液相阻断ELISA在口蹄疫病毒抗体水平检测中的应用

分别利用口蹄疫病毒Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法,对健康猪、牛、羊血清,O型、Asia-I型免疫血清,以及人工感染Asia-I型FMDV的猪、羊血清和人工感染O型FMDV牛血清进行了抗体水平检测,同时利用3ABC-I-ELISA对液相阻断ELISA方法所选的部分阴性血清进行了验证试验.结果显示:利用Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法筛选的阴性动物,在免疫和攻毒后,血清抗体水平显著升高,表明该法可完全用于口蹄疫阴性动物筛选及口蹄疫病毒抗体水平的检测.     

猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果比较试验

为了探索最佳的猪口蹄疫O型疫苗免疫程序和免疫质量,更好地防控重大动物疫病,我们对国家采购的猪口蹄疫疫苗进行免疫程序和免疫效果的评估。本实验采用液相阻断ELISA(Lp B-ELISA)的方法对猪口蹄疫O型疫苗免疫抗体水平进行检测。     

日照市猪A型口蹄疫检测与疫情风险分析

日照市近期对养殖场、屠宰场和无害化处理厂进行一次猪A型口蹄疫专项调查。实验室进行猪A型口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测和猪口蹄疫病毒荧光RT-PCR试验,结果表明,未发现猪A型口蹄疫病例,但存在诸多导致疫情发生的不安全隐患。     

济南市部分猪场口蹄疫抗体监测结果与分析

为了解济南市口蹄疫免疫效果,抽检了济南市的12个规模化猪场的血清样品370份,采用液相阻断ELISA方法对其进行O型口蹄疫抗体检测,其中313份免疫合格,免疫合格率为84.59%,检测结果表明济南市规模化猪场口蹄疫免疫效果良好,接种起到免疫预防的作用。     

两种口蹄疫O型抗体阻断ELISA检测试剂盒应用比较

为评估两种常用口蹄疫O型抗体检测试剂盒的性能差异,本实验室对2020年春季随机抽检的三家规模养殖场提供的60份猪血清分别用液相阻断ELISA和固相阻断ELISA两种试剂盒进行了检测,并比较了两种试剂盒检测结果的阳性检出率和符合率。结果表明,两种方法检测结果总符合率为91.67%,符合率高。在基层畜牧兽医部门日常定性检测中,推荐使用固相阻断ELISA检测试剂盒。     

乌鲁木齐地区牛口蹄疫O型Asia-Ⅰ型双价灭活疫苗免疫效果的检测与分析

[目的]研究乌鲁木齐地区牛口蹄疫O型Asia-Ⅰ型双价灭活疫苗的免疫效果.[方法]应用液相阻断ELISA法检测492份口蹄疫O型Asia-Ⅰ型双价灭活疫苗的免疫效果.[结果]免疫牛群对牛口蹄疫O型的平均免疫合格率为97.6％,对Asia-Ⅰ型的平均免疫合格率为97.7％.[结论]牛口蹄疫O型Asia-Ⅰ型双价灭活疫苗可以使免疫牛产生有效的免疫保护.     

2种口蹄疫O型抗体阻断ELISA检测试剂盒应用比较

为评估2种常用口蹄疫O型抗体检测试剂盒的性能差异,对2020年春季随机抽检的3家规模养殖场提供的60份猪血清分别用液相阻断ELISA试剂盒和抗体阻断(固相)ELISA试剂盒进行了检测,并比较了2种试剂盒的阳性检出率和符合率。结果表明,2种方法检测结果总符合率为91.67%,符合程度高。在基层畜牧兽医部门日常定性检测中,推荐使用抗体阻断(固相)ELISA检测试剂盒。     

海南某规模牛场口蹄疫强制免疫效果分析

口蹄疫是我国规定强制免疫的动物疫病。为了评价口蹄疫疫苗强制免疫疫果,本研究采用液相阻断ELISA法检测了海南儋州某规模牛场强制免疫口蹄疫疫苗三价苗前后的免疫抗体水平。结果表明:强免口蹄疫三价灭活苗21 d后,试验牛血清O型、A型和亚Ⅰ型抗体效价和免疫合格率均达到规定标准;O型和A型免疫效果优于亚Ⅰ型免疫效果,而且肌肉注射效果优于皮下注射效果。     

