衍生化结合分散固相萃取–UPLC–MS/MS法测定果品中EBDCs类农药残留

建立了果品中乙撑双二硫代氨基甲酸酯(盐)类(简称EBDCs)残留的液质串联确证快速检测方法。果品样品中的EBDCs经碘甲烷甲基衍生化后用分散固相萃取(QuEChERS)提取和净化,利用超高效液相色谱—串联质谱(UPLC–MS/MS)在多反应离子监测模式下进行检测,采用基质匹配标准曲线校正,外标法定量。以碎片离子对m/z 241.1/117.1、m/z 241.1/193.0进行定性分析、m/z 241.1/134.0进行定量分析。结果表明,代森锌、代森锰、代森锰锌、代森钠和代森联的甲基化衍生产物亚乙基–1,2–双二硫代氨基甲酸甲酯在不同水果中具有不同的基质效应;在0.005~1.000 mg·kg~(-1)(以二硫化碳计)之间具有良好的线性关系,相关系数为0.9948~0.9996。在苹果、桃、葡萄、柑橘和香蕉果实样品中添加不同水平乙撑双二硫代氨基甲酸酯(盐)时,回收率为82.6%~98.8%,相对标准偏差为0.7%~8.8%。本方法的检出限(以CS2计)为0.6~1.0μg·kg~(-1),定量限(以CS2计)为10μg·kg~(-1)。本方法简便、快速、准确,可用于果品中乙撑双二硫代氨基甲酸酯(盐)的残留确证检测。     

基于UPLC-MS/MS的枇杷不同组织萜类代谢物鉴定

【目的】了解枇杷不同组织中的萜类代谢物成分及含量,为高值化利用提供依据。【方法】利用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）广泛靶向代谢组学的方法,分析鉴定安徽大红袍枇杷叶片、花、果皮、果肉和种子等组织中的萜类代谢物成分,利用R软件进行主成分分析和聚类分析,比较不同组织中的萜类物质成分和含量差异。【结果】安徽大红袍枇杷叶片、花、果皮、果肉和种子等5个组织中,共鉴定出萜类代谢物51种,其中单萜1种、倍半萜1种、二萜3种、三萜42种、三萜皂苷4种,其中紫苏子醇、脱氢枞酸、白桦脂醇、脱氢山楂酸、23-羟基白桦脂酸等35种物质在枇杷中未见报道;各组织萜类代谢物分别为叶片50种、花49种、果皮49种、果肉45种、种子40种,所有组织共有成分38种,占51种萜类物质的74.5%。叶片、花、果皮、果肉和种子中萜类代谢物相对含量>1%的物质各有14、15、11、13、10种,各占其总萜类物质相对含量的88.46%、92.78%、92.37%、94.62%和96.28%,且以三萜类物质为主,5个组织共有的主要萜类物质有8种,分别为2α,19α-二羟基-3-氧熊果-12-烯-28-酸、科罗索...     

UPLC-MS/MS法同时测定生菜叶片中五种植物内源激素

以有机生菜为试材,采用甲醇∶甲酸∶水=15∶1∶4作为提取剂,经过超声、离心、氮吹,DiKMA ProElut PXA固相萃取柱分离纯化后得到植物激素提取液,在38℃恒温水浴中氮吹浓缩干燥,甲醇作为复溶液进行复溶,得到植物激素待测液.采用ACQU-ITY UPLC BEN反相色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)对5种植物激素进行分离,流动相A为0.1％甲酸水溶液,流动相B为甲醇溶液,梯度洗脱,流速为0.30 mL·min-1,柱温为40℃;在液相色谱质谱联用多反应监测(MRM)模式下进行定性定量分析,外标法测定植物激素回收率.建立了应用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),同时测定叶菜类蔬菜中赤霉素、生长素、脱落酸、水杨酸、茉莉酸5种植物内源激素含量的方法,并优化了生菜基质中激素的前处理方法、质谱色谱条件等.结果 表明:生菜在低、中、高浓度加标时,5种激素的加标回收率为60.15％～107.73％,且相对标准偏差均小于7.6％,检出限为0.30～0.52 μg·kg-1,定量限为0.68～1.56μg·kg-1.该方法快速灵敏,可适用于其它叶菜类植物中赤霉素、生长素、水杨酸、茉莉酸、脱落酸含量的检测,以期为叶菜类植物叶片中多种内源激素的同时检测提供了一个快速有效的方法.     

