急性热应激后小鼠的抗氧化能力和Hsp70基因的表达

为研究急性热应激后小鼠抗氧化酶活性的变化及其肝脏热休克蛋白70基因(Hsp70)的表达规律,选取5～6周龄健康昆明雄性小鼠56只,平均分成7组(1个对照组和6个急性高温处理组).6个急性高温处理组小鼠分别为41℃、急性高温处理2h后再置于25℃环境中0、2、6、12、24、48 h的小鼠.分别测定各处理小鼠的脏器指数、...     

昆虫热休克蛋白Hsp70的研究进展

热休克蛋白Hsp70诱导性显著,合成量多并具有高度的保守性。Hsp70表达于所有的活体细胞中。Hsp70具有分子伴侣、抗细胞凋亡功能,参与免疫反应、抗氧化功能,可以提高细胞对环境胁迫或伤害的耐受性。文章对Hsp70的特性以及其在昆虫学中的研究意义、研究现状及前景进行了综述。     

银杏叶提取物对热应激小鼠Hsp70表达的影响

银杏叶提取物的主要成分是银杏黄酮和萜类内酯,研究表明银杏叶提取物具有很好的抗应激的作用。热应激是指机体由于外界环境的高温刺激所做的非特异性的生理应答反应的总和。其中热休克蛋白70是热休克蛋白家族中最保守、最重要的一族,它能够使机体迅速适应环境变化,在热应激下发挥保护作用。就E GB761的抗热应激能力开展实验,证明G B761能提高H SP70的表达水平,从而起到保护心脏、肝脏和抗热应激的作用。     

棉蚜HSP70基因cDNA片段的克隆和序列分析

【目的】克隆棉蚜HSP70基因cDNA片段,并分析其基因序列。【方法】采集黄色型和绿色型棉蚜,实验室饲养4~5代形成单克隆系,温度处理后提取总RNA备用。根据已知昆虫HSP70基因的保守性区域,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增棉蚜HSP70基因的部分序列,测序后进行核苷酸和推导的氨基酸序列分析。【结果】RT-PCR扩增得到一条长度783 bp左右的HSP70基因cDNA片段。测序结果显示,所得cDNA片段长度为783bp(GenBank登录号为:EU109426),且黄色型和绿色型棉蚜的核苷酸序列一致,编码261个氨基酸残基。由棉蚜该片段推导的氨基酸序列与其他昆虫的同源性较高。【结论】获得了棉蚜HSP70基因783 bp的cDNA片段,该片段编码261个氨基酸残基。     

TCZB培养液提高小鼠早期胚胎热耐受性的研究

【目的】研究改良的CZB培养液(TCZB)对小鼠早期胚胎发育的影响,寻找一种可以提高动物胚胎热耐受性的新型培养液。【方法】利用原核表达的方法得到TAT蛋白和小鼠Hsp70的串联表达体—Tat-Hsp70,通过在CZB培养液中添加Tat-Hsp70蛋白,配制成TCZB培养液。比较热应激组及对照组胚胎发育率和囊胚孵出率的不同。【结果】小鼠胚胎经39℃热应激处理后,CZB组、TCZB组及对照组的囊胚发育率及囊胚孵出率无显著差异。41℃热应激处理后各组则有显著差异,对照组囊胚发育率及囊胚孵出率(83.7±6.1和75.6±4.5)显著高于TCZB组(81.3±4.5和76.5±7.6)(P0.05),TCZB组显著高于CZB组(80.2±5.4和73.4±6.2)(P0.05)。【结论】TCZB培养液可以提高小鼠早期胚胎在41℃强烈热应激条件下的发育率,提高小鼠胚胎的热耐受性。     

鸽热休克蛋白70基因的扩增与同源性比较

[目的]扩增鸽热休克蛋白(HSP)70基因,并与其他禽类作同源性比较。[方法]参考禽类的HSP70基因序列设计、合成引物,从热应激鸽肝脏组织中提取总RNA作为模板,RT-PCR扩增目的基因。[结果]RT-PCR扩增到的基因片段为576 bp,经测序,确定为鸽HSP70基因;鸽HSP70基因与鸡、鹌鹑、珍珠鸡同类基因序列的同源性达97%以上。[结论]禽类的HSP70基因具有较高保守性。     

TCZB培养液提高小鼠早期胚胎热耐受性的研究#br#

【目的】研究改良的CZB培养液(TCZB)对小鼠早期胚胎发育的影响,寻找一种可以提高动物胚胎热耐受性的新型培养液。【方法】利用原核表达的方法得到TAT蛋白和小鼠Hsp70的串联表达体-Tat-Hsp70,通过在CZB培养液中添加Tat-Hsp70蛋白,配制成TCZB培养液。比较热应激组及对照组胚胎发育率和囊胚孵出率的不同。【结果】小鼠胚胎经39℃热应激处理后,CZB组、TCZB组及对照组的囊胚发育率及囊胚孵出率无显著差异。41℃热应激处理后各组则有显著差异,对照组囊胚发育率及囊胚孵出率(83.7±6.1和75.6±4.5)显著高于TCZB组（81.3±4.5和76.5±7.6）（P＜0.05）,TCZB组显著高于CZB组（80.2±5.4和73.4±6.2）（P＜0.05）。【结论】TCZB培养液可以提高小鼠早期胚胎在41℃强烈热应激条件下的发育率,提高小鼠胚胎的热耐受性。     

