禽大肠杆菌O2、O78菌株外膜蛋白A基因扩增及序列分析

根据Genbank中大肠杆菌K-12外膜蛋白A基因的核苷酸序列设计引物,从禽大肠杆菌O为O2、O78及它们的融合株O2．78(Chl^rNor^r)中分别扩增得到外膜蛋白A基因(ompA),进行序列测定及分析发现3个菌株的ompA均由2276nt组成,核苷酸序列完全相同,只有一个大的开放性阅读框(ORF),长1041bp,编码由346个氨基酸组成的前外膜蛋白A(pro-OmpA),前21个氨基酸残基组成信号肽,成熟的OmpA由325个氨基酸残基组成,相对分子质量为37000．其氨基酸序列也完全相同．从基因水平上证明了禽大肠杆菌O2和O78菌株存在相同的外膜蛋白A抗原。     

禽巴氏杆菌大肠杆菌融合二联弱毒菌株F4的培育

以恩诺沙星标记禽多杀性巴氏杆菌强毒株C48－1得到的耐药菌株C48－1（Enr^r,Chl^8) ,与禽大肠杆菌O78弱毒株O78（Chl^r,Enr^8) 作为亲本菌株，采用溶菌酶－EDTA法制备两亲本菌株原生质体，通过聚乙二醇（PEG）－新生磷酸钙促融系统进行两亲本菌株原生质体融合，得到16株双耐药融合菌株。选取融合菌株F4、F9进行初步的免疫试验，初步显示融合菌株F4是一株安全、具双联免疫效果的融合菌株。     

鸡源大肠杆菌O38、O53及O75分离株外膜蛋白型的研究(英文)

[目的]研究鸡源大肠杆菌血清型O38、O53及O75分离株的外膜蛋白型。[方法]以8株不同血清型鸡致病性大肠杆菌为试验菌株,采用超声波裂解和N-十二烷基肌胺酸钠对其进行外膜蛋白(OMP)的提取,提取产物经SDS-PAGE电泳检测后,根据OMP型模式图确定其OMP型。[结果]3个血清型的8株大肠杆菌外膜蛋白共分为3个型。其中2株O75血清型大肠杆菌的外膜蛋白分别为OMP-I型和OMP-II型,1株O53血清型大肠杆菌的外膜蛋白为OMP-II型,5株O38血清型大肠杆菌的外膜蛋白分为OMP-I型和OMP-III型。[结论]该研究结果表明,同一血清型的大肠杆菌菌株外膜蛋白可能属于完全不同的OMP型,血清学上毫不相关的分离株之间的外膜蛋白却可具有相同的OMP型。同一血清型的分离株的外膜蛋白之间可发生遗传分化,而不同血清型的分离株的外膜蛋白之间也可具有不同程度的遗传相关性。     

河南省鸡致病性大肠杆菌血清型、耐药性的研究

对河南省3个不同地区的38株鸡致病性大肠杆菌进行了O血清型的鉴定、15种抗生素药物的耐药性试验。结果表明:河南省鸡致病性大肠杆菌的血清型种类众多,以O78,O1,O2为优势血清型,分别占定型菌株的35.29%,23.53%,17.65%;耐药图谱复杂,可以分为21种耐药类型,菌株耐药种类4~14种;不同来源的菌株其血清型、耐药性一般不同;相同来源的菌株,其耐药图谱相同或相似,但血清型有多种。     

大肠杆菌O157:H7氟苯尼考耐药菌株与敏感菌株的蛋白组学差异

[目的]分析大肠杆菌O157:H7氟苯尼考耐药菌株与敏感菌株的差异表达蛋白,从蛋白组学层面揭示大肠杆菌O157:H7对氟苯尼考耐药性的产生机制.[方法]提取大肠杆菌O157:H7氟苯尼考耐药菌株(RS2-256)和敏感菌株(RS2)的全菌蛋白,经同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)标记后进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析,质谱数据通过Mascot v2.2鉴定,并根据COGs数据库对差异表达蛋白进行GO功能注释和分类.[结果]RS2菌株获得3385个肽段,RS2-256菌株获得3955个肽段,合计7340个肽段,其中6975个肽段为特有肽段,分属于1039个蛋白.与RS2菌株相比,RS2-256菌株有145个蛋白表达差异显著(P<0.05),占检测蛋白总数的13.96%,其中,上调表达蛋白有87个、下调表达蛋白有58个.表达差异蛋白按照功能进行分类,可分为外排泵、转运蛋白、细胞膜形成、应激调控、核糖体结构、DNA复制、转录、翻译、翻译后修饰、能量产生和转化、氨基酸转运和代谢、辅酶转运和代谢、糖转运和代谢、脂肪代谢、离子转运和代谢、细菌运动性、转座及信号通路共18类;多药物外排泵亚基AcrA和AcrB、外膜蛋白TolC、外膜蛋白X等52个蛋白的表达变化在3.00倍以上,占表达差异蛋白总数的35.86%.[结论]外排泵AcrAB-TolC家族、ABC家族、外膜蛋白、毒性调节器B、饥饿蛋白等在大肠杆菌O157:H7对氟苯尼考耐药性产生过程中发挥重要作用,同时涉及细菌糖代谢、氨基酸代谢、离子转运、DNA损伤与修复、生物膜及毒素与抗毒素系统等生命活动.     

