猪链球菌鉴定方法的研究进展

猪链球菌是一种重要的人畜共患病病原,现已对我国部分省市的养殖业产生了巨大的影响。该菌血清型众多,生化特征变化较大,鉴定困难。本文就其中几种鉴定方法,如生化鉴定、血清学鉴定、分子水平鉴定等方面进行了综述。     

贵州省猪链球菌的分离鉴定

贵州某养猪场发生一种以颈部淋巴结脓肿为特征的慢性疾病，通过对送检病料进行病原菌的分离纯化、培养特性观察、生理生化鉴定为动物感染试验，确诊该病是由粪链球菌引起的猪链球菌病。     

猪链球菌2型和小鼠巨噬细胞的相互作用显微观察

猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种重要的人兽共患传染病病原体。主要引起人和仔猪脑膜炎、心内膜炎、关节炎、肺炎和败血症等。本试验选Balb/c小鼠为试验动物,腹腔接种SS2,接种后第2、4、6、8 h分别取巨噬细胞,姬姆萨染色,光镜观察SS2和巨噬细胞的相互作用。发现巨噬细胞发生显著形态改变:胞质嗜酸红染,有吞噬颗粒;有的细胞膜颗粒样,细胞核浓缩;胞膜边界模糊不清,胞核结构消失;有的巨噬细胞碎裂成残片;有的细胞融合成细胞团。结论:巨噬细胞不能有效吞噬清除SS2,而是SS2导致巨噬细胞损伤。     

猪链球菌的分离鉴定和药敏试验

本文对来自龙口市不同乡镇的疑似猪链球菌病的病料进行采集,对细菌进行分离培养,运用生化试验和血清学两种方法对分离出的细菌进行鉴定,并对鉴定出来的链球菌进行药敏试验。试验结果表明其形态、染色、培养及生化特性均符合链球菌的特征。该分离菌株对氨苄西林、头孢他啶、万古霉素、头孢氨苄、克林霉素、恩诺沙星高度敏感,对多黏菌素、环丙沙星、卡那霉素中度敏感,对红霉素、青霉素低度敏感,而对土霉素、四环素、强力霉素、复方新诺明有明显耐药性。由此可见,分离出的链球菌对不同药物的敏感性存在显著差异。本文通过对疑似猪链球菌病的病料进行分离和研究鉴定,旨在了解生猪中猪链球菌的分布情况和现状,为防控该病提供理论依据。     

猪链球菌的分离鉴定

对禾自锦州市的疑似猪链球菌送检病料进行分离，结合培养特性和生化试验鉴定为猪链球菌，经血清学试验进一步鉴定为猪链球菌1／2及2型混合感染。毒力试验结果：病原株对小鼠有致死性；药敏试验结果：猪链球菌对头孢菌素敏感，对洁霉素和卡那霉素中度敏感，而对土霉素、链霉素、青霉素和庆大霉素不敏感。     

猪链球菌的分离与鉴定

文章对分离的4株猪源链球菌进行了鉴定，其形态，染色、培养及生化特性均符合链球菌的特点。用链球菌乳胶分型诊断液检潮上述分离株，均不在其检测范围，即不属于链球菌兰氏分群的A-G群，但它们凝集猪链球菌2型抗血清。分离株对小鼠不致病，而对家兔则可致病。     

猪链球菌的分离与鉴定

对16份猪场病猪病料进行病原菌分离、血清学鉴定、致病力试验、保护力试验、细菌回收试验、药敏试验,结果表明,该病原菌为II型猪链球菌,引起关节炎的猪链球菌较引起败血症的猪链球菌致病力弱;该菌对头孢菌素、青霉素高度敏感。     

广西猪链球菌的分离与鉴定

从2002年开始,先后在柳州、贵港、桂平、玉林、合浦等地的多个猪场采集病料,分离到30株疑似猪链球菌的菌株,经对分离菌株的理化特性测定, 动物接种试验等,鉴定主要为C、D、ET和L血清群.     