锦州市猪O型口蹄疫免疫抗体水平调查

在2013~2015年,从锦州市各猪养殖场共采集了20567份血清,应用口蹄疫O型液相阻断ELISA实验方法,进行抗体监测,结果为2013~2015年养殖场整体抗体合格率86.48%,表明,锦州市本地养殖场猪口蹄疫抗体水平整体比较高,并有逐年上升的趋势。     

液相阻断ELISA在奶牛A型口蹄疫抗体水平检测中的应用

用液相阻断ELISA(酶联免疫吸附试验)方法对奶牛进行A型口蹄疫抗体水平进行调查,液相阻断ELISA方法在现实应用中对亚洲I型口蹄疫已经成熟,用同样的方法对A型口蹄疫抗体检测,探寻奶牛体内抗体消长规律,制定合理的免疫程序,从而指导奶牛A型口蹄疫的免疫。根据以往免疫经验来看,结果发现90日龄首免后,抗体滴度开始回升,免后21d回升到最高1:324(1:128),之后开始下降,28d后免疫抗体滴度回落至1:204,说明首免抗体维持时间较短,需要进行2免,2免后免疫抗体保护率可维持4个月,再进行3免,抗体滴度又很快回升,且维持较长时间。说明A型口蹄疫间隔28d进行2免,再间隔4个月进行3免,以后每隔4个月免疫1次。适时地加强免疫有利于牛群抵抗A型口蹄疫;FMD疫苗对育成、青年和成年期都有理想的免疫效果。     

从兽医化验员技能竞赛分析ELISA试验注意事项

2020年,山东省动物疫病预防与控制中心举办了兽医化验员技能竞赛,由全省16个市选拔16名兽医化验员参加竞赛,口蹄疫液相阻断酶联免疫吸附试验(ELISA)作为其中的一项技能操作进行,从考核过程和检测结果看,技能竞赛基本能反应选手的操作水平和技术能力,选手基本掌握ELISA检测技术,但也存在一些细节性的问题需要改进。     

某规模化牛场口蹄疫免疫抗体水平检测及分析

为了解某规模化牛场口蹄疫病毒(FMDV)的抗体水平及疫苗的免疫效果,本研究应用液相阻断ELISA检测技术对2012—2015年出生牛的380份血清进行A型FMDV和O型FMDV的抗体水平检测。结果表明,该牛场A型FMDV和O型FMDV的抗体阳性率分别为74.7%、85.5%,整体免疫水平偏低。     

三种猪O型口蹄疫免疫抗体检测方法的比较

为了评价猪O型口蹄疫抗体不同检测方法的相关性和特点。随机选择3个规模化猪场,每个猪场采30份猪血清,分别采用正向间接血凝、阻断夹心ELISA、间接ELISA三种方法进行O型口蹄疫免疫抗体检测。结果显示采用正向间接血凝法检测的免疫抗体合格率显著高于两种ELISA方法(P<0.05);两种ELISA方法检测结果差异不显著(P>0.05),且具有良好的相关性。     

A型口蹄疫病毒VP1蛋白间接ELISA检测方法的建立

以原核表达经纯化复性制备的A型口蹄疫病毒(FMDV)VP1蛋白代替传统病毒抗原包被,建立快速、安全、有效的A型FMDV抗体ELISA检测方法。对前期制备的A型VP1蛋白进行Western-Blot检测,结果表明,VP1蛋白能够特异性识别A型FMDV阳性牛血清,可作为检测抗原建立检测A型FMDV抗体的方法。以最佳质量浓度1mg/L VP1蛋白为检测抗原,方阵滴定法确定最佳检测血清稀释度为1∶50[V(血清)∶V(封闭液)],最佳的酶标二抗稀释度为1∶2 000[V(酶标二抗)∶V(封闭液)],建立A型FMDV抗体ELISA检测方法。该方法的敏感性为94.32%,特异性为99.09%,批内与批间重复试验变异系数均小于8%。采用该方法检测201份临床血清,与液相阻断ELISA试剂盒的符合率达92.54%。研制的VP1-ELISA试剂盒特异、敏感、稳定、操作简便,可用来监控A型口蹄疫抗体水平。     

