鸡新城疫耐热冻干保护剂活疫苗试验

用耐热冻干保护剂冻干的鸡新城疫（LaSota系）活疫苗，在37℃环境下放置14d，疫苗的病毒含量EID50由10^9.1下降为10^8.1，在4℃环境下放置1年半，疫苗的病毒含量基本不变。     

耐热保护剂鸡传染性支气管炎活疫苗试验

用3批耐热保护剂冻干的鸡传染性支气管炎活疫苗在2-8℃条件下放置2年，疫苗的病毒含量EID50由10^53、10^55、10^55分别下降为10^37、10^41、10^37。在20-25℃条件下储存6个月病毒含量EID50由10^53、10^55、10^55分别下降为10^39、10^35、10^41。由试验结果可知，试验中的3批耐热保护剂冻干的鸡传染性支气管炎活疫苗在2—8℃条件下保存有效期不少于2年，20-25℃条件下仍具有6个月的有效期。     

鸡痘耐热保护剂活疫苗的研究

选择不同基质组成保护剂与鸡痘抗原进行冻干试验，试制一种适宜鸡痘弱毒株的耐热冻干保护剂。应用耐热冻干保护剂和专用的冻干曲线，制成鸡痘耐热保护剂活疫苗，经37℃保存10d的耐老化试验，每羽份病毒含量下降0．2—0．4个滴度；疫苗在2—8℃保存24个月后，每羽份病毒含量下降0．2-0．4个滴度，且均≥10^3.0EID50／羽，具有良好的热稳定性。19万羽的田间试验证明，鸡痘耐热保护剂活疫苗安全、有效。     

鸡痘耐热保护剂冻干活疫苗热稳定性试验

将耐热保护剂配制成的鸡痘冻干活疫苗置于37℃条件下分别作用10d、20d和30d,检测其效价,发现EID50/羽份从冻干后的105.3分别下降为104.1、103.7和103.5,下降率分别为22.6%、30.2%和34.0%。     

猪繁殖与呼吸综合征活疫苗耐热冻干保护剂的研究

为了解耐热冻干保护剂在猪繁殖与呼吸综合征活疫苗中的应用效果,将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)分别与耐热冻干保护剂和常规冻干保护剂进行配比、冻干,制备疫苗,分别将疫苗置2~8℃保存,定期测定其效价,同时进行37℃、25℃耐老化试验。结果显示,疫苗在2~8℃条件下保存24个月,耐热苗效价下降不超过0.5个滴度,常规苗效价下降超过3.0个滴度;37℃保存10d,耐热苗效价下降不超过0.5个滴度,常规疫苗下降超过2个滴度;25℃常温保存2个月,耐热保护剂疫苗效价下降不超过0.35个滴度,而常规苗效价下降超过2个滴度。试验结果表明,耐热冻干保护剂对病毒的保护效果明显优于常规冻干保护剂,具有良好的热稳定性。     

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(耐热保护剂)活疫苗的研究

通过对不同保护剂基质与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)相溶性的研究及冻干曲线的优化,成功研制出一种适宜HVT的耐热冻干保护剂。用其与相匹配的48h自然回温冻干曲线冻干的HVT耐热活疫苗,其病毒冻干损失比SPGA常规疫苗减少约50%,在2~8℃条件下可保存24个月,37℃保存10d病毒存活率达50.5%,而SPGA规程苗仅为31.6%。经约50万羽份的田间试验,证明安全有效并显示出良好的耐热性能,达到国外同类产品水平。     

鸡传染性支气管炎活疫苗耐热保护剂的研究

应用冻干制品加速热稳定性试验,测试三组冻干保护剂配方对鸡传染性支气管炎(H120株)活疫苗的耐热保护效果。结果表明A配方的耐热保护剂效果最好,使用该保护剂的疫苗表现为37℃放置10d后,病毒含量下降在0.6~0.8个滴度。     