一株猪链球菌的分离与鉴定

从疑似发生猪链球菌病患猪的肺脏和淋巴结中分离到1株细菌。该细菌经形态学观察、培养特性、溶血试验、生化试验和动物试验鉴定为偏向厌氧型链球菌。该菌株对小白鼠存在致病性。药敏试验表明：分离菌株对阿莫西林和先锋V高度敏感,对菌必治、呋喃妥因、磺胺类药中敏,对青霉素、链霉素、卡那霉素和恩诺沙星等药物不敏感。     

四川省猪链球菌的分离与鉴定

从41份病、死猪病料中分离到SC1-SC19 19株细菌,结合培养特性和生化特性鉴定为猪链球菌,通过玻片凝集试验,用猪链球菌2型阳性血清将最初分离出来的4株菌（SC1-SC4）鉴定为猪链球菌2型。同时还进行了动物试验和药敏试验,为及时有效地控制疫情提供了科学依据。     

猪致病性链球菌的分离鉴定

采集33例临床症状疑似猪链球菌感染猪的全血及内脏器官进行涂(触)片染色镜检,取有球菌感染的样品16份进行血琼脂平板分离纯化试验;根据血琼脂平板上菌落形态、溶血情况及对单个菌落涂片染色镜检结果,共筛选出12份可疑样品,进一步采用液体培养基对12份样品进行增菌及纯化培养;选取纯化培养菌进行链球菌生化试验,结果共鉴定出11株纯化的猪链球菌;11株猪链球菌均对小鼠表现出高致病力.     

育成猪对猪链球菌的免疫应答

取 7周龄长大杂交猪 12头 ,随机均分为试验组和对照组。试验组按每公斤体重 4.5亿个菌腹部皮下接种猪链球菌 C551 2 6复制猪链球菌病 ,接种后 0、7、14、2 1、2 8d,自前腔静脉采血 ,计数红、白细胞总数和白细胞分类 ,用硝基蓝四氮唑 (NBT)还原试验定量检测嗜中性粒细胞吞噬功能 ,噻唑蓝 (MTT)比色法检测外周血中淋巴细胞转化 ,单向免疫扩散法测定血清 Ig G浓度 ,5 0 %溶血试验测定血清中补体总活性 ,同时 ,用植物血凝素 (PHA)皮肤试验检测迟发型超敏(DTH)反应。结果表明 ,接种后 7d开始 ,试验组白细胞总数升高 ,接种后 14d嗜中性粒细胞百分含量低于对照组 ,淋巴细胞百分含量则升高 ;嗜中性粒细胞还原硝基蓝四氮唑 (NBT)能力均极显著高于对照组 (P<0 .0 1) ,PHA诱导的淋巴细胞转化则极显著降低 (P<0 .0 1) ,DTH只在接种后 2 1d显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,血清中 Ig G总量接种后 7d降低 (P<0 .0 5 ) ,14d却极显著升高 (P<0 .0 1) ,此后恢复正常 ,血清补体总活性只在接种后 7d降低 (P<0 .0 5 )。可见 ,猪对猪链球菌的免疫应答除了常见的抗原抗体反应外 ,还表现在免疫细胞数及其功能的变化 ,以及补体活性的改变。     

快速鉴定猪链球菌和马链球菌兽疫亚种双重PCR方法的建立

本试验旨在建立一种快速、特异、敏感的双重PCR鉴定猪链球菌和马链球菌兽疫亚种病原检测方法。根据猪链球菌GDH蛋白和马链球菌类 M 蛋白的基因保守区分别设计引物,优化了该双重PCR检测方法的引物浓度及比例,并筛选了其最佳退火温度;用该双重PCR反应体系以其他几株阴性菌株为对照,检测了该反应体系的特异性。以新鲜培养的猪链球菌倍比稀释后进行菌落计数,对该检测方法的敏感性进行了鉴定。M-like和GDH引物的加入量均为1 μL(20 pmol/L),最佳退火温度为52.3℃;该双重PCR反应体系有较高敏感性,检测马链球菌兽疫亚种和猪链球菌的敏感度分别达100和10 CFU;特异性试验结果显示,常见的5种病原菌在该双重PCR体系中无特异性条带出现;临床应用该方法分离鉴定了1株猪链球菌和2株马链球菌兽疫亚种。本试验建立了一种能同时检测猪链球菌和马链球菌兽疫亚种的双重PCR方法,且该方法应用快速、特异且敏感。     

