胆木愈伤组织与悬浮细胞培养研究

通过组织培养技术,利用胆木（Nauclea officinalis）种子无菌实生苗的茎段、叶片、叶柄等进行愈伤组织的诱导及悬浮细胞的培养。结果如下：（1）以WPM为基本培养基,获得愈伤组织高诱导率的激素种类及浓度为①0.5 mg/L 2,4-D、②0.5～1.5 mg/L IBA＋（0.0,0.5 mg/L）6-BA,诱导率达到100%;（2）在外植体的差异上,茎段和叶片出现愈伤组织的时间较早、增殖系数最大,可达15倍;（3）在培养基1/2WPM＋0.5 mg/L2,4-D＋30 g/L蔗糖中,继代周期为14～17 d,胆木细胞悬浮培养增殖率可达30.16%。     

马铃薯品种——庄薯3号试管苗愈伤组织诱导研究

为筛选适合高淀粉型马铃薯庄薯3号试管苗诱导愈伤的器官来源,以庄薯3号茎尖为材料,分别在3种培养基上进行愈伤诱导,比较接种后10d、20d的出愈率及愈伤组织外观。研究结果表明：在接种20d后3种培养基均可诱导出大量的愈伤组织,但以MS＋3mg／L2,4D＋0．20mg／LKT培养基上诱导产生愈伤速度快,颜色亮黄,外观疏松。     

马铃薯品种-秦芋31号试管苗愈伤组织诱导的研究

为筛选适合马铃薯品种秦芋31号试管苗诱导愈伤的器官来源,以秦芋31号茎尖为材料．在5种含不同浓度激素的培养基中进行茎段愈伤组织的诱导,研究两种植物激素（6-BA,KT）对秦芋3l号茎段愈伤组织的诱导效应,观察愈伤组织的生长状态,并对共诱导率进行统计。结果表明：秦芋31号茎段愈伤组织最佳诱导培养基为MS＋2．0mg／16-BA＋1．0mg／1KT,愈伤组织的诱导率可达63．3％。而高于2．0mg／1的激素浓度会产生体积过大、膨松、褐变的愈伤组织。     

马铃薯悬浮细胞培养

本文报道了马铃薯悬浮细胞系的建立，包括愈伤组织的诱导、继代培养；单细胞的分离及细胞悬浮培养；细胞团和愈伤组织的再形成以及植株的再生。     

茄子愈伤组织诱导及悬浮细胞培养（英文）

[目的]建立茄子愈伤组织悬浮细胞培养体系。[方法]以三月茄为试验材料,利用正交设计筛选适合茄子愈伤组织诱导、继代保存以及悬浮培养的培养基并测定悬浮培养过程中细胞生长状况。[结果]适宜茄子愈伤组织诱导的培养基为MS＋6-BA（0.2 mg/L）＋NAA（0.2 mg/L）;适宜继代保存的培养基为MS＋6-BA（0.2 mg/L）＋NAA（0.2 mg/L）＋KT（0.1 mg/L）;适宜悬浮细胞培养的培养基为MS＋NAA（0.4mg/L）＋6-BA（0.2 mg/L）液体培养基。茄子悬浮培养细胞生长呈S形曲线,其中前3 d为起始期,3~7 d处于对数生长期,7~8 d为静止期;8~11 d为衰退期。悬浮细胞密度随着培养时间的延长增长,在培养第7天达到最高值,约3.8×105个/ml.随后细胞数量迅速减少。起始期细胞活力最高。茄子悬浮细胞在MS＋NAA（0.4 mg/L）＋6-BA（0.2 mg/L）液体培养基上生长良好,其分裂指数最大达4.1%。[结论]茄子悬浮细胞培养体系为茄子生物技术研究提供了一条途径,可应用该体系进行遗传转化等方面的研究。     

人参胚愈伤组织诱导和悬浮培养的研究

[目的]建立一种从人参胚诱导愈伤组织并进行悬浮培养的方法,考察这种悬浮细胞的生长和人参皂苷积累情况。[方法]以人参胚为外植体,在添加了2,4-D3mg/L、NAA2mg/L和6-BA0.5mg/L的MS培养基上诱导愈伤组织。选取经8次继代培养的松散的愈伤组织在含有同样激素的液体培养基中进行悬浮培养。继代悬浮培养5次后测定悬浮细胞生长曲线,用高效液相色谱（HPLC）技术分析细胞中所含的人参皂苷。[结果]有活性的人参胚愈伤组织的诱导率为100%。用这种愈伤组织建立的悬浮培养体系生物量在21d内可增加1.5倍,悬浮培养物至少含有6种人参皂苷,其中Rb1、Rg和Re的含量较高,分别为细胞干重的0.44%、0.35%和0.37%。[结论]由人参胚诱导的愈伤细胞进行悬浮培养比较容易,生长良好,含有较丰富的人参皂苷。     

