乙烯利诱导番茄抗叶霉病效果的研究

在番茄苗期施用乙烯利,然后人工接种叶霉病病菌,诱导植株产生对叶霉病的抗性。通过对番茄叶霉病病情指数和病株率的调查,分析不同处理的差异,探讨乙烯利诱导抗性与病害发生的作用效果,为应用生产提供依据。     

乙烯利诱导番茄抗叶霉病效果的研究

在番茄苗期施用乙烯利， 然后人工接种叶霉病病菌，诱导植株产生对叶霉病的抗性。通过对番茄叶霉病病情指数和病株率的调查，分析不同处理的差异，探讨乙烯利诱导抗性与病害发生的作用效果，为应用生产提供依据。     

钙对化学诱抗剂诱导番茄叶片酚类物质含量的影响

为探索钙对化学诱抗剂水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、β-氨基丁酸(BABA)和龙胆酸(GA)诱导番茄酚类物质积累的影响,在番茄6叶期用上述化学诱抗剂处理第3叶片,并分别喷施CaCl2、蒸馏水(H2O)、LaCl3和EGTA,然后测定各处理第3叶片(诱导叶)和第5叶片(非诱导叶)中酚类物质含量的变化。结果表明:(1)化学诱抗剂处理后,番茄诱导叶及其上位非诱导叶中酚类物质含量均升高;其中,SA、MeJA和GA处理后第2天,酚类物质含量迅速升高并达到高峰,而BABA处理后第1天酚类物质含量即达到高峰。(2)外源Ca2+显著促进诱抗剂对番茄叶片中酚类物质积累的诱导,4种诱抗剂与Ca2+共同处理,番茄叶片中酚类物质含量比相应诱抗剂单独处理高10%以上;而Ca2+螯合剂EGTA和质膜钙通道抑制剂LaCl3,则不同程度抑制这些诱抗剂诱导番茄叶片中酚类物质含量的提高。由此认为,钙对上述诱抗剂诱导番茄叶片中酚类物质的合成具有正调控作用。     

番茄枯萎病诱导抗病性研究进展

综述了近年来国内外番茄枯萎病诱导抗病性研究的主要进展,对不同诱抗剂的诱抗效果和抗性机制做了简要回顾。青霉菌、几丁质等都可降低枯萎病病情指数,降低植株死亡率,且诱抗效果与诱抗剂使用浓度有关。被诱导植株病菌侵入部位细胞壁加厚,胼胝质沉积;植株体内过氧化物酶(POD)活性、多酚氧化酶活性和多酚含量显著增高,P14蛋白、β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶等PR蛋白积累。水杨酸与茉莉酸可能介导了二条不同的诱导信号传递途径。同时提出目前研究中存在的问题及今后研究方向和发展前景。     

诱抗剂BTH对马铃薯疮痂病抗性诱导的研究

用不同浓度诱抗剂BTH处理马铃薯,研究其对马铃薯疮痂病抗性诱导的影响。结果表明,不同浓度诱抗剂BTH处理可明显降低马铃薯疮痂病的发病率和病情指数,在BTH浓度为1.00mmol/L的条件下,对疮痂病的相对防效最高达63.59%。在此最适浓度下,马铃薯植株的色素、超氧阴离子自由基、POD和PPO活性等相关指标均明显高于对照,这些指标的提高与疮痂病的抗性密切相关,但诱抗剂BTH诱导效果及对产量的影响有待进一步研究。     

番茄植株对外源植物诱抗剂的生理响应

采用果胶(Pec)、2,1,3-苯并噻二唑(BTH)、茉莉酸甲酯(MJ)、壳聚糖(CTS)、氨基寡糖素(AO)、水杨酸(SA)、亚精胺(Spd)这7种诱抗剂喷施开花结果期的番茄植株,以喷施清水为对照(CK),研究番茄植株对外源诱抗剂的生理响应。结果表明,喷施Spd的番茄植株Tr最大,为11.70 mmol/(m~2·s),与喷施BTH、MJ、CTS、AO及H2O(CK)相比差异显著;喷施SA的番茄植株Ci最大,为338.0μmol/mol,喷施BTH的番茄植株Ci最小,为258.7μmol/mol,两者之间差异显著;与CK相比,施用诱抗剂可提高番茄植株体内POD、CAT酶的活性,除施用SA、CTS外的其他诱抗剂可减少番茄植株体内SOD酶的含量,除施用Pec、SA外的其他诱抗剂可降低番茄植株体内的MDA含量;喷施AO、MJ、BTH的番茄植株坐果率比CK分别增加15.7、14.7、11.9百分点,施用AO、Pec、SA的番茄单株产量比CK分别增加16.76%、15.38%、13.55%,喷施CTS、AO、Spd的番茄植株病叶率分别比CK减少3.78、3.59、0.99百分点。     

