大花蕙兰再生体系建立的研究

[目的]研究并建立大花蕙兰再生体系。[方法]用75%酒精和0.1%升汞进行表面灭菌,以MS为基本培养基,采用L9(33)正交试验设计进行类原球茎增殖的优选,以继代培养40 d后的增殖系数及幼苗分化率为考察指标。[结果]在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,待长至2~3 cm时,小心切下接入1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+GA31.0 mg/L+香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。[结论]为规模化生产提供依据。     

大花蕙兰组织培养高频植株再生体系研究

用嫩根作外植体,建立了大花蕙兰的组织培养再生体系.外植体消毒过程中采用70%酒精与0.1%HgC12配合消毒,以70%酒精浸泡30s,0.1%HgC12消毒15min效果最好.MS为基本培养基,类原球茎的诱导最佳培养基6-BA2.0mg/1 NAA0.3mg/1,诱导率达35%;而附加6-BA2.0mg/1 NAA 0.1mg/1的培养基有利于芽的分化与增殖,培养30d左右,每个外植体分化形成的再生小植株数达15个以上;并在1/2MS IBA0.5mg/1的培养基中生根.     

大花蕙兰高频再生体系优化研究

为研究大花蕙兰(Cymbidium hybridum)的高频快繁再生体系,以大花蕙兰无菌原球茎、分化苗为材料,应用正交试验进行不同激素和添加物的优化筛选。结果表明院在1/2 MS+0.3 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1 g/L活性炭的培养基上大花蕙兰的原球茎增殖效果最好,新增原球茎呈深绿色、形状饱满,增殖倍数达11倍;在1/2 MS+0.1 mg/L6-BA+0.4 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1g/L活性炭的培养基上茎叶分化效果最好,分化丛生芽数量最多、颜色深绿色、生长健壮,分化倍数达6.1倍;在1/2 MS+0.2 mg/L GA3+1.0mg/L NAA+0.2 mg/L IBA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1 g/L活性炭的培养基上生根效果最好,生根数最多,平均生根数达4条,根系生长强健。     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及植株再生研究

从大花蕙兰(Cymbidium hybridum)试管苗取材,诱导原球茎,建立植株再生体系,分析了不同激素及其浓度对原球茎诱导、增殖和植株生根的影响.结果表明,不定芽比叶片更容易诱导出原球茎;生长素NAA对原球茎的诱导效果好于2,4-D,最适合原球茎诱导的激素组合为1.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA;原球茎增殖培养基中添加1.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA增殖效果较好,增殖系数可达7.90;最适生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖.     

大花蕙兰类原球茎薄切片高频诱导体系的建立

通过对大花蕙兰离体诱导类原球茎几个主要影响因素的研究,构建优良、高效的离体诱导体系.研究表明,不同外植体类型再生能力有显著差异,其中以类原球茎(protocorn-like body,PLB)横切片(transverse thin cell layers,tTCLs)为外植体可获得最高的PLB再生频率,叶片再生频率及数量最低.不同激素配比影响tTCLs的再生能力,其中在1/2 MS+TDZ 1.0 mg/L +KT 0.5 mg/L +NAA 0.5 mg/L上最高诱导频率为91.20.在上述培养基中添加3.0 mg/L AgNO3可提高tTCLs上PLBs的形成,但作用不显著.可见,以tTCLs为外植体诱导大花蕙兰PLBs切实可行.     

大花蕙兰的茎段培养

以大花蕙兰试管苗茎段为外植体,在１／２ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋香蕉１００ｇ／Ｌ的培养基上可１次成苗。在添加ＢＡ０．４ｍｇ／Ｌ的ＶＷ及１／２ＭＳ培养基上可诱导产生原球茎,通过原球菌的继代增殖、诱导成苗,也可在短期内获得大量种苗。     

大花蕙兰原球茎的诱导和增殖研究

通过对大花蕙兰茎尖和茎段的组织培养,建立了大花蕙兰原球茎的无菌繁殖体系。结果表明:芽诱导的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;原球茎诱导培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+2.5 mg/L 6-BA+100 mg/mLVC;原球茎诱导增殖培养基为1/2MS+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;适宜原球茎增殖培养的外植体为原球茎。     

大花蕙兰原球茎增殖影响因素的研究

[目的]为探明组培过程中大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了MS培养基浓度、BA浓度及培养方式对原球茎增殖和生长的影响。[结果]1MS基本培养基适合大花蕙兰原球茎培养;在振荡培养时MS培养基中加入BA1．5mg／L时,原球茎生长良好,显著好于其他浓度处理;在液体培养基中培养原球茎明显优于在固体培养基中培养,液体培养基培养的原球茎鲜重和增殖系数均为固体培养的1．75倍。[结论]培养基配方为Ms＋BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30g／L且振荡培养时,大花蕙兰原球茎增殖及生长效果较好。     

大花蕙兰的茎段培养

以大花蕙兰试管苗茎段为外植体 ,在 1/ 2MS +BA 2mg/L +NAA 0 1mg/L +香蕉 10 0g/L的培养基上可 1次成苗 .在添加BA 0 4mg/L的VW及 1/ 2MS培养基上可诱导产生原球茎 ,通过原球茎的继代增殖、诱导成苗 ,也可在短期内获得大量种苗     

