蛹虫草人工栽培种的分离与复壮

蛹虫草 ,俗称北冬虫夏草。我国主要分布在山西、陕西、吉林、河北等省区。现在用人工培养基栽培蛹虫草已成功 ,人工栽培的蛹虫草经药理学分析 ,其营养及药用价值与天然冬虫夏草相近 ,因此具有广阔的市场前景。本文叙述了我系人工培植蛹虫草过程中菌种的分离与复壮方法。1　材料与仪器1.1　菌　株　本所生长良好、健壮且无病虫害的人工培植的蛹虫草一瓶。1.2　仪器与试剂　仪器为超净工作台 ,恒温培养箱 ,高压灭菌锅 ,试管 ,小刀 ,接种铲 ,酒精灯等。试剂为 3 8%甲醛 ,0 .2 %升汞溶液 ,酒精棉球 ,无菌水等。2　培养基配制2 .1　培养基的配制…     

不同接种物对蛹虫草子实体营养成分的影响

以蛹虫草菌株母种的表层菌皮、母种基内菌丝和成熟的待分离的新鲜子实体顶端接种到液体培养基进行液体培养,分析比较栽培所获得不同蛹虫草子实体的有效成分得出:以母种表层菌皮接种液体培养所获得的子实体虫草素和硒元素含量最高;以母种培养基的基内菌丝接种培养栽培所获得子实体的虫草酸、腺苷、虫草多糖、SOD酶、蛋氨酸、酪氨酸含量较高。     

蛹虫草高效栽培技术

野生冬虫夏草面临灭绝,但因营养保健价值较高,市场消费需求走高。因此,为满足消费者的需求,采取人工培植蛹虫草,以代替野生冬虫夏草。介绍了人工培养蛹虫草的方法,包括培养基配制、接种、管理采收及包装等。     

响应面法优化蛹虫草菌液体发酵条件

以蛹虫草菌(Cordyceps militaris)为试材,用单因素试验筛选适宜温度后,利用响应面法优化培养基,最后用优化的条件和培养基进行摇床6d和摇床6d+静置培养10d的液体发酵试验,研究不同培养条件下蛹虫草菌液体发酵后菌丝体产率以及静置培养对虫草素积累量的影响。结果表明:蛹虫草菌适宜温度为25℃,优化培养基为蔗糖4.34%、酵母粉3.06%、硫酸亚铁0.027%、磷酸二氢钾0.2%、硫酸铵0.04%、硫酸镁0.13%、维生素B10.08%、硫酸锌0.06%;摇床6d和摇床6d+静置10d后,发酵液中的菌丝体产率分别为2.568g/100mL和3.389g/100mL,后者菌丝体产率比初始培养基增加了1.73倍,而虫草素积累量分别达到568.329μg/mL和862.893μg/mL,后者比初始培养基中增加了1.56倍。     

1株分离自蛹虫草小麦培养基的粘质沙雷氏菌的鉴定及初步研究

从蛹虫草小麦培养基中筛选出1株产红色素的菌株,划线分离、纯化后命名为CD1,对其进行了16S rDNA ITS序列分析。同时将其接种于正常的蛹虫草小麦培养基上,接种后在蛹虫草子实体生长早期、中期、后期分别进行子实体湿质量、干质量、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性等生理生化指标测定,结果表明该菌为粘质沙雷氏菌,接种小麦培养基后可以显著提高蛹虫草子实体产量。     

江苏蛹虫草的人工培育

以灌输野生蛹虫草分离菌人工接种鳞翅目昆虫及人工合成培养基，在人控环境保护下，虫体上长出与野蛹虫草一致的子座，人工合成培养基上长出比野生蛹虫草精壮的子座。     

蛹虫草有性生殖及有性子实体人工培养研究

对蛹虫草有性生殖性亲和性类型、子囊壳生长发育过程,人工培养有性子实体形成与蛹虫草无性型产孢结构、培养基、环境等方面的研究进行了综合报道,以便为进一步产业化生产蛹虫草有性子实体（子囊壳子座）提供科学依据。     

