黄鳝载脂蛋白apoAI基因的克隆及序列分析

以黄鳝(Monopterus albus)肝脏为研究材料,提取总RNA,利用同源克隆技术获得了黄鳝的载脂蛋白apoAI基因的部分编码区(GenBank登录号:HQ603782)和3′UTR,其cDNA序列长度为1 145 bp,其中编码区长度为772 bp,编码256个氨基酸.序列同源性分析表明,黄鳝的apoAI基因的...     

FMO3调控犊牛原代肝细胞VLDL-TG的代谢

脂肪肝是围产期奶牛常见的营养代谢性疾病,过多的甘油三酯(TG)无法被极低密度脂蛋白(VLDL)运出肝脏外而导致。含黄素单加氧酶3(FMO3)是近年来发现的与脂代谢相关的重要调控因子。试验通过合成FMO3低表达和过表达腺病毒载体,感染犊牛原代肝细胞,检测FMO3对VLDL组装和分泌过程中关键基因的影响。结果发现,FMO3低表达时VLDL组装与分泌的关键基因mRNA表达量以及VLDL和TG的浓度明显降低,FMO3过表达时结果则相反。研究表明,FMO3能调控犊牛原代肝细胞的VLDL组装和分泌,从而调节细胞内TG的沉积。     

鸡血清载脂蛋白AI浓度单向免疫扩散测定法的研究

介绍一种特异、灵敏、简便的蛋鸡血清载脂蛋白AI（apoAI）浓度单向免疫扩散测定法。用磷钨酸镁反复沉淀制备得高密度脂蛋白,经纯化、Bradford法蛋白定量后（3．208mg／mL）,作为新西兰白兔的免疫原及载脂蛋白AI测定的标准。本室免疫所得兔抗鸡apoAI抗血清制成免疫琼脂板,加样培养进行单向免疫扩散测定。本法的标准曲线相关性良好,可信性、重复性满意。     

尿毒症患者脂蛋白水平的检测及其临床意义

目的:观察尿毒症患者血清脂蛋白变化,阐明尿毒症患者各类脂蛋白变化的临床意义。方法:使用美国Beckm an公司生产CX 5全自动生化分仪测定患者血液透析前后总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(apoA)、载脂蛋白B(apoB)的值,脂蛋白a〔LP(a)〕则用TURBOX特定蛋白分析仪测定。结果:尿毒症患者与对照组比较,TG、apoB、LP(a)显著升高(P<0.01),HDL-C显著降低(P<0.01)。患者透析前后比较TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA、apoB、LP(a)等差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:TG、apoB、LP(a)等脂蛋白血清浓度可作为尿毒症心脑血管疾病并发症预示指标。     

干乳期高能饲喂围产期健康奶牛肝载脂蛋白B100 mRNA表达的研究

为阐明载脂蛋白B100在围产期奶牛脂肪肝及相关代谢性疾病发生过程中的作用，以β-actin作为内对照，用RT～PCR方法测定了干乳期高能饲喂围产期健康奶牛不同时期肝组织的apoB100 mRNA表达。结果表明：高能饲喂的围产期健康奶牛肝组织的apoB100 mRNA表达从产前至产后呈先升高后降低的趋势，其中产后14d比产后1d降低了61．45％（P〈0．01），且产前apoB100 mRNA表达显著高于产后（产后1d除外，P〈0．01）。干乳期高能饲喂对围产期奶牛肝脏载脂蛋白B100 mRNA表达有显著影响。     

ApoB RNA编辑高效蛋白检测体系的构建

[目的]建立一个载脂蛋白B(apoB)RNA编辑蛋白检测体系。[方法]在慢病毒表达质粒载体pCSII-CMV-IRES-Neor中插入apoB RNA编辑保守序列,并在其2端嵌入红色荧光蛋白(DsRed)、绿色荧光蛋白(GFP)表达序列,以此慢病载体转染大鼠肝癌细胞系CBRH-7919获得稳定表达。采用共聚焦显微镜测序方法检测apoB RNA的编辑。[结果]目的指示基因能够在CBRH-7919细胞中稳定表达,表现出指征RNA编辑的多色特征。[结论]试验成功构建了在细胞水平上以颜色变化指示apoB RNA编辑的检测体系,该体系为快速检测以apoB RNA编辑为靶的降胆固醇药物筛选提供了基础。     

