雷帕霉素通过促进自噬提高小鼠iPSCs诱导效率

【目的】雷帕霉素(Rapamycin)可以激活和促进细胞的自噬过程。探明在体外培养系统中添加雷帕霉素,检测是否可以通过促进自噬过程提高iPSCs诱导效率。【方法】在iPSCs诱导过程的1~3d和4~6d分别加入雷帕霉素,检测自噬现象,同时对iPSCs诱导过程中多能性基因表达进行检测,统计原代iPSCs克隆数等,评价雷帕霉素对iPSCs重编程的影响;在iPSCs的培养过程中分别加入50nM/L和100nM/L的雷帕霉素处理。【结果】使用浓度为50nM/L和100nM/L的雷帕霉素处理,可以提高iPSCs的诱导效率。50nM/L浓度处理,重编程效率较高【结论】雷帕霉素在iPSCs重编程过程中可以促进自噬,提高Nanog表达水平,抑制p53表达,进而提高iPSCs诱导效率。     

诱导多能干细胞的研究进展

通过转入特定基因能诱导体细胞重编程成为多能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs),这项技术为干细胞的研究和应用带来了革命性的变化,对于解决长期困扰干细胞研究领域的伦理困境和免疫排斥等问题具有重大意义。然而,目前iPSCs技术本身还不完善,面临致癌性、效率低、以病毒为载体的安全性问题以及移植后存活率低等诸多问题。主要从iPSCs的产生和筛选、应用前景及其存在的问题等3个方面进行了综述,以期为今后关于这方面的研究提供参考。     

绵羊iPS细胞诱导及转录组学分析

【目的】建立绵羊(Ovis aries)诱导性多能干细胞系,为绵羊转基因育种、应用绵羊诱导性多能干细胞奠定基础。【方法】利用电转将OCT4、SOX2、KLF4、l-Myc、Lin28转染至绵羊成纤维细胞中并诱导培养至有光滑隆起、边缘整齐的细胞克隆,形态学、碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色以及实时荧光定量PCR检测克隆细胞的生物学特性;利用高通量测序技术对诱导0、10、20、30 d的阳性细胞的差异表达基因进行筛选。【结果】克隆细胞中SOX2、OCT4、SSEA-1蛋白免疫荧光染色均呈阳性; OCT4、SOX2、Nanog基因表达量均极显著高于成纤维细胞;0和30 d转录组测序表明,被注释到GO数据库的差异表达基因有9 465个,其中,上调基因6 987个,下调基因2 478个;KEGG分析共有5 773个基因注释到259个通路中,其中,P53信号通路显著富集,且其在干细胞增殖方面起着非常重要的作用。【结论】初步成功建立了绵羊诱导性多能干细胞。     

不同病毒感染方法对山羊体细胞重编程效率的影响

[目的]检测2种病毒感染方法(悬浮感染和贴壁感染)对体细胞重编程效率的影响。[方法]采用慢病毒作为载体携带多能因子分别使用悬浮感染和贴壁感染2种方法感染正常山羊体细胞,统计克隆形成率。[结果]悬浮感染和贴壁感染的平均克隆率分别为0.44‰和0.31‰,悬浮感染的效果要显著地优于贴壁感染。[结论]悬浮感染的方式更利于山羊成纤维细胞重编程。     

诱导性多能干细胞的研究及应用

自从小鼠的胚胎成纤维细胞和鼠尾成纤维细胞重编程成为诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSCs）以来,iPS的研究成了干细胞研究领域的热点。与胚胎干细胞相比,iPS细胞有操作简便和高稳定性等优点可以应用于,如创建人类疾病的遗传模型,培育转基因动物用于器官移植,改善动物生产性状和抗病性,以及生物制药等领域。另外,iPSCs的产生对于解决长期以来干细胞研究领域的伦理问题和免疫排斥问题有巨大的意义,iPS结合基因治疗和细胞移植疗法的成果已经应用到了动物疾病模型上。iPS细胞技术给病人特定细胞治疗和基因针对性药品研制带来了巨大的前景。此外,该技术也提供了iPS细胞重编程机制和人类疾病的病理过程研究的新平台。然而,现阶段多能干细胞的研究只是开辟了一个新的领域,iPS技术要应用于临床还有很多工作要做。本文主要针对iPSCs的研究现状与应用前景进行讨论。     

用重金属离子诱导胡萝卜体细胞胚胎发生

对胡萝卜体细胞胚胎诱导的一种新方法,取７ｄ龄胡萝卜幼苗的茎尖在不加生长调节生物而含有重金属离子（如Ｃｕ＾２＋、Ｃｏ＾２＋、Ｎｉ＾２＋、Ｚｎ＾２＋、Ｃｄ＾２＋）的ＭＳ培养基上培养７～２１ｄ,然后移到ＭＳ培养基上培养,未见生成愈伤组织就形成体细胞胚胎。说明这些重金属离子产生的胁迫可刺激胡萝卜的体细胞胚胎发生。     

不同来源山羊体细胞重编程效率比较

[目的]检测克隆奶山羊(♀12003)和转基因克隆奶山羊(♂12001)作为供体细胞,对体细胞重编程效率的影响。[方法]采用慢病毒作为载体,携带多能因子来感染正常山羊(g2)、♀12003和♂12001体细胞,统计克隆形成率和碱性磷酸酶阳性克隆率。[结果]与普通山羊(g2)相比,转基因克隆奶山羊耳成纤维细胞的重编程效率低,出现的细胞克隆在传代之前容易分化;克隆奶山羊体细胞与普通山羊体细胞的重编程效率接近,转基因克隆奶山羊(♂12001)的重编程效率极显著低于克隆奶山羊(♀12003)和普通山羊(P0.01)。[结论]转基因克隆奶山羊体细胞可以被重编程为诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs),但效率较低。     

诱导多能干细胞技术与羊的遗传改良

我国拥有丰富、宝贵的肉用绵羊种质遗传资源,如何有效利用现有的优良绵羊种质资源和提高绵羊的经济性状已成为一个紧迫的问题.为了进一步提高其生产性能,对诱导多能干细胞技术在羊的遗传改良方面的应用前景进行了综述.     