安徽部分地区主要猪病血清学抗体检测

从安徽省部分地区种猪场种猪、规模化养殖场商品猪及散养猪随机抽取采集的血清样品,共计3242份,分别对其进行了猪瘟、口蹄疫和高致病性猪蓝耳病的免疫抗体检测。用阻断ELISA方法检测猪瘟抗体;用液相阻断ELISA方法检测猪口蹄疫抗体,用ELISA方法检测高致病性猪蓝耳病抗体,结果表明,猪瘟、口蹄疫和高致病性猪蓝耳病的免疫抗体合格率分别为85.07%、78.01%和88.86%;3种免疫抗体均合格的样品数为2224份,占所检样品总数的68.60%。说明当前安徽省猪群总体免疫效果较好,血清抗体能够达到有效保护水平,但仍存在猪只个体发生主要猪病的风险。     

A型口蹄疫病毒VP1蛋白竞争ELISA检测方法的初步建立

用纯化的融合蛋白p GEX-6p-1-VP1作为包被抗原,4E12单抗为检测抗体与待检血清竞争固相抗原,建立了单抗竞争ELISA方法来检测口蹄疫A型抗体,并进行了反应条件的优化,确定阴阳临界值。结果表明,抗原最适包被浓度为0.625μg/m L,待检血清稀释度为1∶2,单抗最大稀释度为1∶400,酶标抗体工作浓度为1∶5000,封闭液、待检血清和单抗作用时间分别为60、60、45 min;阴阳性判断抑制率(PI)≥30%为阳性。与液相阻断ELISA检测试剂盒比对,符合率为84.8%。试验表明,建立的单抗竞争ELISA检测方法具有特异性强、稳定性好等优点,可用于口蹄疫A型血清抗体的检测,这为口蹄疫A型免疫抗体水平检测、疫情监控及流行病学调查提供了技术平台。     

浅谈猪口蹄疫3ABC检测试剂盒的应用价值

口蹄疫是一种严重威胁偶蹄动物的急性烈性传染病,由于该病感染率高,传播速度快,对畜牧业危害极大,为有效控制口蹄疫疫情的发生,农业部将其列位强制免疫动物疫病病种. 免疫抗体效价检测是科学评定免疫质量的有效手段.抗体检测方法很多,多数情况下采用的是无生物安全要求的血清学诊断技术,如正向间接血凝试验、液相阻断ELISA,正向间接血凝试验存在较大主观偏差,不能保证其结果的正确性;液相阻断ELISA试验特异性强,灵敏度高,结果判定客观稳定,但无法准确区分免疫动物和野毒感染动物.因此,找到一种早期的鉴别诊断方法,可以准确、快捷鉴别出口蹄疫野毒感染猪和用灭活疫苗免疫猪,是掌握动物免疫密度和免疫质量的有效方法,是防治口蹄疫的一个重要举措.     

猪群口蹄疫免疫抗体跟踪监测报告

猪群免疫牛口蹄疫AsiaI-O型双价灭活疫苗,采用正相间接血凝试验和液相阻断ELISA方法对511份生猪血清进行AsiaI和O型口蹄疫血清抗体跟踪监测。结果:生猪群AsiaI的IHA抗体水平较低,不能对猪群起到有效保护;O型FMD抗体水平较高,在免疫后4个月内的IHA效价均保持在较高水平。     

液相阻断ELISA在口蹄疫抗体检测中的应用

用液相阻断的方法检测郎溪县某家庭农场羊群经O型口蹄疫灭活疫苗免疫的湖羊血清214份,经过检测抗体阳性血清208份,抗体保护率为97.2%。     

贺兰县奶牛O型口蹄疫免疫抗体水平监测与分析

口蹄疫是由口蹄疫病毒（FMDV）感染引起的一种急性、热性、高度接触性的动物疫病,被国际兽医局（OIE）列为A类传染病之首．本试验采用液相阻断酶联免疫吸附试验（LPR-EIJTSA）方法对贺兰县周边地区的180份奶牛血清抽样样本进行了口蹄疫0型抗体的检测．监测结果显示免疫抗体合格率达80％,表明贺兰地区的奶牛0型口蹄疫免疫效果较好．