副猪嗜血杆菌新疆株的分离及PCR鉴定

从新疆北疆6个规模化猪场的37例发病猪病料中分离到两株疑似副猪嗜血杆菌(HPs)。经形态染色镜检、培养特性、生化和部分生物学特性试验,初步鉴定为HPs。根据副猪嗜血杆菌特异性引物进行PCR扩增,结果均扩增出822 bp预期特异性条带,确定分离株为副猪嗜血杆菌。这是目前为止新疆地区首次分离到HPs。     

副猪嗜血杆菌病的流行病学调查

副猪嗜血杆菌是近年来危害我国养猪业最重要的细菌传染病之一,严重影响着我国养猪业的健康发展,为了解近年来我国副猪嗜血杆菌病的流行情况,我们对山东、河南、黑龙江、江西、辽宁、广东、陕西、四川等地区送检病料进行了副猪嗜血杆菌的分离、鉴定。试验结果表明,从2006~2009年送检的194个患病猪场发病猪的关节液、肺脏、脑组织、心血、鼻腔等病料进行检测,最终分离到47株副猪嗜血杆菌,分离率为24.2%;通过采用KRG(Kieletein-Rapp-Gabriedson)琼脂扩散方法对分离菌株进行血清分型鉴定,结果血清4型13株(占27.7%)、血清5型10株(占21.3%)、血清12型8株(占17%)、血清13型7株(占14.9%),表明我国副猪嗜血杆菌主要血清型是血清4型、血清5型、血清12型和血清13型。     

仔猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及耐药性检测

为了了解海南藏族自治州共和县规模化猪场中仔猪副猪嗜血杆菌分离株的流行情况及对常用抗菌药的耐药情况。本试验于2022—2023年采集海南藏族自治州共和县规模化猪场中患疑似副猪嗜血杆菌病的仔猪鼻拭子、关节液、胸腔积液、肺脏等病料,共计283份。采用细菌分离鉴定、PCR方法对采集的病料进行副猪嗜血杆菌分离鉴定,采用人工感染小鼠试验验证分离株的致病性,采用纸片扩散法(Kirby-Bauer,简称K-B法)检测致病性副猪嗜血杆菌分离株对临床中常用抗菌药的耐药性。结果显示：从采集的283份病料中分离到128株副猪嗜血杆菌,通过致病试验显示,91株副猪嗜血杆菌能引起小鼠不同程度发病与死亡,为致病性菌株;分离的91株致病性副猪嗜血杆菌对磺胺间甲氧嘧啶、阿莫西林、氨苄西林等6种药物的耐药率为85.7%以上,对其他药物的耐药率为3.3%～25.3%,本研究为该地区仔猪副猪嗜血杆菌合理用药及防控提供参考。     

江苏部分规模化猪场副猪嗜血杆菌病的调查与分析

为了调查江苏省规模化猪场副猪嗜血杆菌病的流行状况,以便采取有效的防控措施,试验采集江苏省18家规模化猪场的29份病料进行分离培养、形态观察、培养特性检验、生化鉴定、PCR鉴定。结果表明:分离出15株副猪嗜血杆菌;15株分离菌中血清1型5株,12型3株,4型和5型各2株,未定型3株;筛选出了3株强毒株;大部分菌株对头孢吡肟敏感,对其他抗生素均有不同程度的耐药。说明副猪嗜血杆菌病在江苏部分地区广泛流行,并有增长的趋势。     

浙江省副猪嗜血杆菌血清型调查及其潜在毒力相关基因分析

为了掌握浙江省近几年副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)的血清型流行情况,通过PCR扩增的方法来鉴定浙江省2010—2015年从113个猪场中分离鉴定的副猪嗜血杆菌血清型,同时检测6个可能与副猪嗜血杆菌毒力相关的基因(B14、D45、nha C、fhu A、hhd A、hhd B),并分析其与血清型的相关性。结果显示:浙江省副猪嗜血杆菌近几年的优势血清型为5/12型、4型、13型和14型,未检测到3型、9型、11型和15型;2010—2015年副猪嗜血杆菌的主要血清型流行趋势并未发生明显改变,部分猪场存在2种血清型菌株共感染现象;对潜在毒力基因的检测结果表明,D45基因在毒力菌株中出现的比例(82.4%~87.5%)高于其在无毒力菌株中的检测比例(50%);fhu A基因在强毒力菌株中的检测比例(55%)却低于其在中等毒力和无毒力菌株中的检测比例(70.6%~90%);其他4个毒力基因(B14、nha C、hhd A、hhd B)在所有菌株中均有较高的比例。提示:副猪嗜血杆菌潜在的毒力基因与血清型之间并没有明显的相关性。     

