猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型PCR程序优化及分子鉴定

猪接触性传染性胸膜肺炎（porcine contagious pleuropneumonia,PCP）又称坏死性胸膜肺炎,是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种高度接触传染性、致死性呼吸道传染病。以急性出血性纤维素性肺炎和慢性纤维素性坏死性胸膜炎为主要特征。各种年龄、性别的猪对本病均易感,急性者死亡率高,慢性者常能耐过。猪传染性胸膜肺炎放线杆菌有15个血清型,不同血清型之间没有或仅有较弱的交叉保护作用,这给猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的诊断防治和免疫预防带来了很大的困难。因此建立一种快速血清型分子鉴定方法尤为重要。为了快速、简便的建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型分子鉴定的方法,本研究所从临床发病疑似病例猪肺脏和气管中分离到的放线杆菌,首先经过血清型鉴定,确定部分血清型为2型,为了确定血清型鉴定的准确性,在此基础上,采用分子鉴定的方法,对这些菌株进行鉴定,确定分离到的11株菌为猪胸膜肺炎放线杆菌血清2型。这为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型分子鉴定及防治提供了理论依据,为今后临床血清型定型提供了一种简便方法。     

猪传染性胸膜肺炎的诊断和治疗

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种猪呼吸道传染病.因本病血清型较多,各血清型之间缺乏很好的交叉免疫保护力,故其诊断与防治都较为困难,近几年给养猪业造成了严重的经济损失.为此,本文重点在于阐述猪传染性胸膜肺炎的诊断和综合防治,进而为该病的防控提供参考和帮助.     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型PCR方法的建立及初步应用

为了建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,本研究根据胸膜肺炎放线杆菌从编码荚膜多糖的碱基序列设计1对引物,扩增特异性的720 bp核酸片段。结果表明,以APP为模板,均能扩增出与预期一致的1条720 bp核酸片段,所得PCR产物经测序,与Gen Bank已发表的胸膜肺炎放线杆菌血清型6型的同源性达99%以上。本研究建立了PCR检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,该方法的建立为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病的诊断和防治及鉴定提供了基础。     

猪传染性胸膜肺炎的诊断与防控

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种猪呼吸道传染病。因本病血清型较多,各血清型之间缺乏很好的交叉免疫保护力[3],故其诊断与防治都较为困难,近几年给养猪业造成了严重的经济损失。为此,本文重点在于阐述猪传染性胸膜肺炎的诊断和综合防治,进而为该病的防控提供参考和帮助。     

猪胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌的鉴别诊断及血清型鉴定

利用PCR技术、琼脂扩散试验、糖发酵试验和间接血凝试验(IHA)对野外分离到的可疑猪胸膜肺炎放线杆菌和副猪嗜血杆菌进行了诊断和血清型鉴定.PCR鉴定分离物HS1580为副猪嗜血杆菌,分离物HS1582为猪胸膜肺炎放线杆菌;生化试验表明分离物HS1581和HS1582为猪胸膜肺炎放线杆菌;血清型鉴定分离物HS1580不属于被检的14个血清型之列,HS1581为App血清15型,HS1582为App血清7型.试验结果表明,综合使用PCR等技术可快速、准确地对这两种传染性细菌进行鉴别诊断和血清型鉴定.     

胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素研究进展

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的一种呼吸道传染性疾病.根据荚膜多糖和脂多糖抗原表位不同,将胸膜肺炎放线杆菌分为15个血清型,不同血清型的菌株毒力大小不同,致病性也有强弱之别.研究发现与APP致病性有关的毒力因子包括荚膜多糖、脂多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白、溶血外毒素等,其中溶血外毒素是APP引起猪致病最主要的毒力因子,也是主要的保护性抗原.论文从猪传染性胸膜肺炎溶血外毒素的分子结构、致病机制、免疫原性几个方面对其进行综述,为获得以Apx为抗原制备减毒活疫苗提供参考资料.     

猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗研究进展

猪传染性胸膜肺炎(PCP)是猪的一种严重的呼吸系统疾病。目前,对该病的预防主要使用几个致病血清型的胸膜肺炎放线杆菌(App)全菌体灭活苗,交叉保护力差。亚单位疫苗采用多个血清型共有的免疫保护性抗原外毒素(Apx)及外膜蛋白,具有很强的交叉免疫保护效果,使用前不必检测病原血清型,全世界通用,大大降低免疫副反应,应用空间广阔。论文阐述了猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗的研究进展,为猪传染性胸膜肺炎的预防和控制提供参考。     

鲁西地区猪胸膜肺炎放线杆菌血清型多重PCR研究

本研究建立了鉴定猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清型的多重PCR方法,并对鲁西地区流行的APP血清型进行了鉴定.根据猪胸膜肺炎放线杆菌的外膜脂蛋白(OmlA)基因设计1对种特异性引物;并且根据血清1型、5型、7型荚膜多(cps)基因设计型特异性引物,建立检测血清1型、5型、7型的PCR方法.运用多重PCR对临床分离鉴定的89株APP进行血清型鉴定,结果表明建立的多重PCR检测方法特异性和敏感性良好,可作为猪传染性胸膜肺炎快速诊断和流行病学调查的重要手段.     

猪传染性胸膜肺炎的诊断与治疗

猪传染性胸膜肺炎是一种由胸膜肺炎放线杆菌侵入猪呼吸道而引起的传染性疾病,目前对该病进行防治的血清型较多,但不同血清类型之间缺乏良好的交叉保护性能。致使该病的防治存在一定的困难,影响猪体健康及猪养殖安全。为了进一步提升猪传染性胸膜肺炎的诊断和治疗成效,本文重点从猪传染性胸膜肺炎的流行病学特点、临床诊断、鉴别诊断,以及综合防治等方面进行深入研究,进而为该病的有效防控提供一些参考。     

常见猪病诊断与控制

第九讲猪传染性胸膜肺炎的诊断与控制 传染性胸膜肺炎是猪的一种重要呼吸道传染性疾病,其病原为猪胸膜肺炎嗜血杆菌(H.Pleuropneumonie),又叫猪胸膜肺炎放线杆菌(A.Pleuropneumoniae),各种年龄的猪均可感染,常导致生产性能下降,并能导致死亡.目前,猪传染性胸膜肺炎已成为各国集约化养猪场及散养户猪群的主要危害疾病之一,应当引起足够的重视.     

猪接触传染性胸膜肺炎的诊治

猪接触传染性胸膜肺炎（以下简称猪传染性胸膜肺炎）又称猪副溶血嗜血杆菌病,是由猪胸膜肺炎放线杆菌引起猪的细菌性呼吸道传染病。     

猪传染性胸膜肺炎的病例分析

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的一种高度传染性呼吸道疾病,又称为猪接触性传染性胸膜肺炎。分离自山东某养殖场的疑似病例,并对典型的疑似猪传染性胸膜肺炎病例进行放线杆菌的分离鉴定。分离到5株细菌为多形态、革兰氏阴性杆菌;生化试验鉴定结果表明所分离的上述5株菌株为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。文内介绍了猪传染性胸膜肺炎的发病情况以及药敏实验结果,为生产优质猪肉提供有效的理论支持。     

猪传染性胸膜肺炎及其综合防制

猪传染性胸膜肺炎，是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的一种高度接触传染性、致死性呼吸道传染病。本病病原为胸膜肺炎放线杆菌(APP)。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及应用

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的一种高度接触性呼吸道传染病,该病可给养猪业造成巨大的经济损失。为有效控制和确诊该病,根据报道的猪胸膜肺炎放线杆菌APXIV毒株的基因序列,合成了2对可扩增长度分别为442 bp和378 bp的特异引物,建立检测胸膜肺炎放线杆菌的巢式PCR方法。利用合成的引物在扩增猪肺疫巴氏杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌和大肠杆菌等细菌DNA时,结果均为阴性。用引物检测猪胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株可扩增出442 bp和378 bp的特异性条带。表明运用PCR法检测猪胸膜肺炎放线杆菌的特异性和灵敏性均较高,可作为猪传染性胸膜肺炎的快速诊断和流行病学调查的手段。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定

