真鲷视网膜结构及其视觉特性研究：Ⅰ.真鲷视网膜组织结构研究

本文采用组织学方法对真鲷视网膜的组织结构进行观察，结果表明：真鲷视网膜存在大量视杆，单锥和孪生双锥三种光感受细胞，视网膜颞侧区为视锥高密集区，中央区和鼻侧区为视杆高密集区，明适应下，单锥和双锥呈正方形镶嵌结构，暗适应下，这一镶嵌结构仍然存在，平均每１７。９个视细胞和一个双极细胞联系，每个神经节细胞和９．８个双极细胞联系。水平细胞四层，推测前三层为锥水平细胞，第四层为杆水平细胞。     

无花果蛋白酶的分离纯化及其理化性质研究

以无花果良种布兰瑞克和紫果１号为材料，其匀浆滤汁经有机溶剂沉淀、超滤等方法处理，得到无花果蛋白酶粉。酶比活力为１５．３４ｕ／ｍｇ·ｐｒｏｔｅｉｎ，纯化倍数为１１．６８％，酶产率为１．５％，酶活力回收率为２７．４％，酶最适ｐＨ为８．０，在ｐＨ５￣１０范围内处理０．５ｈ活性稳定，酶最适温度为４０℃，在温度５０℃以内活性稳定。酶具有巯基蛋白酶特性，能被半胱氨酸和ＥＤＴＡ激活，而被ＨｇＣｌ２抑制。     

生姜蛋白酶的部分纯化及酶学性质研究

对姜块中的生姜蛋白酶进行部分纯化，并对其主要酶学性质进行了研究。以酪蛋白为底物时，其最适pH值为6.0最适温度为60℃，30℃下保温30min，酶活力不变，高于72℃酶活力迅速下降，60℃、75℃、80℃时，该酶的半衰期分另为17、12和3min，Km值为0.270mmol/L；二硫苏糖醇（DTT）、乙二胺四乙酸二钠（EDTA）对酶有激活作用；对氯汞苯甲酸（PCMB）、氯化锌、硫酸铜等对酶有抑制作用；氯化钙、硫酸镁、三氯化铝对酶活影响不大。     

中草药添加剂对真鲷幼鱼生长和蛋白质消化吸收的影响

将体重为(22.18±1.44)g的真鲷Pagrosomus major幼鱼饲养于80 cm×40 cm×50 cm的水槽内(水温22±0.5 ℃),连续投喂含山楂、麦芽、当归等中草药的饲料2个月.试验中,中草药(粉剂和水煎剂)分别以1%、2%、3%(质量分数)的剂量添加到基础饲料中,试验结束时测定鱼体的增重并计算饵料系数,分3个阶段(每20 d为1个阶段)测定饲料总消化率、蛋白质消化率和幼鱼胃、肠道及肝脏中蛋白酶的活性.结果表明:摄食添加中草药饲料的6组鱼生长速度均快于对照组,且粉剂和水煎剂中均以2%剂量组幼鱼的生长最佳,相对增重率分别比对照组提高了39.43%和47.16%,均极显著高于对照组(P<0.01);饵料系数均低于对照组,两种剂型的2%剂量组均比对照组低0.10,均达到了显著性水平(P<0.05);中草药添加剂对鱼胃、肠道及肝脏中的蛋白酶活性及消化吸收的影响与对生长的影响相似,两种剂型的中草药处理组均在第2、3阶段与对照组之间出现极显著的差异(P<0.01),且均以2%剂量组为最佳.     

