螯合剂在ELISA检测饲料中黄曲霉毒素B_1上的应用研究

<正>在饲料生产上,以无机盐形式添加来满足畜禽的微量元素需要仍为主要手段。目前必需微量元素添加剂的不科学补充主要表现为超量添加,尤其在配合饲料中使用高铜、高锌和高铁制剂。由此带来的霉菌毒     

螯合剂对ELISA检测饲料中黄曲霉毒素B_1的应用研究

针对饲料中大量添加无机微量元素造成黄曲霉毒素B1检测结果假阳性的问题,在样品提取液中添加一定量的3种金属离子螯合剂[乙二胺四乙酸二钠(Ⅰ)、柠檬酸铵(Ⅱ)和二异丁基二硫代磷酸钾(Ⅲ)],分别讨论其对4种金属离子(Cu2+、Fe2+、Mn2+和Zn2+)的消除能力及处理后对EusA检测体系的影响.研究表明,3种螯合剂的作用离子效果依次为IⅡ>I>Ⅱ,并且3种螯合剂对ELISA测定的影响小,在(2～8)×103 mg/kg浓度下,无显著差异;3种螯合剂混合进行样品提取时,样品加标平均回收率为97.8%;使用该方法测定30份不同饲料样品,阳性率仅为6.67%.     

湖南省部分地区饲料中黄曲霉毒素B1的检测

饲料发霉变质和畜禽霉菌毒素中毒是世界性问题,其严重程度因地区和饲料加工水平而异。我国长江以南多数地区的饲料霉菌及其毒素含量都较高,尤其是广东、广西等省区的饲料污染更为严重。黄曲霉属贮藏霉菌,分布极为广泛,只要温度在25℃左右,基质含水量超过13%,相对湿度在70%以上,就能大量繁殖,产生有毒代谢产物,损害动物,诱发癌症和抑制免疫     

畜禽饲料中黄曲霉毒素B1的危害及检测

黄曲霉毒素B1是所有已知黄曲霉毒素中毒性最强的一种,是迄今为止发现的致癌性最强的天然毒物.在养殖生产过程中,部分养殖户对霉菌毒素的危害认识不充分,往往更注重药物、疫苗的防治,忽视了霉菌毒素的检测净化,导致畜禽生产性能下降,经济效益降低,影响畜禽产品质量,危及人畜健康.本文介绍了一种免疫亲和柱净化结合高效液相色谱法的方案...     

酶联免疫法检测饲料中黄曲霉毒素B1

本文采用ELISA法测定黄曲霉毒素B1。本法检测线性范围0.1～10ng/ml,最底检出浓度0.1ng/ml,回收率87%～95%。本法具有快速、简便和一次可批量定性定量的优点,适用于饲料等样品的黄曲霉毒素B1的分析测定。     

应用ELISA检测进口玉米粒饲料中的黄曲霉毒素B1

黄曲霉毒素是黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的一类有毒副代谢产物.黄曲霉毒素B_1(AFB_1)是这类毒素中最毒的化合物,并且是自然界中最严重的致癌物之一.农产品中如花生、谷粒和动物饲料常常遭受AFB_1污染,这已成为影响人畜健康的潜在危害.在泰国和印度尼西亚,农产品受黄曲霉毒素污染已是一个严重的经济问题.     

饲料中黄曲霉毒素检测研究进展

饲料中黄曲霉毒素的检测对饲料工业的发展非常重要,随着科技发展,饲料中黄曲霉毒素的检测技术越来越多。本文从黄曲霉毒素的来源及其对畜禽业危害、黄曲霉毒素的检测方法、展望3个方面进行综述,以期为检测饲料中黄曲霉毒素提供参考。     

饲料中黄曲霉毒素B1的毒性机制研究进展

黄曲霉毒素B1(AFB1)是当下所有已知的霉菌毒素中分布最广、最具代表性的毒素,具有强毒性、致癌性和致畸性。常见的饲料原料极易受到AFB1污染,严重危害动物健康,不仅给养殖生产带来重大经济损失,还会残留于动物产品中威胁人类健康。AFB1的毒性机制包括抑制动物生长发育、氧化应激、线粒体损伤、内质网应激、免疫毒性、细胞凋亡及脂质代谢紊乱等方面。文章对AFB1在体内的代谢过程及其毒性机制进行了综述。     

水产养殖饲料黄曲霉毒素B1的ELISA快速检测

黄曲霉毒素B1(AflatoxinsAFB1)是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素),前者为基本毒性结构,后者与致癌有关。AFB1可由黄曲霉、寄生曲霉和A.nomius产生,其理化性状稳定,可通过食物链从一种生物体转移到另一种生物体,导致人体中毒。鉴于此,欧盟规定用于动物饲料产品中AFB1最高残留限量(MRL)不能超过2.0μg/kg。基于抗原抗体特异性反应建立起来的ELISA方法,具有简单、快速、灵敏度高、处理样品量大、重复性好等特点,已成为实验室最常用的药物残留快速筛选方法之一。本实验利用荷兰E.D生产的黄曲霉毒…     

玉米中黄曲霉毒素 B1的检测方法

青刈饲料是指人工播种的专供家畜饲用的青饲作物。这类饲料在贮存时要防止潮湿或霜冻。我国常用的青刈饲料作物有青刈玉米、雀麦、青刈高粱、燕麦、黑豆、蚕豆、饲用甘蓝和甜菜等。玉米是我国继大米之后的第二大粮食作物,但是霉菌毒素对玉米的污染远远严重于对大米的污染。从玉米中黄曲霉毒素的检出率高达83.9%。动物食用了黄曲霉毒素污染的玉米同样会受到危害,并且黄曲霉毒素会在动物体内富集,最终危害人类的健康。     

