2020年国内玉米青贮霉菌毒素普查报告

2020年1—12月,博瑞科技检测中心共采集黑龙江、辽宁、内蒙古、北京、天津、河北、山东、山西、陕西、甘肃、宁夏等地区的玉米青贮样本1 184 份,旨在了解2020年国内玉米青贮霉菌毒素污染情况。采用酶联免疫吸附法测定样品中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素三大霉菌毒素含量,分析总体污染情况以及不同月份、不同采集区域的污染情况。结果表明：2020年在检测的1 184 份玉米青贮样品中,玉米赤霉烯酮和呕吐毒素污染最为严重,超标率分别为4.36%,6.67%;不同月份的霉菌毒素平均值未出现明显的规律;同一牧场不同月份黄曲霉毒素B1和呕吐毒素差异较大,尤其是呕吐毒素,最高月份和最低月份相差2 649.56 μg/kg。     

平顶山地区猪饲料中霉菌毒素污染情况的调查与分析

为掌握平顶山地区饲料样品中霉菌毒素的污染情况,应用ELISA方法对2015年采集的168份猪饲料样品进行了黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素含量的检测与分析。结果显示平顶山地区黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素的污染率分别为15.48%、40.48%和30.95%;168份样品中1种霉菌毒素污染率为16.67%,2种以上霉菌毒素混合污染率为30.35%。结果表明平顶山地区猪饲料中存在黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素3种霉菌毒素的污染,且混合污染现象比较严重,应引起重视。     

饲料中常见霉菌毒素的污染报告

从市场采集猪配合饲料、鸡鸭配合饲料、玉米及其加工副产品、小麦及其加工副产品、豆粕、棉籽粕和米糠共292个样品,同时测定其呕吐毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮含量。结果表明,玉米及其加工副产品和小麦及其加工副产品中呕吐毒素含量较高,最高污染水平分别达5 296.3、3 566.2μg/kg,猪配合饲料呕吐毒素含量超标率7.9%;玉米及其加工副产品和棉籽粕黄曲霉毒素B1含量较高,最高污染水平分别达300、3 992.5μg/kg,猪配合饲料、鸡鸭配合饲料、玉米及其加工副产品和棉籽粕中黄曲霉毒素B1超标率分别为5.4%、8.5%、4.4%和33.3%;玉米及其加工副产品和小麦及其加工副产品中玉米赤霉烯酮含量较高,最高污染水平分别达1 686.3、1 378.9μg/kg,猪配合饲料玉米赤霉烯酮含量超标率达5.1%;饲料原料和饲料产品中存在呕吐毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮的共同污染问题,猪配合饲料和鸡鸭配合饲料中3种霉菌毒素的共同污染率分别达35.1%和42.9%。     

2010年上半年DDGS常规养分含量差异及霉菌毒素污染状况调查

2010年1～6月,笔者在河南市场收集来自全国的84份DDGS样品,进行了养分含量的分析及霉菌毒素污染情况的普查。结果表明:在所调查的DDGS样品中,水分含量范围2.43%～10.36%,平均值8.62%,变异系数30.30%;粗蛋白含量范围是24.56%～44.41%,平均为30.27%,变异系数为11.73%;粗脂肪的含量为0.45%～16.81%,平均7.81%,变异系数61.16%。粗灰分含量范围是2.63%～20.28%,平均6.73%,变异系数51.97%;粗纤维含量范围是1.38%～14.21%,平均11.94%,变异系数为31.90%;总磷的含量范围0.25%～1.00%,平均0.70%,变异系数54.81%;有效磷含量范围为0.25%～0.90%,平均0.60%,变异系数为48.13%;钙的含量范围是0.05%～0.25%,平均0.17%,变异系数67.97%。在所调查的DDGS样品中呕吐毒素、黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的污染普遍存在,被调查的DDGS样品中霉菌毒素的阳性检出率为100%。毒素含量由高到低依次为呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1。其中,呕吐毒素的含量变化范围:188.14～6 281.93μg/kg,平均值为3 947.36μg/kg,变异系数48.63%;玉米赤霉烯酮含量范围:4.79～1 219.9μg/kg,平均值达到329.25μg/kg,变异系数为73.90%;黄曲霉毒素B1含量范围:2.58～66.06μg/kg,均值达到20.77μg/kg,变异系数为52.86%。在所检测的DDGS样品中,呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的污染情况基本相同,并具有相同的变化趋势,即呕吐毒素污染严重的样品中玉米赤霉烯酮的含量亦高,而黄曲霉毒素B1则与上述两种毒素呈相反的趋势。     