VLDL与肝脂肪变性的关系及LXRα对VLDL代谢的调控

综述了肝脏X受体亚基LXRα对极低密度脂蛋向(VLDL)调控的机理及VLDL对肝脂肪变性的影响。     

乙型肝炎患者血脂水平与病情和预后关系的探讨

目的探讨血脂水平与病毒性乙型肝炎病情及预后的关系.方法采用RI-1000TM全自动生化分析仪测定240例乙型肝炎患者[其中急性肝炎48例,慢性肝炎90例(轻度25例,中度30例,重度35例),重型肝炎40例,肝炎肝硬化62例(Child-Pugh A级15例,B级23例,C级24例)和50例正常人血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、脂蛋白(Lp-α)载脂蛋白A-Ⅰ(APOA-Ⅰ)、载脂蛋白B(APOB)水平.结果除急性肝炎组外,重型肝炎组、肝硬化组和慢性肝炎组血清TC、TG、HDL、LDL、VLDL、Lp-α、APOA-Ⅰ、APOB水平均较正常对照组显著降低(P＜0.01).各项血脂水平随着肝功能损害的加重而降低(慢性肝炎重度组和中度组显著低于轻度组,重型肝炎组显著低于慢性肝炎组和肝硬化组,死亡组显著低于存活组);同时亦随着病程进展和肝纤维化的加重而降低(Child-Pugh C和B组显著低于Child-Pugh A组).结论对病毒性肝炎患者进行血脂和载脂蛋白水平的监测,对了解肝细胞损害的程度和估计预后均有一定的意义.     

抗精神病药物对精神病患者血脂代谢的影响

目的初步评价精神病患者抗精神药物治疗后血脂代谢异常的情况。方法采用酶法及免疫比浊法检测80例健康人和89例精神病患者治疗前后血清总胆固醇(TC)、甘油三酸(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)和载脂蛋白B(apoB)水平,并比较各组间血清脂质的差异。结果精神病患者血清TC(3.98±0.79)mmol/L、HDL-C(1.14±0.35)mmol/L、apoB(0.61±0.17)g/L,水平均低于对照组(P<0.01),而TG、LDL-C、apoA1水平则差异无统计学意义(P>0.05)。精神病患者治疗后血清TC(4.86±1.12)mmol/L、TG(1.69±1.23)mmol/L、HDL-C(0.99±0.43)mmol/L、LDL-C(3.72±1.33)mmol/L、apoA1(1.16±0.20)g/L、apoB(0.92±0.31)g/L与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论精神病患者经药物治疗后不同程度存在血脂代谢异常,主要表现为TC、TG、LDL-C、apoB水平的升高和HDL-C、apoA1的降低。     

改进原位循环灌流法分离小鼠肝细胞研究

【目的】建立小鼠肝细胞分离原位循环灌流方法,为肝脏细胞蛋白质组研究提供技术技持。【方法】参考Seglen胶原酶两步原位灌流法,对其进行改进,建立原位循环灌流分离小鼠肝细胞方法,对小鼠肝脏进行原位循环灌流,离体消化肝脏组织,差速离心获得纯化小鼠肝细胞;台盼蓝拒染试验检测肝细胞活性,常规血球计数法计算肝细胞得率;利用显微形态观察、HE、PAS及免疫细胞化学等检测方法鉴定所获得的肝细胞纯度;用含体积分数20%FBS的RPMI-1640细胞营养液对原代小鼠肝细胞进行培养。【结果】建立了原位循环灌流分离小鼠肝细胞的方法,采用该方法可从每只小鼠肝脏中成功分选到细胞活性大于90%、纯度在95%以上的(4.2×107)～(6.5×107)个肝细胞。原代分离的小鼠肝细胞培养4h后,大多数细胞可贴壁,12h后贴壁完全,细胞呈伸张状态,该原代肝细胞可持续培养7d以上,且细胞形态状况良好。【结论】成功建立了小鼠肝脏原位循环灌流试验体系,获得了纯度和活性均较高的小鼠肝细胞,分选所得的小鼠肝细胞完全满足构建肝细胞蛋白质组表达谱试验的需要。     