3种诱抗剂对凤丹抗病害的诱导效果

分别用5个浓度的3种诱抗剂(Harpin、BTH和SA)喷施凤丹叶面,并以清水处理为对照,统计叶片病斑面积和病叶数,从而测定诱抗剂对凤丹抗3种主要病害(红斑病、灰霉病和黑斑病)的诱导效果;同时,测定了最适浓度诱抗剂对3种病原菌的抑制活性,以及对凤丹植株生理指标的影响.结果表明:3种诱抗剂均可有效地诱导凤丹对不同病害产生抗性,其中,BTH的诱抗效果最佳;3种诱抗剂对凤丹抗主要病害的诱导效果均表现为红斑病黑斑病灰霉病;诱抗剂处理显著提高了凤丹植株可溶性蛋白和色素含量及相关酶活性,显著降低了超氧阴离子自由基和丙二醛的含量;诱抗剂对凤丹3种病害的病原菌无毒杀作用,但可诱导植株获得系统抗性.     

生防腐皮镰刀菌JK-13对黄瓜抗白粉病的诱导作用

【目的】研究生防腐皮镰刀菌JK-13发酵液作为诱抗剂对黄瓜抗白粉病的诱导作用.【方法】采用喷雾接种法,研究菌株JK-13不同稀释倍数发酵液诱导黄瓜幼苗对白粉菌的抗性.【结果】经菌株JK-13发酵液原液处理后,白粉病的病情指数显著低于对照,仅为19.09,且诱抗效果较为显著,为77.20%,诱导抗病持久期为11d.喷施菌株JK-13发酵液或接种白粉菌均可提高黄瓜叶片中PPO、POD、PAL酶的活性,诱导处理后接种白粉菌的植株叶片上相关酶活性均高于只诱导不接种的处理.菌株JK-13发酵液处理后POD、PPO活性于第5天达到峰值,而PAL活性则于第3天达到峰值.【结论】菌株JK-13发酵液处理可以提高防御酶的活性,显著降低病情指数,增强黄瓜幼苗对白粉病的抗性.     

诱抗剂对番茄植物学性状和灰霉病抗性的影响

为提高番茄植株的系统抗病性、减少化学药剂的施用,选用7种诱抗剂作用于番茄植株,初步研究了诱抗剂对番茄植物学性状和对灰霉病诱导抗性的影响。结果表明,与清水CK相比,施用诱抗剂后番茄植株的节间长度、茎的粗度、根干质量、坐果率、单株果实数、果实纵横比和果实硬度呈增大趋势;而植株的总节数、花序间的叶数、叶片开散度、茎干质量、单果质量呈下降趋势。喷施壳聚糖(CTS)、氨基寡聚糖(AO)、亚精胺(Spd)可增强番茄对灰霉病的抗性,相对防效分别比CK提高62.33%、57.44%、12.47%;番茄单株产量以施用氨基寡聚糖(AO)、果胶(Pec)、水杨酸(SA)比CK增加较多,分别为16.75%、15.34%、13.55%。在生产中AO作为诱抗剂,既可以提高番茄产量,又可以增强对灰霉病的抗性。     

诱导哈密瓜系统抗病性内生细菌的筛选

试验从38个哈密瓜内生细菌中筛选出具有诱导哈密瓜植株抗细菌性叶斑病和疫霉病能力的菌株。研究结果表明：以诱抗效果达到30%为标准,筛选出有12株具有诱导哈密瓜抗细菌叶斑病的菌株;有8株具有诱导哈密瓜抗疫霉病的菌株;有4株具有诱导哈密瓜同时抗细菌叶斑病和疫霉病的菌株,诱抗效果高于或相当于化学诱抗剂水杨酸,且诱抗效果较持续稳定。试验证明了从哈密瓜内生细菌菌株中可以筛选出能显著提高哈密瓜抗病性的菌株,具有作为生防菌开发利用的潜能。     

