Molecular and physico-chemical evaluation of enzymatic browning of whole meal and dough in a collection of tetraploid wheats

Many studies have demonstrated the role of polyphenol oxidase (PPO; E.C. 1.14.18.1) in darkening of wheat products. Even slight browning of pasta is a major hindrance to consumer acceptance. The aim of this research was to evaluate the variability of PPO activity, browning level, and protein content in a collection of more than 100 genotypes of tetraploid wheat, including cultivars and landraces. A molecular approach was followed to evaluate the efficiency of marker PPO18, discovered and used in common wheat, in detecting tetraploid wheat genotypes with low browning level. The data showed a significant genotype influence on the activity of the PPO enzyme, which was correlated with brown index of whole meal and dough, and with protein content. On the whole, the cultivars showed lower PPO activity, brown index, and protein content than landraces, but wide variability was present. Marker PPO18 detected four different alleles for Ppo-A1. The allele Ppo-A1f identified genotypes with high PPO activity and brown index, while the Ppo-A1b and null alleles were associated with the opposite characteristics. Hence, this marker can be used to select new tetraploid wheat cultivars with low browning level.     

不同荔枝品种采后果皮褐变与多酚氧化酶关系的研究

以无核荔枝、妃子笑、紫娘喜3个荔枝品种为试材,研究了不同耐贮性荔枝品种果实采后果皮多酚氧化酶活性与果皮褐变之间的关系,结果表明,在相同贮藏阶段,3个荔枝品种中无核荔枝褐变指数最高,妃子笑次之,紫娘喜最低。不同处理条件下妃子笑、紫娘喜果皮PPO酶活性均呈先上升后下降的趋势,常温贮藏时无核荔枝果皮PPO活性逐渐下降,低温贮藏则先下降后上升再下降。果实贮藏前期,PPO结合酶、游离酶与总酶活性以无核荔枝最高,妃子笑次之,紫娘喜最低。新采收果实中,紫娘喜果皮PPO同工酶仅2条带,妃子笑3条,而无核荔枝有4条。不同处理对同工酶带数无影响,但低温减少了无核荔枝某些阶段果皮PPO同工酶带数。不同品种荔枝果皮褐变进程差异与果实贮藏前期果皮PPO酶活性差异及同工酶带数有关。     

蔬菜和水果中农药残留检测中的质量控制措施

在蔬菜和水果中农药残留检测分析过程中,由于分析的农药种类多且样品基质成分复杂,易对检测结果产生干扰,影响结果的准确性。结合新版《检验检测机构资质认定能力评价检验检测机构通用要求》(RB/T214-2017),从影响检测结果的“人”、“机”、“料”、“法”、“环”、“测”6个方面,对质量控制措施进行了分析和探讨。     

Chemical composition of indigenous wild herbs,spices, fruits,nuts and leafy vegetables used as food

Thirty wild fruits, nuts, herbs, spices and leafy vegetables were characterized and their chemical composition determined. Some of them were not only used for food, but for medicine in minor aliments by the natives. Results of the proximate analysis showed that on dry weight basis, the crude protein content ranged from 4.6 to 22.1 percent for spices and herbs, 3.2 to 43.1 percent for fruits and nuts, and 15.9 to 35.7 percent for leafy vegetables. The fat (ether extract) ranged from 7.5 to 36.0 percent for spices and herbs, 1.8 to 72.6 percent for fruits and nuts and 10.6 to 22.6 percent for leafy vegetables. Total carbohydrate content ranged from 34.6 to 71.9 percent for spices and herbs, 11.3 to 76.1 percent for fruits and nuts, and 24.6 to 51.4 percent for leafy vegetables. The wild fruits, nuts and leafy vegetables are high in ascorbic acid (Vitamin C.) Ascorbic acid content ranged from 18 mg/100 g dry sample to 113 mg/100 g sample for fruits and nuts, and 23 mg/100 g to 232 mg/100 g sample for leafy vegetables. The levels for peroxide value and free fatty acids (as percent oleic acid) of the spices are generally low indicating good storage stability of these plant materials. The flavour imparting essential oils (as percent oleoresin) content of the spices/herbs were fairly high and ranged from 0.1 to 5.2 percent.     