应用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术分析草菇同核和异核菌丝蛋白质组

首次利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)技术结合二维液相色谱串联质谱对草菇(Volvariella volvacea)同核和异核菌丝蛋白质组进行研究。采用QExactive质谱鉴定并经MASCOT软件搜库,对所有鉴定蛋白进行主成分分析(principal component analysis,PCA)、层次聚类(hierarchical clustering)分析和GO(gene ontology)注释,并进行生物信息学分析。结果共获得2335个不同肽段,鉴定到1039个蛋白,其中1030个蛋白具有定量信息。在同核菌丝中显著上调蛋白83个,下调蛋白97个,表明iTRAQ标记技术结合二维液相色谱串联质谱可有效地分离和鉴定草菇菌丝蛋白质组。该研究结果为更深入全面地研究草菇菌丝蛋白质组学奠定基础。     

桃果实叶片和土壤草甘膦和氨甲基膦酸残留的HPLC-MS/MS检测方法

建立了桃果实、叶片和土壤中草甘膦(PMG)及其代谢物氨甲基膦酸(AMPA)的高效液相色谱—串联质谱(HPLC-MS/MS)的检测方法。样品经碳酸氢钠水溶液和二氯甲烷共同提取,以9–芴基甲基三氯甲烷为衍生剂室温下衍生3 h,多反应监测(MRM)模式检测。草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸在1~2 000μg·L~(-1)的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999;在0.01~1.0 mg·kg~(-1)添加水平下平均回收率为76.7%~93.0%,相对标准偏差(RSD)为2.2%~8.7%;方法定量限(LOQ)均为0.01mg·kg~(-1);适用于桃果实和叶片及土壤中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留的快速检测。     

不同花色玫瑰类黄酮成分及其与花色关系

以‘苦水玫瑰’‘墨红玫瑰’和‘保加利亚白玫瑰’3个不同花色的玫瑰为试材，采用CIE L^*a^*b^*表色系法测量玫瑰花色，用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术定性定量分析玫瑰花中类黄酮化合物成分与含量，运用多元线性回归方法，研究玫瑰花瓣中类黄酮成分对其花色的影响，以期为玫瑰花色形成的物质基础提供参考依据。结果表明：3种不同花色玫瑰中共检测到58种类黄酮成分，其中花青苷只有1种，为矢车菊-3-O葡萄糖苷，约占30.45%;黄酮类有24种，约占18.85%;黄酮醇类9种，约占31.89%;黄烷醇类有8种，二氢黄酮类有6种，异黄酮类有3种，查尔酮有2种，其它及多酚类物质有5种；3种不同花色玫瑰中的黄酮和黄酮醇类化合物的含量不同，‘保加利亚白玫瑰’花瓣中的占其类黄酮总量的93.85%,而‘苦水玫瑰’花瓣和‘墨红玫瑰’花瓣中的分别占其类黄酮总量的29.33%和44.08%;多元线性回归分析显示儿茶素和乔松素是影响花色的最主要因素，其含量积累会影响参数L^*、a^*     

蜜环菌不同特化菌体的HPLC-DAD图谱比较

采用麦芽汁液体培养基培养蜜环菌获得菌丝体，采用麦芽汁半固体培养基培养蜜环菌获得蜜环菌菌素、皮壳状菌丝和子实体。以高效液相色谱-二极管阵列检测法（High Performance Liquid Chromatography-Diode Array detector，HPLC—DAD）比较四种菌体的甲醇提取物的成分差异。液体培养的蜜环菌菌丝体与固体培养的蜜环菌菌素、皮壳状菌丝和子实体的蜜环菌素类成分有明显差别。图谱分析表明，菌素与皮壳状菌丝的成分接近，与子实体和液体培养菌丝体之间有较大差别。     

新疆野苹果多酚物质的遗传多样性

以新疆野苹果(Malus sieversii)30个单株的成熟果实为试材,对果实多酚物质的组成、含量及遗传多样性进行了研究,结果表明：新疆野苹果30个单株多酚物质含量存在广泛的遗传变异,变异系数均在36.12%以上,遗传多样性极为丰富;鉴定出原花青素、没食子酸、绿原酸、对羟基苯甲酸、儿茶素、表儿茶素、香草醛、阿魏酸、苯甲酸、根皮苷、槲皮素、肉桂酸、根皮素等13种多酚物质,其中原花青素、表儿茶素、根皮苷和绿原酸是野苹果的主要多酚组分,总酚及主要多酚物质含量显著高于栽培苹果(Malus domestica)品种红星。     

