响应面法优化鹿角灵芝产胞内多糖的液体发酵工艺

为了优化鹿角灵芝产胞内多糖的液体发酵工艺,以鹿角灵芝胞内多糖得率为指标,研究碳源、氮源、初始pH值、发酵时间、接种量、装液量、马铃薯添加量对鹿角灵芝胞内多糖得率的影响,并通过单因素和响应面法对鹿角灵芝产胞内多糖的发酵工艺进行优化。结果表明,鹿角灵芝胞内多糖得率最高时的发酵条件如下:20%马铃薯、3. 3%葡萄糖、3%麦麸、0. 2%KH_2PO4、0. 1%MgSO4,初始pH值为7. 0,接种量为11%,500 mL三角瓶装液量为151 mL,转速为150 r/min,培养温度为(27±2)℃,培养时间为82 h。在此条件下,鹿角灵芝胞内多糖的得率为12. 94%,与预测值13. 16%的相对误差小于5%,说明该优化模型真实可行,具有指导生产的实用价值。     

碳氮源对灵芝液体发酵胞外糖肽产量的影响

为寻找适合灵芝胞外糖肽(EPSP)液体深层发酵工艺商业化生产的经济高效的培养基原料,在摇瓶水平上比较研究了不同类型的碳源和氮源(各6种)对灵芝胞外糖肽(EPSP)产量的影响。试验表明:玉米粉是最适合灵芝EPSP生产((2.664±0.801)g/L)和菌丝生长((4.559±0.150)g/L)的碳源;尿素是最适合灵芝EPSP生产((0.636±0.040)g/L)的氮源,豆粕粉则是最适合灵芝菌丝生长的氮源((2.222±0.256)g/L);玉米粉与豆粕粉组合是最适合灵芝EPSP生产((4.366±0.434)g/L)的碳氮源组合。本研究结果可为灵芝EPSP液体深层发酵工艺的工业化生产提供科学指导。     

富硒灵芝菌株的选育及发酵性能研究

[目的]选育富硒灵芝高产菌株并研究其液体发酵性能。[方法]应用添加Na2SeO3的培养基筛选富硒能力较强、菌体生物量及菌体多糖产量均较高的菌株,并研究其发酵性能。[结果]筛选到菌株Ganoderma lucidumZ-4-25,在液体培养基中添加浓度0.08%的Na2SeO3即能有效促进菌体生长,在浓度0.16%的Na2SeO3液体培养基中培养192 h,灵芝菌粉有机硒含量达到13 000μg/g菌体。在添加浓度0.08%的Na2SeO3条件下,10 L发酵罐发酵216 h,菌体生物量干重达到26.82 g/L,灵芝菌粉有机硒含量达到9 800μg/g菌体。[结论]该研究为富硒灵芝的液体发酵生产奠定了基础。     

灵芝原生质体电融合选育高产多糖菌株的研究

采用灵芝原生质体电融合技术选育高产多糖菌株,通过电融合方法对紫芝(Ganoderma sinese )和赤芝(Ganoderma lucidnm)原生质体电融合条件进行了研究,表明灵芝原生质体电融合的最佳条件为:脉冲强度10 kV,脉冲间隙24 μs,脉冲次数3次/s,最高融合率为0.038%.10 L罐发酵结果,选育的融合菌株GL-18的生物量和多糖含量分别为17.52 g/L和1.88 g/L,均高于亲本菌株.     

灵芝琼脂固体菌种超声均质效果及其发酵工艺

建立一种灵芝均一性菌种制作方法及其发酵工艺。超声破碎灵芝琼脂固体平板培养物,采用镜检和涂布平板法分析超声均质效果,以生物量和胞外多糖为指标优化其发酵工艺。结果表明:灵芝琼脂固体菌种破碎完全、均一性好,菌落数达到186.00 CFU/个(琼脂块直径0.5 cm);以超声均质化菌种为接种物于恒摇床发酵,生物量、胞外多糖分别为9.24、0.62 g/L,低于琼脂块菌种(分别为13.37、1.16 g/L);采用静置加摇床两阶段发酵方法(共10 d),以静置3 d、摇床7 d为最优,生物量、胞外多糖含量分别达到15.14、0.86 g/L;与琼脂块菌种恒摇床发酵相比分别提高29.96%、16.21%;超声均质菌种优化后的接种量为7 m L。     

