，亲水系数为-0.709，不含典型的信号肽和跨膜结构域，可同时定位于细胞核、线粒体和过氧化物酶体。东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫、泛胞虫、肠脑炎微孢子虫和蚱蜢脑炎微孢子虫的SGT1中均含有4个保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3和Motif 4)和1个结构域(SGT1超家族结构域)。东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫、肠脑炎微孢子虫和蚱蜢脑炎微孢子虫的SGT1聚为一支，且东方蜜蜂微孢子虫与家蚕微孢子虫的SGT1进化距离最近。相较于侵染东方蜜蜂微孢子虫后1 d，侵染后2,4,6和8 d nce-miR-11248的表达量均显著下调(P＜0.05)；侵染后2,4,6和8 d SGT1的表达量均下调，其中侵染后4,6和8 d的表达量与2 d的差异达显著水平(P＜0.05)。【结论】nce-miR-11248在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在；东方蜜蜂微孢子虫与家蚕微孢子虫的SGT1亲缘关系最近；随着侵染时间的延长，nce-miR-11248及其靶基因SGT1在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中的表达量均呈持续下降；nce-miR-11248和SGT1是潜在的参与调控微孢子虫侵染过程的因子。     

东方蜜蜂微孢子虫对密林熊蜂的致病机理

【目的】明确东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）对密林熊蜂（Bombus patagiatus）的侵染性及致病机理。【方法】采用传统生物学和电镜超微结构观察的方法,结合qPCR定量分析对东方蜜蜂微孢子虫在密林熊蜂上的致病机理进行探讨。【结果】感染初期工蜂除取食减少和行动迟缓外无明显外观染病特征,感染后期工蜂萎靡、衰弱、飞翔无力。解剖后镜检发现中肠仅存少量孢子,但充满大量细菌;熊蜂肠道组织切片发现东方蜜蜂微孢子虫侵染中肠上皮细胞后导致核膨大并变形、线粒体体积变小甚至解体,内质网紊乱,但孢子只侵染寄主细胞质而不侵入细胞核,最终导致线粒体解体,细胞破裂;qPCR定量分析得出接种后3-4 d中肠和脂肪体中微孢子虫的感染量达到最高值,其它组织则基本未检测到。【结论】东方蜜蜂微孢子虫可侵染异源寄主熊蜂,致病机理为微孢子虫引起寄主中肠上皮细胞内溶物发生病变,并导致整个中肠上皮细胞的破裂和凋亡。     

高浓度静松灵注射液对三种野生反刍动物麻醉效果的观察

1997～2000年,在甘肃濒危动物研究中心,用高浓度静松灵注射液(10 %)对马鹿、扭角羚、野骆驼进行了麻醉试验,结果显示,在实验用药量0.03 mL/kg(马鹿)、0.004 mL/kg(扭角羚)和0.03 mL/kg(野骆驼)下,肌肉注射给药后,动物在1～5 min出现反应。制动诱导期为:马鹿3～12 min,扭角羚1～5 min,野骆驼5～15 min。麻醉持续时间为马鹿32±7.60 min,扭角羚120±18.44 min,野骆驼28±6.57 min。恢复时间为马鹿3±1.05 min,扭角羚2±0.30 min,野骆驼5±3.18 min。使用后均未出现中毒现象。实验表明,该药对这3种野生动物具有良好的保定效果。     

侵染唐菖蒲的菜豆黄花叶病毒的初步研究

 从叶片表现为白色斑驳的唐菖蒲病株上分离到一病毒,通过寄主范围测定,可侵染豆科、藜科、苋科、番杏科中的8种植物。病毒的致死温度为50～60 ℃,稀释限点为10^-3～10^-4,体外保毒期为3～4 d。病毒是长度为700～750 nm的线状粒子,血清学反应与标准BYMV抗血清出现明显的沉淀线。可认为该病毒分离物为菜豆黄花叶病毒(Bean Yellow Mosaic Virus, BYMV)。     