淮山中多酚氧化酶特性及无硫护色脱水工艺

酶促褐变是导致淮山脱水加工过程中色泽变化的主要原因。通过研究淮山中多酚氧化酶的最适pH 值、最适温度等主要特性,设计选取适当的非硫成分NaC1、VC、柠檬酸进行护色,通过正交实验得到一种安全有效的无硫复合护色液,即含质量分数0.7%NaC1、0.3%Vc、0.6%柠檬酸的水溶液。在脱水加工过程中,用该护色液对淮山片浸泡护色4h后,在65℃下干燥4.5h,得到与传统硫熏漂白同样好色泽的终产品。     

离子色谱法测定蔬菜水果中氯离子、亚硫酸盐、硫酸盐含量

确立离子色谱法同时检测蔬菜水果中氯离子、亚硫酸盐、硫酸盐含量的样品处理方法和检测条件。在2%甲醛溶液SO32-的稳定剂的作用下,样品用10 mmol/L氢氧化钠溶液提取后,用IonPacAS9-HC型色谱柱为分离柱和9 mmol/L的碳酸钠淋洗液为流动相,电导检测器进行分析。结果表明,Cl-、SO32-、SO42-在2～10μg/mL浓度范围内线性良好(其相关系数分别为0.9973、0.9999、0.9991),样品中Cl-、SO32-、SO42-的加标回收率分别为83.7%～99.2%、80.6%～98.4%、81.0%～100.4%,检出限分别为0.005、0.05、0.01 mg/kg。     

野生大豆接种大豆疫霉根腐病菌后多酚氧化酶(PPO)活性变化

以8个对黑龙江省大豆疫霉菌1号优势生理小种抗感性不同的野生大豆为材料,对接种大豆疫霉菌游动孢子后野生大豆根、茎、叶中多酚氧化酶( Polyphenol Oxidase,PPO)活性变化情况进行了初步研究.结果表明:抗病野生大豆根和叶中PPO活性在整个病程均比相应对照增加,茎中PPO活性在病程的大部分阶段高于对照,且根中PPO活性高于茎和叶的PPO活性增幅;感病野生大豆根和叶中PPO活性在病程的大部分阶段低于对照.     

钙处理对杨桃果实采后四种氧化酶活性的影响 `

通过ＣａＣｌ２溶液真空浸渗杨桃果实探讨不同浓度的Ｃａ处理对采后杨桃果实过氧化氢酶、多酚氧化酶、过氧化物酶和抗性血酸氧化酶活性的影响。结果表明：低浓度的Ｃａ自理不能有效抑制这４种氧化酶活性;高浓度的Ｃａ处理极显刺激这４种氧化酶的活性,适当浓度的Ｃａ处理能极显抑制这４种氧化酶的活性。     

茶多酚自然色变影响因子及其控制

茶多酚是一种天然抗氧化剂,因而它自己也容易氧化变色。在加工、贮藏过程中,如何防止产品的氧化变色,则是一个有待解决的问题。本研究就茶多酚自然色变影响因子及其控制方法进行了初步探索。１　茶多酚不同含量水平产品的自然氧化色变情况若将提取的茶多酚产品,其含量为３０％～５０％的称作ＴＰⅢ,含量在８０％以上的产品称作ＴＰⅡ,含量９０％以上称作ＴＰⅠ,试验表明,ＴＰⅠ、ＴＰⅡ中的茶黄素要比未经纯化的ＴＰⅢ提高７～９倍,茶红素提高２～３倍,茶褐素提高４倍。在放置过程中,茶多酚产品还容易潮解,其中的茶红素和茶褐素…     

乌龙茶做青期间多酚氧化酶、过氧化物酶的活性变化

以毛蟹的三、四叶梢为原料 ,通过对乌龙茶新工艺加工过程中多酚氧化酶 (PPO)、过氧化物酶(POD)的活性研究 ,发现在做青过程中 ,整叶的PPO活性、POD活性分别呈低→高→低和高→低→高的变化规律 ;整叶叶缘的PPO活性呈高→低→高的变化规律 ,POD活性呈低→高→低的变化规律 ;整叶叶芯的PPO活性、POD活性分别呈依次减弱和依次增强的变化规律     

小麦籽粒多酚氧化酶及其控制基因研究进展

小麦籽粒多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性是引起面制食品褐变的主要原因。目前常用测试小麦籽粒PPO活性的方法为邻苯二酚法和LDOPA法等。基因型和环境均对小麦籽粒PPO活性产生显著影响,但基因型是最为主要的决定因素。影响小麦籽粒PPO活性的基因主要位于2AL染色体上的PpoA1位点和2DL染色体上的PpoD1位点。目前,在PpoA1位点已发现7种等位变异类型,在PpoD1位点已发现4种等位变异类型,其中PpoA1b和PpoD1a类型表现出低PPO活性,而PpoA1a和PpoD1b类型则表现出高PPO活性。依据其序列特征,已经有PPO16、PPO18、PPO29和PPO33等多个籽粒PPO活性基因的功能性分子标记被开发,从而为以颜色为目标的小麦品质改良提供了有力的技术支撑。本文综述了小麦籽粒多酚氧化酶的检测方法及其遗传特征,并重点阐述了小麦籽粒多酚氧化酶的基因克隆、等位变异类型及其功能性分子标记研发情况,旨在为我国小麦品质改良及小麦籽粒多酚氧化酶活性的遗传研究提供一定的理论依据和有用信息。     

