不同培养基和激素浓度处理对草地 早熟禾愈伤组织诱导的影响

以3种不同的草地早熟禾种子为外植体,研究了不同培养基、不同浓度的2,4-D、BA及水解酪蛋白对愈伤组织诱导的影响。试验表明:(1)MN6培育基有利于愈伤组织的诱导;(2)种胚愈伤组织的诱导和继代宜采用MN6 2,4-D3mg/L BA0.2mg/L的培养基;(3)水解酪蛋白对草地早熟禾种子愈伤组织诱导的影响不大;(4)3种草地早熟禾种子中,新哥莱德(Nuglade)出愈率较高。     

几个因素对草地早熟禾种子愈伤组织诱导的影响

对草地早熟禾种子分别在每天12h的光照和完全黑暗以及不同蔗糖浓度、不同接种季节条件下愈伤组织的诱导进行了研究,结果表明：在暗培养条件下,早熟禾种子愈伤组织诱导率为55．6％,而在每天12h光照条件下则为38．1％;蔗糖浓度以30,15g/L为好,其愈伤组织诱导率分别是62．5％,58．3％;培养季节春、夏、秋都比较适宜,冬季不适合早熟禾种子愈伤组织的诱导。     

草地早熟禾愈伤组织诱导和分化中内源激素水平分析

以草地早熟禾‘午夜2号’、‘新格莱德’、‘橄榄球2号’成熟种子为材料,进行愈伤组织的诱导和分化培养,利用高效液相色谱法对愈伤组织在不同培养期中的内源激素生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素(ZT)进行测定和分析.结果表明:愈伤组织诱导率与成熟种子中IAA和ABA水平呈正相关.3个品种种子中的IAA水平相对较高,分别为0.574、0.393和0.415μg/g,内源激素ABA的含量微小,分别为0.157、0.088和0.123μg/g,ZT含量在3个品种间差异不大;在供试材料愈伤组织的继代培养和分化阶段,IAA含量在‘午夜2号’中始终处于较高的水平,分别为0.425μg/g和0.554μg/g,变化幅度不大,在愈伤组织生长旺盛和分化成芽期最高,分别为0.495μg/g和0.629μg/g,ABA和ZT含量在愈伤组织培养和分化过程中一直处于较低水平,ABA分别为0.120μg/g和0.141μg/g,ZT分别为0.111μg/g和0.202μg/g,二者在胚性愈伤组织形成期含量逐渐升高,在愈伤组织分化能力强的时期也有升高趋势,对胚性愈伤组织的形成和分化出芽有促进作用;高ZT∶IAA和高ABA∶IAA有利于愈伤组织的生长发育,并促进胚性愈伤组织的形成,高ABA∶IAA有利于愈伤组织分化形成芽.     

几个因素对草地早熟禾种子愈伤组织诱导的影响

对草地早熟禾种子分别在每天12 h的光照和完全黑暗以及不同蔗糖浓度、不同接种季节条件下愈伤组织的诱导进行了研究,结果表明:在暗培养条件下,早熟禾种子愈伤组织诱导率为55.6%,而在每天12 h光照条件下则为38.1%;蔗糖浓度以30,15 g/L为好,其愈伤组织诱导率分别是62.5%,58.3%;培养季节春、夏、秋都比较适宜,冬季不适合早熟禾种子愈伤组织的诱导.     

橄榄球2号草地早熟禾愈伤组织的诱导和植株再生

以橄榄球2号草地早熟禾种子为外植体,研究了不同培养基、不同类型的生长调节剂(2,4-D,BA等)对愈伤组织诱导、增殖继代、幼苗分化及植株再生的影响。结果表明,在愈伤组织诱导培养基中附加10 mg/L Ag NO3抑制了橄榄球2号叶芽生长,促进了愈伤组织的诱导效果;HNP2培养基诱导频率明显高于HNP3培养基,是橄榄球2号的最适诱导培养基;愈伤组织的增殖继代方面激素配比宜采用附加适当浓度的6-BA,TDZ的N19,N21,N22这3个培养基;继代1~2次的愈伤在分化培养基R1上培养分化率可达78.4%,再生频率可达30%~50%,为后期相关抗性基因的转化提供了良好的受体系统。     

