黑龙江省猪肉中四环素类药物残留检测及风险评估

本文用高效液相色谱串联质谱法对2015年3-10月在黑龙江省8个市、县的超市、屠宰场、农贸市场随机采集的245份猪肉中3种四环素类药物(四环素、土霉素、金霉素)的残留水平进行了检测,在此基础上对黑龙江省猪肉产品中四环素类药物的残留风险进行了评估。结果显示,在黑龙江省8个市县抽检的245份猪肉样本中未检出四霉素和土霉素的残留,金霉素的检出率为2.85%,金霉素残留范围为12.80μg/kg~24.50μg/kg,均值为18.48μg/kg,未超过国家规定的最高残留限量(100μg/kg);金霉素是该批次抽检的猪肉样品中残留的主要四环素类药物;黑龙江省猪肉产品中四环素类药物残留的食品安全指数均值为10.22×10~(-3),最小值为7.11×10~(-3),最大值为13.61×10~(-3),远远低于1,表明黑龙江省猪肉产品中四环素类药物的残留对人体的潜在危害水平是可以接受的,不会对人群产生不良作用。     

湖南省永州市猪肉中四环素类药物残留的现状分析

为了解湖南省永州市猪肉中四环素类药物的残留情况,分批随机采集永州市八个县区超市、农贸市场和生猪屠宰场的猪肉样品200份,采用高效液相色谱法进行土霉素、四环素和金霉素等四环素类药物残留的分析监测。抽检八个县区中冷水滩、零陵、祁阳和东安四个县区被检出四环素类药物的残留,其检测出的残留量均超过国家规定的四环素类药物最大残留限量0.1μg/g(或100μg/kg),在200个样品中有9个样品含有被测的四环素类药物成分,占被调查样品的4.5%。这表明当地生猪养殖过程存在滥用四环素类药物的现象,从而造成猪肉的四环素类药物残留。     

液相色谱-串联质谱法测定猪肉中四环素类药物残留量的不确定度评定

评定液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定猪肉中四环素类药物残留量的不确定度。依据GB/T 21317-2007《动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法与高效液相色谱法》,建立相关数学模型,对实验过程中的不确定度来源进行分析与评定。当采用LC-MS/MS法测定猪肉中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素的残留量分别为50.05、42.81、42.45、41.60μg/kg时,扩展不确定度分别为 5.44、6.72、2.86、4.80μg/kg (k=2)。检测结果的不确定度主要受回收率、标准溶液配制、工作曲线拟合的影响。     

安阳市鸡肉组织四环素类药物残留检测与分析

为了初步弄清安阳市鸡肉组织四环素类兽药残留情况,本次研究应用液相色谱质谱法对该地区收集鸡肉组织进行兽药残留检测。结果显示,被检测的220份肌肉样品中四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的检出率分别为0.91%、0、1.82%和1.36%,其中四环素、金霉素和强力霉素最大残留量分别为43.25ug/kg、52.0ug/kg和37.50ug/kg。结果说明抽检的安阳市鸡肉中存在四环素类兽药残留,其药残含量低于国家和农业部行业标准,但仍需引起养殖户和相关检疫部门的警惕。     

猪、牛、鱼组织中四环素类药物残留的测定

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了猪、牛、鱼组织中四环素、土霉素、金霉素和多西环素4种药物残留的酶联免疫检测方法。该方法在猪、牛、鱼组织中的检测限均低于13μg/kg，4种四环素类药物最高残留限量浓度添加回收率范围为47．5％～119．4％，批内、批间变异系数在25％以内。检测各种组织中四环素类药物的临界值分别为猪肉49．2μg／kg、猪肝138．7μg／kg、牛肉52．1μg／kg、牛肝124．4μg／kg、鱼肉44．1μg／kg。     

