牛的组织相容性抗原(BoLA)的研究——第三报 抗原频率和基因频率

利用我们自己建立的十三组BoLA分型血清,对61头奶牛进行测定,获得了初步的抗原频率。其中常见抗原为BoLA-W4、W1、W10,少见抗原为BoLA-W2、W5、W6、W9。这些被指定的抗原将与国际标准BoLA进行核对。 本文讨论了在中国各类牛品种之间进行BoLA的研究,并在分类及育种工作中获得应用的可能性。     

牛的组织相容性抗原(BoLA)的研究——第一报 BoLA抗血清的筛选

组织相容性抗原也叫白细胞抗原,是动物体内重要抗原之一,它有着重要的生物学功能,因而研究家畜的组织相容性抗原有着重要的经济意义和理论意义。 本文介绍了组织相容性抗原的特点和生物学功能以及组织相容性抗原的筛选方法。 本实验取自4个牛场的500头经产母牛的血清,用40头随机牛的淋巴细胞筛选,方法采用国际标准微量淋巴细胞毒方法。获得阳性血清274份,总阳性率为54.8％,这些阳性血清将用于下一步实验,以鉴定它们的特异性。筛选出中国奶牛的白细胞抗原型别,并应用于畜牧业生产中去。     

BoLA在牛抗病育种中的研究进展

BoLA基因同牛多种疾病和生产性状相联系,因此如何利用BoLA基因进行牛抗病育种是育种学家关心的问题,作者综述了BoLA基因同牛一些疾病的关系,并对BoLA基因进行牛抗病育种的现状及发展方向作了探讨。     

牛MHC(BoLA)基因的研究进展

牛MHC(BoLA)不仅与移植排斥反应和免疫反应有关,而且还与一些经济性状有关.该文简述了BoLA的分布、结构、功能和基本特征,并且介绍了BoLA基因与主要经济性状如生产性能和疾病的关系,并对其作为动物育种遗传标记的应用前景进行了展望.认为MHC作为遗传标记,通过标记辅助选择进行抗病育种可以培育出高产、抗病力强的家畜品种.     

牛主要组织相容性复合物BoLA基因研究进展

<正>牛主要组织相容性复合体MHC(BoLA)与移植排斥反应和免疫反应密切相关,是免疫学研究的重要内容。本文简述了牛BoLA分布、结构及其功能,介绍BoLA与疾病易感性,免疫应答调控之间的关系及表达产物结构方面的研究。1简介主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)是动物体内由紧密连锁、高度多态的基因座位所组成的一个基因家族。MHC基因产物称为MHC抗原,是一类存在于细     

赤羽病微量病毒中和试验诊断方法的研究

应用引自日本的赤羽病病毒，制备了微量病毒中和试验抗原和高免阳性血清，建立了赤羽病微量病毒中和试验诊断方法，应用此方法对广东省７２４头牛血清进行了检查，阳性率为３５．３％，对上海６６５头牛血清作了检查，阳性率为６７．７％，说明这些地区曾流行过赤羽病，同时对澳大利亚当地牛１０８头进行检查，阳性率为５５．５％，与外报道一致。对澳大利亚、加拿大，美国进口牛１７３头的检查结果，全部阴性，对澳大利亚进口羊９９２头的检查结果，发现阳性１头，已得到澳方认可。     

奶牛淋巴细胞毒抗体的研究

本文用微量淋巴细胞毒试验方法检测了两个牛场的502头黑白花奶牛对淋巴细胞毒抗体出现的时间、阳性率及阳性血清的反应频率进行了研究。从已配种而未分娩的母牛至五胎以上的怀孕母牛均进行了检测。淋巴细胞毒抗血清的总阳性率为44.2％(223/502)。各胎次母牛出现的阳性率,差异不显著。但二胎以下组与三胎以上组相比较,血清阳性率各为34.7％和50.7％,差异极显著(P<0.001)。怀孕母牛的淋巴细胞毒抗体在第三胎以上开始大量出现。同时对阳性血清的反应频率进行了分析。反应频率在21-40％这一范围的阳性血清最多,占总阳性血清的36.8％,与其他反应频率范围的阳性血清之间均有显著或极显著差异,21-40％这一反应频率对筛选分型血清是较为合适的。     

BoLA-DQB基因上游调控区多态性研究

通过PCR扩增和克隆测序,对BoLA DQB 基因上游调控区的多态性进行研究。对BoLA DQB 基因ex on2的14种等位基因上游调控区序列进行同源性比较,结果表明:每个DQB·exon2 等位基因均与2 种DQB URR相连锁,在14种BoLA DQB·exon2等位基因上游共检测到15种DQB URR序列。这些序列中均存在与基因表达调控有关的W box 、X box、Y box、CCAAT box以及类TATA box调控元件,且遵循严格的空间顺序。其中W box 、X box 、Y box及类TATA box是多态的,CCAAT box是保守的,在这些调控元件之间也存在多态座位。这些多态座位的存在有可能对结构基因的表达水平产生影响。     