饲用酶添加剂预混料中酸性蛋白酶活力测定方法研究

本文就《工业酶制剂通用试验方法》测定饲用酶添加剂预混料中酸性蛋白酶的活力进行了探讨,并就试验方法的适用性以及影响酶活力测定的因素进行了试验论证。结果表明:《工业酶制剂通用试验方法》回收率低,不适合于饲用酶添加剂预混料中酸性蛋白酶活力的测定;其他酶的存在不会影响酸性蛋白酶的活力测定;载体对酸性蛋白酶有较强的吸附力,结果导致《工业酶制剂通用试验方法》回收率偏低;《工业酶制剂通用试验方法》改进方法避免了载体吸附造成的回收率低的因素,回收率由原方法的70%左右提高到了93%以上。     

不同底物对蛋白酶K酶活力测定的影响

为了制定蛋白酶K酶活力测定方法标准提供理论依据,研究了不同底物对蛋白酶K酶活力测定的影响。分别以6种常见蛋白质为底物,5种有代表性蛋白酶为对照,结果表明:所有受试蛋白酶均在以酪蛋白为底物时,酶活力最高。以角蛋白为底物时,蛋白酶K的相对酶活力(33.97%)低于碱性蛋白酶(58.34%)和胰蛋白酶(48.46%),远远高于菠萝蛋白酶(-2.92%)和木瓜蛋白酶(2.84%)。以血红蛋白为底物时,蛋白酶K的相对酶活力(25.70%)仅次于碱性蛋白酶(50.95%),远远高于胰凝乳蛋白酶(5.38%)和菠萝蛋白酶(7.61%)。以牛血清白蛋白、组蛋白和明胶为底物时,蛋白酶K酶活力很低甚至检测不到。因此,建议选择血红蛋白作为测定蛋白酶K酶活力的底物。     

黑曲霉酸性蛋白酶酶学性质的研究

对黑曲霉菌株ANS1产酸性蛋白酶基本酶学性质的研究表明:酸性蛋白酶适宜pH在2.5～4.0之间,在pH为3.5时,相对酶活最高;适宜温度在40～50℃之间,在45℃时,相对酶活最高;酸性蛋白酶有着较好的热稳定性,曲酶粉在80℃保温至5min保留有51.4%的酶活,液态酶在80℃恒温水浴中保温1min保留有54.6%的酶活力,曲酶粉较液态酶有着更好的抗热性;金属离子对酸性蛋白酶活力有一定的影响,在2.0mmol·L-1的浓度下,Mn2 和Cu2 酸性蛋白酶有较强的激活作用,Fe3 对该酶表现出明显的抑制作用。研究结果表明,黑曲霉菌株ANS1产酸性蛋白酶可以作为生物饲料添加剂。     

温度、复配原料和中性蛋白酶活力的相关性研究

研究温度、复配原料对中性蛋白酶酶促反应速度的影响，观察酶活性变化规律，从而探索最佳条件为生产应用提供科学依据。     

海参组织蛋白酶K的部分酶学性质及其对海参自溶的影响

采用特异性荧光底物法检测海参体壁组织蛋白酶K(CTSK)的酶学性质并初步探讨其对海参自溶的影响。结果表明:CTSK的最适pH为5.0,最适温度为50℃,在20~40℃之间酶活力稳定性较好;Zn~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)均对CTSK产生一定抑制作用,抑制率均超过60%;而Ca~(2+)和Mn~(2+)对其活性影响不大,Mg2+可增强该酶活性、CA-074、Z-Leu-Leu-Leu-H(ZLLL)、碘乙酸、E-64、抗痛素、PMSF对CTSK的抑制率均在85%以上,EDTA和1,10-菲啰啉对该酶的抑制率分别为39.7%和16%,而DTT和L-Cys可将该酶活力分别提高至127.46%和238.3%。在海参匀浆物中分别加入特异性抑制剂CA-074和ZLLL,25℃水浴加热使其发生自溶,并通过SDSPAGE检测CTSK对海参蛋白降解的影响。结果显示ZLLL能够在一定程度上抑制海参蛋白的降解。CTSK是一种巯基氨基酸含量较高的半胱氨酸蛋白酶,具有一定的金属离子依赖性,但又易被多种金属离子抑制;CTSK有可能直接参与海参自溶过程中蛋白质的降解。     