鸡源Iss抗血清对鸡大肠埃希菌O2、O78、CVCC1551的抑制作用

为探讨Iss抗体对鸡大肠埃希菌(Escherichia coli)血清抗性的抑制作用,将纯化的Iss融合蛋白免疫雏鸡而获得抗血清,并对3株鸡大肠埃希菌株O2、O78、CVCC1551进行血清抗性抑制试验,分析Iss抗血清对鸡大肠埃希菌血清抗性的抑制作用。结果表明,抗血清对O2、O78、CVCC1551等3株致病性-血清抗性,但iss基因氨基酸序列不同的大肠杆菌均产生抑制作用,且抑制作用的程度与抗血清含量有关。     

不同血清型禽大肠杆菌外膜蛋白免疫原性研究

用提纯的O_2、O_(18)、O_(46)、O_(76)禽大肠杆菌外膜蛋白对10日龄小鸡进行免疫,ELISA检测显示抗体水平显著上升;经同型菌株和异型菌株攻毒,结果O_(46)菌株外膜蛋白免疫组用同型菌株攻毒的病变率与对照组相比差异显著(P<0.05),其余组均差异不显著,但各免疫组病变率均比对照组低。说明用禽源大肠杆菌外膜蛋白免疫,无论对同型或异型菌株的攻击,都使机体受到一定的保护作用。     

致病性大肠杆菌O157H7外膜蛋白(OMPs)抗原的快速提取

本试验采用了超声波破碎、N－十二烷基肌氨酸处理和超速离心技术提取致病性大肠杆菌O157H7的外膜蛋白（OMPs）。提取物用SDS－PAGE进行电泳检测。     

表达两种不同外膜蛋白的禽大肠杆菌融合菌株的构建

对从陕西省主要养鸡地区病死鸡及鸡胚中分离的致病性禽源大肠杆菌,用SDS-PAGE进行Omp分型。采用不同浓度溶菌酶作用不同时间裂解细胞壁,制备原生质体,在高渗平板上再生培养;在药敏试验的基础上,结合Omp型分析,选择具有交叉耐药且Omp型不同的菌株,利用PEG诱导进行原生质体融合,在含双抗的高渗平板上筛选融合株,对不同代次的融合株分别进行革兰氏染色镜检、生化鉴定、血清型鉴定和Omp型分析。结果表明,所构建的融合菌株染色镜检和生化特性均符合大肠杆菌特征,75%融合子可凝集2亲本的O抗原,25%凝集其中1个亲本的O抗原;外膜蛋白型表现为1个或2个亲本的带型,但都有不同程度的增强。经稳定性检验证明其为遗传学上稳定的融合子。     

16省市禽源性大肠杆菌O18和O78的外膜蛋白型

经对我国16个省市、自治区分离到的110个禽病原性大肠杆菌O18和O78分离株的外膜蛋白型(OMP型)的测定,结果表明,这些分离株共产生了4个OMP型,56个O18分离株可分为3个OMP型,54个O78分离株出现了4个OMP型,其OMP1～3型为二者所共有.     

Water isotope ratios D/H, 18O/16O, 17O/16O in and out of clouds map dehydration pathways

Water isotope ratios have been measured by laser absorption spectroscopy in and out of cirrus clouds formed in situ and convectively generated in anvils over subtropical regions. Water vapor in the tropical and subtropical upper troposphere shows a wide range of isotopic depletion not observed previously. The range suggests that dehydration of upper tropospheric air occurs both by convective dehydration and by gradual dehydration mechanisms. Twenty-five percent of upper tropospheric water sampled is in ice particles whose isotopic signatures are used to identify those grown in situ from those lofted from below.     

Interhemispheric Differences in Polar Stratospheric HNO3, H2O, CIO, and O3

Simultaneous global measurements of nitric acid (HNO(3)), water (H(2)O), chlorine monoxide (CIO), and ozone (O(3)) in the stratosphere have been obtained over complete annual cycles in both hemispheres by the Microwave Limb Sounder on the Upper Atmosphere Research Satellite. A sizeable decrease in gas-phase HNO(3) was evident in the lower stratospheric vortex over Antarctica by early June 1992, followed by a significant reduction in gas-phase H(2)O after mid-July. By mid-August, near the time of peak CIO, abundances of gas-phase HNO(3) and H(2)O were extremely low. The concentrations of HNO(3) and H(2)O over Antarctica remained depressed into November, well after temperatures in the lower stratosphere had risen above the evaporation threshold for polar stratospheric clouds, implying that denitrification and dehydration had occurred. No large decreases in either gas-phase HNO(3) or H(2)O were observed in the 1992-1993 Arctic winter vortex. Although CIO was enhanced over the Arctic as it was over the Antarctic, Arctic O(3) depletion was substantially smaller than that over Antarctica. A major factor currently limiting the formation of an Arctic ozone "hole" is the lack of denitrification in the northern polar vortex, but future cooling of the lower stratosphere could lead to more intense denitrification and consequently larger losses of Arctic ozone.     