饲料中四环素类药物UPLC检测方法的建立

建立了一种四环素类药物（土霉素、四环素、强力霉素、金霉素）在饲料中残留的超高效液相色谱（UPLC）分析方法。样品提取液选用浓度为0.1 mol/L的Na2EDTA-Mcllvaine。四种药物在0.1～5.0μg/mL浓度范围内呈现良好的线性关系，相关系数R2大于0.999。检出限（LOD）为0.5 mg/kg，定量限（LOQ）为1.0 mg/kg。加标的平均回收率分别为土霉素86.2%～88.4%，四环素82.1%～88.5%，强力霉素70.1%～78.1%，金霉素71.2%～74.5%，相对标准偏差（RSD）≤6.0%(n=6)。结果显示，该方法灵敏度高、重复性好、选择性强，适用于饲料中四环素类药物残留的定量检测。     

禽肉中四环素类药物残留监测分析及膳食暴露风险评估研究

本文对在商场超市、农贸市场、批发市场随机采集的1331份禽肉进行4种四环素类药物(四环素、土霉素、金霉素、强力霉素)残留量监测分析,利用深圳市食用农产品质量安全风险评估技术平台系统,对禽肉中四环素类药物进行膳食暴露风险评估。经该平台系统计算,禽肉中四环素类药物97.5%最高暴露量为0.050μg/(kg/d·bw),食品安全指数最大为0.017,食品安全指数远小于1,表明禽肉中四环素类药物的残留水平对人体健康的危害作用是安全的,不存在健康风险。     

猪肉中四环素类抗生素残留的ELISA检测

采用间接竞争ELISA检测猪肉及内脏组织中土霉素、四环素、金霉素的残留量,在50~300μg/kg浓度范围内,标准添加样品回收率81.3%~122.4%,变异系数2.7%~11.1%。本方法的建立为四环素类抗生素残留的快速检验试剂盒的研制奠定了基础。     

猪肉及猪肝中四环素类药物残留量测定的高效液相色谱法

采用高效液相色谱法建立了猪肉及猪肝中土霉素、四环素、金霉素、多西环素残留量的检测方法。试样中的四环素类药物经Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液提取,硫酸和钨酸钠溶液沉淀蛋白,HLB及LCX固相萃取柱净化,高效液相色谱法测定。以0.01 mol/L三氟乙酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为340 nm。结果显示：四种四环素类药物在0.05~5 μg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系,决定系数大于0.999。本方法在猪肉中的检测限为20 μg/kg,定量限为50 μg/kg;在猪肝中的检测限为50 μg/kg,定量限为100 μg/kg。在空白猪肉组织中添加50~200 μg/kg浓度,平均回收率为62.8%~114.4%,日内相对标准偏差为0.5%~6.6%,日间相对标准偏差为21%~5.4%;在空白猪肝组织中添加100~600 μg/kg浓度,平均回收率为602%~111.9%,日内相对标准偏差为0.3%~3.1%,日间相对标准偏差为1.1%~3.5%。该方法各项技术指标均能满足残留检测要求,且重现性良好,适用于猪肉及猪肝中四环素类药物残留量的测定。     

固相萃取-高效液相色谱法测定畜禽肉与牛奶中5种四环素类药物残留及其稳定性研究

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定畜禽肉与牛奶中土霉素、四环素、去甲基金霉素、金霉素和强力霉素的残留量。样品用乙腈和0.1mol/L Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液提取,HLIB固相萃取小柱净化,采用高效液相色谱分离,二极管阵列检测器(PDA)检测,外标法定量。结果表明:标准校准曲线在30~1 000 ng/mL的范围内呈良好线性关系,相关系数r>0.99。样品中土霉素、四环素、去甲基金霉素、金霉素和强力霉素的添加水平分别为0.05、0.1、和0.2 mg/L时,样品加标回收率为71.5%~88.3%,变异系数在2.6~8.3之间。本法简便、快速、定量准确、精密度高,适用于畜禽肉中四环素族抗生素残留量的检测。同时稳定性试验表明,畜禽肉与牛奶中土霉素、四环素、去甲基金霉素、金霉素和强力霉素随着放置时间的延长,药物明显地消解。     