布氏菌病活疫苗（Rev.1株）冻干保护剂工艺的研究

布氏菌病活疫苗(Rev.1株)的冻干工艺借鉴、采纳布氏菌病活疫苗(S2株)成熟的冻干工艺及菌液的配比,对冻干保护剂的选择进行了优化。我们选择蔗糖明胶保护剂和蔗糖脱脂乳保护剂,保护剂与布鲁氏菌Rev.1株菌液以16的比例混合,冻干后测定其活菌含量。结果显示,3批使用蔗糖脱脂乳保护剂的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12×10^9CFUmL、12.44×10^9CFUmL、12.65×10^9CFUmL;使用蔗糖明胶再加入终浓度约1%硫脲的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12.34×10^9CFUmL、12.62×10^9CFUmL、12.91×10^9CFUmL;使用蔗糖明胶的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12.22×10^9CFUmL、12.64×10^9CFUmL、12.8×10^9CFUmL。3种冻干保护剂对冻干疫苗的活菌含量影响无明显差异,但使用蔗糖明胶保护剂制备冻干疫苗时加入适量硫脲可适当增加冻干疫苗的耐热性,因此我们选择10%明胶、20%蔗糖冻干保护剂与菌液以1∶6配比比例混合,再加入终浓度约为1%的硫脲作为布氏菌病活疫苗(Rev.1株)的冻干工艺。     

鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗耐热保护剂筛选和优化

应用冻干制品加速热稳定试验,测试7组冻干保护剂配方对鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（LaSota株＋H120株）的耐热保护效果。试验筛选出用于鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗的耐热保护剂,使用该保护剂的疫苗表现为37℃保存10d,病毒含量下降0．4个滴度,常规疫苗下降2～2．4个滴度;25℃保存30d,病毒含量下降0．4～0．6个滴度,常规疫苗下降1．8～2．6个滴度。证明此保护剂具有良好的耐热效果。     

仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗C500株生产工艺的优化

为优化仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗生产工艺,对细菌生长曲线、耐热保护剂和冻干曲线进行了研究,建立了发酵体积1%、2%和3%的二级种子接种量下分别发酵12 h~20 h的细菌生长曲线,检测3个配苗比例、4种耐热保护剂和3条冻干曲线下成品疫苗的冻干菌存率、活菌存活率和安全性,确定了接种3%二级种子液发酵培养17 h为最佳发酵培养条件,发酵菌数达到428×108CFU/m L;最佳配苗比例为菌液︰耐热保护剂1∶1(V∶V),优化保护剂B作为最佳耐热保护剂,设定冻干程序3#作为最佳冻干曲线。基于此,仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗抗原含量达到40头份/瓶,冻干菌存率和活菌存活率均达到95%以上,大幅度降低了猪体免疫副反应,极大提升了疫苗的产品品质。     

猪瘟无明胶无蛋白耐热活疫苗的研制及冻干工艺

为提高猪瘟(CSF)活疫苗的耐热性能,同时避免明胶和蛋白对猪只产生的免疫副反应,用葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、氨基酸等成分设计无明胶无蛋白耐热保护剂,根据配方的共晶点、塌陷温度科学设计冻干程序,并比较了不同预冻方式对猪瘟活疫苗效价的影响。结果表明,猪瘟病毒采用无明胶无蛋白耐热保护剂配方A冻干后具有较好的耐热性能,37℃保存10,15d,病毒的耐热损失分别为0.6lg和0.9lg;对快冻、慢冻以及退火3种不同的冻干方式进行比较,发现对猪瘟病毒冻干损失由大到小依次为:退火慢冻快冻,而耐热损失则相反;与传统的含明胶含蛋白耐热疫苗相比,猪瘟无明胶无蛋白耐热疫苗耐热效果更好,可在2~8℃长期保存30个月,动物试验表明该疫苗对猪只安全、无副反应。     

仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗的研究

为了解决仔猪副伤寒活疫苗在储存和运输中活菌数下降的问题,试验采用不同保护性基质组成冻干保护剂,与仔猪副伤寒沙门菌混合、冻干制成仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗,测定其冻干保护率和耐热保护率,以评价疫苗的质量。结果表明:T1和T2是优选的仔猪副伤寒耐热保护剂,采用T2保护剂中试生产的3批仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗经37℃保存10 d后,疫苗的耐热保护率在80%以上,且均大于3×109cfu/头份,具有良好的热稳定性,田间试验安全、有效。     

耐热保护剂冻干活疫苗冷冻干燥工艺研究

以鸡新城疫、传染性支气管炎二联耐热保护剂冻干活疫苗的冷冻干燥试验为例,描述了冻干耐热保护剂冻干活疫苗时的工艺改进过程,获得了较佳冻干工艺曲线.     

