实验性脾虚证大白鼠酶组织化学研究

将45只大白鼠随机分成3组，即实验组、治疗组及对照组，每组15只。以利血平致大白鼠脾虚证模型，分阶段捕杀动物，取肝脏、胃、十二指肠，用酶组织化学方法测定酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的变化。结果表明：实验组、治疗组、正常对照组各酶活性均发生了变化，在第7天、第14天时组内各酶存在着动态学上的变化。治疗组各酶活性接近正常对照组，说明四君子汤具明显的治疗作用。     

实验性脾虚证大鼠肝脏和肌肉组织中糖原变化的组织学观察

将45只大白鼠随机分成对照组、脾虚模型组及治疗组,每组15只。以利血平(1mg/kg·d)复制大白鼠脾虚证模型,四君子汤辅助治疗,在实验进行至第7天和第14天分别捕杀各组大白鼠,取肝脏、肌肉组织,用组织化学方法测定在不同组间和不同实验阶段其中糖原的变化。结果,在第7天时,脾虚组和治疗组糖原含量明显低于正常对照组,第14天时,与正常对照组相比较,脾虚组和治疗组糖原含量显著升高,且脾虚组糖原含量较其它两组高,提示肝脏和肌肉组织中糖原的变化可能是脾虚证发生发展的重要指标。     

骨骼肌琥珀酸脱氢酶的组织化学方法探讨

应用骨骼肌琥珀酸脱氢酶法检测哺乳动物骨骼肌的肌纤维型 ,在 1 95 7年首先由 Nachlas等 [1]创建色素形成四唑盐法 ,倍受各国学者的广泛青睐而加以普遍应用。经过四十多年来的改良和创新 ,为了迅速、方便地切实反映骨骼肌各型肌纤维间的分辨 ,提高肌纤维的区分度。利用镁离子作为酶的激活剂来激活骨骼肌细胞浆内线粒体中琥珀酸脱氢酶 ,在其脱氢作用下 ,含有双四唑盐的底物释放出氢原子 ,与无色的双四唑盐结合 ,还原形成蓝色的双甲月赞色素 ,沉着于酶作用的所在部位 ,据此分出染成蓝色的 型纤维和未染色的 型纤维。 1 96 8年 Pearse[2 ]发…     

实验性脾虚证大鼠免疫细胞因子变化及四君子汤对其影响

本文分别通过大鼠肌肉注射利血平和口服小承气汤两种方法复制脾虚证动物模型,比较研究了脾虚证大鼠细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF)的含量变化,并用四君子汤治疗以反证.结果表明,不论利血平法复制脾虚证动物模型,还是小承气汤复制脾虚证动物模型,均表现为外周血IL-2、IL-6和TNF含量明显低于正常对照组与四君子汤治疗组(P＜0.01),对照组与治疗组之间除利血平所致脾虚证动物模型用四君子汤治疗后TNF含量明显高于对照组(P＜0.05)以外,以上其它指标均无明显差异(P＞0.05).说明脾虚大鼠产生IL-2、IL-6和TNF等细胞因子能力下降,使免疫功能处于低下状态,四君子汤治疗能够提高脾虚证大鼠产生细胞因子的能力,从而达到健脾益气调整机体的免疫功能.     

四君子汤对实验性脾虚证模型大鼠血浆内几种神经肽含量的影响

为了阐明脾虚证模型大鼠血浆中部分神经肽的变化规律和健脾益气方剂四君子汤对神经肽的调节作用以及对脾虚证病理过程的保护机制，应用利血平和苦寒中药方剂小承气汤两种方法复制出脾虚证大鼠模型，以特异性放射免疫分析法检测了血浆β－内啡肽（β－endorphin,β-EF)、降钙素基因相关肽（Calcitonin gene related peptide,CGRP)和神经肽Y（Neuropeptide Y,NPY)的含量变化。结果表明：两种方法复制的大鼠脾虚证模型均表现为血浆β－EP、CGRP比对照组显著升高（P＜0.01)，NPY比对照组显著降低（P＜0.01)，以上变化经四君子汤治疗后都有不同程度的好转，与模型组比较差异极显著（P＜0.01)，接近对照组水平。提示脾虚证的病理变化过程与β－EP、CGRP、NPY等神经肽类的失衡有一定的相关性，而健脾益气方剂四君子汤对脾虚让模型大鼠血浆内神经肽含量有较好的调节作用，推测这也许是该方能够治疗脾虚证的作用机制之一。     