小麦高温抗条锈性表达与苯丙氨酸解氨酶和多酚氧化酶活性的关系

测定了小麦高温抗条锈性表达过程中小麦叶内苯丙氨酸解氨酶和多酚氧化酶的活性变化。结果表明,高温抗条锈性品种,在小麦高温抗条锈性表达过程中,接种寄主叶内PAL活性对高温非常敏感。在高温处理12h时PAL活性就很快增高,到24h就达到活性高峰,形成一个对高温敏感的特异峰,且该峰可以从高温处理12h持续到72h。小种专化抗锈性的PAL活性也较对照增高,但对温度处理没有明显的活性峰。多酚氧化酶在高温抗条锈性表达过程中变化与对照无明显变化。     

河南小麦新品种（系）的多酚氧化酶基因等位变异

为了解河南小麦多酚氧化酶的基因型和表型分布情况,以72份河南小麦新品种(系)为材料,进行了籽粒多酚氧化酶活性测试,并利用多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)基因的功能标记PPO18、PPO16和PPO29分别进行2A和2D染色体上Ppo-A1和Ppo-D1的基因型鉴定。结果表明,参试品种(系)中,具有等位基因Ppo-A1a(与高PPO活性相关)和Ppo-A1b(与低PPO活性相关)的品种(系)分别为52个和20个,分布频率分别为72.2%和27.8%;具有等位基因Ppo-D1a(与低PPO活性相关)和Ppo-D1b(与高PPO活性相关)的品种(系)分别为51个和21个,分布频率分别为70.8%和29.2%。在参试小麦品种(系)中发现四种等位变异组合Ppo-A1a/Ppo-D1a、Ppo-A1a/Ppo-D1b、Ppo-A1b/Ppo-D1a和Ppo-A1b/Ppo-D1b,分布频率分别为50.0%、22.2%、20.8%和7.0%。进一步分析不同基因型组合对小麦籽粒PPO活性的影响,4种基因型中,Ppo-A1b/Ppo-D1a类型的小麦籽粒PPO活性最低。拥有低PPO活性的河南小麦新品种(系)相对较少,因此,建议在小麦品质育种中加强对低PPO活性材料的选择。     

打顶对烤烟主要化学成分及多酚氧化酶活性的影响

为探讨烤烟品质的顶端调控措施,研究了不同打顶措施对烟叶多酚氧化酶活性和主要化学成分的影响。结果表明,与不打顶处理相比,打顶抹权明显促进了烟碱的合成以及在烟叶中的积累,有增加还原糖含量的趋势,能减少后期烟叶中钾素的流失,从而提高了上、中部叶的钾含量,有效提高了成熟期多酚氧化酶的活性。     

橄榄多酚氧化酶基因(PPO)克隆及其试管苗离体保存过程中的表达分析

以来源于橄榄成熟胚的橄榄试管苗为材料,进行PPO基因克隆,比较试管苗不同保存阶段PPO基因转录水平和PPO酶活性的变化。结果表明:克隆获得1个PPO基因全长cDNA序列,命名为PPO2,GenBank登录号为JQ319005,cDNA全长序列为1 934 bp,推测出橄榄PPO开放阅读框(ORF)1 818 bp,编码606个氨基酸。橄榄PPO2属于碱性、亲水、非分泌蛋白,可能定位于线粒体基质空间,具有3个典型的保守结构域,丝氨酸磷酸化占主导地位,并且二级结构以不规则卷曲为主。而三级结构预测表明,橄榄试管苗PPO2蛋白主要由α螺旋和不规则卷曲组成;进化树分析显示橄榄PPO蛋白与胡杨PPO关系最近,而与葡萄和莲的亲缘关系较远;qPCR分析显示,PPO2基因在橄榄试管苗不同保存阶段都有表达,但在橄榄试管苗保存1个月幼叶比较多时PPO2基因的表达量最高;而橄榄试管苗在分别保存1、2、3、4、5个月时PPO活性变化趋势不明显,当保存时间到6、7、8个月时PPO活性急剧增加。因此,PPO基因可能与幼嫩组织的启动分化有关,并在橄榄试管苗生长发育过程中发挥重要作用。     

