甜叶菊叶片高频再生体系的建立

以“守田3号”甜叶菊叶片为外植体,研究了消毒时间、外源激素等因素对外植体成活率、不定芽的诱导、不定芽继代培养和生根的影响.结果表明:用0.1％的升汞处理3 min为最佳消毒方法,最佳的不定芽诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA-1.0 mg/L IAA+300 mg/L水解酪蛋白,平均诱导率为80％;最佳不定芽继代培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3 +4.0 mg/L KT;最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IAA,生根率为100％,所获得的再生苗生长健壮且移栽后成活率高,最终建立了甜叶菊最佳的再生体系.     

草地早熟禾高频再生体系建立

研究了草地早熟禾愈伤组织的诱导和分化的最适培养基,建立了早熟禾高频率的再生体系.结果表明:品种优异的胚性愈伤诱导率最高,其中含2.0 mg/L 2,4-D和0.2 mg/L6-BA的培养基处理胚性愈伤组织的诱导频率最大,可以达到65.26%.早熟禾品种肯塔基、午夜、优异与新哥莱德最适分化激素浓度与配比分别为6-BA 1.0 KT 0.2、6-BA 2.0 2,4-D 0.1、6-BA1.0 2,4-D 0.2、KT 2.0,愈伤组织分化率分别达到27.93%、52.38%、66.67%和60%.早熟禾再生芽在1/2 MS 0.2 NAA培养基上生根率可达到100%.     

苜蓿高频再生体系的建立

以10个品种苜蓿无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同培养基、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导率及分化率的影响。结果表明:国产苜蓿下胚轴外植体愈伤组织分化率最高;愈伤组织诱导最适培养基为MS盐+UM维生素+2mg/L 2,4-D+0.25mg/L KT+2g/L水解酪蛋白+6g/L琼脂+30g/L蔗糖;愈伤组织最适分化培养基为MS+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA;最适生根培养基为1/2MS。     

甘蔗近缘属斑茅组织培养高频再生体系的建立

以甘蔗近缘属植物斑茅的幼嫩叶片为材料,研究MS、SH、B5三种基本培养基和不同激素（2,4-D、NAA、6-BA）配比对斑茅愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选出斑茅细胞高频再生体系的最优培养基配方。研究结果表明,斑茅幼嫩叶片愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4-D 3.0 mg/L＋6-BA 0.4 mg/L为最适,愈伤组织继代培养基以MS＋2,4-D 3.0 mg/L为最适。在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,具有较强的分化能力。目的是建立斑茅组织培养的高频再生体系,为斑茅材料的细胞悬浮培养、染色体加倍和细胞融合等研究提供一定参考。     

紫罗兰再生体系的建立

本研究以紫罗兰(Matthiola incana R.Br)无菌苗的叶片、茎段为外植体,通过组织培养的方法诱导愈伤组织,并进一步诱导分化出芽及再生植株.结果表明,建立紫罗兰再生体系的最佳外植体为生长8～10d的无菌幼苗的子叶;愈伤组织诱导最佳培养基为MS 6-BA(0.5mg/L) NAA(0.5 mg/L)培养基;最佳分化培养基为MS 6-BA(2.0mg/L) NAA(0.1 mg/L)培养基;最佳生根培养基为1/2MS NAA(0.5 mg/L) C(0.05mg/L).     

甜瓜再生体系的建立

以‘鑫福999’甜瓜5 d龄无菌苗的子叶、下胚轴、真叶为外植体,研究了添加6-BA、IAA和2,4-D的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽的发生和丛生芽生根的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最适外植体为子叶,由子叶诱导的愈伤组织生长速度最快、品质最好、数量最多,最适愈伤组织的诱导培养基为MS+IAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L。最适宜诱导丛生芽的外植体为子叶,最适丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0 mg/L,最适生根培养基为MS培养基。     

紫花苜蓿组织培养高频再生体系的建立

以紫花苜蓿品种“甘农1号”的子叶为外植体,研究了不同培养基和不同浓度激素对紫花苜蓿愈伤组织诱导、分化及生根的影响.结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为NSH+2,4-二氯苯氧基(2,4-D)4 mg/L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.4 mg/L+3％蔗糖+0.7％琼脂;最佳诱导愈伤组织分化培养基为MS+2％蔗糖+0.7％琼脂;最佳诱导无根苗生根培养基为1/2MS+萘乙酸(NAA)0.2 mg/L+1％蔗糖+0.7％琼脂;再生植株适宜的移栽基质为营养土∶草炭∶蛭石=1∶2∶1.该研究建立了一个紫花苜蓿稳定的高频再生体系,为其作为转基因受体奠定了基础.     

薰衣草叶片高频再生体系的建立

 以薰衣草叶片为外植体进行了离体再生研究。结果表明: 叶片愈伤组织诱导最佳的培养基是MS + 2,4-D 0.1 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L, 诱导率高达100%; 液体悬浮—固体培养芽分化率达92.5% , 芽数/愈伤组织达6.6; 正交试验筛选出芽增殖最佳培养基为MS +NAA 2.0 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L + IAA 1.0 mg/L, 其增殖系数高达8.7; 在芽增殖培养基上可直接生根, 生根率达100%。     

金柑高效再生体系的建立

以金柑实生苗为试材进行试验,研究不同再生培养基和苗龄及不同暗培养时间对金柑不定茅再生的影响,建立一套高效稳定的金柑组织培养再生体系.结果表明:采用55 d苗龄的无菌苗上胚轴茎段在Ms+6-苄氨基嘌呤(6-BA)2.0 mg/L+а-萘乙酸(NM)1.0mg/L+激动素(KT)1.0 mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂(DH值5.7)再生培养基上,不经过暗培养直接转移至光/暗周期1 6 h/8 h条件下,为诱导金柑不定芽再生的最佳条件,再生率高达90%.     