高效液相色谱法测定动物性食品中四环素类药物的残留

采用高效液相色谱法进行四环素类抗生素药物残留量的测定。样品经提取,微孔滤膜过滤,超声波排气,反相色谱分离。色谱柱为AgilentExtend-C18(150×4.6nm,5umi.d)柱,以乙腈-磷酸二氢钠(体积比69∶31)为流动相,紫外检测器检测波长为355nm,以0.8ml/min的流速,采用内加法[1]测定了25个鸡肝样品中土霉素、四环素、金霉素的残留量。测定结果土霉素、四环素、金霉素残留平均值分别为40.7、28.04、71.5μg/kg(n=25)。实验结果表明:16%的样品中有残留,其中土霉素超标占残留样中的25%、金霉素超标占残留样中的50%,四环素未测出超标。     

饲料中4种四环素类药物的检测——高效液相色谱法

本研究建立了高效液相色谱法同时测定饲料中土霉素、金霉素、四环素、强力霉素4种四环素类药物。结果显示,4种药物在1~100 g/mL范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均达到0.999以上;土霉素和四环素的检出限为0.25 g/g,金霉素和强力霉素的检出限为0.5 g/g;土霉素和四环素的定量限为2 g/g,金霉素和强力霉素的定量限为4 g/g;回收率达到74.1%~98.8%。本方法适用于浓缩饲料、配合饲料、预混合饲料中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素4种四环素类抗生素的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳、发酵乳和乳粉中四环素类药物残留

建立超高效液相色谱-串联质谱法同时检测牛乳、发酵乳和乳粉3 种基质中4 种四环素类药物残留的检测方法。对前处理方法和仪器上机条件进行研究。以EDTA-Mcllvaine缓冲液进行提取,经HLB固相萃取柱净化,甲醇-乙酸乙酯（1∶9,V/V）洗脱,氮吹后复溶,采用电喷雾离子源正离子模式、多反应监测模式进行检测。结果表明：乳粉中四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的定量限均为10 μg/kg;液态乳和发酵乳中4 种药物的定量限均为2 μg/kg;四环素类药物添加量为2～100 μg/kg时,回收率为63.1%～1     

UPLC-MS/MS检测七种动物源食品中四环素类药物残留量的研究

研究并优化了七种不同动物源食品中四环素、土霉素、金霉素、多西环素残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。选用Na2EDTA-Mc Ilvaine缓冲溶液作为提取液,超声提取七种动物源食品中四环素类残留,C18固相萃取小柱净化,脱溶剂后用甲醇水溶解,在超高效液相色谱-串联质谱上进行检测。结果显示,猪肉、鸡肉、鸡蛋、鱼肉、牛奶中四环素类药物残留的最低定量限(LOQ)为10μg/kg,猪肾、猪肝最低定量限(LOQ)为20μg/kg,在定量限到2倍最大残留限量(MRL)的添加范围内,回收率为75%±25%,RSD10%,可以满足农业部235号公告的要求。     

土霉素在鸡蛋中的残留消除研究

研究临床使用常规剂量及养殖环节加大盐酸土霉素可溶性粉剂量后其在鸡蛋中的残留消除规律。对产蛋期蛋鸡分别给予500 mg/L和667 mg/L 50%盐酸土霉素可溶性粉,集中饮水给药,每日1次,连续5 d。分别采集停药后1～12 d的鸡蛋样品,采用UPLC-MS/MS测定鸡蛋中土霉素的残留量。按上述方法给药后,低、高剂量组分别在停药第1天和停药第2天达到土霉素残留量最高。低、高剂量组的最高残留量分别为142. 72、82. 84μg/kg,均低于国家规定的最高残留限量(200μg/kg),不会造成土霉素残留超标。本试验通过研究土霉素可溶性粉在鸡蛋中的残留情况,确定弃蛋期前后土霉素残留量,以期为蛋鸡产蛋期安全用药,保障食品安全提供科学依据。     