不同激素浓度对罗汉果愈伤组织诱导的影响

以罗汉果(Siraitia grosvenorii)优良株系的幼嫩茎段作为试验材料,经过消毒处理后,剪成带腋芽小段,探讨植物激素细胞分裂素6-BA(6-苄基嘌呤)与生长激素IAA(吲哚乙酸)不同浓度配比和细胞分裂素6-BA与生长激素NAA(萘乙酸)不同浓度配比对其愈伤组织诱导的影响,以建立罗汉果高效再生系统。结果表明:MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L+3%蔗糖+3.5g/L琼脂为罗汉果愈伤组织最适宜的诱导培养基,诱导率达83.33%。     

不同激素配比对红掌叶片愈伤组织诱导的影响

以红掌幼嫩叶片为外植体,采用MS培养基,研究了4种激素(生长素2,4-D、NAA和细胞分裂素6-BA、KT)对愈伤组织诱导的影响。结果表明:生长素2,4-D效果优于NAA,细胞分裂素6-BA优于KT,2,4-D是主要的诱导因子。在几种激素组合中,以MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的诱导效果较好。     

不同因子对蝟实愈伤组织诱导及愈伤组织继代的影响

本文以虫胃实茎段、叶柄、叶片为外植体 ,将其培养于附加BA和NAA不同激素配比的MS或B5基本培养基上。结果表明 :在附加BA 2 /L和NAA 0 5 /L的B5培养基上外植体出愈快 ,愈伤组织诱导率高。在愈伤组织继代中 ,不同种类激素组合、激素浓度配比及不同琼脂浓度对愈伤组织的继代质量有不同影响 :1%的琼脂浓度、BA 2 /L +NAA 0 0 5 /L时 ,愈伤组织生长速度适中、质地较致密 颜色翠绿 ,适合作进一步研究的材料。     

不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响

为筛选出适宜百合鳞片愈伤组织诱导的最佳激素配比,以给百合大规模的培养与繁殖创造有利的条件,以百合鳞片作为外植体,利用正交试验设计,研究不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响。结果表明:以MS为基本培养基,2,4-D浓度,6-BA浓度,NAA浓度3个因素对愈伤组织诱导率的影响表现为6-BANAA2,4-D。最优的激素配比组合为A2B1C3,即2,4-D 0.6 mg·L-1,6-BA 0.3 mg·L-1,NAA0.9mg·L-1,其愈伤组织诱导率为91.21%。     

植物激素对观赏南瓜下胚轴愈伤组织形成的影响

探讨了不同的植物激素组合对观赏南瓜下胚轴愈伤组织形成的影响。结果表明:最有利于观赏南瓜下胚轴愈伤组织形成的激素组合为:MS+NAA 1 mg/L+KT0.5 mg/L+6-BA 1 mg/L或MS+NAA+6-BA 1 mg/L。     

葡萄糖氧化酶基因在草地早熟禾转基因植株中的表达

用农杆菌介导法将含有葡萄糖氧化酶基因(GO)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)的重组质粒导入草地早熟禾品种超级伊克利,经卡那霉素筛选获得具有卡那霉素抗性的再生植株.PCR检测证明,GO基因已整合到草地早熟禾基因组中.RT-PCR检测、淀粉-KI显色反应和H2O2定量检测结果均表明,GO基因在转录和翻译水平上已得到表达.抗病性鉴定结果显示,转GO基因植株对锈病具有较高的抗性.     

不同灌溉水平下气象因子对草地早熟禾蒸散量的影响

[目的]研究不同灌溉水平下气象因子对草地早熟禾蒸散量的影响。[方法]以田间持水量为标准,用称重法控制土壤含水量并测量草地早熟禾蒸散量,利用Watchdog气象仪记录实时气象数据,研究在不同灌溉水平下草地早熟禾蒸散量及其动态,并研究草地早熟禾蒸散量与气象因子的关系。[结果]充分灌溉条件下草地早熟禾的蒸散量明显大于限制灌溉;除了8月限制灌溉草地早熟禾日蒸散量呈双峰型外,其他草地早熟禾日蒸散量均呈单峰型,且峰值均出现在当天气温最高值之前;月蒸散量随太阳辐射和气温的减小而逐月减少。草地早熟禾蒸散量受太阳辐射和气温的影响最显著,与相对湿度呈负相关关系,与风速的正相关性较不显著。[结论]该研究为草地早熟禾的栽培提供科学依据。     