灵芝多糖对番茄抗灰霉病的诱导效应

【目的】诱导抗病剂可以诱导寄主植株产生系统抗病性,具有持效性和广谱性的特点。论文以番茄植株为模式植物,番茄灰霉菌（Botrytis cinerea）为目标菌,进行温室盆栽试验,以期明确灵芝多糖诱导剂对番茄灰霉病的诱导抗性。【方法】用一定质量浓度的灵芝多糖溶液（50、100、200和400 mg·L^-1）喷雾处理盆栽番茄植株第1、2片真叶（正反面）,每2 d喷施1次,共诱导3次,最后一次诱导2 d后全株喷雾接种供试菌孢子悬浮液（（1-2）×10⁶个孢子/mL）,对照组施用等量清水代替灵芝多糖溶液,与各处理平行喷雾接种番茄灰霉菌孢子悬浮液。在接种孢子悬浮液之前用注射器将番茄苗茎基部刺伤,注意伤口不能太大。然后再罩上塑料薄膜保湿24 h,接种孢子悬浮液2 d内植株遮阴处理,并用加湿器提高温室内的相对湿度,相对湿度控制在不低于90%,温度控制在（15±5）℃,接种后第3 天正常光照。通过调查植株病情指数,计算相对防治效果以评价灵芝多糖对番茄抗灰霉病的诱导效果,并且从防御酶活性、丙二醛（MDA）和叶绿素含量的变化角度评价其诱导抗性的作用机制。同时用一定质量浓度的灵芝多糖溶液（50、100、200和400 mg·L^-1）处理番茄种子并育苗,20 d后测定番茄幼苗株高、鲜重等多项生长指标。【结果】与直接施用等量清水后挑战接菌的对照组病情指数49.25相比,灵芝多糖处理组的番茄植株病情指数明显下降,在32.96-43.85。其中经400 mg·L^-1灵芝多糖处理的番茄植株病情指数最低为32.96,相对防效达到33.07%。经灵芝多糖处理的番茄植株,其体内与抗病有关的防御酶活性也发生显著变化,过氧化氢酶（CAT）和多酚氧化酶（PPO）的活性在多糖诱导第3天达到最高,分别达到162和98 U·min^-1·g^-1 FW,是对照组的2.13和1.71倍;过氧化物酶（POD）的活性在诱导后第4天达到最高值434 U·min^-1·g^-1 FW,是对照处理组的3.29倍。灵芝多糖能够系统地诱导番茄体内 CAT、POD 及 PPO 活性,显著抑制了感染灰霉菌后番茄植株叶片叶绿素含量的下降。灵芝多糖处理组的MDA含量与对照组相比有所下降,对照处理组在取样期间内MDA含量持续上升,而灵芝多糖处理组在取样期间内MDA含量呈先上升后趋于平稳的变化趋势。各质量浓度灵芝多糖对番茄种子的发芽率、芽长和幼苗株高、植株的鲜重均有不同程度的促进作用。其中200 mg·L^-1灵芝多糖浸泡的番茄种子发芽率最高,达87.3%,比对照组的发芽率77.3%提高了10.0%;且该处理对番茄幼苗的株高和地上部分鲜重的促进作用也最大,分别较对照增加了12.9%和33.3%;经100 mg·L^-1灵芝多糖处理后番茄幼苗的芽长和地下部分鲜重变化最大,与对照组相比分别提高了0.16 cm和0.33 g。【结论】灵芝多糖能够诱导番茄植株对灰霉病产生系统抗病性,同时对番茄种子发芽和番茄植株幼苗生长具有一定的促进作用。     