铜缺乏奶牛琥珀酸脱氢酶的组化特征

为探讨铜缺乏对奶牛心脏、肝脏、肾脏琥珀酸脱氢酶 (SDHase)组化特征 (分布特点及活性 )的影响 ,本实验选择铜缺乏症高发区自然发病的奶犊牛 6头 ,剖杀后采集心、肝、肾作冰冻切片及酶组化染色 ,以 6头同年生健康奶犊牛为对照。实验结果表明 ,发病组奶牛心脏中 SDHase计数值显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,而肝脏、肾脏中SDHase计数值显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ;健康组奶牛心脏、肝脏、肾脏中 SDH活性扫描值均显著大于发病组(P<0 .0 5 )。发病奶牛组组织中 SDHase酶颗粒的分布也发生特征性的变化。结论 :氧化呼吸链关键酶活性的改变是导致奶牛铜缺乏症病理过程的重要原因     

银杏叶复方干预大鼠脾虚证的代谢组学初步研究

试验基于大鼠脾虚证模型,经与传统固本方剂-四君子汤比较,初步揭示银杏叶复方干预大鼠脾虚证营养物质代谢方面的影响.选择24只雄性SD大鼠,随机分为对照组、脾虚模型组、四君子汤组和银杏叶复方组,每组6只.对照组给予生理盐水灌服(10 mL/kg)和皮下注射(0.6 mL/kg),脾虚模型组给予生理盐水灌胃(10 mL/kg...     

一次力竭运动对雌性大鼠琥珀酸脱氢酶的影响

目的:通过实验观察雌性大鼠一次性力竭游泳训练后,雌性大鼠股四头肌、腓肠肌和心肌琥珀酸脱氢酶活性的变化,初步探讨一次性力竭运动对雌性大鼠琥珀酸脱氢酶的影响及原因.方法:健康成年雌性Sprague Dauley(SD)大鼠32只,随机分为4组,C(C,n=8),运动后立即取材组(T0,n=8)、运动后12 h取材组(T12...     

实验性脾虚证大鼠血浆胃泌素和胃动素含量变化及四君子汤对其调整作用

通过大鼠肌肉注射利血平的方法复制了脾虚证动物模型，并应用四君子汤治疗反证，研究了脾虚证大鼠血浆胃泌素（GAS）和胃动素（MOT）的含量变化。结果表明，脾虚证大鼠血浆GAS和MOT含量显著降低，与对照组和四君子汤治疗组比较差异极显著（P＜0．01），对照组与四君子汤治疗组之间GAS和MOT的变化无明显差异（P＜0．05）；脾虚时的消化吸收机能障碍和胃肠动力学的改变与GAS和MOT的分泌减少密切相关；四君子汤能够提高血浆GAS和MOT含量，有效地改善脾虚证的胃肠功能。     

四君子汤对脾虚北京鸭胃肠组织中血管活性肠肽和生长抑素mRNA表达的影响

为从分子水平阐明脾虚与胃肠激素之间的关系以及健脾中药四君子汤防治脾虚的机制，首次用北京鸭复制脾虚证模型，以半定量的RT—PCR方法检测其腺胃、十二指肠和空肠血管活性肠肽（VIP）和生长抑素（SS）mR—NA表达的变化。结果表明，脾虚组腺胃VIPmRNA表达显著高于对照组（P〈0．05），十二指肠和空肠VIPmR—NA表达有所升高（P〉0．05）；脾虚组腺胃（P〈0．01）、十二指肠（P〈0．05）和空肠（P〈0．01）SSmRNA表达显著低于对照组。经四君子汤预防和治疗后二者恢复到接近对照组水平。提示脾虚证与VIP和SS有一定关系，四君子汤对VIP和SS水平的影响可能是该方治疗脾虚证的作用机制之一。     

脾虚仔猪口服左旋氧氟沙星的"辨证药动学"研究

15头健康仔猪，分3组，每组5头：即健康组、脾虚组和四君子汤反证组。按20mg／kg的剂量内服进行左旋氧氟沙星的辨证药动学研究。高效液相色谱法测定血浆中药物浓度，3p97药代动力学程序处理药时数据。健康组和脾虚组药动学数据符合一级吸收一室模型，四君子汤反证组药动学数据符合一级吸收二室模型。试验结果表明：仔猪脾虚状态下明显影响左旋氧氟沙星内服给药的药动学特征(PK)；四君子汤可使脾虚仔猪异常的左旋氧氟沙星的药动学特征得到恢复，为验证“辨证药动学”假说和完善中西兽医结合提供了进一步的科学依据。     