单一或连续高温处理对奶牛乳腺细胞的生长及凋亡的影响

用细胞流式、台盼蓝染色、免疫组织化学等方法研究单一高温(40 ℃1 h)或连续高温(40 ℃1 h·d-1)3～7 d对乳腺上皮细胞细胞周期、凋亡及热休克蛋白(HSP70)表达的影响.结果表明:40 ℃1 h单一高温处理乳腺上皮细胞后24 h,G2比例极显著高于对照组(37 ℃)(P＜0.01),细胞死亡率在热处理后6 h达到最大值,并极显著高于对照组(P＜0.01).高温(40 ℃1 h)诱导细胞HSP70的表达,HSP70阳性细胞比率在热处理后3 h达到最大值.连续的40 ℃1 h·d-1诱导细胞产生G2期阻滞;连续4 d以上的40 ℃1 h热处理显著地抑制了细胞的增殖(P＜0.05).结果提示:高温诱导乳腺细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,并诱导乳腺细胞HSP70的表达.     

单一或连续高温处理对奶牛乳腺细胞的生长及凋亡的影响

用细胞流式、台盼蓝染色、免疫组织化学等方法研究单一高温(40 ℃1 h)或连续高温(40 ℃1 h·d-1)3～7 d对乳腺上皮细胞细胞周期、凋亡及热休克蛋白(HSP70)表达的影响.结果表明:40 ℃1 h单一高温处理乳腺上皮细胞后24 h,G2比例极显著高于对照组(37 ℃)(P＜0.01),细胞死亡率在热处理后6 h达到最大值,并极显著高于对照组(P＜0.01).高温(40 ℃1 h)诱导细胞HSP70的表达,HSP70阳性细胞比率在热处理后3 h达到最大值.连续的40 ℃1 h·d-1诱导细胞产生G2期阻滞;连续4 d以上的40 ℃1 h热处理显著地抑制了细胞的增殖(P＜0.05).结果提示:高温诱导乳腺细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,并诱导乳腺细胞HSP70的表达.     

复方中草药对大鼠热应激蛋白70mRNA的表达影响

采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对热应激模型组、热应激加中草药配方一组、热应激加中草药配方二组和对照组的SD大鼠的肝组织进行HSP70mRNA表达检测,观察清热复方中草药对两种模型大鼠肝HSP70mRNA表达的影响,并以β-actin为内参照进行基因表达水平的半定量分析。结果显示热应激组中HSP70mRNA的表达高于对照组(P<0.05);热应激加中草药配方一组和热应激加中草药配方二组高于热应激组(P<0.05),但其二者之间差异不显著(P>0.05)。说明清热复方中草药可诱导热应激大鼠肝脏组织中HSP70表达量的增加,从而提高组织细胞的耐受性,避免损伤,对机体起保护作用。     

慢性心阳虚大鼠模型制备改良研究

[目的]对现有慢性心阳虚大鼠模型加以改良,制备更符合中(兽)医证候特点的心阳虚动物模型,为温阳方剂的作用机理研究积累资料.[方法]以盐酸多柔比星(主要成分为阿霉素)诱导法联合冰水浴寒冷刺激制备慢性心阳虚大鼠模型,耳温枪测量耳洞温度,生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)四种心肌酶活性,ELISA法测定血浆脑利钠肽(BNP)含量,多道生理信号采集处理系统监测心电图和心率变化,常规方法制作心脏切片并观察心肌病理学变化.[结果]与对照组相比,制备的慢性心阳虚模型大鼠出现精神萎靡、活动减少、身体蜷缩和扎堆等阳虚症状,且体温在造模后期的第28、35和42天明显降低(P＜0.01);在造模第42天,心肌酶ALT、AST、CK、LDH活性显著升高(P＜0.05/P＜0.01),血浆BNP含量显著升高(P＜0.05);心电图QRS间期在14、21和35天显著延长(P＜0.05/P＜0.01),ST段在第35、42天明显抬高(P＜0.01),心率在14、21、28、35和42天明显降低(P＜0.05/P＜0.01);心肌组织出现空泡变性、心肌变性及轻度单个核细胞浸润.[结论]改良的盐酸多柔比星联合冰水浴寒冷刺激法可制备出具有阳虚症状和心脏损伤特征的慢性心阳虚大鼠模型,造模成功率提高.     

转基因SD大鼠构建技术的研究

为构建转基因SD大鼠,用3种不同转基因构件p279-D5、p279-D5B、p279-SV40Tag对SD大鼠受精卵进行显微注射和胚胎移植试验,移植出生仔鼠经PCR检测筛选首建鼠.结果表明:以每只20 U的孕马血清促性腺激素和人绒毛膜促性腺激素的剂量组合对5周龄组大鼠达到了最佳超数排卵效果.3种构件经PCR检测后都获得了阳性后代,其外源基因整合率分别为p279-D5 1.4%(5/350)、p279-D5B 1.1%(3/274)和p279-SV40Tag 1.3%(3/230).     