蛹虫草子实体的人工培育及超氧化物歧化酶的活性测定

笔者在人工控制环境条件下,使接种在不同培养基上的蛹虫草菌长出了与野生蛹虫草一样的子实体,并测定了子实体及培养基-菌丝体混合物中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。     

应用干蚕蛹栽培蛹虫草

蛹虫草Cordyeps militaris（L．ex Fr．）Link的人工栽培，按其培养基一般分为米饭和蚕蛹两种栽培方式。蚕蛹栽培中又有活蛹、毛脚蛹和干蛹之分。基于干蛹来源丰富、耐贮藏、运输方便，栽培也易于成功。同时，蚕蛹又是一味中药，接种虫草菌经培养后，所含虫草素比米饭等培养基高，因此它是栽培蛹虫草的理想原料。现将桑蚕（Bombyr mori Linaeus）干蛹的栽培技术作简要介绍如下。     

蛹虫草液体深层发酵的研究

以蛹虫草菌丝体生物量为指标,运用单因素对比试验和正交实验,对蛹虫草液体培养基的碳、氮营养源以及最佳配方和培养条件进行了优化研究。结果表明:筛选出蛹虫草液体培养基最佳碳源为蔗糖,其次为麦芽糖;最佳氮源为酵母膏,其次为蛋白胨。筛选出蛹虫草液体培养基适宜配方为:蔗糖3%、酵母膏3%、KH2PO40.1%、MgSO40.15%;液体培养适宜条件的温度为24℃,pH 5.5,接种量为15%,摇瓶转速为140 r/min,发酵罐通气量为1∶1.2~1∶1.6V/(V.min)。     

蛹虫草子实体的人工培养及超氧化物歧化酶的活性测定

笔者在人工控制环境条件下，使接种在不同培养基上的蛹虫草菌长出了与野生蛹虫草一样的子实体，并测定了子实体及培养基－菌丝体混合物中超氧化物歧酶酶的活性。     

蛹虫草发酵菌茶菌株筛选及制备

以乌龙茶梗与小麦粒复配制作培养基，接种不同蛹虫草菌株进行固态发酵，以菌丝体生长速度为考察指标，筛选出适宜制备菌茶的长势良好，生长周期适中的发酵优势菌株；优势菌株接入茶叶培养基，发酵14 d，制备成菌茶，并对茶汤感官评价。结果表明，蛹虫草YCC 2号菌株在茶梗-麦粒培养基上菌丝长势较好，日均生长速度为1.67 mm/d，接种该菌制备而成的菌茶茶汤呈橙黄色，香气清淡，无絮状物，口感清爽，有淡淡的蛹虫草香味。     

柞蚕蛹虫草工厂化栽培技术

蛹虫草,又名北虫草、北冬虫夏草。野生蛹虫草是麦角菌科虫草属蛹虫草菌(Cordyceps militaris)和鳞翅目大蚕蛾科柞蚕蛹(Antheraea pernyi)的共生体[1]。传统医书记载天然野生蛹虫草具有补肾润肺的功能[2],现代医学和营养学研究也表明了蛹虫草含有虫草素、虫草多糖等活性成分[3-5],具有提高免疫力、抗疲劳、保护心脑血管、抗癌等方面的作用[6-7]。近十余年来,在我国南北各地涌现出众多蛹虫草栽培基地,其中南方以人工培养基代料栽培为主,北方则以利用柞蚕蛹培育蛹虫草为主。北京航天农业生物科技有限公司经过十年的努力,独立设计并建成了国内第一座柞蚕蛹虫草工厂,实现了周年生产,取得了很好的经济效益。现将柞蚕蛹虫草工厂化栽培技术总结如下。     