一株猪源链球菌的分离鉴定及生物学特性研究

从送检的一份疑似链球菌病病死猪病料中分离出1株细菌,通过对分离菌株进行细菌的培养特性、生化试验、玻片凝集试验及PCR分型鉴定,确定为2型猪链球菌,动物致病性试验表明,1×10⁸ CFU/mL的剂量可致死小白鼠,对该分离菌株的毒力因子进行PCR检测发现,溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(ef)和溶血素(sly)均为阳性。此菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。     

猪链球菌2型的分离鉴定及致病性试验

从全国部分猪场采集疑似猪链球菌感染病例脑样品20份进行细菌分离,成功分离到10株细菌,通过猪链球菌及血清类型鉴定,最终确定其中一株为2型猪链球菌。应用猪链球菌7种主要毒力因子特异性基因扩增检测方法检测所分离到的2型猪链球菌的毒力因子分布情况,并应用小鼠攻毒试验对其致病性进行观察研究。结果表明:分离的2型猪链球菌具备7种毒力因子;动物试验表明SS2能引起小鼠的急性败血症及脑膜炎;细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠的脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且能分离出攻毒菌。此分离菌株的研究为研制2型猪链球菌病疫苗奠定了基础。     

猪链球菌病研究进展

猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人兽共患病病原体,能够引起猪的疫病,人类感染该菌可导致脑膜炎、败血症,甚至死亡.该菌对养猪业造成严重经济影响,对公共卫生事业构成巨大威胁.由于猪链球菌血清型较多,抗原结构复杂,在临床上又可呈现不同的症状,如败血症、脑膜脑炎、心内膜炎、肺炎、化脓性淋巴结炎、关节炎等,还常常与其他疾病发生合并感染.近几年来,该病的发病率和死亡率有逐年上升趋势.链球菌的致病性已引起临床工作者和科研人员的广泛关注和重视,国内外许多学者对猪链球菌做了大量的研究工作,已发现的猪链球菌2型的致病因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、细胞外因子、蛋白质片段和IgG结合蛋白、溶血素等.     

湖南省猪链球菌的分离与鉴定

从病猪脏器病料中通过细菌培养、生化试验分离鉴定出了121株猪链球菌.经PCR技术鉴定马链球菌兽疫亚种28株,占23.1%,猪链球菌24株,占19.8% ,其中猪链球菌2型4株,占3.3%,猪链球菌9型2株,占1.7%,猪链球菌1型和7型都没检测到,证实省内除了猪链球菌2型外,也存在其他血清型的猪链球菌.     

致仔猪脑膜炎猪链球菌的分离鉴定

旨在从脑膜炎症状仔猪的脑组织及其他脏器中分离鉴定病原菌。采集患病仔猪脏器分离病原,通过PCR及血清凝集试验鉴定其种属及血清型;透射电镜观察分离株的超微结构;经多序列位点分型分析,鉴定其ST型;通过测定最小抑菌浓度分析其耐药性;经小鼠攻毒试验分析其毒力。结果:最终从患脑膜炎仔猪的脑组织中分离到一株猪链球菌,血清型为9型,将其命名为WH1609。电镜结果显示WH1609有荚膜结构。多位点序列分型结果表明WH1609属于一个新的ST型。耐药性试验结果表明WH1609对多种抗生素耐药;对万古霉素、青霉素及氨苄西林敏感。BALB/c小鼠毒力试验测得LD50为1.89×10~2 CFU·mL^-1,病理组织学观察结果显示WH1609感染小鼠可出现明显的脑组织病变。本研究从患脑膜炎的仔猪脑组织中分离到一株猪链球菌9型强毒株,其在BALB/c小鼠的半数致死量为已发现的猪链球菌强毒株的10~5倍以上,对猪链球菌致脑膜炎分子机制的研究有重要的意义。