鲁北地区全株玉米青贮饲料霉菌毒素检测分析

为了评估鲁北地区全株玉米青贮饲料霉菌毒素含量及危害情况,在鲁北地区18家养殖场青贮池中采集青贮样品,利用ELISA检测方法,开展了呕吐毒素(DON)、黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、T-2、赭曲霉毒素(OTA)等5种常见霉菌毒素的检测分析。结果表明:呕吐毒素、T-2毒素检出率均为100%,黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素检出率分别为55.56%、27.78%、5.56%;5.56%的样品存在黄曲霉毒素B1超出限量标准,其他均在限量标准以下。添加乳酸菌制剂制备组的呕吐毒素、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮3种霉菌毒素平均含量明显低于未添加组。全部样品中均检测出2种以上霉菌毒素,其中DON+T-2+AFB1三种霉菌毒素的组合检出率最高,达到38.89%,因此需提高对全株玉米青贮饲料霉菌毒素污染的认识和重视程度。     

能同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌筛选

旨在筛选能够同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌。先以呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的混合物为唯一碳源,以母猪粪便为材料,进行霉菌毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解这3 种霉菌毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行呕吐毒素降解能力检测,得到10 株对呕吐毒素降解率达70% 以上的菌株。进而检测这10 株细菌对玉米赤霉烯酮的降解能力,得到4 株对玉米赤霉烯酮降解率达70%以上的菌株。再检测这4 株细菌对黄曲霉毒素B1的降解能力,结果有1 株细菌(ODS-1)对黄曲霉毒素B1的降解能力达78.9%。革兰氏染色结果表明ODS-1 为革兰氏阴性芽孢杆菌。研究获得的ODS-1 对呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素均有较好降解效果,为进一步开发具有霉菌毒素降解作用的产酶益生素奠定了基础。     

猪胃肠道食糜中黄曲霉毒素B_1和玉米赤霉烯酮检测方法的改进及其在霉菌毒素吸附剂吸附效果评价中的应用

本试验旨在建立测定猪胃和小肠食糜上清液中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮含量的高效液相色谱(HPLC)法,并利用该方法评价霉菌毒素吸附剂分别在不同介质中对黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的吸附效果。为消除食糜上清液中复杂组分对目标毒素检测的干扰,本试验对毒素提取方法、液相色谱的检测波长设置和流动相组成进行了优化。利用单浓度体外吸附试验评价了4种霉菌毒素吸附剂分别在水、猪胃和小肠食糜上清液介质中对黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的吸附效果。结果表明:1)反应上清液经过1次正己烷和3次二氯甲烷提取,荧光激发波长和发射波长在0~9 min和9~14 min分别设定为360、440 nm和235、418 nm,乙腈/水流动相中乙腈比例控制在40%~60%时,本试验采用的HPLC仪对1.00~10 000.00 ng/m L黄曲霉毒素B1和20.00~5 000.00 ng/m L玉米赤霉烯酮具有良好的分离定量效果,线性相关系数分别为1.000和0.999;检出限分别为0.16和2.00 ng/m L;黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮日内精密度相对标准差分别为2.37%、4.50%;日间精密度相对标准差分别为2.74%、8.84%。黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮标准添加回收率分别为89.1%~110.3%、98.7%~104.1%。2)自制霉菌毒素吸附剂样品P3、M3和市场采购的霉菌毒素吸附剂产品Y1、Y2在猪胃食糜上清液介质中对黄曲霉毒素B1的吸附率依次为72.10%、84.18%、83.17%和66.01%;在猪小肠食糜上清液介质中的吸附率依次为78.15%、88.08%、88.12%和67.34%。4种吸附剂在胃食糜上清液介质中对玉米赤霉烯酮的吸附率依次为85.35%、18.41%、16.20%和12.98%;在猪小肠食糜上清液介质中的吸附率分别为39.75%、25.15%、21.40%和24.85%。综上,本试验建立的HPLC法可同时测定猪胃和小肠食糜上清液中的黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮,检测限和检测范围满足我国《猪饲料卫生标准》的要求。该方法可用于评价霉菌毒素吸附剂猪生理体液条件下对黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的吸附效果。     

2012年上半年饲料中霉菌毒素污染状况的分析

2012年上半年,从广东、福建、浙江、上海、江西、安徽、湖南、湖北、广西、云南、四川、河南、河北、山东、北京、辽宁、黑龙江17个省市的饲料厂和养殖场收集饲料及饲料原料样品共476份,检测了黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、烟曲霉毒素B1、T-2毒素和赭曲霉毒素A。结果表明,玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和烟曲霉毒素Bl的污染情况较为严重,配合饲料样品中3者检测的平均值分别为607．6μg／kg、808．5μg／kg和2349．2μg／kg,超标率也分别达到24．6％、24．1％和18．3％。另外,霉菌毒素的污染程度具有明显的季节性,梅雨时节尤其应多加防范。     

