CqG基序对坏死梭杆菌免疫原的免疫佐剂效应实验研究

分别用坏死梭杆菌来源CpG、弗氏完全佐剂、氢氧化铝佐剂与坏死梭杆菌免疫原配制的抗原免疫小白鼠，通过检测坏死梭杆菌免疫原抗体变化，来探讨CpG对坏死梭杆菌免疫原的佐剂效应。试验结果表明，坏死梭杆菌来源CpG有较好的免疫佐剂效应。可望进一步研制成为坏死梭杆菌疫苗佐剂成分。     

通过双重PCR方法区分坏死梭杆菌亚种

基于已发表的坏死梭杆菌白细胞毒素启动子区序列,设计3条特异性引物L7、L8和L9。L7和L8分别与Fnn和Fnf的特异性序列结合,L9与两个亚种序列相匹配。分别扩增出1 076bp和809bp的特异性片段。试验结果表明,这些引物具有高度的特异性和敏感性,能够检测坏死梭杆菌基因组DNA的最小量为10pg/μL,建立的双重PCR体系可用于区分坏死梭杆菌亚种。     

坏死梭杆菌白细胞毒素基因SH片段的克隆与表达

坏死梭杆菌白细胞毒素是坏死杆菌病的主要致病因子,白细胞毒素基因（lkt）是其编码基因。以分离到的国内牛源坏死梭杆菌FN（A）菌株F4基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增白细胞毒素基因SH片段,克隆至pMD18-T载体上,以BamHⅠ和HindⅢ酶切的目的片段SH与相应酶切的pET32a载体连接构建pET32a-SH重组表达质粒,经转化E coli BL21（DE3）后用IPTG进行蛋白诱导,SDS-PAGE检测重组蛋白表达情况。结果表明：扩增基因序列大小为1800bp,SDS-PAGE检测重组蛋白有效表达,表达得到大小为80.2kDa的目的蛋白,采用镍柱亲和层析方法纯化SH重组蛋白,获得了纯度达95%的重组蛋白;经West-ern-blot证实,该蛋白对抗坏死杆菌阳性血清具有反应活性。     

CpG基序对坏死梭杆菌免疫原的免疫佐剂效应实验研究

分别用坏死梭杆菌来源CpG、弗氏完全佐剂、氢氧化铝佐剂与坏死梭杆菌免疫原配制的抗原免疫小白鼠,通过检测坏死梭杆菌免疫原抗体变化,来探讨CpG对坏死梭杆菌免疫原的佐剂效应。试验结果表明,坏死梭杆菌来源CpG有较好的免疫佐剂效应,可望进一步研制成为坏死梭杆菌疫苗佐剂成分。     

牛坏死杆菌病的防治

随着舍饲奶牛业的快速发展,牛坏死杆菌病的发病率也有逐年上升的趋势,给奶牛养殖带来了不小的经济损失。该病是由坏死梭杆菌引起的一种慢性传染病,以蹄部、皮肤、消化道粘膜坏死为特征,一般多发病于5～10月份。笔者今年在我市奶牛养殖区诊治两     

坏死梭杆菌斑马鱼模型建立与LD50的测定

建立斑马鱼人工感染坏死梭杆菌动物模型。牛源坏死梭杆菌FN(AB)株以3×1010cfu/mL、3×109cfu/mL、3×108cfu/mL、3×107cfu/mL不同菌量,腹腔接种斑马鱼,定时观察斑马鱼的发病和死亡情况,建立动物感染模型。FN(AB)对斑马鱼的半数致死量(LD50)为1.06×106cfu/尾;感染发病鱼呈现出侧游、腹水、注射部位出血红肿等症状,肝脏、肾脏、肠道出现明显的病理学变化。斑马鱼可作为坏死梭杆菌致病性研究的动物模型。     

致病性坏死梭杆菌天然白细胞毒素毒性研究

为研究坏死梭杆菌白细胞毒素毒性及其致病机理,通过超滤截留技术从细菌培养物上清液分离获得坏死梭杆菌天然白细胞毒素,并通过细胞毒性试验、动物试验以及透射电镜观察等手段对分离获得的白细胞毒素的毒性进行研究.结果表明:坏死梭杆菌白细胞毒素对牛外周血白细胞具有细胞毒性作用,毒素毒性强弱与剂量呈正相关性,高浓度白细胞毒素能裂解白细胞,低浓度白细胞毒素则可诱导细胞凋亡.坏死梭杆菌白细胞毒素一方面能诱导宿主形成坏死病灶,另一方面也能诱导宿主产生对抗坏死梭杆菌感染的免疫保护力.     

