酶联免疫吸附法检测猪肉和猪尿中莱克多巴胺残留

以莱克多巴胺单克隆抗体间接竞争酶联免疫吸附（ELISA）法测定猪肉和猪尿中莱克多巴胺残留。该法对莱克多巴胺的检测限为0.8ng/mL（g）,在空白组织中的添加回收率为80.4%～109.5%,变异系数为5.8%～12.6%。     

酶联免疫吸附法测定猪尿中莱克多巴胺残留的研究

用酶联免疫吸附法对猪尿中莱克多巴胺进行了残留检测,结果:该方法的最低检测限为0.92μg/L;50%抑制浓度的平均值为2.7μg/L;回收率在(65.2±3.9)%(～86.6±6.1)%,批内变异系数≤17.8%,批间变异系数小于≤15.6%。试验表明该方法可用于莱克多巴胺残留量的筛选检测。     

酶联免疫吸附法检测猪尿中的莱克多巴胺

莱克多巴胺（Ractopamine，RAC）属于β2-兴奋剂的一种，它作为饲料添加剂使用，能显著促进动物生长，增加饲料转化率和瘦肉率，已经被美国及其他一些国家批准作为猪的饲料添加剂。但包括RAC在内的β2-兴奋剂在我国及欧盟都被禁止在食品动物的饲养过程中使用。     

化学发光免疫分析法检测猪尿中莱克多巴胺残留

本试验运用化学发光免疫分析法（chemiluminescence immunoassay,CLIA）检测猪尿中莱克多巴胺（Ractopamine,RAC）的残留。检测限为0.01 ng/mL,检测范围为0.036～32.2 ng/mL。添加浓度分别为0.1、1、10 ng/mL,平均回收率为73.2%,批内平均变异系数为9.7%,批间平均变异系数为11.3%。而本研究所建立的化学发光免疫检测方法(CLISA)可以达到检测RAC残留的要求。     

化学发光直接竞争免疫分析法检测猪尿中莱克多巴胺残留

本试验研究建立了猪尿中莱克多巴胺（Ractopamine, RAC）残留的直接竞争化学发光免疫检测方法。合成了莱克多巴胺和辣根过氧化物酶的偶联物（RAC-HRP）,方法的检测限为0.09 ng/mL,空白猪尿中添加浓度为0.5、10和100 ng/mL RAC时,检测范围为0.3～157.0 ng/mL;回收率为76.3%～87.6%,批内变异系数为10.0%～12.2%,批间变异系数为14.2%～15.2%。     

三种ELISA法检测猪尿中莱克多巴胺的比较分析

在各种莱克多巴胺检测方法中，适合应用于大批检测样品的是ELISA方法。但目前市场上的大多数检测莱克多巴胺的试剂盒对猪尿样的检测会造成假阳性，有的假阳性率达到33.3％。本实验用三种不同厂家的试剂盒对15份猪尿样进行了检测，通过比较分析得出：对尿样的稀释可以有效的减少阳性的产生，在制备标准曲线时加入尿样背景也可以减少假阳性的产生。方法C的添加回收率在65％以上，可以比较准确的检测猪尿中的莱克多巴胺。     

反相高效液相色谱法测定猪尿中的莱克多巴胺

本文对猪尿中莱克多巴胺的高效液相色谱检测方法进行了优化,猪尿碱化后用叔丁基甲基醚提取莱克多巴胺,用硅胶柱净化;以乙腈-水-冰乙酸-辛烷磺酸钠为流动相,反相高效液相色谱荧光检测法进行测定,激发波长226nm,发射波长305nm,方法的检测限为10μg/L,定量限为50μg/L,回收率大于70%,变异系数小于10%。     

猪肾脏等组织中盐酸莱克多巴胺的HPLC检测方法及其残留消除

本研究建立了猪肝脏、肾脏、肌肉和脂肪中盐酸莱克多巴胺的高效液相色谱检测方法。方法的检测限为1ng/g,定量限为2 ng/g,肝脏的平均回收率在73.4%～83.2%,变异系数在2.1%～6.6%;肾脏的平均回收率在73.1%～95.5%,变异系数在3.8%～4.0%;肌肉的平均回收率在80.7%～82.5%,变异系数在4.9%～9.1%;脂肪的平均回收率在73.3%～78.8%,变异系数在2.9%～6.7%。对60头健康猪以18 mg/kg的剂量混饲给药28d,停药饲喂14 d。在给药7、142、8 d和停药1、2、3、7、9、14 d分别屠宰6头猪,取各组织进行残留量测定。结果显示：肾脏中残留量最高,肝脏其次,残留量在停药期间较给药期间显著降低。其中肾脏和肝脏中的残留量分别在停药14 d、停药9 d后降至定量限以下;肌肉和脂肪中的残留量显著低于肾脏和肝脏,给药28 d时,残留基本低于定量限;停药1 d时均低至检测限以下。     

气相色谱－质谱法测定猪尿中莱克多巴胺

建立了猪尿中莱克多巴胺的气相色谱-质谱（GC-MS）检测方法。样品经β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解,乙酸乙酯提取、盐酸溶液萃取,SCX固相萃取柱净化,N,O-双三甲基硅基-三氟乙酰胺（BSTFA）衍生化后进行气相色谱-质谱测定。结果表明,方法检出限为0.3μg/L,定量限为0.5μg/L,线性范围为10-500μg/L。在2、4、8μg/L三个添加浓度水平上,莱克多巴胺的平均回收率为85%-115%,批内、批间相对标准偏差均小于10%。     