南蛇藤总萜对高脂血症模型大鼠的试验研究

采用南蛇藤总萜分别按60、30和15 mg.(kg.d)-1剂量灌胃高脂血症模型大鼠,连续用药4周,取血检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A(apoA)、apoE;显微镜观察肝脏切片的形态结构变化,研究南蛇藤总萜调节血脂的功效。结果表明:模型对照组大鼠肝细胞中充满大量脂粒,细胞核呈固缩状。经南蛇藤总萜干预后,肝小叶周围的肝细胞质中脂肪颗粒减少,细胞质中炎性细胞减少;部分细胞核无固缩现象,较模型对照组的形态结构有所改善。与模型对照组相比,南蛇藤总萜高、中剂量下均能显著升高大鼠血清HDL-C、apoA水平(P0.01),降低血清TC、TG、LDL-C和apoE水平、改善肝脏的脂肪浸润。证明南蛇藤总萜具有调节血脂、改善肝细胞脂肪变性作用。     

兔肝细胞的体外培养(简报)

本实验建立了肝细胞体外培养的二种方法。①组织块-细胞培养法:取7～10日龄兔新鲜肝脏,剪成1 mm~3的组织块,洗涤后种植于培养瓶中,加入含5%胎牛血清(FCS)的199培养液,待组织块周围长出大片肝细胞时。用0.25%胰蛋白酶(含0.03%EDTA)消化液分离肝细胞,并进行传代,得到较纯的肝细胞。②肝细胞直接培养法:0.5mg·mL~(-1)胶原酶     

内毒素对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A的保护效应

为研究内毒素(ET)致大鼠肝细胞凋亡变化、对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A(CA)的保护效应.将试验动物随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、ET组(Ⅱ组)和CA保护组(Ⅲ组).3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏检测肝细胞凋亡情况和Caspase-3蛋白的表达情况.结果表明,肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达成正相关的关系.ET可上调Caspase-3蛋白在肝脏的表达,诱导肝细胞凋亡,最终导致肝脏受损;而CA则能明显下调Caspase-3在肝脏的表达,抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤具有显著的保护效应.     

DL-乙硫氨酸对大鼠肝细胞脂肪变性的影响

为研究肝细胞脂肪变性后发生的变化。采用体外培养DL-乙硫氨酸诱导的大鼠原代肝细胞作为试验材料。油红O染色经5.0 mmol/L DL-乙硫氨酸处理的贴壁良好培养24 h和48 h的肝细胞,光学显微镜400倍下观察肝细胞的脂质变化,拍照,分析生化指标数据。结果表明,对照组细胞内可见正常脂滴,大量大小不一颜色鲜红的脂滴染色后汇集成块于模型组细胞胞浆内。模型组载脂蛋白B含量降低,甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白含量升高,与对照组比较差异极显著(P0.01)。     

日粮中添加溶血卵磷脂对肉仔鸡脂类代谢的影响

本试验研究了在日粮中添加0.1%(质量分数)溶血卵磷脂对肉仔鸡脂类代谢的影响.结果表明:溶血卵磷脂提高了肉仔鸡体重和胸肌含脂率(P<0.05),降低肝脏相对重量、肝脂率(P<0.05)和腹脂率(P=0.051);降低了血清TG含量(P<0.01),并有降低LDL-C含量及LDL-C与HDL-C含量的比值,提高血清FFA和HDL-C含量的趋势(P>0.05).肝脏apoB和FAS基因表达的检测结果显示,溶血卵磷脂极显著提高肝脏apoB基因的mRNA表达(P<0.01),FAS基因的mRNA表达没有变化(P>0.05).可见,溶血卵磷脂对肉仔鸡具有抗脂肪肝和体脂重分配作用,提高肉仔鸡对体内胆固醇的清除能力.     

肝炎患者及其恢复期应忌酒

酒对肝脏来说是一种毒品。饮酒后酒在胃肠道内很快被吸收,约90％以上的酒精成分(乙醇)在肝脏内代谢,肝细胞的脑浆乙醇脱氢酶催化乙醇而生成乙醛。乙醇和乙醛都有直接刺激、损害肝细胞的毒性作用,可使肝细胞发生变性、坏死．大量饮酒者常有饮食不足、呕吐等酒精急性中毒症状;     