蝗虫微孢子虫与绿僵菌协调使用对东亚飞蝗的毒力测定

以东亚飞蝗三龄蝗蝻为试虫,室内生物测定蝗虫微孢子虫与绿僵菌对试虫的毒力,并研究了这两种病原物以5种比例联合使用的各方面效果。结果表明,蝗虫微孢子虫与绿僵菌对东亚飞蝗LD50分别是7.72×104个/g和5.04×105个/g。两者联合使用增效显著,其中绿僵菌与微孢子虫以1∶1比例处理试虫,饲养24d的LD50（2.5×104个/g）和LD90（1.99×106个/g）均较其他比例最小,效果最佳。比较7个不同剂量处理组的致死时间,LT50从小到大为2∶1,16∶1,1∶1,1∶2,0∶1,1∶0,1∶29;LT90从小到大为2∶1,1∶1,1∶2,16∶1,1∶0,0∶1,1∶29,若同时考虑接种剂量大小,则1∶1处理组致死时间相对最佳。比较6组处理的存活试虫的蝗虫微孢子虫感染情况,各组存活试虫仍可达到较高感染率,联合使用两种病原物在统计学生对微孢子虫感染情况无显著影响。综合各方面因素,当接种剂量绿僵菌∶蝗虫微孢子虫为1∶1时,达到防治东亚飞蝗的最佳实验室配比。     

哈尔滨地区猪、狗旋毛虫低温耐受性研究

对自然感染的猪、狗旋毛虫肉进行室内和室外冷冻实验。结果表明,狗旋毛虫较耐低温,-32±0.5℃,6～8天失去对小鼠的感染力;-22±1℃,6～9个月,-15±1℃,9个月仍有感染力。冬天室外自然冷冻不能使狗旋毛虫灭活。猪旋毛虫不耐低温,-32±0.5℃,26～36h;-22±1℃,4天;-15±1℃,9天即失去对小鼠的感染力。冬天室外自然冷冻可使猪旋毛虫灭活。     

西藏八角莲不同部位鬼臼毒素的HPLC分析

[目的]建立了西藏八角莲[Dysosma versipellis（Hance）M.Cheng]不同部位鬼臼毒素的HPLC分析方法,并对鬼臼毒素含量进行检测。[方法]色谱条件为：色谱柱,Whates C18柱（125.0 mm×4.6 mm,5μm）;流动相,甲醇∶水（55∶45,V/V）;流速,1.0 ml/min;检测波长,290 nm;柱温,25℃;进样量,20μl。线性范围为1~200μg/ml,回归方程：y=15121x-46585,r=0.9991。[结果]西藏八角莲根、块茎、叶、叶柄、花和果实中均检测到鬼臼毒素,但是不同部位含量差异较大。其中,块茎中鬼臼毒素含量最高,为（180.50±2.74）（md）μg/g,之后依次为根中（58.83±1.59）（md）μg/g,花中（40.33±1.24）（md）μg/g,叶中（36.93±1.09）（md）μg/g,叶柄中（29.90±0.45）（md）μg/g,果实中（6.03±0.12）（md）μg/g,依次降低。[结论]该检测方法灵敏度高、稳定性好、重复性高、分离效果好,不同组织中鬼臼毒素含量以块茎中最高,果实中最低。该研究可为西藏药源植物功效成分的分析提供理论与实践指导。     

凉山半细毛羊种质特性的研究

对凉山半细毛羊的产毛、产肉性能、繁殖性能、生长发育、生理生化性状、血液蛋白多态性和染色体核型作了全面的介绍。凉山半细毛羊成年公羊体重 85 2 5± 3 2 5kg、母羊 4 8 11± 4 13kg ;剪毛量分别为 6 5 5± 0 12kg和4 12± 0 32kg ;毛长分别为 18 12± 0 5 1cm和 15 74± 0 2 1cm ;羊毛主体细度 4 8～ 5 0支。 6月龄肥羔胴体重16 83± 0 76kg ,屠宰率为 5 0 79%。母羊初配年龄为 10～ 12月龄 ,平均产羔率为 111 36 %。染色体数目 2n =5 4。在长期的精心选育和当地生态条件的影响下 ,凉山半细毛羊的生理生化性状产生了不同程度的变化 ,以适应凉山地区的生态条件     