能同时降解眍吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌筛选

旨在筛选能够同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌。先以呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的混合物为唯一碳源,以母猪粪便为材料,进行霉菌毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解这3种霉菌毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行呕吐毒素降解能力检测,得到10株对呕吐毒素降解率达70％以上的菌株。进而检测这10株细菌对玉米赤霉烯酮的降解能力,得到4株对玉米赤霉烯酮降解率达70％以上的菌株。再检测这4株细菌对黄曲霉毒素B1的降解能力,结果有1株细菌（ODS-1）对黄曲霉毒素B1的降解能力达78．9％。革兰氏染色结果表明ODS-1为革兰氏阴性芽孢杆菌。研究获得的ODS-1对呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素均有较好降解效果,为进一步开发具有霉菌毒素降解作用的产酶益生素奠定了基础。     

2012年新季玉米霉菌毒素污染调查分析

对2012年玉米主产区新季玉米的89个样品进行霉菌毒素检测分析,结果表明,2012年新季玉米呕吐毒素和黄曲霉毒素B1的感染率较高,分别达到了53.75％和50‰,阳性平均值分别为889μg/kg和6.905μg/kg,玉米赤霉烯酮感染率与含量都比较低;从产地来看,陕西、安徽的玉米霉菌毒素污染较低,辽宁、黑龙江、山西的玉米不仅霉菌毒素感染率高,其含量也高.     

2012年国内饲料及原料霉菌毒素污染调查分析

为了解我国饲料及原料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的污染情况,于2012年对来自全国的205份送检样品进行了3种霉菌毒素的HPLC检测,并对检测结果进行分析。结果:霉菌毒素污染情况仍然严重,检出率高达66.21%,超标率高达27.75%;黄曲霉毒素B1污染情况并未减轻,最大值达488.86μg/kg,高出国家标准近25倍,其平均值为23.02μg/kg,高出国家标准;与其他原料相比,饼粕类饲料原料霉菌毒素污染情况更为严重,污染率可达76.47%。此次调查结果为今后控制饲料中霉菌毒素含量提供一定理论依据。     

2013年1—6月12省市饲料及原料中霉菌毒素分析报告

对2013年1—6月12省市饲料及原料中霉菌毒素进行检测分析,结果表明：1）饲料及原料总体上黄曲霉毒素B1污染较轻,玉米赤霉烯酮和呕吐毒素污染严重,玉米副产物霉菌毒素污染最严重;2）玉米和配合饲料的主要污染物是玉米赤霉烯酮和呕吐毒素,小麦及其副产物的主要污染物为呕吐毒素,饼粕类特别是花生粕黄曲霉毒素B1污染较严重。     

青贮玉米中10种霉菌毒素LC-MS/MS检测方法的建立和应用

研究优化了应用液相色谱-电喷雾串联四级杆质谱仪,用多离子反应监测定量法同时检测青贮玉米中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、麦角醇、杂色曲霉毒素、HT-2毒素和T-2毒素的方法。样品经乙腈-水-甲酸(8415.90.1,V/V)提取后,经Mycospin 400多功能净化柱净化后过膜直接上机测定,在5~100 ng/ml的线性范围内,线性关系良好。选择高中低3个浓度水平进行空白样品加标,平均回收率为67.4%~114.1%,相对标准偏差(RSD)为0.2%~6.1%,该方法精密度良好,回收率高,灵敏度好,在较短时间内同时能满足10种霉菌毒素的检测。利用该方法检测了2015年度4省市10个奶牛场的14个全株青贮玉米样品,其中河南3个,河北4个,黑龙江3个,山东4个。结果发现,10个奶牛场全株青贮玉米样品中全部检出的霉菌毒素种类为呕吐毒素、黄曲霉毒素B2和玉米赤霉烯酮,河南、河北和山东还检出麦角醇。奶牛场全株玉米青贮玉米样品中霉菌毒素含量由高到低依次为呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B2和麦角醇,样品含量全部未超过国家限量。     