肉鸡高、低脂系体脂性状和血清生化指标的比较分析

以东北农业大学肉鸡高、低腹脂双向选择品系为试验材料,分析第11、12世代肉鸡体重、体脂性状和血清生化指标在两系间的差异。结果表明,在体重和体脂性状方面,肉鸡高脂系的腹脂重、腹脂率、肝脏重极显著高于低脂系肉鸡的相应性状(P<0.01),而肝脏内脂肪含量性状差异则只达到显著水平(P<0.05);对于胸肌和腿肌内脂肪含量等性状,高脂系则极显著低于低脂系肉鸡(P<0.01);与此同时,高、低脂系间7周龄体重则无显著性差异(P>0.05)。在血清生化指标方面,高脂系肉鸡血清中HDL-C、VLDL、FFA、apoB和胰岛素(Insulin)水平高于低脂系肉鸡的相应指标(P<0.01);相反Glu和LDL-C低于低脂系的相应指标(P<0.01);高、低脂系间TG、TC的水平则无显著差异(P>0.05)。上述结果表明,对肉鸡腹脂率的持续定向选择对血液中脂质代谢各项生化指标具有显著的影响。有助于理解肉鸡血脂代谢与体脂沉积的关系,对低脂肉鸡的进一步选育具有积极的指导意义。     

siRNA对猪肝细胞THRSP基因mRNA表达的干扰效率

应用改良的剪切消化法(1%Ⅳ型胶原酶)消化分离仔猪肝脏细胞,建立稳定的仔猪肝脏细胞的分离与原代培养体系;通过siRNA途径及RT-PCR技术检测肝细胞THRSP基因mRNA表达水平。结果表明,平均每g肝脏可获得6.2×106个细胞,接种即时存活率达94.84%,培养存活率达50%左右,细胞转染后细胞存活率达80%以上;设计合成的siRNA的干扰效率为75.3%     

大豆黄酮对大鼠肝脏氮代谢和胰岛素样生长因子生成和分泌的影响

利用大鼠离体肝脏灌流技术以及大鼠原代培养的肝细胞研究了大豆黄酮对SD大鼠肝脏氮代谢和IGF -I生成的影响。结果表明大豆黄酮可使大鼠离体肝脏灌流液中尿素氮浓度下降 ,并有一定的剂量效应和时间效应。在给药后灌流的第 1、2、3、4h ,1× 10 -4mol/L剂量的大豆黄酮试验组 (n =8)大鼠离体肝脏灌流液中尿素氮水平分别为 (0 .76± 0 .19)、(1.16± 0 .0 7)、(1.2 8± 0 .13)、(1.5 9± 0 .19) μg/ml(以含每毫克DNA的肝组织所生成的尿素氮浓度表示 ) ;与对照组相比 ,其尿素氮浓度下降的幅度分别为 13.6 4 % (P <0 .0 5 ) ,2 3.18%(P <0 .0 5 ) ,34.0 2 % (P <0 .0 1)和 32 .91% (P <0 .0 1)。 4× 10 -5mol/L的大豆黄酮对大鼠肝脏尿素氮生成影响具有类似的效应。大豆黄酮还可在一定程度上抑制大鼠离体灌流的肝组织中GPT的活性 (n =8) ,能够促进大鼠肝细胞蛋白质的合成 ,1× 10 -5mol/L的大豆黄酮可使3 H -亮氨酸的参入量与对照组相比提高了 2 1.38%(n =6 ,P <0 .0 5 )。大豆黄酮对离体灌流的大鼠肝脏IGF -I生成和分泌也具有一定程度的促进作用 (n =8)。提示大豆黄酮可通过增加对大鼠肝脏氮的储留、促进大鼠肝细胞蛋白质的合成以及在一定程度上影响肝脏IGF-I生成和GPT的活性 ,而调节肝脏的氮代谢     

一例犬肝脏肿瘤手术及治疗的病例报告

肝脏是体内最大的腺体,是主要的代谢器官(解毒),在蛋白质、脂肪和碳水化合物的代谢中起主要作用。但不幸的是,肝脏疾病的临床症状一般在病情加重及其功能障碍不可逆时才表现出来。犬原发性肝脏肿瘤罕见。多数肿瘤可发生于任何品种的老年犬。虽然在实验中某些化学物质可诱发肝肿瘤,然而自发性肝肿瘤的病因仍不清楚。在各报道中,各类型原发性肝癌(肝细胞癌、肝内胆管细胞癌)的性别倾向差异很大,肝细胞腺瘤在雌性犬和雄性犬中均少见。