嫁接番茄抗叶霉病效果与植株体内同工酶的关系

采用LS－89和BF兴津101作砧木，L－402作接穗的嫁接番茄，其叶霉病病情指数分别比L－402自根苗低11.92%和14.7%。嫁接番茄的抗病效果与植株体内过氧化物酶同工酶（POD）、多酚氧化酶同工酶（PPD）、儿茶酚氧化酶等酶系的同功酶有关，表现为嫁接番茄体内出现新的抗病谱带和某些谱带活性增强，其中嫁接番茄的POD与CK的差别最大，特别是叶部的POD。     

抗叶霉病不同基因型番茄的光合特性

以抗叶霉病不同基因型的感病番茄品系61、抗病番茄品系16、番茄组合1661(16为母本,61为父本的杂交组合)为材料,苗期人工接种叶霉病病菌,测定植株叶片光合特性的变化。结果表明,随着叶霉病病菌接种时间的延长,感病品系61胞间CO2浓度表现为增长趋势,叶片净光合速率、气孔导度、蒸腾速率均呈降低趋势。组合1661、抗病品系16的光合参数变化不大。番茄叶霉病侵染明显抑制感病番茄品系植株的光合作用,而对抗病番茄无明显影响。     

番茄抗叶霉病相关基因片段克隆及VIGS重组载体的构建与鉴定

以含有Cf-19基因的番茄抗叶霉病品种CGN18423为材料,运用RT-PCR技术克隆番茄抗叶霉病相关基因细胞色素P450 90A1-like(CYP 90A1-like)部分序列,片段长295 bp;以番茄八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因作为阳性对照,片段长349 bp。测序结果表明,序列与番茄同源性达100%;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,在番茄感染叶霉病后,随时间延长CYP 90A1-like基因相对表达量呈上调趋势,说明该基因在番茄抗叶霉病过程中有重要作用;以烟草脆裂病毒(TRV2)为载体,成功构建CYP 90A1-like、PDS基因的病毒诱导基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)重组载体。构建的p TRV2-CYP 90A1-like、p TRV2-PDS重组载体将为下一步利用VIGS技术在番茄上研究CYP 90A1-like基因与番茄抗叶霉病的关系奠定试验基础。     

BTH处理对番茄幼苗TYLCV抗性、光合特性及防御酶活性的影响

以番茄‘1479’和‘2300’为材料,研究了苯并噻二唑(BTH)诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的抗病性,并测定BTH处理对番茄幼苗叶片光合特性和几种防御酶活性的影响。结果表明:0.10～2.00 mmol·L-1BTH均有不同程度的诱抗效果,其中0.50 mmol·L-1BTH处理效果明显,诱导效果可达42.7%。BTH可以提高番茄叶片的净光合速率(Pn)和气孔导度(Gs),能缓解由TYLCV侵染带来的净光合速率和气孔导度下降的趋势。喷施BTH或接种TYLCV均可提高番茄叶片过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,但喷施BTH诱导并接种TYLCV处理的植株叶片上述酶活性比只诱导不接种处理上升速度快。表明,BTH处理可以缓解TYLCV侵染对番茄光合系统的伤害,诱导防御酶活性的增强,显著降低其病情指数,增强番茄对TYLCV的抗性。     

苯并噻二唑诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒病的抗性

以番茄感病品种1479和2300为材料,研究了苯并噻二唑(BTH)诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒病的抗性,并测定BTH处理和番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)接种对番茄叶片几种防御酶活性的影响。结果表明,0.1～2.0mmol/L BTH能有效诱导番茄产生对番茄黄化曲叶病的抗性,其中0.5 mmol/L BTH处理效果明显,诱导效率可达42.7%。喷施BTH或接种TYLCV均可提高番茄叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,但诱导并接种处理的植株叶片上述酶活性比只诱导不接种处理高。说明BTH处理可以诱导番茄增强防御酶活性,降低病情指数,增强对番茄黄化曲叶病的抗性。     