ELISA在检测饲料黄曲霉毒素总量中的应用

实验研究了酶联免疫吸附法(ELISA)测定饲料中黄曲霉毒素总量的方法。采用70%甲醇萃取饲料中黄曲霉毒素,应用固相直接竞争酶联免疫吸附原理,建立标准反应曲线Y=-21.1X+120.11,R2=0.998。该方法简单、快捷、准确,回收率在97.71%￣102.74%之间。     

ELISA法检测配合饲料中黄曲霉素B_1前处理方法的改进研究

用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测配合饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量,关键在于样品的前处理。本文对配合饲料中AFB1的前处理作了方法改进。结果表明:改进后的前处理方法较国标方法能显著地提高AFB1的检出量,与高效液相色谱法(HPLC)法数据一致,且改进方法加标回收理想,平均回收率为87.3%～94.5%。     

寄生曲霉的花生粕固体培养及其AFB1的ELISA定量检测

饲料原料及配合饲料中的霉菌毒素污染甚为严重,极易通过食物链最终影响人类健康。在各种常见霉菌毒素中,黄曲霉毒素危害最大,尤其是AFB1具有强致畸、致突变作用犤1犦。还有研究者发现,AFB1是一种强致癌物,与肝癌的发生率有很大关系。长期食用被AFB1污染食品的人群,其肝癌发生率较正常人群明显升高犤2-5犦。因此,全球范围内都在通过立法机构来限制食品与动物饲料中黄曲霉毒素的含量,尤其是AFB1。为此,特进行此次花生粕霉菌发酵试验,同时采用ELISA试剂盒测定花生粕培养基中AFB1的含量犤7犦,为该领域的深入研究提供参考。1材料与方法1.…     

酶联免疫法检测饲料中莱克多巴胺的探讨

莱克多巴胺(Ractopamine)属于β-兴奋剂。β-兴奋剂是营养重分配剂的一种,是一类结构和功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇胺类衍生物,它可以加快畜禽生长速度,降低酮体脂肪含量,提高瘦肉率。β2-兴奋剂常见的有克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等,克伦特罗俗称"瘦肉精"。随着我国对克伦特罗监管力度的加大,克伦特罗的使用逐渐减少,其他β2-兴奋剂的使用逐渐增加。莱克多巴胺(ractopamine)是美国最新研制出的一种β2-兴奋剂,由于莱克多巴胺有类似于盐酸克伦特罗的作用,在动物组织中残留,可能对人体产生不利影响,所以我国农业部、卫生部、国家药品监督管理局明文禁止莱克多巴胺用于动物养殖,目前我国还未统一监测莱克多巴胺的方法,因此建立莱克多巴胺的快速、准确的测定方法以适合市场监测十分必要。目前国内对β2-兴奋剂测定的方法主要有:酶联免疫法、高压液相色谱(HPLC)法以及气相色谱-质谱朕用法(GC-MS)等,而酶联免疫分析技术具有检测快速(检测过程只需要2h)的特点。经过试验研究,应用酶联免疫法检测莱克多巴胺,回收率可达到95%以上,相关系数(r值)可达到0.99以上,而最低检测限能达到0.5ng/ml。     

黄曲霉毒素B1免疫层析检测方法的研究

以柠檬酸三钠为还原剂,制备了20nm胶体金颗粒,以此胶体金标记纯化的单抗4G6,喷于玻璃纤维上,AFBl蛋白偶联物和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装,切割成胶体金试纸条。结果：组装的试纸条特异性好,与AF类似物无交叉反应,对AFBl标准品最低检测限为3μg／L,检测时间约为10min,批内和批间重复性为100％,假阳性率和假阴性率均为0。操作简便,成本很低,适于AFBl的现场快速检测。在制备了单克隆抗体的基础上,应用胶体金免疫层析技术,建立了食品中黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFBl）快速检测方法。     

酶联免疫法检测饲料中呋喃唑酮含量的探讨

呋喃唑酮酶联免疫反应测试盒是利用竞争性酶联反应原理,广泛应用于水产、养殖及动物肉制品（如鸡肉、牛肉和猪肉组织）、尿样、血清、鸡蛋和蜂蜜中呋喃唑酮（AOZ）残留的定量检测。经试验证明,该试剂盒具有快速提取被测样品中违禁药物呋喃唑酮,提取时间仅需4h;高灵敏度能够检测到标准曲线中0．05ng／mL浓度的呋喃唑酮;低检测下限,能够检测到被检测饲料样品中0．1μg／kg含量的呋喃唑酮,而这个含量要低于欧盟标准要求的1μg／kg;检测过程时间短,只需要2h左右;高重复性,离散系数（CV值）≤3．5;标准曲线r≥0．9965;能够达到80％～95％以上的回收率等特点。     

酶联免疫法测定饲料中盐酸克仑特罗含量

采用酶联免疫法测定饲料中盐酸克仑特罗的含量。方法的最低检测限为100μg/kg,线性范围0.1～2.7μg/L,r=0.9997。浓度为100、500、1000μg/kg的添加水平时,回收率分别为74％、81％和90％;板内变异系数<15.0％,板间变异系数<14.4％。此方法快速、灵敏、准确、经济,具有实际应用价值。