牛的血液型研究(Ⅲ) 关于牛红细胞血型抗体的制备

用43种国际标准抗血清检查了45头延边黄牛的血型。以此45头牛血液作为标准红细胞抗原,分析、分离了同种免疫的多价血清(polyvelent serum)。采用免疫吸附法(lmmunoadsorption Test)从7头牛的免疫血清中分离,制备Z′、I_1、T_1、C_2、G_2、A′_x、J、U′8种牛红细胞血型抗体。用相互吸附法(lnteractadsorption Test)验证了上述抗体的特异性,並同相应的国际标准抗血清的溶血反应模式进行了比较。结果表明,45种样本的反应模式,与国际标准抗血清完全一致。     

马传贫琼脂扩散无色透明冻干抗原的研究 Ⅱ.马传贫琼脂扩散试验方法的改进

用双扩散方阵滴定试验标定马传贫琼脂扩散无色抗原。凡能使原液至256倍系列稀释的阳性血清产生阳性反应者均为合格抗原。此法标定的无色透明合格抗原,经用法国马传贫琼脂扩散试验国际标准阴、阳性血清及古巴马传贫琼脂扩散抗原所标化的阳性参照血清进行考核试验,已证明达到国际标准。将双扩散方阵滴定试验与现行“规程”的辐射扩散法对抗原进行标定对比,证明后者效价标准高于国际标准,检出率低于前者。选用能与抗原原液及不同系列稀释倍数抗原产生阳性反应的16单位阳性血清为阳性参照血清。采用血清孔与抗原孔的孔径均为5mm、阳性参照血清孔与被检血清孔之比为“3:3”的新术式代替现行“规程”术式,可以提高检出率。     

一起“瘦肉精”事件的启示

正2016年4月,桦甸市畜牧总站在进行"瘦肉精"抽检时,检测出桦郊乡一养牛场3头牛的尿液克伦特罗检测疑似阳性。随后,桦甸市畜牧业管理局将这3头牛的尿液样本送至长春市,进行了进一步的实验室检测,确证这3头牛饲喂了内含克伦特罗化合物的饲料。案件在省畜牧业管理局的指导下,经桦甸市食安委、公安局、畜牧业管理局的共同会商处理,最终对这3头牛进行了无害化处理,事情得到了依法圆满解决。     

宫崎县的Ibaraki病及其流行病学

1989年9—12月,宫崎县75户农户饲养的993头牛中有76头牛发生了 Ibaraki 病。发病牛大部分是4月龄到13岁的黑毛日本母牛,从刚发病后采的45份病牛血液中,有17份血分离出 Ibaraki 病毒,并查明发病后1个月内采的76头病牛血液全部为 Ibaraki 病毒抗体阳性。此外,9月对未发生本病的农户饲养的258头牛进行了 Ibaraki 病毒抗体调查。     

J亚群禽白血病病毒(ALV-J)ELISA检测方法的建立

利用抗J亚群禽白血病病毒（ALV—J）囊膜蛋白特异性单克隆抗体JE9，建立了检测ALV—J env抗原抗体免疫复合物的ELISA方法。应用该方法检测SPF鸡血清、鸡抗禽流感H9亚型阳性血清、鸡沙门氏菌阳性血清、鸡腺病毒阳性血清、鸡新城疫阳性血清．结果均为阴性，无交叉反应；抗ALV—J阳性血清与ALV—J特异性单克隆抗体JE9能相互阻断；ALV—J阳性血清经酸处理后，ELISA检测的D490差值明显下降。对部分攻毒鸡血清样本及田间ALV—J阳性血清样本进行电镜观察，可见ALV—J样病毒粒子及ALV—J样免疫复合物。经与间接免疫荧光（IFA）检测ALV—J env抗体结果比较表明，建立的ELISA方法与IFA方法两者具有较好的群体符合率，群体符合率为8／9。这些结果表明，本研究建立的ELISA方法在ALV—J的诊断中具有很好的应用前景。     

在接种的成年奶牛中布氏菌19号菌株感染的流行和持续及其他生物型的流行

在感染的奶牛群中,对成年牛用四种方法接种后,由乳房排出布氏菌19号菌株的流行与持续作了研究。对55个接种群的1,736头母牛的样品进行了培养,在744个布氏菌分出物中,98个是19号菌株并且是由25群牛中得到,结膜接种者排出最高(1.4％),标准剂量皮下接种(0.83％),比减少剂量的皮下接种(0.45％)要高,皮内接种的牛未作分离。 19号菌株排出的持续与初次分离后时间的长短有关,初次分出19号以后经7—12个月,在61头牛中有22头保持血清学阳性,10头为培养阳性,13—18个月后在50头中有     

