牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术的研究进展

论述了牛卵母细胞体外成熟和体外受精的最新研究进展,包括卵丘母细胞复合体、卵母细胞的体内、体外成熟、以及体内、体外的异常成熟和卵母细胞的体外成熟方法,无蛋白质、无血清系统的限定性培养液的研究进展,卵母细胞全外成熟与标志的某些理论上的突破性;体外受精中精子供体的选择、精子活力和正常形态的选择冷冻解冻精液的体外获能、精了的体外受精力,以及体外的异常受精,还论述了牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术在家畜育种     

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术的研究进展

文章综述了十几年来牛的卵母细胞体外成熟和体外受精技术的研究进展，包括精子的体外获能、9日母细胞采集及成熟培养和体外受精、体外受精早期胚胎的培养等环节，并且对影响该技术的主要原因进行了分析，对体外受精在家畜育种中的应用提出了展望。     

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术

本文综述了十几年来牛的卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展，包括精子的体外获能、卵母细胞采集受成熟培养和体外受精、体外受精早期胚胎的培养等环节，并且对影响该技术的王要原因进行了分析，对体外受精在家畜育种中的应用提出了展望。     

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术的研究进展

论述牛卵母细胞体外成熟和体外受精的最新研究进展,包括卵丘卵母细胞复合体、卵母细胞的体内、体外成熟,以及体内、体外的异常成熟和卵母细胞的体外成熟方法,无蛋白质、无血清系统的限定性培养液的研究进展,卵母细胞体外成熟状态与标志的某些理论上的突破;体外受精中精子供体的选择、精子活力和正常形态的选择、冷冻解冻精液的体外获能、精子的体外受精力,以及体外的异常受精;还论述了牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术在家畜育种和胚胎克隆等方面的应用前景     

牛卵母细胞体外受精和培养技术

本文综述了牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展,包括精子的体外获能、卵母细胞成熟培养和体外受精、体外受精早期胚胎的培养等,并且对影响该技术的主要原因进行了分析。     

牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术

文章从卵母细胞的来源、精子体外获能、卵母细胞体外成熟、体外受精和体外受精早期胚胎培养五个方面综述了牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展.同时指出了影响精子体外获能的因素、影响卵母细胞成熟培养的因素、体外受精存在的问题及解决办法等.并且对影响该技术的主要因素进行了系统分析.     

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术

本文综述了十几年来牛的卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展,包括精子的体外获能、卵母细胞采集及成熟培养和体外受精、体外受精早期胚胎的培养等环节,并且对影响该技术的主要原因进行了分析,对体外受精在家畜育种中的应用提出了展望。     

牛体外受精技术研究进展

１卵母细胞的体外成熟１．１卵母细胞的获取自卵巢获取卵母细胞的方法主要有４种。机械分离法，系自屠宰场废弃的卵巢表面获取卵母细胞的常用方法，主要有抽吸法、切割法和剥离法。抽吸法操作迅速，但易损伤卵丘细胞，取卵数量较少；切割法在最短时间内获卵数量较多，但易出现裸卵和损伤卵丘细胞；剥离法操作繁琐，但对卵丘细胞损伤较小。机械分离和酶消化结合法，系自屠宰场废弃的卵巢内获取卵母细胞的常用方法，可克服机械分离时间长的特点，又减轻了酶消化过程中对细胞细微结构的破坏。腹腔镜和超声扫描活体取卵法，系自活体卵巢内获取卵…     

性成熟前牛卵母细胞体外受精研究

性成熟前牛卵母细胞体外受精研究孙青原，侯艺，刘国艺，杨庆章，秦鹏春（东北农业大学生物工程系哈尔滨１５００３０）前言在国内，牛体外受精的最大困难之一，就是卵巢来源不足。如果能用小牛作为卵母细胞供体，不仅可扩大卵母细胞来源，还可缩短世代间隔的时间，加快牛...     

牛卵母细胞体外受精技术研究

本研究从3方面进行了牛卵母细胞的体外受精试验,即用不同离心法、不同温度上浮法、不同精子浓度等方法对COCs进行体外受精,测定其体外受精率。结果表明,两种离心法中,以上清液二次离心法的精子获能效果最好,受精率最高,该法首次采用低速离心技术,突破了离心法的传统方法,离心效果明显提高;不同温度条件下的精子上浮效果以CO2培养箱恒温（38.5℃）上浮法最好,受精率最高;对于选择受精时获能精子的浓度,宜控制在1.0×106～1.5×106个/ml,不仅能提高受精率,还可避免或降低多精受精现象。     

多种因素对小鼠卵母细胞体外受精效果影响的分析

为了探讨不同精子获能时间,精卵孵育时间,精子密度以及颗粒细胞对小鼠卵母细胞体外受精的影响,从而达到对卵母细胞体外受精体系优化的目的。比较了精子获能时间分别为40 min、60 min、80 min试验组的受精卵卵裂率。结果表明,带颗粒细胞卵母细胞(COCs)在三个试验组中卵裂率无显著差异,不带颗粒细胞卵母细胞(NO)在精子获能时间为60 min时卵裂率最高;比较了精卵孵育时间分别为2 h、4 h、6 h、8 h试验组的受精卵卵裂率,结果显示COCs精卵孵育时间2 h试验组的效果最好,NO孵育时间为6 h试验组的效果最好;比较了精子密度分别为3×10⁵/mL,3×10⁶/mL,3×10⁷/mL试验组受精卵卵裂率,结果显示COCs和NO均为3×10⁶/mL试验组卵裂效果最好;比较COCs和NO的受精卵卵裂率,结果显示COCs与NO之间存在显著差异(P<0.05),裸卵卵裂效果显著优于颗粒细胞卵裂效果。试验结果表明,在卵母细胞体外受精过程中,精子获能时间60 min,精子密度为3×10⁶/mL,精卵孵育6 h,培养24 h后卵裂率最高。     