大口黑鲈主要消化器官蛋白酶活力的研究

从酶学分析角度研究了大口黑鲈Micropterus salmoides主要消化器官蛋白酶的活力分布,以及不同温度、pH和底物浓度条件下其胃、幽门盲囊、肠中蛋白酶的活力变化。结果表明:不同消化器官中蛋白酶的活力存在明显差异,由高到低依次为胃>幽门盲囊>前肠>中肠>后肠;蛋白酶的活力随温度和pH变化呈现一定的规律性,不同消化器官蛋白酶的最适温度、pH依次为胃(40℃,2.4)、幽门盲囊(55℃,7.6)、肠(45℃,8.0),蛋白酶的最适温度高于体温,胃蛋白酶在强酸环境下活力最大,幽门盲囊与肠在中性和偏碱条件下活力最大;蛋白酶的活力与底物浓度有关,最大活力的底物酪素浓度依次为胃20 g/L、幽门盲囊20 g/L、肠10 g/L。     

蜜蜂球囊菌几种胞外蛋白酶的特性

 【目的】研究由蜜蜂球囊菌引起的真菌性疾病白垩病的侵染机制,以及蜜蜂球囊菌胞外蛋白酶的种类及其特性。【方法】利用人工合成的培养基,在体外诱导蜜蜂球囊菌分泌胞外蛋白酶,用硫酸铵沉淀和透析,获得初酶液,利用相应的底物对酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶、弹性蛋白酶和胰蛋白酶的活力进行测定。【结果】蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶主要有酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶3种,无弹性蛋白酶和胰蛋白酶。对这3种酶的最适温度、pH值以及热稳定性和酸碱稳定性进行了测定。这3种胞外酶的最适反应温度都在40℃左右,最适pH为7左右,均不耐高温,热稳定性差,在中性的pH环境下比较稳定。【结论】蜜蜂球囊菌可以分泌多种胞外蛋白酶,它们的最适pH和温度与蜜蜂消化道内的环境一致。     

高产蛋白酶P5菌株的纯化及酶学性质

对高产蛋白酶细菌P5菌株发酵产生的蛋白酶进行初步分离纯化并研究其酶学性质。结果表明,硫酸铵饱和度为70%时,酶活性达到最高(310.44U/mL);该酶最适反应温度为40℃,在35～40℃保温5h,酶活性基本没变化;酶反应最适pH值为7.0,酶活性在pH值6.0～7.5时比较稳定。K+、Ca2+、Mg2+、Fe3+对酶活性有促进作用,Na+对酶活性基本没有影响,Hg2+和Mn2+对酶活性有抑制作用,其他金属离子对酶活性的影响随离子浓度的不同而不同。     

不同益生素对鲤鱼肠道蛋白酶、淀粉酶活力的影响

本试验应用4种不同的益生素（光合菌组Ⅰ、光合菌组Ⅱ、芽胞杆菌组及复合菌组）饲养鲤鱼．测定鲤鱼肠道内容物中蛋白酶和淀粉酶（AMS）含量,算出蛋白酶比活和淀粉酶比活。结果显示：试验组鲤鱼的蛋白酶和淀粉酶比活均高于对照组（P〈0．05）,且4个试验组中复合菌组蛋白酶和淀粉酶比活又高于其它试验组。     

蝉拟青霉胞内几丁质酶、蛋白酶、溶菌酶研究

通过对8株蝉拟青霉Paecilomyces cicadae胞内几丁质酶、蛋白酶、溶菌酶的活力测定,从中筛选出酶活力高的菌株为GZDXIFR3716,并对3种酶的产酶条件进行了研究.结果表明,GZDXIFR3716产3种酶的最佳发酵培养基组成为葡萄糖20g·L-1、酵母膏5g·L-1、K2HPO41g·L-1;其几丁质酶、蛋白酶和溶菌酶含量最高的发酵时间分别为48h、60h和84h;而3种酶的最适反应温度分别为50℃、40℃和40℃;3种酶的最适反应pH值分别为6.0、7.0和5.0.     