猪瘟病毒囊膜蛋白基因pcDNA4．0-E重组质粒的构建及其对小鼠的免疫原性

以猪瘟病毒石门株RNA序列为模板，应用RT—PCR方法，克隆得到猪瘟病毒囊膜蛋白E0-E2 cDNA全序列，并将其与真核表达质粒pcDNA4．0定向连接，构建了重组质粒pcDNA4．0-E。经提纯后，给试验组小鼠后肢胫前肌注射pcDNA4．0-E，每只100μg，15d后再注射1次，同时设空白对照组。于二免后第10、20、30d分别扑杀小鼠，进行免疫小鼠脾和外周血淋巴细胞的转化增殖试验，并用间接ELISA法检测血清抗体水平。结果显示，与空白对照组相比，所构建的重组质粒能够极显著增强小鼠脾细胞和外周血淋巴细胞的增殖（P〈0．01），血清抗体水平从二免后的第10d开始逐渐升高，且极显著高于对照组（P〈0．01）。说明该重组质粒能够诱导小鼠产生特异性免疫反应。     

兴海县牛羊弓形虫病、衣原体病、沙门氏菌病血清学调查

为了进一步查清引起牛羊流产的病因,笔者于1991年6—7月在兴海县羊布病监测和牛布病考核的同时,采集了502头牛和504只羊的血清,用IHA法对弓形虫病、衣原体病,用凝集反应对沙门氏菌病,分别进行了血清学调查。材料:弓形虫病和衣原体病IHA所用的抗原,稀释液,阳性血清,阴性血清,均由兰州兽医研究所制造、提供。沙门氏菌病凝集反应     

经56℃处理的血清碱性磷酸酶活性动态及其诊断意义

已经证实母牛血清中抗热的碱性磷酸酶活性能用于矿物质代谢病的诊断。对怀孕9个月的小母牛、分娩2—8天的初产牛、怀孕9个月的4—7岁的母牛和分娩2—8天的经产母牛等四组牛的血清进行的初步研究证明:血清经6℃加热15分钟以后,各组牛热稳定碱性磷酸酶的百分率仍然是相当恒定的。以后,又对分为类似4组以及小公牛组和具有代谢病临床体征母牛组的另外163头牛血清做了同样的试验。结论是:     

亚硝酸钠对小鼠免疫功能的影响

为了研究亚硝酸钠对小鼠免疫功能的影响,试验采用分别给小鼠灌服不同剂量(12.5 mg/g、25 mg/g和50 mg/g)亚硝酸钠的方法,对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫系统中白细胞、淋巴细胞和酸性α-乙酸萘酚酯酶(ANAE)染色阳性T淋巴细胞数量以及体液免疫中血清溶血素含量等指标进行研究。结果表明:与对照组相比,灌服亚硝酸钠组小鼠的免疫器官相对重量、白细胞和淋巴细胞数量、ANAE染色阳性T淋巴细胞数量及血清中溶血素含量降低,且灌服亚硝酸钠的剂量越高,差异越显著。说明亚硝酸钠对小鼠的细胞免疫和体液免疫功能有不同程度的抑制作用。     

鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品的研制

为制备标定HI试验用的鸡新城疫阳性血清国家标准品,以鸡新城疫La Sota株病毒和灭活疫苗免疫SPF鸡制备鸡新城疫高免血清。将检验合格的鸡新城疫阳性血清以鸡阴性血清稀释为HI效价与国际标准血清完全一致后,用于标准品制备。对该标准品进行了物理性状、无菌检验、真空度测定、剩余水分检验、均匀性检测和稳定性试验,检测结果均符合要求。以国际标准品为参比,测定了该标准品的HI效价为1∶60与协作标定结果基本一致。该标准品以国际标准品溯源的国际单位含量为320 IU/mL,为鸡新城疫的相关研究提供了物质基础。     

赤羽病琼脂免疫扩散试验诊断方法的研究

应用引自美国和日本的羽病毒和标准阳性血甭,制备了琼脂免疫扩散试验（ＡＧＩＤ）抗原和高免阳性血清,建立了赤羽病ＡＧＩＤ诊断方法。应用此方法对上海、杭州、广州等地的１３８３头牛进行了检疫,ＡＧＩＤ抗体阳性牛７４６头,阳笥率５４．０％,与流行情况相符。同时对从澳大利亚、美国、新西兰和加拿大等国进口的牛、羊、猪血清１６２头份进行了检疫,全部为ＡＧＩＤ抗体阴性。