栽培稻、斑点野生稻、药用野生稻基因组比较分析

以栽培稻总DNA为探针,对栽培稻(AA)自身、斑点野生稻(BB)以及药用野生稻(CC)体细胞染色体进行基因组荧光原位杂交(GISH),并以斑点野生稻总DNA为探针,对自身和药用野生稻体细胞染色体进行基因组荧光原位杂交,以此研究A、B、C 3个基因组型之间的关系.结果显示,A、B、C基因组之间都存在较高的同源性,其中AA与CC之间的信号最强,BB基因组与AA基因组次之,BB基因组与CC基因组的信号最弱.说明A、B、C 3个基因组之间的亲缘关系,A与C最近,B与C最远.     

O,O-二甲基硫代磷酰氯氨解反应动力学

根据卤素氨解反应机理,提出了O,O-二甲基硫代磷酰氯液相非催化氨解的反应历程,并建立了相应的拟均相反应动力学模型.在消除传质的影响下,由实验确定了模型参数.模型表明:在反应前期,O,O-二甲基硫代磷酰氯浓度对速率影响很小,反应速率呈拟一级反应特征;但在反应后期,反应速率呈明显的二级反应特征.氨与O,O-二甲基硫代磷酰氯的起始摩尔比以及氨浓度对反应速率影响显著.     

Group B erythrocytes enzymatically converted to group O survive normally in A, B, and O individuals

With an alpha-galactosidase, B erythrocytes can be converted to blood group O under conditions that neither impair their viability in vitro nor affect their ability to survive normally after transfusion to individuals of groups O, A, and B. Such an approach has the potential for producing enzymatically converted group O cells for use in transfusion therapy. It should also be possible to convert A cells to group O by using the appropriate alpha-N-acetylgalactosaminidase.     

Time scales in atmospheric chemistry: coupled perturbations to N2O, NOy, and O3

Nitrous oxide (N2O) is one of the top three greenhouse gases whose emissions may be brought under control through the Framework Convention on Climate Change. Current understanding of its global budget, including the balance of natural and anthropogenic sources, is largely based on the atmospheric losses calculated with chemical models. A representative one-dimensional model used here describes the photochemical coupling between N2O and stratospheric ozone (O3), which can easily be decomposed into its natural modes. The primary, longest lived mode describes most of the atmospheric perturbation due to anthropogenic N2O sources, and this pattern may be observable. The photolytic link between O3 and N2O is identified as the mechanism causing this mode to decay 10 to 15 percent more rapidly than the N2O mean atmospheric lifetime, affecting the inference of anthropogenic sources.     

马铃薯施用Mg·N·P_2O_5·K_2O肥优化数学模型研究

采用二次回归正交旋转组合设计方法研究Mg、N、P2O5、K2O施用量与马铃薯生产成本、纯收入及产投比的关系,建立了马铃薯生产成本、纯收入及产投比与Mg、N、P2O5、K2O施用量间的优化数学模型。在对模型进行深入分析的基础上,作了计算机模拟试验,提出了2套马铃薯高产、高效栽培的施肥模型:纯收入高于9 000元/hm2,产投比高于2.21时的施肥量为Mg肥(MgSO2)15.697 5～18.742 5kg/hm2,N肥(纯N)35.100 0～45.137 5 kg/hm2,磷肥(P2O5)97.47～155.52 kg/hm2,K肥(K2O)125.685～149.445 kg/hm2。纯收入高于10 000元/hm2,产投比高于3.0施肥量为Mg肥(MgSO2)16.485～27.765 kg/hm2,N肥(纯N)9.552 5～44.697 5 kg/hm2,磷肥(P2O5)63.585～129.915kg/hm2,K肥(K2O)为102.802 5～173.947 5 kg/hm2。     

氮磷钾肥对马铃薯营养状况及块茎产量的影响

试验分别在甘肃省景泰县、内蒙古自治区达拉特旗和河北省沽源县3个马铃薯生产基地进行,在基地常规N、P2O5、K2O肥施用量分别为300、345、375kg/hm2的基础上,研究改变磷、钾、氮肥用量对马铃薯营养状况、块茎产量以及土壤养分的影响。试验结果表明,氮、磷、钾肥用量分别从N300、P2O5345、K2O375kg/hm2降低到180、180、225kg/hm2,对植株干物质累积量没有显著影响,3个基地都呈相同的趋势;3个基地不同处理的块茎产量也没有显著性差异。因此,在试验条件下,氮、磷、钾肥用量和比例为180-180-225的施肥处理,其经济效益较高。施肥对土壤养分含量有较大的影响,特别是磷肥,当施用磷肥后,土壤速效磷含量显著提高,而且主要存在于表层土壤(0￣20cm),这说明缺磷土壤通过施用磷肥,可提高土壤有效磷水平。