桑树子叶节高频再生体系的建立

选用无菌培养10d左右的桑树幼苗,切取子叶节外植体。以MS培养基为基本培养基,对6-BA、IBA诱导丛生芽的适宜浓度进行筛选,并对诱导生根激素IBA、NAA的最适宜浓度进行了研究,通过直接的器官再生途径,建立了桑树子叶节高频再生体系。结果表明:诱导丛生芽最佳激素组合为2.0mg/L 6-BA和0.15 mg/L IBA;生根较适宜的激素为2.0mg/L IBA。     

橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)小橡胶粒子蛋白基因的克隆与表达分析

以橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)为试材,在茉莉酸处理的根转录组数据分析的基础上,采用PCR的方法克隆获得小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)基因。通过生物信息学分析研究了该基因的特征,并检测了该基因的时空和原核表达情况。结果表明:SRPP3蛋白分子质量24.431 kDa,理论等电点(pI)4.64,属于酸性蛋白,二级结构以β-折叠为主,具有REF保守结构域,属于REF/SRPP家族成员之一。系统进化树分析显示TkSRPP3基因与短角蒲公英同源性最近;时空表达分析表明,TkSRPP3基因在六月龄的根中表达最高,推测该基因可能与天然橡胶的合成有关。TkSRPP3原核表达最佳诱导条件为浓度1 mmol·L^-1 IPTG诱导表达6 h。该研究为深入了解REF/SRPP家族中SRPP3在天然橡胶中的作用提供了参考依据。     

薄皮甜瓜高效再生体系的建立

对"G24"和"甘甜一号"薄皮甜瓜材料5～7d苗龄的子叶、下胚轴、根尖、真叶以及不同6-BA浓度下不定芽诱导情况进行了研究,建立了高效稳定的再生体系并对生根以及移栽等条件进行了初步研究。结果表明:2份薄皮甜瓜材料在不定芽的诱导方面差异不大,"G24"不定芽的发生频率达到97.2%,"甘甜一号"为91.6%;最适宜作为甜瓜组织培养的外植体材料为子叶近胚轴端,其不定芽诱导率可达95%以上;不定芽诱导中最适6-BA浓度为1.0mg/L。     

盐胁迫对橡胶草生长及生理指标的影响

以橡胶草为试验材料,对不同程度盐胁迫处理(0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%NaCl)橡胶草生长及生理指标进行了比较分析,探讨橡胶草在盐胁迫条件下的生长发育特性。结果表明:橡胶草生长、发育对盐胁迫反应较为敏感,不同水平盐胁迫处理条件下,橡胶草植株形态、生理指标差异显著。橡胶草对盐胁迫的耐受极值为NaCl浓度0.5%,超过极值盐浓度,则橡胶草植株无法存活。橡胶草盐害程度与盐胁迫处理时间呈正相关,0.2%盐胁迫处理浓度是进行橡胶草苗期耐盐性鉴定和筛选的较适宜浓度。     

西瓜高效离体培养再生植株的研究

以"荣誉4010"西瓜为试材,研究了不同外植体类型、激素配比和苗龄对西瓜植株再生频率的影响。结果表明:以MS+BA 4.0mg/L+NAA 0.1mg/L为培养基,3d苗龄的子叶为外植体不定芽诱导率达96.7%,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.4mg/L,生根率可达100.0%。     

宁夏三个葡萄品种高效再生体系的建立

以宁夏葡萄产业中大量种植的3个葡萄品种为试材建立再生体系.采用花药、茎尖进行愈伤组织诱导,比较了3种葡萄用花药、茎尖培养诱导愈伤组织形成、分化、生根的必须培养条件,获得不定芽分化再生植株.结果表明:葡萄花药愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很低,几乎不能分化成苗;而茎尖愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很高,分化成苗率极高,达100％.B5培养基诱导宁夏葡萄茎尖愈伤组织和分化丛生效果最好;KT有利于愈伤组织分化;茎尖浓度以0.8～1.0 cm最好.     

朝鲜蒲公英生殖类型确定

利用根尖染 色体计数、人工授粉试验以及流式细胞仪检测等方法,确定朝鲜蒲公英为四倍体,人
工授粉试验表明朝鲜蒲公英生殖系统为兼性无融合生殖类型,无融合发生率为50% 左右;流式细胞仪 检测结
果表明种子细胞内存在3 种倍性水平2C∶3C∶4C。四倍体朝鲜蒲公英为兼性无融合生殖类型,胚乳自主发育。     

西瓜高效再生体系的建立

以优质小果型西瓜品种西173和小麒麟为材料,系统研究了以子叶为外植体的西瓜组培高效再生体系。结果表明:2个西瓜品种在不定芽和愈伤组织诱导上存在着较大差异,在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1的分化培养基上,西173不定芽诱导率最高达到92.6%,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1培养基上小麒麟不定芽诱导率最高达到89.7%;诱导出的不定芽丛伸长以MS+KT0.2mg·L-1培养基最佳;2个西瓜品种不定芽在MS+IBA0.2mg·L-1培养基上均获得了较好的生根效果。组培苗移栽后保持高温、高湿是移栽成活的重要条件。西瓜高效再生体系的建立为应用基因工程技术改良西瓜品质和提高其抗逆、抗病性奠定了基础。