从柳州某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎病猪中分离到致病菌.通过对分离菌株的理化特性测定,鉴定为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,并用分离菌株制备了灭活疫苗,有效控制了菌株分离场的猪传染性胸膜肺炎病。     

洛阳某猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

为确定洛阳某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎的病原种类及其血清型,为其临床科学防疫和合理用药提供参考方案,本试验无菌采集了病猪肺脏等病料,采用病菌培养后形态观察、革兰氏染色、生理生化特性试验、PCR诊断等技术对病原菌进行实验室分离鉴定,通过基因测序和同源性分析方法对其进行确诊,通过动物攻毒试验和药敏试验分析分离菌株的致病性和耐药性,采用5对分型引物对分离菌进行基因分型以确定病原菌血清型。结果显示,分离菌2007菌落形态为光滑、透明、边缘整齐、圆形、隆起的小菌落,革兰氏染色特征为阴性杆菌且呈多型性,具有猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）的典型培养特征,且生化结果符合猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的生化特性。同源性分析结果显示,分离菌株2007与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株FJ848573.1同源性为99.4%,说明分离株2007是猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。动物攻毒试验结果显示,分离菌株2007对小鼠有强致病性。药敏试验结果显示,分离株2007对泰妙菌素、氨苄西林和头孢噻呋钠等高敏,对替米考星、红霉素、氟苯尼考等20种抗菌药完全耐药,对34种抗生素的耐药率高达76.5%,具有较强的多重耐药性。分离菌2007基因分型扩增到目的基因片段与血清型5型结果相符。本试验结果为发病猪场提出了解决该病的具体防治措施,并最终获得了良好的效果,为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌临床耐药折点的制定提供了一些参考。     

猪传染性胸膜肺炎的诊断与治疗分析

猪传染性胸膜肺炎是猪养殖过程中的常见疾病,其主要是由猪胸膜肺炎放线杆菌引起的呼吸道类疾病,成为制约猪养殖业的重要因素。为了降低猪养殖业的经济损失,应强化对猪传染性胸膜炎的有效诊断,通过对该疾病的有效诊断与病理分析,可为治疗工作的开展提供前提。为此,本文就猪传染性胸膜肺炎的诊断与治疗进行了分析与探究。     

利用菌落多重PCR对传染性胸膜肺炎放线杆菌进行血清分型

参照文献报道的传染性胸膜肺炎放线杆菌的特异基因合成5对特异引物,建立传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型分型的菌落多重PCR方法,结果为10株传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型参考菌株均扩增出了相应的预期片段,而支气管败血波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠埃希菌的扩增均为阴性。利用此多重PCR方法对41株传染性胸膜肺炎放线杆菌分离菌株进行血清型分型,结果所有菌株均扩增出了相应的特异片段,其中6株为1型,5株为7型,1株为5型,29株为9型。     

猪传染性胸膜肺炎的防制体会

猪传染性胸膜肺炎(APP)是近10多年才在我国发现的一种新病,病原最初为胸膜肺炎嗜血杆菌,后因通过辅酶I(NAD)同源学研究,与列里尔氏放线杆菌关系密切,故划入放线杆菌属中,现定为胸膜肺炎放线杆菌.     

一例猪传染性胸膜肺炎的治疗

传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的高度传染性呼吸道疾病,又称猪接触性传染性胸膜肺炎。以急性纤维素性胸膜肺炎和慢性局灶性坏死性胸膜肺炎为特征,急性型呈现高死亡率,本病的病原为胸膜肺炎放线杆菌。随着气候逐渐变冷,加之气候干燥、猪舍通风不良,我市郊区部分养殖户发生猪传染性胸膜肺炎。