非洲菊胚性愈伤组织悬浮培养方法建立及其诱变条件研究

以紫罗兰绿心、洋红黑心、绿心黄瓣、鹅黄黑心的花托和花梗，白色黑心的叶片为外植体，在pH值为5．8、蔗糖30g／L和琼脂8g／L的条件下诱导愈伤组织，筛选出的最佳愈伤组织诱导培养基配方是MS＋6B—A1．0mg／L＋NAA0．2mg／L＋2，4-D1．0mg／L诱导出的愈伤转到MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L。适合非洲菊固体和液体培养基上愈伤增长的配方是MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L。20Cy的Co^60辐射剂量和0．1％（V／V）的EMS浓度是较适合的诱变剂量．可以作为半致死剂量进行下一步大批量愈伤组织的诱变处理，从中筛选耐寒或花色特异等突变体。     

花椒愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

以花椒试管苗叶片为试验材料,研究了不同激素浓度对花椒愈伤组织继代培养的影响,并以多次继代得到的疏松、活性高的愈伤组织建立花椒细胞悬浮系。结果表明:花椒愈伤组织最适继代培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂6g·L~(-1);花椒细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+葡萄糖30g·L~(-1),接种量0.05g·mL~(-1),摇床转速110r·min~(-1),25℃暗培养,该条件下悬浮细胞生长良好,最大生长量为4.52g;花椒悬浮细胞生长呈"S"型曲线,最适继代周期为16d。     

外源激素对马铃薯试管苗耐盐性的影响

以马铃薯栽培品种甘农薯2号试管苗为试材,研究了在0.4%、0.6%NaCl胁迫下外源激素GA3、6-BA、IAA对试管苗耐盐性的影响。结果表明:3种激素均对马铃薯试管苗受到的盐胁迫具有一定缓解作用,使盐胁迫下的试管苗叶绿素含量提高、脯氨酸和丙二醛含量降低,其中GA3和IAA提高叶绿素含量的效果显著,GA3降低脯氨酸和丙二醛含量的效果比6-BA和IAA明显。     

3种渗透调节物质对马铃薯试管苗生长和保存的影响

以“郑薯5号”马铃薯试管苗为材料,研究蔗糖、聚乙二醇( PEG6000)和甘露醇对试管苗生长和保存的影响.结果表明,3种渗透调节物质均能抑制试管苗生长,但不影响试管苗的存活率,其中40 g·L-1 PEG6000的抑制效果最好.采用RAPD标记研究发现,保存于添加90 g·L-1蔗糖,40 g·L- PEG6000和2...     

水分胁迫下马铃薯试管苗的生理响应

利用PEG-6000模拟根际水分胁迫法,对马铃薯试管苗进行了水分胁迫处理,研究马铃薯不同品种在不同水分胁迫程度下的生理反应。结果表明,马铃薯试管苗体内丙二醛(MDA)含量、脯氨酸(Pro)含量、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性与可溶性蛋白质含量在水分胁迫下发生了不同的变化。其中,在轻度水分胁迫(10%PEG)下各马铃薯品种可溶性蛋白含量均上升,脯氨酸大量积累,MDA含量急剧增加,POD、SOD、CAT活性上升;经重度水分胁迫(20%PEG)后,以上各指标变化趋势不一。马铃薯不同品种对水分胁迫的反应敏感程度不一致,这与其不同的抗旱能力有关。     

葡萄悬浮细胞系的建立

【目的】建立适合葡萄悬浮细胞系快速稳定生长的培养体系。【方法】以鲜食葡萄巨峰的果皮为材料,以B5为基本培养基,通过选择合适的激素配比及浓度、pH、蔗糖浓度等建立并优化葡萄愈伤组织培养体系及细胞悬浮培养体系。【结果】在B5+0.5 mg/L 6-BA+NAA条件下,NAA最适质量浓度为1 mg/L;在B5+0.5 mg/L 6-BA+2,4-D条件下,2,4-D最适质量浓度为1.0~2.0 mg/L;在B5+1 mg/L NAA+6-BA条件下,6-BA最适质量浓度为0.5~1.0 mg/L;在B5+2 mg/L 2,4-D+KT条件下,KT的最适质量浓度0.2 mg/L。在最佳蔗糖质量浓度30g/L、最适pH 5.5~5.8培养基条件下,建立了能快速生长的均一、稳定的巨峰葡萄细胞悬浮体系,优化了培养条件。【结论】适合葡萄愈伤组织生长的培养体系为:B5+250 mg/L水解酪蛋白+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L KT+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂;适合葡萄细胞悬浮培养的体系为:B5+1 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖和B5+250mg/L水解酪蛋白+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L KT+30 g/L蔗糖。     