铁皮石斛对灵芝多糖深层发酵的影响

[目的]研究铁皮石斛对灵芝生长及胞外多糖分泌的影响,并分析灵芝多糖组分的变化。[方法]在发酵培养基中添加不同量的铁皮石斛,分析灵芝生物量和胞外多糖含量的变化,并采用KTA explorer柱层析分析多糖组分。[结果]铁皮石斛可促进灵芝胞外多糖的合成,添加量以10 g/L效果最佳;添加铁皮石斛发酵未改变灵芝多糖的组分。[结论]在灵芝深层发酵培养基中添加适量铁皮石斛有助于灵芝多糖的高效生产。     

提高蝉拟青霉多糖产量的液体发酵条件研究

以蝉拟青霉(Paecilomyses cicadae)0305-3菌株为材料,研究了提高蝉拟青霉多糖含量的液体发酵条件。结果表明,蝉拟青霉多糖含量的最佳液体发酵条件为:在液体培养基中,以7%的接种量将浓度为107个/mL的孢子悬液接入装液量为20%的液体培养基中,于pH 7、27℃1、50 r/min的转速下发酵7 d,0305-3菌株的多糖产量可达3.24 g/L。     

以米糠为主要原料的灵芝菌丝体液体深层发酵技术

以米糠液为培养基的主要原料,分别添加糙米浆、麦芽汁或豆芽汁,进行灵芝菌丝体液体深层发酵培养,分析灵芝菌丝体利用培养基的情况,筛选培养基组分.结果表明:米糠液与豆芽汁(可溶性固形物为2°Brix)以4∶1的体积比混合进行灵芝菌丝体液体深层发酵时,其菌丝体干重及胞外多糖含量最高,可达11.45 g·L-1和10.20 g·L-1;发酵过程中发酵液中总糖、还原糖含量显著下降(P<0.05),可溶性蛋白含量略有上升,游离氨基态氮含量先下降后上升,菌丝体干重、胞外多糖含量均显著增加.     

基于液体发酵灵芝草乌相互作用的影响研究

[目的]研究在液体发酵过程中草乌与灵芝相互作用的影响。[方法]研究在灵芝液体发酵过程中初始pH、草乌粉及草乌提取物对灵芝菌体生长、胞内外多糖的影响,以及灵芝发酵对草乌粉及草乌提取物中酯型生物碱质量分数的影响。[结果]当初始pH为6时,灵芝菌体生物量及胞内外多糖产量均达最大值,分别为7．50、0．25、0．42 g／L;草乌粉添加量为20 g／L时,生物量和胞内多糖达最大,分别为10．60和0．54 g／L,分别为对照的1．96和2．57倍;草乌粉添加量为15 g／L时,胞外多糖产量达最大,为0．76 g／L,是对照的2．11倍;草乌提取物添加量为0．87 g／L时,生物量和胞外多糖产量达最大,分别为11．30和0．72 g／L,分别是对照的2．13和2．06倍,添加量为1．16 g／L时,胞内多糖产量最高,达0．57 g／L,是对照的2．38倍。[结论]灵芝均能降低发酵液中草乌粉、草乌提取物中的双酯型生物碱含量及增加发酵液中单酯型生物碱含量。     

激素对蝉拟青霉胞内核苷合成的影响

[目的]在蝉拟青霉液体深层发酵过程中添加6-苄氨基嘌呤(6-BA)和3-吲哚乙酸2种激素以考察激素对蝉拟青霉代谢途径的影响。[方法]在蝉拟青霉液体发酵培养基中,按照5 mg/L的比例添加激素6-苄氨基嘌呤和3-吲哚乙酸,研究激素对蝉拟青霉液体发酵过程中生物量、胞内总核苷和腺苷合成的影响。[结果]2个试验组在整个发酵过程中生长代谢节奏与对照组间存在一定差异;6-BA试验组和3-吲哚乙酸试验组蝉拟青霉于发酵第3天达到最大生物量,分别为6.135 g/L和5.860 g/L,比对照组分别提高了19.10%和13.76%,显著高于对照组(P0.05),而且试验组比对照组提前24 h达到最大值;6-BA试验组和3-吲哚乙酸试验组胞内总核苷最高含量分别达到18.49 mg/g和16.77 mg/g,显著高于对照组(P0.05),比对照组分别提高了65.24%和49.87%;6-BA试验组胞内腺苷含量于发酵第4天达到最大值2.32 mg/g,3-吲哚乙酸试验组于第3天达到最大值1.82 mg/g,对照组于发酵第4天胞内腺苷含量达到最大值1.75 mg/g,统计分析后发现6-BA试验组胞内腺苷最高含量显著高于3-吲哚乙酸试验组和对照组(P0.05)。[结论]2种激素在蝉拟青霉液体深层发酵过程中的添加对于提高虫草相关制品品质发挥了积极作用,同时也说明激素确实会改变微生物的代谢途径及生长节奏。     