鸭梨芽变优系主要器官性状研究

采用田间观察和室内分析相结合的方法,对2个鸭梨芽变优系(巨鸭梨、光鸭梨)的生物学及遗传学性状进行研究,为培育鸭梨新品种奠定基础。结果表明:巨鸭梨:果实巨大,花朵较大,花瓣数目多,花粉粒较长;叶片和栅栏组织均较厚,叶片叶绿素含量和净光合速率都较高,属于鸭梨特大果新品系。光鸭梨:果面洁净(果点稀而大,果面锈斑面积小),果肉质地细腻而酥脆,酸味较浓;枝条皮孔和叶片气孔密度均较小;果实成熟期比普通鸭梨晚约7 d。属于外观品质和内在品质俱佳的鸭梨优质新品系。与普通鸭梨相比,巨鸭梨雄蕊多出1条Rf 0.206酶带,而少了1条Rf 0.556酶带;光鸭梨未展叶雏梢多出了2条酶带(Rf 0.079和Rf 0.127),Ф1 cm的幼果多出1条活性较强的Rf 0.560酶带,Ф2 cm的幼果少了1条Rf 0.860酶带。巨鸭梨和光鸭梨既有与普通鸭梨共同的遗传基础,又有一定的遗传差异,是鸭梨新的变异类型。     

早熟梨"新梨7号"不同枝条叶片叶绿素含量的变化

作者研究了早熟梨“新梨7号”在南疆立地条件下不同枝条叶片叶绿素a b含量及a/b值的季节变化。结果表明：无果短枝叶叶绿素a b含量最高，其次为有果短枝叶，营养枝中部叶最低；三类枝叶绿素a b含量年周期变化规律基本一致，为一单峰曲线。有果短枝、无果短枝高峰期出现在7月中旬，而营养枝出现在6月中旬。各类枝叶片9月中旬后开始衰老。有果短枝和无果短枝叶绿素a/b值变化呈高－低－高变化，营养枝叶序叶片叶绿素a/b值变化比较平稳，下部叶片的叶绿素a b含量比上部叶片略高。     

红树莓中酚类化合物研究进展

介绍了红树莓中花青素、黄酮和鞣质(鞣花酸)3种酚类化合物,探讨了国内外关于3种酚类化合物的提取、分离纯化和性质、功能活性及产品开发的研究现状,展望了红树莓3种酚类化合物的研究前景。     

钾对黄土区砀山酥梨产量及品质的影响

连续４年钾肥试验表明,黄土区砀山酥梨施钾平均增产１９．７%,产投比在３．０以上。钾对酥梨内质及外观有明显的改善。施钾能增加酥梨一级果率,提高可溶性固形物、可溶性糖、维生素Ｃ含量,糖酸比及果实硬度。钾能降低新梢生长量,增加百叶重及叶绿素含量,增大果实,协调果树营养生长和生殖生长的关系。此外,氯化钾有显著降低病虫果率的作用。从产量、品质、果树生长状况及经济效益综合考虑,氯化钾＋硫酸钙处理最佳。因此,酥梨应首选氯化钾,同时要补充硫素营养,Ｎ:Ｐ_２Ｏ_５:Ｋ_２Ｏ的大致比例为１:１:１。     

‘鸭梨’芽变‘闫庄梨’自交亲和性分子机制初步研究

 通过‘鸭梨’（S₂₁S₃₄）及其芽变‘闫庄梨’自花授粉和相互授粉结实率和种子数调查发现,‘鸭梨’自花授粉结实率为9.1%,果实平均种子数为0,表现自交不亲和性;‘闫庄梨’自花授粉结实率为56.9%,果实平均种子数为8.64,表现自交亲和性;以‘闫庄梨’为母本,‘鸭梨’为父本,授粉结实率为39.3%,果实平均种子数为3.36,也表现亲和性,而以‘鸭梨’为母本,‘闫庄梨’为父本,授粉结实率仅为2.0%,果实平均种子数为0粒,表现不亲和性。因此,初步推断‘闫庄梨’自交亲和性可能是由于花柱突变所致。利用S₂₁和S₃₄等位基因特异性引物对‘闫庄梨’自交后代S-RNase基因型进行鉴定,结果发现S₂₁在所有后代中均有扩增条带,进一步证明‘闫庄梨’花柱S₂₁等位基因及其编码产物可能发生了突变。蛋白质印迹杂交分析结果表明,‘闫庄梨’花柱S-RNase缺失了一条带,而没有缺失的条带蛋白含量也比‘鸭梨’低。由此初步证明‘闫庄梨’的自交亲和性可能是由于花柱S-RNase的突变和表达量低所致。     

套袋对刺葡萄果实品质及酚类物质的影响

以湖南省中方县的刺葡萄为试材,采用果实套袋的方法,研究其对刺葡萄果实品质和酚类物质的影响,以期为酒用刺葡萄的生产及酿酒提供参考。结果表明:套袋处理降低了果实发病率;与对照相比,套袋降低了采收期刺葡萄果实还原糖含量,增加了总酸含量;套袋处理还降低了葡萄果实总酚含量、总花色苷含量及总黄烷醇含量,2014年分别降低了21.50%、34.84%、14.38%,2015年分别降低了12.23%、9.04%、14.65%。通过2年试验,套袋处理的单体花色苷较对照分别降低30.47%(2014年)、4.28%(2015年);与对照相比,套袋处理的非单体花色苷酚类物质总量2014年降低了9.05%,2015年增加了15.17%,其中黄烷醇类物质,2014年降低了10.15%,2015年增加了15.53%。因此,套袋对刺葡萄果实品质及酚类物质无提升作用,不适合刺葡萄葡萄酒的酿造。     

