双孢蘑菇储藏中的褐变及相关酶活性研究

测定了双孢蘑菇(Agaricus bisporus)储藏中的色差,总酚含量及多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase, PAL)的活性变化.结果表明,双孢蘑菇储藏期间L值逐渐变小,褐变度不断增加.总酚含量在15 ℃储藏的第1～4天升高,之后逐渐下降,4 ℃储藏时,总酚含量变化不大.PPO在15 ℃储藏时活性水平较4 ℃储藏时高,在15 ℃时,第1天就显著上升,第3天达到最高值后下降,而4 ℃储藏时在第2天急剧上升,而后下降.双孢蘑菇在15 ℃和4 ℃储藏时PAL活性在第1～2天升高,而后的变化无规律.根据实验结果,双孢蘑菇中PPO与PAL可能参与了酶促褐变,其中PPO活性可能是引起双孢蘑菇褐变的主要因素.     

双孢蘑菇、野蘑菇和姬松茸的过氧化物酶和酯酶的同工酶分析

本文对蘑菇属的双孢蘑菇、野蘑菇和姬松茸的 8个菌株的菌丝体阶段的过氧化物酶 (POD)和酯酶(EST)同工酶进行分析研究。结果表明 :(1)POD和EST同工酶谱不仅清楚地显示出这 3个种的 8个菌株同属于蘑菇属所具有的共同酶带 ;而且酶谱还清楚地显示出不同种不同菌株间的酶的差异。 (2 )双孢蘑菇 4个菌株 (除野生菌株 96 4 3外 )之间无论是来自中国还是来自西欧 ,无论是白色品系还是棕色品系 ,它们的POD和EST同工酶的遗传相似性是比较高的。 (3)双孢蘑菇与野蘑菇的遗传距离近于它与姬松茸的距离     

双孢蘑菇分解基质能力退化的同工酶分析

采用同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gelelectrophoresis,PAGE)技术,对双孢蘑菇(Agaricus bisporus) 菌株0214及其分解基质能力退化菌株0214-3、0214-5在4种不同液体培养基中培养的菌丝体的酯酶(esterase,EST)、 多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO)、细胞色素氧化酶(cytochrome oxidase, COD)同工酶进行分析,结果表明:在部分培养基中3个菌株的EST和PPO同工酶表型有明显差异,且2个退化菌株的同工酶表型变异一致,说明双孢蘑菇分解基质能力的退化与EST和PPO同工酶活性存在相关性.各菌株在不同培养基中的COD同工酶酶谱表型一致.     

一氧化氮熏蒸处理对双孢蘑菇采后褐变及衰老的影响

以双孢蘑菇为试材,研究了在(10±0.5)℃条件下,不同浓度一氧化氮(NO) (30、60、90 μL/L)气体熏蒸处理对双孢蘑菇贮藏过程中感官品质、褐变度、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性的影响.结果表明:外源NO熏蒸处理显著抑制了PPO活性的升高(8.90％～33.13％),减轻贮藏期的褐变程度.提高了贮藏后期POD活性(12.28％～76.27％),延缓了双孢蘑菇的衰老,有效延长了货架期(2 d).其中,NO浓度为60 μL/L时效果最好.     

激光诱变双孢蘑菇酯酶同工酶的研究

用He-Ne激光和半导体激光辐照四株双孢蘑菇的菌丝体,以不处理为对照。取辐照部位转接PDA培养基培养12～15天,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析菌丝体酯酶同工酶谱。结果表明:He-Ne激光处理不改变蘑菇菌丝体酯酶同工酶主要区带(F与S区)的迁移率(Rf)。但是,20mwHe-Ne激光10分钟剂量不仅使酯酶同工酶活力明显增强,而且使得M区酶带数目增加。半导体激光对双孢蘑菇的辐照效果不及He-Ne激光,且不同功率之间效果差异不显著。     

双孢蘑菇不同菌株生物学特性的研究

比较研究了13株双孢蘑菇菌株的菌丝生长势、出菇性状、菌丝拮抗性、酯酶同工酶酶谱等。结果表明,13个菌株中表现出一定的遗传差异性,部分菌株为同物异名。Ag-004菌株菌丝生长势最强,日平均生长速度0.54 cm·d~(-1),23d长满试管;出菇试验表明棕色蘑菇品种表现出比白色蘑菇品种产量高、较耐低温和抗逆性强的特性。大多数菌株之间表现出一定的拮抗反应,少部分菌株间拮抗现象不明显。酯酶同工酶酶谱出现3个区域,Rf=0.1758、0.2424、0.7697为所有菌株共有,可能为双孢蘑菇酯酶同工酶的特征谱带,Rf=0.8060为白色蘑菇品种的酯酶同工酶的特征条带,而Rf=0.7151为2个棕色蘑菇菌株所有,在所有的白色品种中几乎没有,Rf=0.7151可能为棕色蘑菇菌株的特征谱带。     