鹿坏死杆菌病的诊治

正鹿坏死杆菌病是由坏死梭杆菌引起的一种慢性传染病。以蹄的损害和皮肤、皮下组织、口腔及消化道黏膜、内脏发生坏死为特征。1病原体坏死梭杆菌为多形性革兰氏阴性杆菌,小者呈球杆状,大者呈长丝状,无鞭毛,不能运动,亦不形成芽胞和荚膜。广泛分布于自然界中,健康动物的口腔、肠道、外生殖道等处也常     

坏死梭杆菌白细胞毒素基因BSBSE片段的克隆及原核表达

以牛源坏死梭杆菌FNn株为试材,根据GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列设计1对引物,利用PCR技术扩增出1 131 bp的坏死梭杆菌白细胞毒素BSBSE基因。将PCR产物插入pGEM-T Easy vector中,经双酶切鉴定正确后进行序列测定。分析表明该BSBSE序列与GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列的核苷酸同源性为99%,推导出的氨基酸序列同源性为98%。为研究BSBSE的免疫原性,构建了原核表达载体pMAL-p2X-BSBSE,用IPTG诱导在大肠杆菌中表达。结果表明,BSBSE基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达,融合蛋白分子量约为84.5×103,其中41.5×103为BS-BSE基因表达的蛋白质,43.0×103为MBP融合标签,Western-blotting检测表明该表达产物有免疫原性。     

牦牛布鲁氏菌病的防控情况调查

布鲁氏菌病属于人畜共患传染病,可以感染很多种类的动物,在高原牧区,牦牛和藏羊是最容易感染该疾病的物种。动物一旦感染该疾病之后,会对其造成严重破坏,导致其出现流产、结膜炎、不育和睾丸炎等症状,给养殖户造成严重的经济损失。基于此,本文主要对青海地区牦牛布鲁氏菌病的防控情况进行分析和探讨。     

牦牛巴氏杆菌病在夏季流行的特征

牦牛巴氏杆菌病(牛出血性败血病)是由巴氏杆菌所引起的一种急性传染病.该病过去在贵南县以秋冬季多发,近几年在夏季也时有发生,并且具有典型的发病过程.笔者就对该病夏季流行情况进行了观察和诊治.     

中甸牦牛寄生虫流行现状及综合防控措施

中甸牦牛是云南省迪庆州重要的地方品种,是我国6大优良牦牛类型之一,具有耐粗饲、适应性强等优点。但传统饲养以放牧为主,补饲少,牦牛体质弱,易感染寄生虫病。本文简要介绍中甸牦牛的主要寄生虫病流行现状及如何做好综合防控,降低牦牛寄生虫疾病的危害。     

牦牛放线菌病的流行调查及防治措施

放线菌是一种传染性很强的细菌,是一种人畜共患肉芽性传染病菌。这种病菌通常寄生在牛的身上,不易引起人们的注意。本文旨在探讨放线菌的基本发病机理和防治措施。     

布鲁氏菌病的流行特点及综合防控策略

本文概述了布鲁氏菌病的流行状况,重点阐述了牛羊布病的流行病学特点、病原检测、检疫隔离与扑杀、易感动物保护等措施,为布鲁氏菌病的科学防控提供指导.     

猪坏死杆菌病的诊治与预防措施

猪坏死杆菌病是一类常见的细菌性传染病,感染部位以组织坏死、变性为主要体征,严重感染者还会引发全身症状甚至死亡。通过对猪坏死杆菌流行病学、临床表现、预防措施及治疗方案进行总结,以期为减少该病的发生提供参考。     

布氏杆菌病的诊断与防控措施

布鲁氏菌病(俗称布病)是由布鲁氏杆菌引起的一种人畜共患传染病,家畜感染布鲁氏杆菌后可以降低生产性能,引起母畜流产,导致种畜出现繁殖障碍,畜产品质量安全受到影响,给养殖业带来很大的经济损失。据统计,世界上已经有170多个国家和地区发生过该病,流行范围很广,而且每年因为布病造成的损失高达数十亿美元。到目前为止,还没有有效的措施来控制和消灭布病,因此做好布病的早期诊断和预防措施非常重要。笔者根据多年的工作经验,详细分析了该病的诊断方法,并提出了有效的防控措施,以供养殖户参考。