实验性脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其的调整作用

分别用小承气汤和利血平复制大鼠脾虚证模型，通过检测血清和心、肝、脾、肾等组织中抗氧化酶SOD和GSHP－Px的活性及脂质过氧化反应终产物MDA含量，研究脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其影响。结果表明：两种方法复制脾虚证模型与对照组比较均表现为SOD活性显著升高（P＜0．05），GSH－Px活性显著降低（P＜0．05）；四君子汤反证治疗组与脾虚证组比较表现为SOD活性显著下降（P＜0．05），GSH－Px活性显著升高（P＜0．05），MDA含量显著降低（P＜0．05），与正常对照组接近。表明大鼠虚证动物模型与体内自由基代谢紊乱，脂质过氧化作用增强存在一定关系，健脾益气方药四君子汤能够提高体内抗氧化酶活性，拮抗自由基对生物膜的过氧化损伤，具有抗脂质过氧化损伤的作用。     

四君子汤对仔猪胸腺及脾脏生长激素受体mRNA表达的影响

选用90头新生"杜×长×大"三元杂交仔猪,随机分为3组,每组30头,分别为中药I组(中药添加剂量10 g/kg),中药Ⅱ组(中药添加剂量20 g/kg),对照组(基础日粮组),试验期为31 d.45日龄时每窝随机选取6头仔猪屠宰后,分别采集胸腺和脾脏.采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析仔猪胸腺及脾脏中生长激素受体(GHR)mRNA的相对丰度.结果显示,与对照组相比较,2种剂量中药组的仔猪胸腺及脾脏中生长激素受体mRNA的含量均不同程度地提高,中药Ⅱ组效果更为显著.     

梅花鹿铜缺乏综合征的复制

为了证明梅花鹿铜缺乏综合征的发生与饲料铜含量的关系，以含铜３．３３×１０－６的日粮饲喂１３１只幼龄圈养梅花鹿，于２８个月后开始发生铜缺乏综合征，继续饲喂到３９个月时，其显症率达９．１６％。人工复制的梅花鹿铜缺乏综合征的临床症状与自然发生者相一致，主要为患鹿后躯运动失调，渐进性瘫痪；意识清楚，无癫痫、抽搐症状发生；被毛颜色变淡，眼睛周围出现白眼圈。ＲＢＣ为（７．５６±０．８３）×１０１２／Ｌ，Ｈｂ（１６３．３０±１２．９０）ｇ／Ｌ，血清铜蓝蛋白氧化酶（２５．７３±６．４５）ＩＵ／Ｌ，均显著低于对照组。血清铜（５．６２±０．８０）μｍｏｌ／Ｌ，毛铜（４．５５±１．２８）ｍｇ／ｋｇ，均显著低于对照组；血清铁（２８．４８±２．４７）μｍｏｌ／Ｌ，显著高于对照组。主要病理变化为脑、脊髓神经脱髓鞘；部分神经元变性坏死；血管壁肥厚，内膜粗糙，管腔变窄，脆性增加；肝、脾、淋巴结含铁血黄素沉着及骨质疏松。日粮中铜含量为７．３３×１０－６时，梅花鹿发育良好，体质健壮，生产性能优越，无铜缺乏综合征发生。表明这一铜含量可作为梅花鹿铜元素饲养标准的参考值。     

脾虚大鼠胰岛胰多肽免疫阳性物质分布变化

脾虚证的临床表现以消化系统功能障碍为主,其中胰腺外分泌功能减退明显,且伴有食欲与体质量的显著下降.胰多肽(PP)是胰岛周边F细胞分泌的主要胃肠激素,对胰腺外分泌功能与食欲的调节有抑制作用,可导致氧化代谢增强,引起体质量下降.本试验旨在揭示大鼠胰岛胰多肽分泌变化与脾虚证发病之间的关系.笔者以利血平脾虚大鼠模型为研究对象,采用SP染色进行免疫组织化学研究,观察大鼠胰岛中胰多肽免疫阳性物质的分布情况.脾虚组与对照组的大鼠胰岛中胰多肽免疫阳性物质面积与胰岛面积百分比相比,胰头部分未见明显差异(P＞0.05);但脾虚组胰中、胰尾的PP免疫阳性物质所占面积极显著大于对照组(P＜0.01).结果表明,脾虚证大鼠胰岛中胰多肽总分泌量极显著增加.因此,胰多肽的分泌增加是导致脾虚证动物出现胰腺外分泌功能低下、食欲减退以及体质量下降的主要因素.