饲粮能量、蛋白质水平及赖能比对早期断奶仔猪生产性能的影响

采用三因素二次回归正交组合设计,研究了能量（ＤＥ：３－０ ～３－８Ｍｃａｌ／ｋｇ） ,粗蛋白质水平（ＣＰ：１５％ ～２５％ ） 与赖能比［（Ｌｙｓ∶ＤＥ） ：０－６ ～１－２（ｇ．Ｌｙｓ）／（ ＭＪ．ＤＥ）］ 对２８ 日龄断奶仔猪（ 长白×汉梅） 的日增重（ＡＤＧ） ,饲料转化率（Ｆ／Ｇ） 、日采食量（ＡＤＦＩ） ,血浆尿素氮（ＰＵＮ） 及血浆游离赖氨酸的影响,试验期４２ｄ。结果表明：能量、蛋白质水平及赖能比对仔猪生产性能均有影响（ Ｐ＜ ０－０１ ） ,其中以赖能比的作用最重要。仔猪２８ ～６０ 日龄（５ ～１５ｋｇ） 与６０ ～７０ 日龄（１５～２０ｋｇ）的ＡＤＧ、ＡＤＦＩ、Ｆ／Ｇ 及７０ 日龄的ＰＵＮ 均随能量、蛋白质水平及赖能比的改变呈显著二次曲线变化。２８～６０ 日龄,随能量、蛋白质水平及赖能比增加,ＡＤＧ 和Ｆ／Ｇ 改善;６０～７０ 日龄能量水平为３－４ Ｍｃａｌ／ｋｇ 左右,ＡＤＧ 和Ｆ／Ｇ 达最佳,高于此水平ＡＤＧ 和ＡＤＦＩ下降,Ｆ／Ｇ 增大。在试验条件下,根据影响规律将仔猪营养需要划分为２８～６０ 日龄与６０ ～７０ 日龄两阶段,２８ ～６０ 日龄与６０～７０ 日龄获得最佳生产性能的能量、蛋白质水平及赖能比（ 赖氨酸） 需要量分别为：     

黄苇鳽筑巢、产卵、孵化及雏鸟生长的初步研究

对云龙湖黄苇鳽(Ixobrychus sinensis)的筑巢、产卵、孵化进行了研究,并测定了黄苇鳽雏鸟阶段的几个生长指标。结果表明,黄苇鳽的筑巢期从5月下旬至6月下旬,巢用水烛叶织,并营建于水烛丛中上部;巢底距离水面1.16±0.29 m,巢-岸距离10.7±3.87 m,巢-敞水区距离2.25±1.01 m;同域巢间距平均为37.5 m;巢深4.0±0.9 cm,巢内面积161.1±48.1 cm~2;窝卵数4.6±0.9个,卵体积6.75±0.51 cm~3,卵重9.41±0.73 g;窝卵数与总卵重呈正相关,窝卵数与巢内面积相关性不显著,窝总卵重与巢内面积相关性也不显著;孵化期为15~18 d,孵化率约为82%;各项形体指标随发育日龄而增长,其中翅长增长较快。     

薄层分离-分光光度法测定楝科植物中三萜皂苷含量

[目的]采用薄层色谱分离-分光光度法测定楝科植物中总三萜皂苷含量。[方法]研究了展开剂组成,显色反应条件,并对该方法的精密度、重现性等进行了探讨。[结果]适宜的展开剂组成为乙酸乙酯:甲酸:水=251:1:,显色反应的适宜条件为:5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2 ml,高氯酸0.8 ml,60℃反应15 min。该方法的线性范围是:10～200μg/ml,相关系数r=0.998 5。香椿老叶中三萜皂苷含量为(17.50±1.26)mg/g,香椿籽中三萜皂苷含量为(32.40±0.95)mg/g,香椿树皮中三萜皂苷含量为(32.90±2.03)mg/g,川楝树皮中三萜皂苷含量为(36.30±0.59)mg/g,川楝子中三萜皂苷含量为(26.00±1.14)mg/g。平均回收率为99.94%,RSD为1.08%。[结论]该方法准确、可靠,可用于楝科药材的质量控制。     

松鼠消化系统的形态学研究

[目的]了解松鼠消化系统与食性的关系。[方法]对5只成体松鼠的消化系统进行解剖,并对各器官进行研究。[结果]松鼠的消化管总长为（1 845.7±171.07）mm,是体长的（7.69±0.57）倍。其中,小肠占消化管总长的65.0%±2.0%,为体长的4.97±0.32倍。[结论]松鼠小肠最发达,而松鼠消化道结构是与其食性相适应的。