副猪嗜血杆菌分离与基因分型鉴定

本研究选择6个具有明显多发性浆膜炎等症状的猪场,从患猪肺支气管中分离获得6株副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs),采用RFLP-PCR针对tbpA基因进行基因型鉴定。结果显示,6个分离株属于4种不同的HPs基因型,证明我国HPs流行株存在多种基因型,采用PCR-RFLP分析副猪嗜血杆菌流行病学规律,具有实用意义。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及三价灭活疫苗免疫效力分析

副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道早期定植菌也是格拉泽病的病原体,给猪场带来较严重的经济损失。为了调查副猪嗜血杆菌血清型的流行情况,采用细菌分离培养、玻板凝集法及PCR方法,从广东、广西、山东、江苏、江西45个规模化猪场送检的疑似样品中共分离鉴定了34株副猪嗜血杆菌,其中6株(17. 65%)血清4型、9株(26. 47%)血清5型、8株(23. 53%)血清12型、4株(11. 76%)血清13型以及7株(20. 59%)未定型菌株。为了有效地防控副猪嗜血杆菌病的流行,以4、5、12血清型优势流行血清型制备3价灭活苗,用仔猪免疫/攻毒试验评价3价灭活疫苗免疫保护力。动物实验表明,该疫苗对副猪嗜血杆菌4型、5型和12型具有较好的免疫保护能力。     

辽宁地区副猪嗜血杆菌血清型的鉴定

为探明辽宁地区副猪嗜血杆菌菌株的血清型,先后从辽宁省的锦州、营口、沈阳、丹东、铁岭、阜新、抚顺、朝阳、葫芦岛等市县采集以多发浆膜炎、关节炎、脑膜炎以及急性死亡为主要特征病猪的病料样本236份,从被检的236份病料中分离到86株副猪嗜血杆菌菌株,最终有51株鉴定出副猪嗜血杆菌血清型,分别为:血清1型2株;血清4型5株;血清5型21株;血清12型3株;血清13型20株。通过本研究初步确定了辽宁省副猪嗜血杆菌主要优势血清型,为辽宁省规模化猪场制定副猪嗜血杆菌病的防控措施提供依据。     

重庆渝东部分地区副猪嗜血杆菌血清学调查与药敏试验

为了解重庆市渝东地区规模猪场副猪嗜血杆菌感染程度及药敏谱,采用流行病学调查及正向血凝试验对梁平县、万州区、云阳县30头及以上母猪规模的31个规模养猪场进行副猪嗜血杆菌血清学检测及实验室分离鉴定与药敏试验。结果表明,重庆市渝东地区养猪业规模化程度和养殖水平总体偏低;副猪嗜血杆菌血清学阳性率平均为19.2%;万州区、梁平县及云阳县三区县规模猪场副猪嗜血杆菌阳性率分别为22.22%、20.84%、16.67%;该地区规模猪场之间、三区县间及各区县内各规模猪场间副猪嗜血杆菌阳性率差异均不显著(P0.05)。分离的3株疑似副猪嗜血杆菌菌株对头孢类、粘杆菌素类高度敏感;对四环素类、喹诺酮类、青霉素类药品明显耐药。规模猪场用药习惯、种猪来源地及保健方案直接影响重庆渝东地区副猪嗜血杆菌的耐药谱。     

天津部分猪场副猪嗜血杆菌病与猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查

为了解天津部分猪场副猪嗜血杆菌病(HPs)和猪传染性胸膜肺炎(PCP)的流行情况,利用间接血凝试验对采自9个规模猪场的178份猪血清样品进行副猪嗜血杆菌抗体检测,对采自8个规模猪场的166份猪血清样品进行猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗体检测。结果表明:副猪嗜血杆菌阳性率为18.54%(33/178),其中断奶仔猪和保育阶段猪阳性率为23.58%(25/106);猪传染性胸膜肺炎的阳性率为21.08%(35/166),其中断奶仔猪阳性率为20.93%(9/43),育肥猪阳性率为27.66%(13/47),种猪阳性率为21.62%(8/37)。说明天津地区部分猪场的副猪嗜血杆菌病和猪传染性胸膜肺炎呈地方性流行。