双孢蘑菇子实体采后褐变及相关生化变化研究

实验研究了双孢蘑菇子实体贮藏期间褐变与总酚含量、酶(PPO和POD)活性、还原糖含量、Vc含量等生化指标之间的关系。结果显示,贮藏期间双孢蘑菇子实体菌盖表面色度L值持续减小、褐变程度加重,总酚和还原糖含量均呈先上升后下降的趋势,Vc含量持续下降,PPO活性在前5 d逐渐增加而后下降,POD活性先增加然后随着褐变的发生逐渐下降,而后期大部分褐变发生时又有所增加。相关性分析显示褐变程度与色度L值之间呈显著负相关,以色度L值来反映褐变程度可行;Vc含量的变化与色度L值呈显著负相关。     

不同保鲜膜对双孢菇采后褐变及相关酶活性的影响

以双孢蘑菇为试材,研究了不同厚度的PE膜及微孔膜包装对双孢蘑菇贮藏中褐变及相关氧化酶活性的影响。结果表明:不同保鲜膜包装均能降低双孢蘑菇贮藏期间的褐变度、酶活性及衰老物质的积累。其中以0.050 mm PE膜对双孢蘑菇的贮藏效果最佳。     

双孢蘑菇保鲜加工护色剂研究进展

双孢蘑菇产品以白为佳,护色问题是双孢蘑菇采后贮藏加工中的共性关键技术问题,护色剂护色是防止双孢蘑菇褐变的最有效手段之一。从双孢蘑菇褐变机理开始,重点对双孢蘑菇保鲜护色剂和加工护色剂的研究进展进行了系统的综述和分析,并对护色剂研究的发展方向进行了展望,为进一步研究安全高效的双孢蘑菇护色剂产品提供参考。     

双孢蘑菇POD酶学特性及其与褐变的关系

为了研究POD在双孢蘑菇褐变过程中的作用,对POD酶学特性进行了测定,并对不同贮藏条件下双孢蘑菇中POD活性变化与褐变的关系进行了分析。结果表明：以愈创木酚为底物时,双孢蘑菇中POD的米氏常数（Km）为5.704 mmol ? L-1,最适反应pH为5.0,最适反应温度为45 ℃;低温可以显著抑制POD的活性,20 ℃和10 ℃时其相对酶活性分别为68%和55%,2 ~10 ℃范围内的酶活性差异不显著;20 ℃贮藏1 d和2 d时POD酶活分别是10 ℃贮藏的4.8倍和10.9倍。7种化合物对POD活性的抑制作用由强到弱依次为：DTT > AsA > L-Cys > SDS > 无水亚硫酸钠 > 柠檬酸 > NaCl。贮藏过程中,虽然POD抑制剂处理双孢蘑菇的褐变程度和气调处理没有显著性差异,但其POD活性显著高于气调处理,说明POD活性高不是引起双孢蘑菇组织褐变的主要因素。     

蝴蝶兰外植体褐变发生与总酚含量、PPO、POD和PAL的关系

 蝴蝶兰外植体在褐变发生前期PPO和POD活力皆升高, 褐变发生后酶活力下降。同工酶谱分析发现, 培养0 d的蝴蝶兰外植体PPO没有酶带出现, 而POD有1条弱带。离体培养2 d POD出现3条酶带, 第4天有新酶带Ⅰ发生, 随后消失, 其余3条带, 随培养天数的延长, 酶带活性渐弱。PPO同工酶谱在培养2 d出现3条酶带, 迁移率为0128的酶带Ⅲ在培养4 d活性较强, 随后3条酶带减弱。总酚含量和PAL活力随外植体褐变增强而逐渐增加, 两者呈现极显著正相关。     

同工酶技术及其在双孢蘑菇选育种中的应用——Ⅰ.双孢蘑菇同工酶标记筛选研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳和琼脂糖凝胶板状电泳,研究不同生长发育期,不同组织、不同培养基或栽培条件,对双孢蘑菇8种同工酶和可溶性蛋白电泳表型的影响,发现酯酶、多酚氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化物酶、乙醇脱氢酶和可溶性蛋白的主要活性区带存在与否,在营养菌丝生长阶段或子实体发育阶段的相同组织中不受上述各因素的影响,并发现不同类型菌株的电泳表型具有不同的活性区带。把这类活性区带命名为标记区带。把这类活性区带命名为标记区带。以标记区带对同工酶表型进行分类,发现酯酶同工酶是双孢蘑菇生化鉴定或遗传分析的最适标记之一。     