农杆菌介导法获得草地早熟禾转Bt基因植株

以草地早熟禾品种超级伊克利成熟种子为外植体材料,当愈伤组织诱导培养基中琼脂的用量增加至16g/L时,诱导产生的颗粒状胚性愈伤组织占愈伤组织总数的40%以上。愈伤组织经携带pGBI4AB农杆菌LBA4404的感染和共培养后,在继代培养基上添加50mg/L筛选剂G418,可较好地筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织,进而获得具有卡那霉素抗性的再生植株。PCR分子检测结果表明,Bt基因已导入转化植株。生物学抗虫性鉴定结果显示,转Bt基因当代植株对1～2龄棉铃虫具有不同程度的抗性。     

草地早熟禾与青海扁茎早熟禾的POD同工酶的比较分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳(PAGE)技术对草地早熟禾(Poa pratensis L.)和青海扁茎早熟禾(Poa pratensis var.cv.Qinghai)的过氧化物酶(POD)同工酶进行检测和分析,从生化水平探讨两者的亲缘关系及遗传差异.结果表明,草地早熟禾与青海扁茎早熟禾在幼叶期、旗叶期的酶谱分别具共有带8条、6条,其酶带数量、带级、位点及活性强度各不相同,形成了各自特有的酶谱特征.在幼叶期,青海扁茎早熟禾具1条特征谱带,而草地早熟禾没有;在旗叶期,草地早熟禾具3条特征谱带,而青海扁茎早熟禾没有.利用这些酶谱特征找出供试材料间的细微差异是可行的,是两者进行生化水平鉴定的有利指标.     

Stable Transformation of Three Cultivars of Kentucky Bluegrass (Poa pratensis L. ) by Particle Bombardment of Mature Seed-Derived Highly Regenerative Callus

High embryogenic calli of three cutivars of Kentucky bluegrass, Md, Bd, and Gm, were in-duced from mature embryos, and were proliferated on medium K3 and K5. Embryogenic calli were trans-formed with plamids pDM803 and pBY520 by microprojectile bombardment. Fourty-two transgenic lines hadbeen obtained. The highest efficiency of transformation reached to 3.7 % for cv. Md, 2.8 % for cv. Gm, and5 % for cv. Bd. The micro nutriment of Cupric had significant effect on transformation. The embryogenic cal-lus cultured in dim-light condition had higher transformation efficiency than the green callus cultured in lightcondition for one month before transformation. The selective regime and selective pressure on the putativetransgenic plants were important for obtaining the desire number of transgenic plants. It also affected the copynumber of integrated genes in the genomic DNA of transgenic plants.     

氮磷钾不同配比对旅游景观早熟禾生长的影响

以城市旅游景观早熟禾为试材,研究了纯氮、氮磷、氮磷钾（50%比例有机氮）、有机氮4个施肥处理对其生长与含水量的影响。结果表明,氮磷处理6～8月份基部叶加长生长处于最高值,氮磷钾处理9～10月处于最高值,两个处理均显著高于不施肥的对照处理;叶片质地在7月份氮磷处理极显著高于对照;干物质积累量6～7月氮磷处理处于最高值,与氮磷钾处理之间无显著差异,8～9月氮磷钾处理最高,有机氮处理增加效果最差;鲜重在8月份所有处理达到最高值,其中氮磷、氮磷钾处理分别达到18 224.08、17 293.33 kg/hm2,极显著高于对照;8～10月份氮磷处理、氮磷钾处理含水量较高,且二者差异不显著。综合分析认为,氮磷处理对促进旅游景观早熟禾生长效果最佳,氮磷钾处理次之。     