猪尿液中莱克多巴胺残留量的测定——液相色谱串联质谱法

用移液枪准确吸取尿样本于离心管中,加入乙腈水,涡旋混合后超声。经PRi ME固相萃取柱净化,用45℃水浴氮吹至吹干。最后用流动相溶解定容,充分涡旋混合,过膜后用UPLC-MS/MS测定。结果显示具有良好的线性关系,相关系数r=0.999 13,加标回收试验的回收率及相对标准偏差等结果满足GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范-食品理化检测》的要求。本方法操作简便、高效,质谱条件及流动相梯度等一系列的条件设置合理,经质谱打碎后的定性定量离子辨识度高,有比较高的响应,检出限可满足实际检测需求,验证结果具有很好的准确度和精密度,是测定猪尿液中莱克多巴胺的一种可靠方法[1]。     

莱克多巴胺残留检测方法的研究进展

莱克多巴胺（RCT）是β-肾上腺素激动剂,能选择性激活支气管平滑肌的82受体,临床上普遍用于支气管哮喘治疗。RCT因具有营养再分配,促进蛋白质合成,增加胴体瘦肉率,提高饲料转化率的作用,随着克仑特罗等药物被世界各国禁止作为饲料添加剂使用,莱克多巴胺的非法添加日趋严重,而其残留对人类健康存在潜在的危害,被禁止或限定在畜产品生产中使用,但其检测方法与克仑特罗等其他β-兴奋剂相比较滞后。因此,建立有效的动物组织中莱克多巴胺的残留检测方法迫在眉睫。笔者从样品前处理、色谱分析法和免疫分析法三个方面对其检测方法进行了综述。     

莱克多巴胺药物残留的检测与监控

莱克多巴胺又称苯乙醇胺,与克仑特罗("瘦肉精")一样,都是β-兴奋剂类药物中的一员,属违禁药物.莱克多巴胺在动物体内的代谢机理与盐酸克伦特罗有相似之处,可以影响动物体内的营养分配,可有效地减少脂肪增长,提高瘦肉率.     

进口猪产品中莱克多巴胺残留的快速检测

应用经验证可靠的ELISA方法,对进口猪产品进行莱克多巴胺残留快速筛选检测,对ELISA检测阳性的样品采用色谱质谱联用分析方法进行确证检测。1330份猪产品的检测结果显示,采用ELISA方法检出阳性率达11．4％（152／1330）;对ELISA阳性样品采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC—MS／MS）或气相色谱-质谱方法（GC—MS）确证,阳性率达90．8％（138／152）。检测工作表明,综合运用快速筛选检验技术与确证检测技术可实现快速准确检测动物产品中莱克多巴胺残留,提高进出境检验工作效率。     

莱克多巴胺药物残留的检测与监控

莱克多巴胺又称苯乙醇胺,与克仑特罗（“瘦肉精”）一样,都是β-兴奋剂类药物中的一员,属违禁药物。莱克多巴胺在动物体内的代谢机理与盐酸克伦特罗有相似之处,可以影响动物体内的营养分配,可有效地减少脂肪增长,提高瘦肉率。     

不同解离方法对莱克多巴胺猪尿阳性样品的提取效果研究

采用同位素内标法和高效液相-串联质谱法对猪尿莱克多巴胺阳性样品进行三种不同解离处理方法比较试验。结果表明,三种方法差异明显,β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶在37℃酶解16 h效果最好,在60℃酶解2 h效果次之,0.1%高氯酸酸解提取效果最差。     

猪尿中β-受体激动剂多残留检测

<正>上个世纪80年代末,欧洲和美国就陆续宣布禁用"瘦肉精"-盐酸克仑特罗,但在90年代初却在欧洲许多国家都出现了多次严重的中毒事件,成为监控重点,但至今使用仍未绝迹,还演绎出10多种类似作用的β-激动剂类药物。目前,市场上已先后出现两种"瘦肉精"的替代品-莱克多巴胺、沙丁胺醇,对我国畜产品和饲料安全构成新的威胁。为了保障我国出口     

深圳市龙岗区生猪尿样中莱克多巴胺残留调查与分析

莱克多巴胺属于β-兴奋剂,在动物产品中残留量过高会危害人类健康,本试验采用酶联免疫法检测龙岗区屠宰生猪尿样中莱克多巴胺的残留,经检验辖区生猪102份样品全为阴性,非辖区生猪102份样品,6份阳性,阳性率达5.9%,分析并建议加强对莱克多巴胺的监管.     

莱克多巴胺单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

莱克多巴胺(RAC)*盐酸(Ractopamine hydrochloride),{(1R*,3R*)(1R*,3s*)-4羟基-a-[[[3-(4-羟丙基)-1-甲基丙基]氨基]甲基]苯甲醇·盐酸},分子结构式如图1所示,是一种属于双苯烷胺类的β-肾上腺素受体激动剂(简称β-激动剂),具有广泛的生理效应,常被用于支气管哮喘、支气管痉挛和产科疾病的治疗[1,2].当其用量为临床用量的5～10倍时,又是良好的营养重分配剂和生长促进剂[3,4].