蛹虫草虫草酸虫草素含量测定与分析

本文采用HPLC法对蛹虫草的虫草酸、虫草素含量作了测定与分析。结果表明同种培养基质中蛹虫草不同部位和不同培养基质中蛹虫草相同部位的虫草酸、虫草素含量均有不同, 通过比较确定了虫草酸、虫草素含量较多的部位, 从而为今后虫草酸、虫草素的开发利用提供了科学依据。     

液体发酵培养富硒蛹虫草菌丝体优化条件的试验

以四因素三水平的正交试验设计培养条件,在24℃±1℃,180 r/min条件下,对蛹虫草菌进行液体培养,测定菌丝体干重,得到了最佳菌株是川草SC0341,而最佳液体培养基是麦芽粉培养基、最适pH 6.8、增稠剂羧甲基纤维素的最佳用量为0.45％.并且确定麸皮粒型种可作为试验使用的良好试管菌种.用试验测得的最优条件下所得液体发酵培养基,在培养液中加入6 μ.g/mL的Na2SeO3,蛹虫草菌丝体硒吸收率达39.22％,菌丝体干重(1.00±0.05) g/100 mL.试验收获的蛹虫草菌丝体营养价值高、成本低,为中小食品企业研发功能型保健品添加剂提供了一实验模型.     

不同培养基配方对野生蛹虫草菌丝生长的影响

将采自长春净月潭的野生蛹虫草进行分离,分离后的蛹虫草菌株进行驯化研究。主要研究了不同培养基配方对蛹虫草菌丝体生长情况的影响,结果表明在培养基配方1上菌丝生长较好。     

啤酒糟栽培蛹虫草

利用啤酒糟栽培蛹虫草(Cordyceps militaris),通过单因素试验培考察培养基中啤酒糟与大米组成比例、培养基含水量、培养基起始pH、培养温度和光照对蛹虫草子实体产量和质量的影响,在此基础上设计正交试验,通过正交试验选出啤酒糟栽培蛹虫草最佳的栽培条件为培养基啤酒糟与大米比例1∶1,含水量65%,瓶底转色后于23℃,光照强度700lux下培养,在此条件下每瓶产量为3.24g(每瓶培养料30g)。     

蚕蛹虫草栽培方法优化试验

不同菌种、培养基配方、接种方法对蛹虫草人工栽培的影响不同。对蚕蛹虫草菌种、培养基配方、接种方法三因素进行优化，以接种后蚕蛹感菌率、出草整齐程度、转色情况等为评价指标进行试验。通过菌株活性检测，筛选出性状稳定的蚕蛹虫草菌种；通过液体菌种培养基配方筛选试验，筛选出发菌快的液体菌种培养基配方；分别采用喷洒、浸泡、注射的方式接种蚕蛹虫草液体菌种，筛选出最优接种方法为注射。     

蛹虫草固体发酵生产虫草素的条件优化

用直径6 cm,高10 cm聚乙烯培养罐固体发酵蛹虫草(Cordyceps militaris),以固体发酵产物中虫草素含量为指标,从16个蛹虫草菌株中筛选出虫草素含量最高的菌株,考察固体发酵该菌株的培养基组成、培养时间、培养基装量、料液比、培养温度、接种量和添加物对虫草素含量的影响,得到了有利于蛹虫草固体发酵产虫草素的培养条件:培养罐装20 g小麦,按小麦干重6％的量分别加入玉米粉和黄豆粉,按料液比1∶1.4(w∶v,以小麦干重为基准)加入营养液(g/L:2.0 K2HPO4·3H2O,0.5 MgSO4·7H2O,16甘氨酸),培养温度为26℃,时间46 d,接种量10％.     

我国蛹虫草人工栽培培养基的现状调查

调查了国内7个较大型栽培蛹虫草的产业化基地,深入直观地调查了蛹虫草常用培养基的种类、配方成分、制作技术、生产性能等方面的内容,并重点收集了不同产业化栽培培养基上蛹虫草子实体生长特征,以期在保证蛹虫草品质的前提下,得到最优的产业化栽培蛹虫草的培养基,为进一步扩大蛹虫草产业化栽培奠定基础。