几种离子和有机化合物对枯草芽胞杆菌蛋白酶活力的影响

研究了不同浓度的金属离子及有机化合物对枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）蛋白酶活力的影响，结果：①在5种金属离子中，Mg^2 、Na^ 、K^ 对酶有激活作用，其中Mg^2 浓度为2mmol/L时，激活作用最大。随着金属离子浓度的降低，K^ 和Na^ 对酶的激活作产减弱，Ca^2 对Zn^2 对酶活力有抑制作用。②在7种重金属离子中，除Mn^2 对蛋白酶有激活作用外，Cu^2 、Pb^2 、Cd^2 、Co^2 、Cr^3 和Cr^6 均对蛋白酶有抑制作用。③在有机化合物中，半胱氨酸和EDTA对酶均有激活作用，且在20mmol/L时最为强裂。④Na^ -K^ 、Ca^2 -Mg^2 和Cu^2 -EDTA共同作用时对蛋白酶活力均有不同程度的抑制作用。     

真鲷对蛋白质和必需氨基酸需要量的研究

通过生长试验和鱼体成分分析测定了体重３４．０～３７．３ｇ的真鲷对蛋白质和必需氨基酸（ＥＡＡ）的需要量，真鲷对蛋白质的最低需要量为０．９１ｇ／ｋｇ．ｄ。适宜需要量为１０．７１ｇ／ｋｇ．ｄ，对必需氨基酸的适宜需要量为５．６３ｇ／ｋｇ．ｄ。１０种必需氨基酸需要量分别为：赖氨酸１．０８。蛋氨酸０．２３，苯丙氨酸０．７０，苏氨酸０．４９，亮氨酸０．９４。异亮氨酸０．５６，精氨酸０．６８，组氨酸０．２５，缬氨     

真鲷网箱养殖的最佳放养密度

根据广东省惠阳县１９８５－１９８６年网箱养殖的生产统计数据,拟合了真鲷的生产函数。该生产函数为二次模型,解释变量包括放养密度、鱼种规格、养殖期、饲料系数及其平方项和叉乘项。模型的决定系数为８２．８％。根据生产函数计算了在不同水平的养殖期、鱼种规格、鱼种价格及成鱼的市场人格等条件下获得最大经济效益的放养密度。     

真鲷网箱养殖的最佳放养密度

根据广东省惠阳县１９８５－１９８６年网箱养殖的生产统计数据,拟合了真鲷的生产函数。该生产函数为二次模型,解释变量包括放养密度、鱼种规格、养殖期、饲料系数及其平方项和叉乘项。模型的决定系数为８２．８％。根据生产函数计算了在不同水平的养殖期、鱼种规格、鱼种价格及成鱼的市场人格等条件下获得最大经济效益的放养密度。     

菌株I13产碱性蛋白酶的酶学性质研究

[目的]研究菌株I13产碱性蛋白酶的酶学性质.[方法]从一株碱性蛋白酶生产菌株I13中得到了碱性蛋白酶粗酶液,并研究了温度和pH值对该酶液酶活力的影响.[结果]所产碱性蛋白酶的最适反应温度为40℃,但在30～60℃范围内活力水平均较高,且在20～30℃范围内也保持了最大活力的40%以上;最适反应pH值为10.5,在8.0～11.0 pH值范围内保持了最大活性的90%以上,有较宽的pH值谱.[结论]该碱性蛋白酶具有开发成为洗衣粉添加剂的巨大潜力.     

生态养猪发酵床菌种产蛋白酶特性的研究

采用福林法对武汉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、7号芽孢杆菌、9号芽孢杆菌、Y2芽孢杆菌、BB1芽孢杆菌进行发酵后产蛋白酶活力测定。结果表明：7号芽孢杆菌、9号芽孢杆菌、Y2芽孢杆菌产蛋白酶活力较小,武汉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、BB1芽孢杆菌产蛋白酶活力较高;在三株产蛋白酶活力高的菌种培养基中加入微量元素,实现产酶条件优化,结果是：对武汉芽孢杆菌产蛋白酶有较大影响,对枯草芽孢杆菌和BB1芽孢杆菌影响较小。