家兔卵母细胞体外受精研究

以家兔为试验动物,人工采集公兔精液,经体外获能后,与从母兔输卵管获取的成熟卵母细胞进行体外受精和培养。结果表明:①卵龄14～15h卵母细胞体外受精后卵裂率和8～16细胞百分率均显著(P<0.05)高于卵龄16～17h卵母细胞;②L-谷氨酰胺对卵母细胞体外受精及受精卵体外发育具有促进作用,但随着添加量的增加其作用减弱;③培养液DMEM+10%FBS组卵裂率、桑椹胚及囊胚百分率均显著(P<0.05)高于TCM-199+10%FBS组及RM-199组。     

猪卵泡卵母细胞的体外成熟与体外受精

本试验对猪卵泡卵母细胞不同体外成熟培养时间、不同精子获能时间、不同精卵共孵育时间对体外受精的影响进行了研究。结果表明,体外成熟培养44 h左右,精子获能时间在1～2 h之间,精卵共孵育时间在6～8 h之间,受精后卵裂率最高。     

间情期犬间母细胞体外受精的影响因素

试验对间情期犬卵母细胞体外受精的影响因素进行了系统研究。结果表明①以TALP液作为犬精子获能液，精子回收率(64±10.5)%、顶体反应率(41.5±4.1)%高于TCM199+20%FCS液。②用TCM199+20%FCS作为受精液，卵母细胞单精受精率(18.6%)、原核形成率(10.4%)，高于TALP受精液，而退化率低于TALP受精液(4.9%比19.7%，P＜0.01)。③犬精子与卵母细胞在受精液中共同孵育12h，单精受精率(23.5%)、原核形成率(12.7%)高于共同孵育8、16、20h，而多精受精率(15.7%)、退化率(3.9%)低于共同孵育16、20h。④犬精子为2×106个/mL时，单精受精率(26.0%)、原核形成率(14.6%)，高于0.5×106、1×106、3×106、5×106个/mL组。卵母细胞多精受精率和退化率随精子含量增加而增加。⑤肝素为29mg/L时,卵母细胞单精受精率(24.4%)、原核形成率(12.2%)高于0、10、20、40、50mg/L组。而犬精子获能2h后，顶体反应率和卵母细胞多精受精率随肝素质量浓度增加而增加。     

不同浓度CO2对牛卵母细胞体外成熟和受精的影响

对牛卵巢卵泡内卵母细胞在不同浓度的CO2培养箱内体外成熟、体外受精后的卵裂率及胚胎体外发育进行了研究。结果显示,含5%小牛血清(CS)的TCM-199内的卵母细胞在2%CO2条件下培养20h后,达到第二次减数分裂期(MⅡ期)的卵子数明显高于在5%CO2条件下培养的卵母细胞数(P<0.05)。两种浓度的CO2条件下培养的牛卵母细胞体外受精后的卵裂率无明显差异,2%CO2浓度下培养的卵母细胞的囊胚发育率高于5%CO2浓度下培养的卵母细胞。     

猪冷冻附睾精子与体外成熟卵母细胞的体外受精

研究了不同解冻温度（39－41℃，58-60℃,69-71℃)和解冻方式（干解冻、湿解冻）对猪冷冻附睾精子解冻后的活力、存活指数以及受精能力的影响。结果表明，采用同一种解冻方式，经高温解冻的精液，虽然解冻后的活力较好，但活力却下降很快，精子的存活时间和存活指数均不如低温解冻的精液。采用同一种解冻温度，湿解冻所需的解冻时间相对短，解冻后精子活力相对低，但存活时间和存活指数相应优于对应的干解冻试验组。经低温解冻的精子，受精能力最强，精子的受精能力与解冻时间呈显著正相关（r=0.91613,P=0.0103).使用改良TCM199培养液，猪受精卵和颗粒细胞单层共培养能发育至早期桑椹胚。     

不同采卵方法及卵巢所处性周期阶段对绵羊卵母细胞体外成熟的影响

本试验主要从采集方法和性周期阶段2方面对绵羊卵母细胞体外成熟的影响进行了探讨。结果表明：不同采卵方法的采卵效果存在差异，卵裂率切割法显著高于抽吸法(27.9%，49.5%；P<0.05)；A、B级卵母细胞成熟率极显著高于C级(75.3%，64.4%，29.1%，P<0.01)，卵裂率A、B级均显著高于C级(42.5%，35.8%，16.0%，P<0.05)；从卵泡期和黄体期卵巢采集到的卵母细胞的体外成熟率和卵裂率分别为66.7%、62.9%；38.2%、34.4%，没有显著差异 (P>0.05)。