影响植物体细胞胚诱导的因素

介绍了植物体细胞胚的含义、诱导方式,探讨了糖类、温度、激素等对植物体细胞胚诱导的影响。     

MicroRNA在多能干细胞的表达与功能

具有自我更新能力和多向分化潜能的胚胎干(ES)细胞及诱导多能干(iPS)细胞在再生医学领域有着巨大的应用潜力。目前获得多能干细胞的效率依然偏低,与干性获得及维持相关的调控机制尚不十分明确,严重制约了多能干细胞的进一步研究与应用。近年的研究表明,microRNAs(miRNAs)不仅在ES细胞增殖分化、维持多能性方面具有重要的调控作用,在诱导体细胞形成iPS细胞的过程中也扮演着重要角色。有关miRNAs在ES细胞以及iPS细胞的表达与调控研究的新进展,为多能干细胞的进一步研究提供了新思路与新方法。本文侧重就miRNAs在ES细胞和iPS细胞的表达及其在细胞增殖分化、干性维持等方面的功能进行综述,以供相关研究参考。     

小麦育种后代点播与密植的农艺性状差异分析

我国小麦育种发展很快,各种新技术不断出现,如杂交小麦育种、辐射育种、花培技术育种、无性系变异育种等等,虽然这些育种方法各不相同,但其后代的种植方式大都是一样的,即采用单粒点播的方式,虽然也有一些其它的种植方式,如穴区播种、撒播,但应用不太广泛.     

不同育苗密度对无患子苗期生长的影响

该文以无患子种子为试验材料,设置6种育苗密度D_1(5cm×25cm)、D_2(20cm×20cm)、D_3(20cm×15cm)、D_4(20cm×10cm)、D_5(15cm×10cm)、D_6(10cm×10cm),研究不同育苗密度对无患子幼苗生长和生物量积累的影响。结果表明:幼苗苗高在生长前期随育苗密度变化不明显,生长中期随密度增加而减少,后期受密度影响不明显;幼苗地径、幼苗根系及茎生物量在生长中期随育苗密度增加而减少,生长后期密度对地径生长影响不大;育苗密度对幼苗叶生物量的影响在各个时期则表现各不相同。     

不同种植密度对机械直播油菜农艺性状及产量的影响

以国审油菜盐油杂3号为材料,设置15、20、25、30以及35万株·hm^-25种种植密度,分析不同种植密度对油菜农艺性状及产量的影响。研究结果表明：1）密度高低对株高、分枝高度、有效分枝数、单株有效角果数等指标均有明显影响,随着密度的增加呈先上升后下降的趋势;2）高密油菜群体株型结构整齐更能适合机械化收获;3）利用混合型产量-密度模型对密度和产量两个因素进行非线性拟合,最终推导出最优方程,利用最优方程计算出油菜直播最优密度。     

Fulgensia fulgens绿藻细胞的分离培养研究

从Fulgensiafulgens分离、纯化出了一种绿藻,对其进行了分子鉴定和培养特性研究。结果表明:从地衣体上分离出的绿藻不一定是其共生藻,地衣体上所存在的藻类具有多样性。     

保苗密度对膜侧沟播春油菜的影响

在临夏高寒阴湿区膜侧沟播种植条件下,研究了保苗密度对春油菜产量及性状的影响。结果表明:临夏高寒阴湿区膜侧沟播春油菜适宜的保苗范围为25.5万~30.0万株/hm2,最佳密度25.5万株/hm2,其产量为3 939.0kg/hm2,较低保苗密度(21.0万株/hm2)、高保苗密度(39.0万株/hm2)分别增产13.29%和17.81%,产量差异达显著水平,且能有效地降低株高和分枝高度,促进油菜壮苗,延缓油菜菌核病的发病时间和降低发病率,提高抗倒伏能力。     

播期与密度对大麦茎秆抗倒力的影响研究

阐述了大麦不同播种期、密度对大麦茎秆抗倒力的影响,结果表明：不同播种密度随着播种期的推迟,大麦抗倒力增强;不同播种期随着播种密度的增加,大麦抗倒力下降。     

直播水稻高效栽培技术

水稻直播具有省工省力、节本增效、缩短生育期、增加产量、适于规模化生产等优势,是水稻栽培发展的新方向.本文介绍了直播稻高产配套栽培技术.     

保留密度对油松飞播林生长的影响

以丹凤县流岭林场的标准地调查资料为依据,采用测树学方法,研究了不同保留密度和不同坡向对油松飞播林生长的影响.结果表明,保留密度的变化对树高生长影响不大,对林分胸径和单株材积的生长影响显著.在阳坡,当保留密度为2 800～6 300株/hm2时,胸径年均生长量为0.36～0.28 cm,单株材积生长量为0.001 24～0.000 62 m3;在阴坡,当保留密度为1 125～5 306株/hm2时,胸径年均生长量为0.54～0.33 cm,单株材积生长量为0.003 6～0.000 98 m3,呈现出随保留     

播期与密度对沙地菊芋产量的影响

本试验采用播期与栽培密度两因素的裂区设计,以确定沙地菊芋种植的较佳密度和适宜播期。研究表明,不同播期与密度交互作用对沙地菊芋地上部植株植物学性状无显著影响;而对于块茎性状及产量,春播优于秋播,密度以25500株/hm2为宜。