中国野生蘑菇属90个菌株遗传多样性的DNA指纹分析

对90个中国野生蘑菇属菌株(其中44株经同工酶初步鉴定为双孢蘑菇菌株)的总DNA进行SRAP和ISSR分析,获得了18条SRAP和12条ISSR标记条带并进行聚类分析,构建了亲缘关系树状图.结果显示这些菌株大体上可分为野生双孢蘑菇和野生蘑菇属其它菌株两大类群,其中来自川藏高原的41个野生双孢蘑菇按照采集地的不同聚为4个群,地域性差异比较明显;部分来自新疆、西藏的白色野生双孢蘑菇菌株新疆野生、AgX04和AgX042具有独特带型,与其它双孢蘑菇菌株的遗传相似值仅为10%～13%.     

冻结条件对双孢蘑菇PPO和POD活性的影响

采用喷雾式流态化液态CO2速冻及缓冻技术,研究了冻结温度、速度对双孢蘑菇多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性的影响。结果表明:冻结温度、速度对酶的活性有明显的影响,在75℃、60℃、45℃及35℃(缓冻)下进行冻结时,双孢蘑菇的PPO活性分别下降了70.5%、66.3%、56.8%及19.6%,POD活性分别下降了74.3%、71.1%、64.5%及21.6%。     

不同贮藏温度对双孢蘑菇采后品质的影响

研究不同贮藏温度对双孢蘑菇采后品质的影响。结果表明,低温贮藏环境可以抑制双孢蘑菇的水分丢失、感官品质下降、可溶性固形物含量降低和褐变等现象的发生。当相对湿度为95％时,双孢蘑菇较适宜的贮藏温度为0～5℃。     

双孢蘑菇酯酶同工酶凝胶电泳

同工酶自1959年由Marbert和提出后,引起生物界研究者的注意。特别是近年来,同工酶技术得到了广泛的应用。同工酶是结构差异而性质相同的酶,它是基因的产物,酶结构的差异反映了基因的差异。本文采用双孢蘑菇     

双孢蘑菇多酚氧化酶的分离、纯化及特性分析

 通过分步盐析,DEAE-Cellulose-52阴离子交换层析和Sephadex G-100凝胶柱层析,对双孢蘑菇中的多酚氧化酶（PPO）进行了分离纯化,并对在分离纯化过程中蛋白得率及酶活性进行了测定。最终得到纯化倍数为103.2,比活为566.57 U · mg^-1,蛋白得率为0.47%的酶液。经SDS-PAGE电泳检验,所得到的PPO呈单一蛋白带,分子质量为25.5 kD。利用扫描探针显微镜对该酶的分子形态进行了观察,发现双孢蘑菇中的PPO分子呈椭球状,分子高度在8 ~ 12 nm之间。     

双孢蘑菇和变褐蘑菇两个不同种的问题

1976年Malloch在《真菌学》杂志上发表了一篇引人注目的论文,题为“变褐蘑菇:栽培的蘑菇”。主要论点是变褐蘑菇Agaricus brunnescens Peck与双孢蘑菇Agaricus bisporus(Lange)Imbach实属同一个种,并根据国际优先发表权的法规,前者是1900年最先发表的,所以建议将双孢蘑菇以变褐蘑菇的学名取代。自此之后,欧美一些蘑菇杂志都纷纷     

双孢蘑菇软包装罐头加工工艺研究

对双孢蘑菇软包装罐头加工工艺进行了研究,确定了不合亚硫酸盐的护色剂配方及汤汁配方,并对制成的双孢蘑菇软包装罐头进行了感官评定和微生物指标检测。试验结果表明,采用不含亚硫酸盐的护色剂处理蘑菇,并用汤汁填充罐头能有效抑制双孢蘑菇的褐变,使菇体色泽浅黄,汤汁鲜味突出,较好地保持了双孢蘑菇的原有品质。     

双孢蘑菇软包装罐头加工工艺研究

对双孢蘑菇软包装罐头加工工艺进行了研究,确定了不舍亚硫酸盐的护色荆配方及汤汁配方,并时制成的双孢蘑菇软包装罐头进行了感官评定和微生物指标检测.试验结果表明,采用不含亚硫酸盐的护色荆处理蘑菇,并用汤汁填充罐头能有效抑制双孢蘑菇的褐变,使菇体色泽浅黄,汤汁鲜味突出,较好地保持了双孢蘑菇的原有品质.