植物试管苗玻璃化现象研究进展

玻璃化现象是普遍发生于不同植物组织、器官的组织培养中,影响它发生的因素较多,如微环境、基因型、内源激素、植株自身的生理状态等。从诸方面进行综述,并提出综合防治玻璃化现象发生的具体措施。     

几种外源激素对盐胁迫下草莓试管苗生长的影响

在组培条件下,研究了外源GA3、6-BA、IAA、IBA和NAA对盐胁迫下草莓试管苗生长的影响。结果表明:5种激素均可明显促进一定浓度盐胁迫下草莓试管苗的生长,使其株高增加,叶片数增多,芽分生率提高。其中0.5 mg/L GA3、1.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L IAA、0.5 mg/L IBA和0.5 mg/L NAA在各激素处理中效果最佳,GA3在5种激素处理中效果最明显。     

海南粗榧细胞悬浮培养体系的建立

以海南粗榧愈伤组织进行悬浮培养,考察了培养基、维生素、蔗糖浓度、pH值、接种量对海南粗榧细胞悬浮培养体系建立的影响,并利用HPLC技术检测海南粗榧悬浮细胞和培养基中生物碱的含量.结果表明:海南粗榧悬浮细胞系培养的最适条件:MS为基本液体培养基、添加蔗糖35 g/L+VB1 10 mg/L、接种量6％、初始pH值5.5～7.0;发酵过程中每5d调节pH值至6.0,有利于细胞的生长和产物的合成;细胞的生长呈“S”型曲线,细胞生长周期为30 d,产物含量在培养25 d时达到最大;细胞活力呈先急剧上升后缓慢下降的趋势.     

利用细胞和组织培养技术研究水稻抗稻瘟病机制

利用组织培养技术建立了水稻悬浮细胞和愈伤组织培养体系.用木聚糖酶激发子处理水稻悬浮细胞,引起细胞内过氧化氢和超氧阴离子含量迅速升高.木聚糖酶和稻瘟病菌提取物处理水稻悬浮细胞1h后,编码几丁质酶的基因Cht-1表达明显增加,而编码病程相关蛋白的PR10基因没有表达,但处理12 h,后者表达明显增加.用稻瘟病菌提取物和激发子木聚糖酶处理水稻悬浮细胞,均诱导水稻细胞合成樱花素--专抗稻瘟病的抗毒素.若用它们处理水稻愈伤组织,则引起组织褐化、生长量降低、密度下降.初步结果表明:水稻悬浮细胞和愈伤组织是研究水稻抗稻瘟病机制方便、合适的实验材料.     

植物生长调节剂对台湾金线莲试管苗增殖和生根的影响

为研究植物生长调节剂对台湾金线莲试管苗增殖和生根的影响,以台湾金线莲无菌试管苗为试验材料,首先研究了6-BA、6-BA＋NAA和6-BA＋IBA对芽增殖的影响,继而比较了NAA、IBA、NAA＋MET、IBA＋MET诱导生根的效果。试验结果：6-BA与NAA配合使用诱导芽增殖的效果最好,NAA与MET配合使用诱导生根的效果最好。试验表明,对于台湾金线莲试管苗而言,适合芽增殖的最佳组合及浓度为6-BA4．0mg／L＋NAA0．2mg／L,适合生根的最佳组合及浓度为NAA4．0mg／L＋MET0．5mg／L。     

小麦“5389”悬浮细胞系建立的条件摸索

以小麦"5389"的幼胚为外植体诱导愈伤组织,研究了培养基中2,4-D、KT、ABA及其配比对愈伤组织诱导和愈伤组织继代培养的影响。结果表明:以MS+2,4-D 3.0 mg/L培养基的诱导效果最好,出愈率最高达93.42%;在MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.1 mg/L培养基上进行继代培养获得松脆型愈伤组织,以MS+2,4-D1.0 mg/L+KT 0.1 mg/L培养基进行液体培养建立了状态良好的悬浮培养细胞。