应用ELISA检测出口冻兔肉产品中兔出血症病毒的研究

“兔出血症”是1984年存在我国发生的一种新的家兔的病毒病,已流行全国。为了加强冻兔肉产品的卫生检测,保证出口兔肉产品不带兔出血症病毒(指出口的去骨兔肉     

应用ELISA检测出口冻兔肉产品中兔出血症病毒的研究

<正> 为了加强冻兔肉的卫生检测,保证出口产品不带兔出血症病毒(RHDV),我们建立了双夹心ELISA技术,并与常规的HA—HI试验进行了对比,取得了满意的结果,特报告如下: 1 材料和方法1.1 兔抗RHDV IgG的提纯取琼扩效价1:64的RHDV阳性血清(南京农业大学兽医微生物组提供),按常规用饱和硫酸铵盐析进行粗提,然后经DEAE纤维素DE—52层析柱进一步纯化,并测定蛋白含量和琼扩效价。均按《酶标技术》一书介绍的方法进行。     

应用间接血凝试验检测兔出血症病毒抗体的研究

应用纯化兔出血症病毒抗原,以戊二醛醛化绵羊红细胞为载体,成功地建立了间接血凝试验用以检测兔出血症病毒抗体.与血凝抑制试验和琼脂双扩散试验比较,其敏感性比血凝抑制试验高32倍,比琼脂双扩散试验高1024倍.致敏红细胞于4°C保存四个月仍有效.     

检测兔病毒性出血症的简便方法——反向间接血凝试验

<正> 兔病毒性出血症自1984年报道以来,主要检测手段是用人红细胞作凝集试验及凝集抑制试验,每次试验都需洗涤配制新鲜红细胞悬液。笔者为寻求取代方法而进行了多项探索,最后应用反向间接血凝获得成功。基础浓度为1:5的检料,间接血凝与直接血凝     

应用单抗间接ELISA检测兔出血症病毒的研究

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应用单抗间接ELISA检测兔出血症病毒的研究

建立了用于检测脏器组织中兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）抗原的单抗间接ＥＬＩＳＡ法，并与血凝试验（ＨＡＴ）和多克降双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法进行比较，在被检的７８９份样品中，种方法检测结果皆为阴性的有５５１份，皆为阳性者１７３份；单抗间接ＥＬＩＳＡ和多克隆双体夹心ＥＬＩＳＡ均为阳性者３１份；公多克隆双抗体夹心ＥＬＩＳ为阳性者３１份；仅ＨＡＴ为阳性者２份；仅单抗间接ＥＬＩＳＡ为阳性者１份。实验结果证实，单抗间接     

应用间接血凝(IHA)方法检测藏羊肝片吸虫

用肝片吸虫成虫虫体进行抗原纯化,建立藏羊肝片吸虫间接血凝(IHA)诊断方法,并用此方法与粪便检查法检测青海湖地区50只藏羊。结果显示藏羊肝片吸虫阳性检出率,IHA法为48%,粪便检出法为38%。与粪检结果相比,阳性符合率为79.17%,阴性符合率为100%。IHA法结果表明:被检地区藏羊的肝片吸虫感染率达48%,应及时进行驱虫治疗。     

兔病毒性出血症病毒血凝作用的研究

选用十种动物(鸡、鸭、鹅、鸽、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、绵羊、公牛,每种5个个体)和人(“O”型)的血液,用氰化高铁血红蛋白法监测红细胞悬液的配制,分别在4℃、22℃、37℃条件下,对兔病毒性出血症病毒进行微量HA试验,并对人工感     

猪瘟间接血凝(IHA)诊断试剂制备及应用

猪瘟病毒细胞培养物经病毒释放、浓缩及系列纯化 ,致敏醛化处理绵羊红细胞不发生自凝 ,排除非特异抗原影响后 ,制备红细胞抗原。诊断液不与其它传染病阳性血清发生交叉凝集 ,保存 2 4个月效价大于 1∶2 0 4 8。不同批次检测同一血清样品结果一致。保存在 4～ 6℃ 2 4个月以上效价不变。该诊断液与标准诊断液同一检测不同滴度猪血清 ,符合率达 91%。检测四个地州市县 2 5 6 0份猪血清 ,血清保护率为 6 5 8%。     

应用间接血凝(IHA)检测绵羊棘球蚴病的感染率

采用新鲜的绵羊棘球蚴囊液,经过处理,用最适浓度(380μg/ml)致敏绵羊红细胞,制成IHA诊断液,用IHA法对321只(份)成幼年改良羊、藏羊进行棘球蚴病感染率的检测,结果表明:成年改良羊棘球蚴感染率为86.05％,幼年改良羊感染率为85％,血清滴度达1:64—1:4096;成年藏羊感染率为74％,幼年藏羊感染率为51.06％,血清滴度1:64—1:256。15只(份)标准阴性羊血清全部为阴性,血清滴度0—1:4。30只(份)标准阳性羊血清,28只(份)为阳性,血清滴度为1:64—1:4096,阳性符合率达93.33％。此方法敏感性高,可用于棘球蚴病的流行病学调查及防治效果考核。     