不同发酵条件对柱状田头菇菌丝产胞外多糖的影响

【目的】为了提高胞外多糖的产量,优化柱状田头菇液体发酵适宜的培养基和培养条件。【方法】 以胞外多糖产量为主要测定指标,通过对培养基的碳源、氮源种类及其浓度、起始 pH、摇床转速、培养时间等 发酵条件进行单因素试验,以获得柱状田头菇液体深层发酵的优化条件,提高柱状田头菇菌丝产胞外多糖的产量, 其中胞外多糖产量通过苯酚 - 硫酸法测得。【结果】柱状田头菇液体发酵产胞外多糖的优化条件为：采用可溶 性淀粉作为碳源,浓度控制在 20~40 g/L;采用 L- 谷氨酰胺作为氮源,浓度控制在 2 g/L;起始 pH 控制在 7.0, 转速控制在 180 r/min,并在 26 ℃下培养 12 d。【结论】在此发酵条件下,柱状田头菇液体发酵的胞外多糖产量 可达到 1.08 g/L,其中多糖含量为 71.73%、蛋白质含量为 8.62%,可为柱状田头菇多糖的工业化生产和应用提供 理论依据。     

深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基优化

[目的]优化深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基。[方法]以不同的培养基深层发酵培养虎奶菇菌丝体和多糖,分离胞内和胞外多糖,在单因素试验和正交试验的基础上,考察碳源、氮源和金属离子对虎奶菇生长及虎奶菇多糖含量的影响。[结果]葡萄糖是最佳碳源,有利于细胞生长和胞内外多糖等代谢产物的积累,从而获得高的多糖产率;酵母膏是最适氮源,可以获得最高的菌丝体生物量和胞外多糖产量;金属离子对细胞生长有影响,在EDTA离子培养基里细胞生长及代谢产物累积效果最佳。在最优培养基培养条件下,总多糖含量为3.34 g/L,胞内多糖含量为1.92 g/L,胞外多糖含量为80.34 mg/g,多糖产率为8.13%,细胞干重为23.62 g/L。[结论]该方法优化了深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基,为虎奶菇的种植栽培提供了科学依据。     

铆钉菇菌丝体液体培养条件及产胞外多糖的研究

[目的]为食用菌液体培养和胞外多糖的研究提供基础。[方法]研究铆钉菇菌丝体的最佳液体培养条件,并对其产胞外多糖的情况进行测定。[结果]铆钉菇菌丝体深层发酵适宜的培养基组成为:蔗糖20 g/L、酵母浸膏2 g/L、K2HPO40.5 g/L、MgSO40.5g/L、Vc 0.001 g/L,适宜培养温度28℃,pH值7.0。铆钉菇菌丝体液体培养7 d,菌丝体干重为28.0 g/L,胞外多糖产量为3.27 g/L。[结论]铆钉菇菌丝体液体培养可很好地生长,并产生较多的胞外多糖。     

两种不同形态猪苓菌核液体发酵生产胞外多糖的分析

对2种不同形态猪苓(Polyporus umbellatus)菌核液体发酵生产胞外多糖进行了研究。结果表明,猪苓菌核液体发酵生产胞外多糖的发酵条件是温度28℃,pH 4.8~5.5,振荡速度110 r/min,通气量4 L/min,罐压0.090 0 MPa,发酵7 d,每12 h取样测其胞外多糖的含量,在72 h和60 h时猪苓(FrCM2)和猪苓(FrCM3)液体发酵产胞外多糖的含量分别为1.783和0.044 mg/mL,猪苓(FrCM2)液体发酵产胞外多糖含量明显高于猪苓(FrCM3)。     

姬松茸深层发酵生产菌丝体和胞外多糖的初步研究

[目的]研究姬松茸的深层发酵技术,筛选了适宜姬松茸液体深层培养的碳源和氮源培养基。[方法]对姬松茸的液体深层培养基进行了研究,筛选出适宜姬松茸发酵的最适碳源和氮源,并研究了不同浓度的最佳碳源和氮源对姬松茸菌丝体和胞外多糖的影响。[结果]姬松茸菌株生长和胞外多糖生产的最佳碳源为葡萄糖,最适浓度为30 g/L;最佳氮源为蛋白胨和酵母膏的组合,最适的组合浓度为7 g/L蛋白胨+7 g/L酵母膏。在此条件下,姬松茸菌体干重和胞外多糖产量均达到最大值,分别为8.7 g/L和281 mg/L。[结论]该研究为姬松茸的进一步规模化培养提供了参考。     