早熟禾新品种农菁15的选育

为选育高产优质饲用和坪用草品种,将早熟禾优异风干种子经50Gy60 Co-γ射线辐射处理后,通过田间系统选择,结合生物产量、返青率、营养品质、抗病性及坪用性能等指标的检测,选育出农菁15早熟禾;该品种抗寒、耐盐碱、抗病性强、适应性广、饲用价值较高;与对照优异相比,具有青绿期长、草产量高、种子产量高等优点;在黑龙江高寒地区平均干草产量达3 832.6kg·hm-2,成熟期平均种子产量达510.2kg·hm-2;适宜在黑龙江全省推广种植。     

草地早熟禾胚发育类型及无融合生殖特征

【目的】通过对草地早熟禾不同时期胚囊发育过程的观察,掌握其胚囊类型和无融合生殖胚囊发育特征,为更深入了解无融合生殖的机理、选育中国本土草地早熟禾新品种提供理论基础。【方法】采用改良的石蜡切片技术,即FAA固定材料,多梯度二甲苯透明,切片厚度8 µm,苏木精（30 min）伊红（5 min）双重染色,观察并分析草地早熟禾的胚囊发育类型和特征。【结果】在石蜡切片中,观察到草地早熟禾巴润生殖过程中的5种胚囊类型,有性生殖胚囊所占比例为21.44%、体细胞无孢子生殖胚囊为49.67%、孤雌生殖胚囊为10.72%、助细胞胚胎和反足细胞胚囊分别为4.82%和7.66%,其中,体细胞无孢子生殖胚囊为主控型胚囊;草地早熟禾有性生殖胚囊为典型的蓼型胚囊;草地早熟禾同一胚珠中存在有性生殖胚囊、体细胞无孢子生殖胚囊或无配子生殖胚囊共存于一体的多胚现象,多胚出现频率为5.69%,其中,卵细胞形成的有性生殖胚囊与助细胞形成的胚囊极性相同,反足细胞形成的胚囊与卵细胞有性生殖胚囊极性相反;无孢子胚囊发育极不规则,通常单个发生或2个以上发生而形成多胚,2个胚囊并存现象居多。【结论】草地早熟禾生殖方式多样,具备有性生殖和无融合生殖2种生殖方式,为兼性无融合生殖植物,其无融合生殖方式以体细胞无孢子生殖为主,此外还有少量孤雌生殖和极少量的无配子生殖。     

草地早熟禾植株再生体系建立的初步研究

为培育优良抗性品种,选取新歌来德(Nuglade)、自由Ⅲ(Freedom Ⅲ)和优异(Merit)3个草地早熟禾品种的不同外植体,在不同浓度的6-BA,KT和NAA的培养基上进行植株培养,研究其对愈伤组织诱导率、绿苗分化率及生根的影响。结果表明:在不同培养基上,不同外植体愈伤组织的诱导率有较大的差异。草地早熟禾种子的愈伤组织诱导和继代培养基以MS(有机)+B5(无机)+2 mg/L 2,4-D+0.4 mg/L 6-BA为最佳;分化培养基以MS(有机)+B5(无机)+1.0 mg/L KT或MS(有机)+B5(无机)+1.0 mg/L 6-BA为最佳;生根培养基以1/2(MS(有机)+B5(无机))+0.8 mg/L NAA最佳。初步建立起草地早熟禾的植株再生体系。     

草地早熟禾转葡萄糖氧化酶基因植株的获得

以从大青山草地早熟禾、超级伊克利和午夜等3个草地早熟禾品种的成熟种子诱导产生的颗粒状胚性愈伤组织为受体材料,应用农杆菌介导法将含有葡萄糖氧化酶基因(GO)和新霉素磷酸转移酶基因(NPT II)的重组质粒导入草地早熟禾。愈伤组织经携带pBGO质粒的农杆菌LBA4404的感染和共培养后,转到添加筛选剂G-418 20~50 mg/L的愈伤组织继代培养基上进行筛选,选择对卡那霉素具有抗性的愈伤组织,进而获得再生植株。试管植株的叶片经淀粉-碘化钾显色反应后,检测到转基因植株中产生了过氧化氢。PCR分子检测证明,GO基因已整合到转化植株的基因组中。抗病性鉴定结果显示,转GO基因植株对水稻纹枯病具有不同程度的抗性。