兔出血症病毒间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立兔出血症病毒(RHDV)的血清学检测方法,本实验通过生物信息学分析,将RHDV衣壳蛋白VP60的3个区域VP60-1(aa2-aa208)、VP60-2(aa174-aa425)和VP60-3(aa342-aa579)分别进行原核表达,获得了大小为42 ku、47.5 ku和45.6 ku的重组蛋白。经ELISA和western blot试验分析显示3种重组蛋白均能够被RHDV阳性血清识别,但VP60-1较VP60-2和VP60-3具有更好的反应原性,因此以表达的重组蛋白VP60-1作为包被抗原建立了RHDV间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该方法具有较好的敏感性、特异性和重复性,对不同免疫期兔血清的检测结果与HI呈显著相关性。对临床样品的检测结果表明该ELISA方法比HI试验更敏感。本研究以VP60-1为包被抗原建立的ELISA方法可以用于RHDV疫苗的免疫评估。     

兔出血症病毒对人类红细胞的血凝谱研究

应用兔出血症病毒标准毒株与人类各型红细胞进行血球凝集反应(HA)。结果表明,兔出血症病毒能凝集人类各型红细胞,且对“O”型、“B”型和“AB”型红细胞的凝集反应快而强烈,HA效价很高(5×213 ～5×215);而对“A”型红细胞的凝集反应慢而弱,HA效价很低(5×21)。据此认为,除“A”型红细胞外,其它3 种血型的红细胞均可用于兔出血症的实验室诊断。     

用反向间接血凝检测乙脑病毒抗原的试验

近年来,随着放射免疫、免疫荧光以及酶免疫测定技术的研究应用,以检测病毒抗原为主要目标的乙脑快诊研究,均取得了可喜的进展。但运用这些技术都需要有一定的条件,对于基层单位来说,目前应用还有困难。间接血凝技术也是目前研究应用较广的一种新技术,具有简便快速的优点,便于基层单位应用,我们进行了乙脑病毒抗原的反向间接血凝试验,现将试验情况报告如下。     

应用间接血凝(IHA)诊断方法检测藏羊肝片吸虫的防治效果

近几年,由于气候变暖和降雨量增多,青海湖周边地区藏羊的肝片吸虫病的流行呈上升趋势,给牧民群众带来了巨大的经济损失。为了给防治工作提供依据,笔者在试验区应用益兽宁对藏羊的肝片吸虫病进行了连续2年的防治。为了检验防治效果,采用间接血凝(IHA)诊断方法,于2010年4月份抽检     

间接血凝试验(IHA)诊断猪弓形体病

<正> 弓形体病是一种人畜共患的寄生原虫病。在家畜中,尤其是猪弓形体病的感染率较高,给养猪业带来了严重的危害。由于猪弓形体病的临床表现极不一致,临床诊断很困难,借助于实验室诊断也就很有必要。间接血凝试验是较常用的一种免疫学诊断方法,它具有敏感性高、特异性强,结果客观等特点,适用于生前诊断及流行病学调查。     

兔病毒性出血症病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

建立一种检测兔病毒性出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法。对RHDV陕西分离株VP60基因进行原核表达,Western blot分析表达产物的免疫反应性;以纯化的蛋白为包被抗原建立ELISA方法,并对反应条件进行优化。结果表明,VP60蛋白在大肠杆菌中成功表达,产物约为42.34 ku的融合蛋白,具有良好的反应原性;优化的ELISA最佳工作条件为:重组抗原包被浓度2.9μg/mL,37℃2 h后4℃过夜,1%BSA 37℃封闭2 h,待检血清37℃孵育1 h,酶标抗体1∶10 000稀释,37℃作用1 h,37℃显色5 min,临界值为0.340;建立的ELISA方法特异性强、重复性好、敏感性高;临床检测180份样品,与血凝抑制试验的符合率为74.1%,与商品化试剂盒检测结果符合率为94.8%。该方法可用于临床样品的大批量检测。     

液相阻断ELISA法与正向间接血凝(IHA)法检测猪瘟抗体结果比较

在我国,猪瘟抗体的检测过程中最为普遍采用的方法主要有正向间接血凝法(IHA)和液相阻断ELISA两种方法。这两种方法由于具有各自的优点而在农业生产、疫病控制和边境检验等环节中被广泛应用。本实验分别采用正向间接血凝法(IHA)和液相阻断ELISA方法对相同样品进行猪瘟抗体检测,对两种方法的符合度和差异性进行了统计。结果显示两种方法检测结果存在一定差异。在实际生产中,应根据具体情况选择合适的检测方法。