胶体金试纸条法和液相色谱-串联质谱法检测牛奶中四环素类药物残留比较

采用胶体金试纸条与液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）两种方法检测牛奶中残留的四环素类药物。结果表明：胶体金试纸条的检测限为四环素40μg/L、强力霉素40μg/L、金霉素40μg/L、土霉素80μg/L;LC-MS/MS法在牛奶中四环素、强力霉素、金霉素、土霉素的检测限为50μg/L。采用两种方法对实际样品检测,检测结果一致。与液相色谱-串联质谱法相比,胶体金试纸条具有操作简便、快速、直观的特点,可作为筛选法对样品进行定性筛查,LC-MS/MS法进行阳性样品的确证和精确定量。     

上海地区猪肉中磺胺类药物的残留检测及风险评估

通过超高效液相色谱串联质谱法检测猪肉产品中磺胺类药物的残留水平,评估上海市猪肉产品中磺胺类药物的残留风险。结果显示,上海地区共260份猪肉产品中检出残留,检出率为5.38%,猪肉产品中最高磺胺类药物残留量为135μg/kg,超过国家规定的最大残留限量(100μg/kg)。食品安全指数IFS值为2.52×10^-3,远远低于1,表明上海市猪肉产品中磺胺类药物的残留对人们的健康不会造成危害效应。     

固相萃取-高效液相色谱-二极管阵列检测器测定牛奶中土霉素、金霉素的残留量

土霉素、金霉素均属于四环素类药物，为广谱抗生素，对革兰氏阳性和阴性细菌、立克次氏体等均有抑制作用，在兽医临床上，这两种药物被广泛用于治疗奶牛乳房炎，因此极易残留于牛奶中，牛奶中残留的原型药物能与人体中的钙结合，导致人体钙流失，影响人体健康”。并且由于四环素类药物价格低廉，所以在畜禽饲养中被广泛用作饲料添加剂来预防动物疾病和提高饲料利用率，但食品动物中的药物残留会对消费者的健康造成危害，长期用药会产生耐药菌株。因此许多国家都对这两种药物实施例行监控，我国和欧盟规定牛奶中的四环素类药物总量不得超过100μg／l。笔者采用同相萃取、高效液相色谱法测定土霉素、金霉素残留量。     

ELISA法测定牛奶和鸡肌肉中四环素类药物残留

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了牛奶和鸡肉中四环素、土霉素、金霉素药和多西环素的ELISA检测方法。该方法对牛奶和鸡肉中四环素的检测限为7μg／L（μg／kg）左右。在牛奶和鸡肉中，4种四环素类药物100μg／L（μg／kg）浓度的添加回收率范围为43．6％～101．4％，批内变异系数小于25％，批间变异系数在30％以内。牛奶的临界值为39．5μg／L，鸡肉的临界值为35.3μg／kg。     

酶联免疫法测定牛奶中四环素类药物的残留量

四环素、金霉素、土霉素、强力土霉素等四环素类药物在牧业生产上有着广泛的应用,除作为治疗性药物使用外,还作为饲料添加剂应用于饲料工业生产上,这一切都不可避免地造成了在畜禽产品中的兽药残留问题,将对人们的健康造成严重威胁。若长期大剂量使用四环素类药物,将引起肝脏损伤以致肝细胞坏死,造成中毒并可能死亡。四环素类药物能够与骨骼中的钙结合,抑制骨骼和牙齿的发育,并且治疗剂量的四环素类药物可能具有潜在的致畸作用。为了调查我省牛奶中的四环素类药物的残留情况,云南省畜牧局委托我所抽检大理州的鲜牛奶250份,现将检测方法及结…