Activation of pontine cholinergic sites implicated in unconsciousness following cerebral concussion in the cat

Low levels of cerebral concussion in the cat produce reversible behavioral suppression presumably associated with unconsciousness. This injury is also associated with increased rates of glucose utilization in regions within the dorsomedial pontine tegmentum. Microinjection of carbachol into these regions produced behavioral suppression resembling that following concussion. These data, together with previously published observations on cholinergic responses to brain injury, suggest that concussive unconsciousness may be attributable in part to activation of cholinergic pontine sites.     

基于云模型的节能项目综合评价方法

节能项目评价是节能工作的重要内容。通过分析总结影响节能项目的因素,应用云理论中的云综合评判法对这些因素做出评价,得出的节能项目水平评价结果以云模型结果呈现,能够分析节能项目的薄弱环节,进一步指导节能项目建设。介绍了节能项目及其评价指标、云模型的数字特征和综合云的算法。通过建立二级指标的综合云模型、评语集的云模型等,将节能项目水平的评价结果以概率分布的形式给出。经实例证实,该模型的评价结果直观、可靠,对节能项目评价具有重要的指导意义。     

基于遗传算法与方案优选的多目标优化模型求解方法

为求解含复杂约束的多目标优化问题并获得符合实际决策需求的最优解,将多目标优化问题的求解分为2步:1)使用改进的遗传算法对带有较复杂约束的多目标规划模型进行求解,得到Pareto解集;2)基于熵权法构建方案优选评价体系,对Pareto解集进行优选,从而获得多目标优化问题的最佳方案。将本研究方法应用到灌区水资源优化配置问题中检验其可行性与实用性。结果表明:相较于评价函数法获得的结果,Pareto解集可以直观展示不同目标之间相互制衡的关系;根据当地实际情况选取粮经产量比、用水结构信息熵、化肥使用量作为优选指标,优选后的配水方案水分生产力可以达到1.46 kg/m~3,总产量达到8.667×10~7 kg。与传统求解方法比较,本研究提出的求解方法全局寻优能力更强,可以获得更加合理的方案。基于遗传算法与方案优选的多目标优化问题求解方法在求解较为复杂的多目标优化问题时能够获得更为满意的方案,可以为其他多目标问题的求解提供一种新的思路。     

乡村旅游环境质量评价体系构建与实证研究

良好的乡村旅游环境是乡村地区发展旅游的重要根基.以乡村旅游环境系统构成为基础,从自然生态环境、社会经济环境、旅游服务环境等3方面构建包含15个评价因子的乡村旅游环境质量评价体系.在此基础上选用灰色关联分析法建立环境质量评价程序,并以广西柳州市7处典型乡村旅游地为例进行实证分析.结果表明,乡村旅游环境质量由优到差排列顺序依次为:程阳八寨、龙女沟、景泉农庄、鹭鹚洲、中渡古镇、下伦屯和太阳村.研究结果具有一定的可操作性和参考意义,是指导乡村旅游目的地可持续发展的重要依据.     

基于McCall模型软件质量的综合评价方法

基于M cCall软件质量度量模型,运用模糊理论对软件质量进行定量综合评价,即首先根据M cCall模型提出的软件质量评价因素,建立软件质量评价因素模糊集和质量评价等级模糊集,然后建立它们之间的模糊关系和质量要素权重集,再通过复合运算方法计算出反映软件质量的评价向量值,最后根据最大隶属度原则,确定所评价软件的质量.     

创新经营模式 构建放心农资下乡进村保障体系

文章通过静海县放心农资下乡进村活动的实践,论述了创新经营模式对放心农资下乡进村的作用。尝试了加强农资市场管理、改革经营体制、开展技物结合等做法,提出农资经营服务存在的问题和建议。     

大鼠原代肝细胞分离培养方法的改良

本研究的目的是改进经典的Seglen原位两步胶原酶灌流法,建立稳定简便的大鼠原代肝细胞分离培养方法.采用胰酶消化获取大鼠肝细胞进行纯化、培养,过碘酸-雪夫反应(PAS)鉴定.结果显示,本法培养的肝细胞产量高、活力好,每只大鼠可获得约2×108个肝细胞;相差显微镜观察不同生长期的肝细胞,细胞贴壁后变平变薄,双核细胞呈岛状连接的形态学特性;PAS鉴定,肝细胞内由于含有大量的糖原颗粒而被染成红色.表明改良的方法稳定、高效,为进一步的试验研究奠定了基础.     

邻体干扰模型的改进

本文应用关帝山庞泉沟自然保护区标准地复查资料，研究了华北落叶松林邻体间相互干扰的问题。在前人工作的基础上，提出了用冠幅代替胸径表示邻体竞争关系的干扰指数改进模型，此模型不但保证了其数学上逻辑的一致性，同时增加了生态学的解释意义，提高了模型的精确度。