酚类物质对东北山樱生长及呼吸关键酶的影响

 以东北山樱（Cerasus sachalinensis Kom.）幼苗为试验材料,研究了根施酚类物质对羟基苯甲酸和香豆素对其生长和呼吸关键酶的影响。结果表明,低浓度的香豆素显著促进东北山樱幼苗生长,提高幼苗光系统Ⅱ（PSⅡ）最大光化学效率、呼吸底物含量、中间产物丙酮酸含量和苹果酸脱氢酶（MDH）活性,不影响糖酵解途径（EMP）和磷酸戊糖途径（PPP）关键酶活性;高浓度香豆素抑制生长,降低PSⅡ最大光化学效率、淀粉含量、异柠檬酸脱氢酶（IDH）和磷酸果糖激酶（PFK）活性。对羟基苯甲酸及其与香豆素的混合溶液在3个作用浓度（0.1、1.0和10 mmol · L-1）下均不同程度地抑制幼苗生长,降低柠檬酸含量,促进PPP关键酶活性提高。低浓度对羟基苯甲酸对幼苗PSⅡ最大光化学效率和呼吸底物含量无影响,但提高丙酮酸含量、己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性,降低IDH、MDH活性;高浓度对羟基苯甲酸使幼苗PSⅡ最大光化学效率、呼吸底物和中间产物含量、PFK、PK、IDH、MDH活性下降,HK活性提高。     

桃3种颜色果肉中10种酚类物质的测定及比较

 优化了桃酚类物质分析的高效液相色谱法（HPLC）,并测定和比较了红、黄、白色类型桃果肉酚类物质组分。以甲醇（0.1% H₃PO₄）为提取剂,采用C₁₈柱（4.6 mm × 250 mm,5 μm）,以甲醇（0.1% H₃PO₄）和水（0.1% H₃PO₄）为流动相梯度冲洗,流速1.0 mL · min^-1,温度30 ℃,检测波长280 nm,适于桃果肉酚类组分分析。在桃果肉中检出了绿原酸、新绿原酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁、槲皮素、没食子酸、阿魏酸、根皮苷和根皮素。不同肉色类型桃的主要酚类组成和含量存在差异,红肉桃主要成分为表儿茶素、绿原酸、儿茶素和新绿原酸,黄肉桃为新绿原酸、绿原酸和儿茶素,白肉桃为新绿原酸、儿茶素和芦丁;红肉桃含量最高的酚类为表儿茶素最高（78.91 ~ 673.90 mg · kg^-1FW）,黄肉桃为新绿原酸（7.28 ~ 25.57 mg · kg^-1FW）,白肉桃中含量最高的酚类因品种而异,规律不明显,以新绿原酸（3.17 ~ 6.16 mg · kg^-1FW）和儿茶素（4.21 ~ 14.55 mg · kg^-1FW）较高;各酚类含量差异显著,对于绿原酸、新绿原酸、儿茶素、表儿茶素和芦丁等桃果肉中的主要组分而言,红肉桃的含量均显著高于白肉和黄肉桃。同一肉色不同品种间一些酚类物质的含量差异显著,可用于筛选桃特异种质。     

外源Fe2+对梨黄化叶光合能力及糖合成代谢的影响

【目的】探讨外源FeSO₄对梨黄化叶叶绿素含量、光合特性及其糖代谢的影响。【方法】以砀山酥梨正常和黄化植株为试材,对生长期黄化植株喷施0.2%FeSO₄溶液,测定叶片总叶绿素(Chl)、山梨醇、果糖、葡萄糖及蔗糖含量;分析了光合、糖代谢相关基因的表达。【结果】FeSO₄处理诱导了黄化叶内Chl合成,增强了其叶片净光合速率P_n、蒸腾速率T_r和叶绿素荧光参数F_m、F_v/F_m,促进了叶内果糖、山梨醇和葡萄糖积累。FeSO₄处理后3、6、9、12 d,光合基因PSIsubunit II、PSII psbD、Rubisco activase V和Chl a–b P4表达量均显著升高,山梨醇代谢相关基因S6PDH1、SDH2/3和其转运基因SOT8/14/15/26/30表达量则均在处理后6 d和9 d显著增加。而蔗糖合成基因SPS1/3和转运基因SUT1/2/3、TMT2表达量均在处理后3、6、9 d...