深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基优化

[目的]优化深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基。[方法]以不同的培养基深层发酵培养虎奶菇茵丝体和多糖,分离胞内和胞外多糖,在单因素试验和正交试验的基础上,考察碳源、氮源和金属离子对虎奶菇生长及虎奶菇多糖含量的影响。[结果]葡萄糖是最佳碳源,有利于细胞生长和胞内外多糖等代谢产物的积累,从而获得高的多糖产率;酵母膏是最适氮源,可以获得最高的菌丝体生物量和胞外多糖产量;金属离子对细胞生长有影响,在EDTA离子培养基里细胞生长及代谢产物累积效果最佳。在最优培养基培养条件下,总多糖含量为3．34g／L,胞内多糖含量为1．92g/L,胞外多糖含量为80．34mg／g,多糖产率为8．13％,细胞干重为23．62g/L。[结论]该方法优化了深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基．为虎奶菇的种植栽培提供了科学依据。     

黑木耳菌丝体发酵条件优化和发酵罐生产多糖的试验

以黑木耳干菌丝体为目标产物,经单因子和L18（37）正交试验对发酵条件作了优化,并对5L发酵罐生产黑木耳多糖作了初步研究。单因子和正交试验的结果经综合分析表明,黑木耳品种＂单片＂优化发酵培养液配方和条件为：土豆汁20%,葡萄糖3%,酵母膏0.15%,KH2PO40.3%,MgSO47H2O0.15%,pH自然和25℃。5L发酵罐生产黑木耳多糖结果表明,优化发酵培养液,接种量10%（v/v）,pH5±1,25℃,转速150r/min等条件下发酵2d,最后发酵液中胞外多糖产量为46.0g/L,胞内多糖产量为0.105g/L。     

生防菌解淀粉芽胞杆菌JT84发酵工艺优化

为探明解淀粉芽胞杆菌菌株JT84的使用前景,对其发酵工艺进行了研究。通过单因素试验和Plackett-Burman试验设计及Box-Behnken试验设计的响应曲面法,对JT84菌株的发酵培养基和培养条件进行了优化。确定培养基3个主要因子的质量浓度分别为:葡萄糖3.59 g/L、大豆蛋白胨21.89 g/L和K_2HPO_4 0.49 g/L;培养条件3个主要因子为:培养温度、装液量和发酵时间,根据响应曲面方程预测结果并结合生产实际,这3个主要培养条件因子分别设定为30.6℃、68 ml(250 ml三角瓶)和65.5 h。在初始pH为6.7、转速180 r/min、接种量3%的条件下,发酵液芽胞含量为1.67×10~9CFU/ml,较基础培养基(YPG)芽胞含量提高159%,无菌滤液对稻瘟病菌的抑菌带宽增加18.2%。     

富集钙·铁离子对灵芝菌丝体培养的影响

研究不同浓度钙、铁离子对灵芝固体培养与液体摇床培养后菌丝体生长、胞外多糖及菌丝体钙、铁含量的影响。结果表明：在浓度为200μg／ml的钙离子发酵液中,灵芝胞外多糖含量和钙离子含量最高,分别为7．4g/L和100．6me,／100g。灵芝多糖含量最高的最适Fe^2＋浓度为1000μg／ml,胞外多糖含量可达到8．5g/L,铁离子含量为364．2mg／100g。     

杂交选育的优良猴头菌株发酵菌丝体多糖结构特征及体外免疫活性

对猴头菌杂交选育的3株高产多糖菌株(15、91、611)和亲本菌株进行液体发酵培养,比较其液体发酵生物量与多糖含量;发酵菌丝体经水提、分级醇沉获得10个胞内多糖组分,对10个多糖组分的相对分子质量分布、单糖组成、多糖基本结构特征和体外刺激RAW 264. 7细胞释放NO的活性进行了研究。结果表明:3株杂交菌株在液体发酵生物量和多糖含量方面较亲本菌株有不同程度的提升,菌株15糖含量提升率达到107%;杂交菌株菌丝体20%、60%(体积分数)醇沉多糖组分在相对分子质量分布、单糖组成与某一亲本菌株相似,变化较小,一般介于两亲本菌株的遗传特性之间。杂交菌株与亲本的多糖组分在红外光谱方面无明显差异; 10个醇沉的多糖组分均具有体外刺激巨噬细胞释放NO的活性,其中H15P20、H91P60、H911P60具有较高的免疫活性,活性与多糖含量具有一定的相关性。研究表明,经杂交选育获得的高产多糖菌株,其发酵菌丝体多糖的结构特征与亲本差异不大,而含量大幅提高,为猴头菌相关产品的开发提供了优质资源。