小麦鲜面片色泽的影响因素研究

为了探讨小麦多酚氧化酶(PPO)活性对鲜面片色泽的影响程度,测定了52个小麦样品的鲜面片色泽、面粉色泽、蛋白质含量、硬度、黄色素含量以及PPO活性的差异.相关分析结果表明,鲜面片色泽主要与蛋白质含量、黄色素含量以及PPO活性有关.蛋白质含量是影响面片色泽L*值的重要因素,与面片放置0 h和24 h的亮度L*值呈极显著负相关,相关系数分别为-0.85和-0.64;黄色素含量与面片放置0 h和24 h的黄蓝度b*值呈极显著正相关,r分别为0.88和0.71,与放置0 h、24 h的红绿度a*值极显著负相关,r分别为-0.58和-0.44,而与L*值相关不显著;PPO活性与0 h鲜面片的L*值没有明显相关,但与24 h面片的L*值呈极显著负相关(相关系数为-0.44～-0.47),与面片放置24 h后L*值的下降值呈极显著正相关(相关系数为-0.45～-0.55).因此,鲜面片的初始亮度L*值与PPO活性无关,主要取决于蛋白质含量,放置24 h后的面片L*值既取决于蛋白质含量,也取决于PPO活性.     

104份甘肃小麦品种脂肪氧化酶和多酚氧化酶活性基因等位变异的检测

面粉和面制品的色泽是评价小麦品质的重要指标。小麦脂肪氧化酶(LOX)和多酚氧化酶(PPO)活性对面粉白度及面制品的色泽具有重要影响。为给甘肃省小麦品质育种提供参考依据,以104份甘肃省育成的小麦品种为材料,利用功能标记LOX16、LOX18、PPO18、PPO16和PPO29检测TaLox-B1、PpoA1及Ppo-D1位点的等位变异,分析甘肃小麦品种资源中LOX和PPO活性基因的组成和分布特点。结果表明,在甘肃小麦中,等位变异TaLox-B1a和TaLox-B1b的频率分别为22.12%和77.88%;其中,甘肃冬小麦品种高LOX活性等位变异TaLox-B1a的分布频率(30.56%)高于春小麦(3.13%)。等位变异Ppo-A1a、PpoA1b、Ppo-D1a和Ppo-D1b的频率分别为49.04%、50.96%、50.96%和49.04%;两个PPO基因的等位变异组合Ppo-A1a/Ppo-D1b、Ppo-A1a/Ppo-D1a、Ppo-A1b/Ppo-D1b和Ppo-A1b/Ppo-D1a的分布频率依次为28.85%、20.19%、20.19%和30.77%。说明在甘肃小麦品种中,低LOX活性等位变异(TaLox-B1b)品种比例较高;低PPO活性等位变异(Ppo-A1b、Ppo-D1a)品种分布比例略高于高PPO活性类型;其中,32份小麦品种在TaLox-B1、Ppo-A1和Ppo-D1三个位点同时含有高LOX活性和低PPO活性的等位变异。     

适制宁红茶茶树品种的可溶态和膜结合态多酚氧化酶特性比较

为探究适制宁红茶茶树品种多酚氧化酶（Polyphenol oxidase,PPO）的酶学性质,提高宁红茶茶黄素含量,以宁州群体种、宁州2号、大叶龙品种的一芽二叶鲜叶为试验材料,获取膜结合态多酚氧化酶（Membrane-bound polyphenol oxidase,mPPO）和可溶态多酚氧化酶（Soluble polyphenol oxidase,sPPO）粗酶,并进行酶学性质分析。以邻苯二酚为底物,3个茶树品种mPPO比活力均高于sPPO比活力,大叶龙mPPO比活力最高,为(542.59±25.13)U·mg^-1,宁州2号的sPPO比活力最低,为(112.57±14.01)U·mg^-1。mPPO最适反应温度在40~60 ℃,sPPO最适反应温度在30~50 ℃,宁州2号和大叶龙的mPPO最适反应温度最高均为55 ℃,宁州2号和宁州群体种的sPPO最适反应温度最低为35 ℃。sPPO最适pH值在7.00~8.50,有1个峰,而mPPO最适pH值在5.00~8.00,有2个峰,宁州群体种的sPPO最适pH值为8.00,宁州2号mPPO最适pH为5.50。mPPO和sPPO对二羟基酚有较强亲和力,其中宁州2号mPPO对邻苯二酚亲和力最强,催化效率最高。抗坏血酸对宁州群体种sPPO抑制效果最好,卤化物抑制剂对适制宁红茶茶树品种sPPO与mPPO活性均无抑制作用,EDTA对适制宁红茶茶树品种mPPO均有活化作用。适制宁红茶茶树品种sPPO和mPPO的热失活遵循一级反应动力学规律,大叶龙mPPO耐热性最好,热敏感性最差,对温度敏感性最弱,而宁州群体种sPPO耐热性最差,热敏感性最强,对温度敏感性最强。结果表明,不同茶树品种间sPPO和mPPO酶特性有一定差异,大叶龙品种mPPO比活力最高,耐热性最好,可为高茶黄素宁红茶加工提供合适酶源。