2018年19省市饲料及饲料原料霉菌毒素污染状况分析

2018年,从北京、福建、安徽、山东、广东、河南等19个省市收集442份饲料及饲料原料,检测了其中行业内较为关注且对畜禽生产影响较大的黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素3种霉菌毒素含量。结果显示,饼粕类样品受黄曲霉毒素B1污染严重,其次为DDGS(谷物干酒精槽),各类样品受玉米赤霉烯酮污染程度较轻,小麦、麸皮、DDGS受呕吐毒素污染较为严重;华中地区样品受霉菌毒素污染程度高于其他地区。     

2014年饲料及饲料原料霉菌毒素污染状况分析

2014年,从北京、河北、山东、河南、山西、安徽、江苏、上海、浙江、福建、江西、湖北、湖南、广东、广西、云南、四川等17个省市收集到584份饲料或饲料原料样品,检测了黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素含量。结果表明,所有样品中黄曲霉毒素B1超标最严重的是杂粕,玉米赤霉烯酮超标最严重的是玉米副产品,呕吐毒素超标最严重的是小麦及麦麸;华东、华南、华中地区霉菌毒素污染程度较华北地区更为严重。     

高效液相色谱同步检测饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的方法

本研究旨在建立同步检测饲料中黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的高效液相色谱(HPLC)法。样品用乙腈-水提取,经涡旋、高速离心,移取2 mL上清液加入28 mL含1%吐温-20的磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.0),过三合一免疫亲和柱净化,用2 mL甲醇洗脱;洗脱液经50℃浓缩氮气吹干后用50%甲醇-水复溶,采用高效液相色谱仪串联光化学衍生器、荧光检测器和紫外检测器进行检测。结果表明:黄曲霉毒素B_1标准品溶液浓度在2.5～50.0 ng/mL、玉米赤霉烯酮标准品溶液浓度在50～2 500 ng/mL、呕吐毒素标准品溶液浓度在250～5 000 ng/mL时线性关系良好,平均加标回收率为81.2%～92.3%,相对标准偏差(RSD)为4.3%～9.5%。采用该方法检测了4种不同饲料样品中的黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素含量,所有样品均检测出1种以上霉菌毒素,说明饲料中霉菌毒素混合污染较为普遍。由此可见,本试验所建立的方法准确度和精密度高,稳定性好,可作为饲料中黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的同步检测方法。     

一种玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒的研制

通过玉米赤霉烯酮与对苯二胺反应,制备出玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中玉米赤霉烯酮的捕获量为50ng/ml,与玉米赤霉烯酮结构或者功能相似的竞争药物:黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、T-2毒素、赭曲霉毒素A、展青霉素等5种药物进行特异性反应时,均无交叉反应。     

晋南地区规模化蛋鸡场饲料霉菌毒素污染状况分析

霉菌毒素中毒是影响我国畜禽业健康发展的重要中毒病之一。为了解晋南地区规模化蛋鸡场饲料霉菌毒素中毒情况,从晋南地区规模化蛋鸡场采集了226份饲料样品（豆粕45份、玉米79份、麦麸44份、全价配合饲料58份）,测定样品中的黄曲霉素B1、呕吐霉素、T-2毒素和玉米赤霉烯酮。结果表明,豆粕、玉米、麦麸和全价配合饲料中黄曲霉毒素B1、呕吐霉素、T-2毒素和玉米赤霉烯酮的超标率分别为15.56%、17.78%、15.56%和13.33%,13.92%、12.66%、15.19%和16.46%,15.91%、15.91%、13.64%和11.36%,17.24%、13.79%、10.35%和12.07%。结果提示,晋南地区规模化蛋鸡场饲料霉菌毒素污染比较严重,养殖场需重视饲料发霉现象。     

玉米类饲料原料中田间毒素在仓储阶段的污染变化规律

本研究通过试验解决了田间毒素在仓储阶段是否增加的问题。通过对玉米类饲料原料中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的两次检测发现:玉米中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素增长率分别为157.6%和288.5%;玉米副产物中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素增长率分别为167.9%和274.4%;呕吐毒素的增长率明显高于玉米赤霉烯酮的增长率。     

2013年上海浦东地区规模养殖场中饲料及原料霉菌毒素污染状况调查

调查采用酶联免疫吸附法(ELISA)对来自浦东地区规模养殖场中3类250份饲料及饲料原料样品进行了黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮4种常见霉菌毒素的测定。调查结果表明:霉菌毒素污染以呕吐毒素和玉米赤霉烯酮为主,黄曲霉毒素B1的检出率增幅较大,平均含量超出国家标准;霉菌毒素污染非常普遍,同时含2~3种霉菌毒素的样品比达到62.80%;霉菌毒素的污染水平在二、三季度较高,具有一定的季节性,但不明显。