兽用常温耐热型弱毒活疫苗的研究进展

常温耐热型弱毒活疫苗对预防畜禽疾病具有重要作用，对它的研究越来越多，尤其是耐热冻干保护剂。作者对耐热冻干保护剂的组成、作用机制、效能及畜禽疫病中的应用进行了介绍。     

猪瘟活疫苗耐热保护剂冷冻干燥技术研究

摘　要：随着猪瘟活疫苗耐热保护剂的不断应用,冻干技术的要求也越来越高。通过对冻干工艺的不断研究,采取预冻阶段快速和慢速降温,一期升华阶段选取不同温度等方法,筛选一条合适的冻干曲线,不仅缩短冻干时间,降低生产能耗,而且有利产品质量稳定,为今后耐热保护剂的冷冻干燥提供了研究方向。     

鸡新城疫活疫苗耐热保护剂研究

应用冻干制品加速热稳定性试验,测试三组冻干保护剂配方对鸡新城疫(LaSota株)活疫苗的耐热保护效果。结果表明3号配方的耐热保护效果理想,主要表现为剩余水份含量低,37℃保存不萎缩,各种温度下保存病毒损失量低。     

耐热冻干保护剂在疫苗生产中的应用研究

冻干保护剂可影响生物制品的质量、效价和稳定性，改变生物制品的生产工艺，提高产品预测能力并增大产品批次间的稳定性。耐热冻干保护剂有免疫活性但无药理活性，可在冻干和保存时维持疫苗的稳定性，初次干燥时在适宜的温度下疫苗不倒塌，企业低成本即可获取。     

专利展示

食草家蝇及蝇蛆的繁育方法;鸡传染性喉气管炎冻干疫苗耐热冻干保护剂及制备工艺;鸡痘冻干苗耐热冻干保护剂及制备工艺;依维菌素缓释注射液及其制备工艺和使用方法;鸡传染性法氏囊病弱毒（B87）冻干疫苗耐热冻干保护剂及制备工艺。     

表达传染性支气管炎S1基因和IFN-γ基因重组鸡痘病毒安全性与最适免疫剂量分析

对共表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因和II型干扰素基因的重组鸡痘病毒（rFPV-IFNγS1）冻干疫苗进行安全性和最适免疫剂量的研究。取冻干疫苗,加生理盐水恢复至冻干前体积,分别取0.1 mL经翅内侧无血管处皮下接种1周龄SPF鸡,接种剂量为1.0×10^5PFU,接种后3 d出现局部反应,5 d局部肿胀达到最大,接种鸡无其它全身反应,精神、食欲以及发育等均不受影响,说明重组病毒对实验鸡是安全的。将重组疫苗用生理盐水作倍比稀释后翅内侧无血管处皮下接种4周龄SPF鸡,接种剂量为1.0×10^1-1.0×10^4PFU,免疫后3周攻击传染性支气管炎病毒LX4株。结果表明,在接种剂量为1.0×10^2-1.0×10^4PFU的剂量范围内均可以使全部实验鸡产生局部反应,并对IBV的攻击形成保护,降低免疫鸡的发病率和死亡率,发病保护率达到73%以上;1.0×10^1PFU接种实验鸡后,仅有5/11的鸡出现局部反应,对IBV攻击的发病保护率为64%,与对照组差异不显著（P〉0.05）。以上结果说明,疫苗接种后的局部反应与重组疫苗的免疫效力之间具有相关性,根据疫苗生产使用实际情况确定传染性支气管炎重组鸡痘病毒疫苗的最适免疫剂量为10^3PFU。     

羊传染性脓疱病毒耐热冻干保护剂筛选及冻干曲线优化

采用冻干试验筛选出保护剂基础配方,再通过Plackett-Burman设计法筛选主要保护剂基质,然后通过Box-Behnken响应面分析法对羊传染性脓疱病毒(ORFV)耐热保护剂配方进一步优化,用冻干试验进一步验证筛选出1种针对ORFV保护效果最好的耐热冻干保护剂作为疫苗用候选配方。同时,依据前期试验获得的活疫苗冻干曲线,通过进一步优化,获得疫苗最佳冻干曲线。利用该冻干工艺冻干的疫苗,保护剂的保护率可达95.3%,且疫苗各项指标均达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》要求。经37℃保存7,15,30d病毒滴度分别下降0.46,0.70,1.00;2~8℃保存3,6,12,24个月病毒滴度分别下降0.10,0.10,0.40,0.60,证明此配方制备的疫苗具有良好的热稳定性。本试验解决了ORFV细胞弱毒疫苗仅能在低温条件下保存和运输的瓶颈技术问题,使疫苗的储存、运输更为方便。