PIAS对番茄晚疫病的诱导抗性及叶片内酶活性的研究

分别用6株番茄晚疫病菌弱毒菌株(简称:PIAS)在番茄幼苗2叶1心期对番茄幼苗进行诱导处理(叶片喷施),以研究弱毒菌株对番茄晚疫病的诱导抗性效果及叶片内酶活性的变化。结果表明:在接种后9～21 d的调查中PIAS-TR-dw处理植株的病情指数与对照有显著差异;在接种后21 d的调查中,PIAS-TR-dw、PIAS-TR-e、PIAS-TR-a、PIAS-TS-dw、PIAS-TL-e和PIAS-TL-a处理植株的病情指数均低于对照,各处理植株的诱导抗性效果分别为57.79%、21.29%、31.29%、48.18%、41.82%和18.32%,与PIAS-TL-a处理相比,PIAS-TR-dw、PIAS-TS-dw和PIAS-TL-e处理植株的诱导抗性效果均有显著差异。番茄晚疫病菌弱毒菌株诱导处理番茄叶片后12～132 h,各处理的PAL和POD活性与对照均有显著差异;诱导处理后36～84 h,各处理的APX、PPO和CAT活性均高于对照且有显著差异;诱导处理后84～132 h,各处理的APX、SOD和β-1,3-glucanase活性均高于对照且有显著差异。番茄叶片内的APX、SOD和β-1,3-glucanase活性与诱导抗性效果均为极显著正相关关系;PPO活性与诱导抗性效果为显著正相关关系;PAL、POD和CAT活性与诱导抗性效果均无显著相关关系。     

通过组织培养筛选番茄抗早疫病突变体

用感病番茄品种的子叶进行组织培养，以早疫病菌培养滤液为选择剂进行了抗病突变体筛选。经７次继代筛选，获得５１块抗性愈伤组织，分化出８株再生植株。经人工接种抗病性鉴定表明８株再生植株均为抗病植株，病情指数为６．２５。４９株对照再生植株病情指数为８９．２９，其中有一株也是抗病植株。原品种的病情指数为９３．３３。     

中草药杀菌剂LS-1对番茄叶霉病的防治效果

测定了未加助剂的LS-1对番茄叶霉病的田间防效及诱导抗病作用,并进行了助剂筛选,测定了助LS-1对番茄叶霉病的施药适期及接种防治效果。结果表明,LS-1对番茄叶霉病的田间防效达到62.46%,显著好于植物源药剂邻烯丙基苯酚、生物药剂宁南霉素和常用化学药剂甲基托布津。LS-1可提高番茄叶片内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性,具有诱导番茄产生抗叶霉病的能力。以适当的比例加入大豆油和生化黄腐酸后对番茄叶霉病的接种防治效果提高到79.36%,最佳施药时期为病菌侵入前7d至侵入后7d,防效在54.09%～86.90%之间,施药间隔期5～7d。40.00和20.00g·L-1的助LS-1对番茄叶霉病的接种防效分别为89.80%和86.35%,显著优于常用化学药剂甲基托布津、生物药剂宁南霉素和植物源药剂邻烯丙基苯酚。     

钙素对β-氨基丁酸诱导番茄抗灰霉病和防御酶活性的调控作用

为研究钙对β-氨基丁酸(BABA)诱导番茄抗病性的调控与防御酶活性的关系,本研究通过外源增钙和缺钙处理,系统探索β-氨基丁酸诱导的番茄抗病性和主要防御酶活性的变化。结果表明:用β-氨基丁酸处理番茄叶片后,处理叶片及其上位非处理叶片对灰霉病的抗性均显著增强,二者病情指数比对照分别降低35.4%和23.9%;外源Ca2+可以显著促进BABA诱导的番茄抗病程度,用BABA诱导同时外源喷施Ca2+,番茄诱导叶和非诱导叶的病情指数分别低于对照53.6%和34.4%;而EGTA(Ca2+螯合剂)和La Cl3(质膜钙通道抑制剂)则不同程度地抑制了BABA诱导的抗病性。外源BABA同样提高番茄处理叶片和非处理叶片中的PAL,PPO,POD和CAT等防御酶的活性;Ca2+可以进一步增强BABA诱导的上述防御酶活性,而不同的缺钙处理则抑制了BABA诱导的上述防御酶活性。外源增施Ca2+及不同方式的缺钙处理,对BABA诱导番茄叶片中SOD活性的影响不显著。据此推测,钙对BABA诱导番茄叶片抗病性的调控,可能与其对BABA诱导的PAL,PPO,POD和CAT等重要防御酶活性的调节作用有关。