大花蕙兰茎尖组织培养与植株再生研究

文章以大花蕙兰为材料,研究其茎尖组织培养再生体系。结果表明,最佳原球茎诱导培养基为VW+0.8mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA+20g·L-1蔗糖+0.05g·L-1AC,pH5.2。原球茎体分化丛生芽经壮苗生根后可进行移栽,最佳移栽基质为树皮块和水苔藓。     

大花蕙兰试管苗玻璃化发生原因及防止技术研究

试验结果表明,大花蕙兰试管苗玻璃化的原因主要有3个:一是培养温度的突然升高,造成高温伤害的后遗症,引发玻璃化;二是经过多次继代培养,原球茎过多吸收细胞分裂素6-BA,使体内激素比例严重失调,导致玻璃化;三是长期使用氨、锰、铁、锌等含量较低的培养基,引起玻璃化苗的产生。采取相应的技术措施,可以完全控制玻璃化苗的发生。     

大花蕙兰腋芽增殖体系的建立

[目的]建立大花蕙兰腋芽增殖体系。[方法]以大花蕙兰的嫩芽为试材,研究大花蕙兰腋芽增殖的最佳条件。[结果]结果表明,腋芽增值的最佳培养基为B5+6-BA 3.0~4.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AD 2.0 mg/L+YE 100.0 mg/L;生根阶段培养基为1/2MS+2.0 g/L AC+0.3 mg/L NAA生根效果好,生根率为90%,根数3~4条,6-BA添加与否影响不大。[结论]该试验通过腋芽增殖模式,遗传稳定性较高。     

杂交兰原球茎增殖及分化研究

[目的]对杂交兰原球茎的增殖及分化进行研究。[方法]采用L9(34)正交试验设计,研究培养基、6-BAI、BA和AC对杂交兰原球茎增殖的影响;设置几种不同培养基对原球茎的分化进行探讨。[结果]培养基和6-BA对原球茎的增殖影响不大,IBA浓度为0.1 mg/L、AC浓度为1.0 mg/L时,原球茎增殖效果最好;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L对原球茎的分化效果最好。[结论]在培养基中添加NAA有利于原球茎的分化。     

大花蕙兰原球茎一步成苗快速繁殖研究

[目的]筛选适宜原球茎一步成苗的培养基,探讨原球茎试管苗的快繁移栽技术。[方法]以大花蕙兰(Cymbidium grandiflorum)幼嫩芽为外植体进行组织培养研究。以MS为基本培养基附加不同的激素,分别设计5种配方的原球茎诱导培养基和3种配方的原球茎一步成苗培养基,原球茎一步成苗的最适培养基。用农用链霉素稀释2500～3500倍对原球茎试管进行消毒后,栽入不同的基质,研究原球茎试管苗的移栽技术。[结果]大花惠兰在MS+6!BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L配方培养基上诱导原球茎效果最好。试管苗的快繁以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基为最适,21d后原球茎大量增殖和分化,诱导出丛生芽并生根。在腐殖土中适当使用农用链霉素有利于练苗成功。[结论]该试验探究出原球茎从增殖,诱导分化到生根只用一种培养基,大大缩短生产周期,但其生根率只有75%,需做进一步研究。     

不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导与增殖影响的研究

[目的]大花蕙兰快速繁殖体系的建立。[方法]以茎尖和带有侧芽的茎段作为外植体,研究不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导和增殖的影响。[结果]结果表明,大花蕙兰茎尖的原球茎诱导率高于侧芽,原球茎诱导的培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋1．0％芦荟汁;原球茎增殖培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋150g／L香蕉泥＋1．0％芦荟汁;“井”字形切割（底部不分开）是原球茎增殖较为理想的切割方式。[结论]该研究结果可为建立大花蕙兰大规模工厂化育苗体系提供依据。     

大花蕙兰组织培养与快繁技术

[目的]研究大花蕙兰组织培养与快繁技术,寻求最佳培养基。[方法]以大花蕙兰的原球茎为接种材料,以MS为基本培养基,设计不同生长调节物质浓度的组合、不同激素配比,探讨了不同培养基对大花蕙兰原球茎增殖、诱导芽及生根的影响和不同激素配比对形成根的影响。[结果]大花蕙兰组织培养原球茎增殖以MS+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA培养基配方最好;适合大花蕙兰组织培养原球茎诱导分化的培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导出芽率可达130%;适合大花蕙兰诱导生根的培养基配方为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,试管苗移栽后成活率为78%。[结论]6-BA浓度的增加,可明显提高原球茎的增殖,高浓度6-BA与低浓度NAA的配比较适合大花蕙兰的原球茎增殖;6-BA在1.5 mg/L时最有利于原球茎的诱导分化。     

多花兰的离体萌发和试管成苗技术研究

[目的]建立多花兰的组培快繁技术体系。[方法]以多花兰种子为试验材料,研究基本培养基和添加物对其无菌萌发、原球茎增殖与分化、试管苗壮苗培育的影响。[结果]在MS、VW、KC、HP[Hyponex（花宝1号）3 g/L＋Peptone（蛋白胨）4 g/L]4种培养基中,以VW中的萌发率最高,达到75%;添加AgNO31 mg/L＋La（NO3）2.6H2O1 mg/L对原球茎的增殖与分化起促进作用;添加0.3%的活性炭可克服培养过程中的褐化现象;HP培养基添加10%香蕉可以获得壮苗。[结论]在不同培养阶段,通过基本培养基与添加物的优化组合可以建立高效的多花兰无菌播种试管成苗技术体系。