铁皮石斛组培快繁技术

以铁皮石斛茎段为外植体,探究最佳的外植体消毒方法和最适的诱导、增殖、生根培养基,进而优化铁皮石斛组培快繁体系。结果表明,最佳外植体消毒方法为30%次氯酸钠消毒10 min,外植体污染率6%,死亡率0;最适诱导培养基为基础培养基(MS)+2 mg·L^-1细胞分裂素(BA)+0.5 mg·L^-1萘乙酸(NAA),在此培养基中再生芽生长快速且健壮,诱导率为5.6;最适增殖培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 BA,在此培养基中丛生芽芽势健壮,生长快,增殖率为3.8;最适生根培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA,在此培养条件下组培苗的平均根数达7.3条,平均根长5.8 cm,根系正常且生长快速。本研究优化了铁皮石斛组培快繁体系,可为组培快繁工厂化生产流程的进一步优化提供依据。     

茶用菊花‘金丝皇菊’的组培快繁技术研究

为了建立茶用菊花‘金丝皇菊’快繁体系，以‘金丝皇菊’当年生茎段为外植体，研究外植体的消毒、诱导培养、生根壮苗、炼苗移栽及苗圃管理，建立一套适合‘金丝皇菊’的组培快繁技术体系。结果表明：‘金丝皇菊’初代培养的最佳表面消毒条件为15%次氯酸钠消毒20 min；最佳诱导培养基为MS+2.0 mg·L^-16-BA+0.3 mg·L^-1NAA；最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1NAA+0.4%活性炭，接种28 d后平均生根数可达17条，生根率100%；炼苗时间为1.5 d左右较为合适。初步构建‘金丝皇菊’组培快繁技术体系，为‘金丝皇菊’的优质高效产业化栽培用苗与种苗脱毒提供了技术支持。     

掌叶覆盆子组培快繁技术

为掌叶覆盆子的组培快繁筛选最佳培养基配方。以掌叶覆盆子优良单株NS8一年生枝条为外植体,在不同激素成分及浓度水平下进行组织培养试验。结果表明:最适宜的诱导培养基为MS+6-BA 1.5mg·L^-1+NAA 0.15mg·L^-1+GA30mg·L^-1,诱导率达到68%,芽苗健壮;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,苗势健壮,增殖系数达到4.87;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.6mg·L^-1+IBA 0.2mg·L^-1+活性炭0.8g·L^-1,生根率达到95.3%,生根数达到5.7条,根长达到5.8cm,根系发达,苗势健壮。结果表明筛选出的最佳培养基配方适宜本土掌叶覆盆子品种的组培快繁,为在短期内获得大量优质种苗及大规模商业化生产提供依据。     

白花除虫菊高效再生体系的建立

【目的】筛选出适宜白花除虫菊外植体的消毒方法、外植体诱导、继代培养及生根培养阶段适宜的培养基配方，建立白花除虫菊高效再生体系。【方法】以白花除虫菊尚未张开的花蕾作为再生体系的外植体材料，花蕾经过灭菌消毒以后，采用MS固体培养基，比较不同种类植物生长调节剂浓度配比对白花除虫菊花蕾诱导出芽、增殖及生根等关键环节的影响。【结果】白花除虫菊花蕾外植体最适宜的消毒条件为75%酒精处理30 s后用0.10%氯化汞溶液消毒10 min，之后用15%次氯酸溶液处理15 min；白花除虫菊花蕾诱导芽的最适培养基为MS+2.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1TDZ+0.2 mg·L^-1IBA；白花除虫菊芽增殖的最适培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1TDZ+0.1 mg·L^-1IBA；白花除虫菊生根的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1IAA+0.1 mg·L^-1IBA；炼苗移栽的最适基质为...     

芦笋优系T2-32-6组培快繁技术

本试验以芦笋优系T2-32-6嫩茎为外植体,通过不同茎段部位外植体灭菌效果比较、诱导增殖与生根培养基的筛选,优化了T2-32-6的组培快繁技术。结果表明,嫩茎的绿色部分是适宜的外植体材料;适宜芦笋茎段诱导、增殖丛芽的培养基为MS+0.2 mg·L^-1 NAA+0.3 mg·L^-1 6-BA,易形成鳞茎盘,利于诱导生根;1/2MS+0.05 mg·L^-1 NAA+0.05 mg·L^-1 KT+0.5mg·L^-1嘧啶醇的激素组合培养基生根率较佳,可达80.6%。本研究为芦笋优系T2-32-6的种苗组培扩繁和生产试验提供了较好的技术基础。     

2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

白花悬钩子的叶片组培快繁与植株再生研究

为获得一套完整高效的白花悬钩子(Rubus leucanthus Hance)组培快繁技术体系,以叶片为外植体,系统研究了外植体不同灭菌时间、不同植物激素配比及浓度对愈伤组织诱导及丛生芽分化、增殖和生根的影响,并进行了组培苗移栽。结果表明：最佳的外植体灭菌方式为2%NaClO溶液2 min+0.1%HgCl₂溶液5 min,实现了污染率最低(23.33%)、存活率最高(73.33%);最佳的丛生芽分化诱导培养基为MS+3.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 KT+0.5 mg·L^-1 NAA,愈伤组织诱导率为100%,芽诱导率为93.33%;6-BA与KT对增殖系数有显著影响,最佳的继代增殖培养基为MS+2.5 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 KT+0.4 mg·L^-1 NAA,培养20 d的增殖系数达7.84;最适的生根培养基为1/2MS+1.0 mg·L^-1 IBA,生根率为10...     

多肉植物红宝石组织培养快繁技术

为建立多肉植物红宝石高效组织培养快繁技术体系,为工厂化生产提供技术保障。以多肉植物红宝石的幼嫩叶片作为外植体,进行多肉植物红宝石组培快繁技术研究。结果表明:采用75%酒精浸泡60s,再使用0.1%升汞处理10min是红宝石外植体最佳消毒处理方法。红宝石愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.5mg·L^-1+NAA 0.5mg·L^-1(pH=6.0),诱导率可达83.3%;愈伤组织分化成芽的最适培养基为MS+6-BA 0.6mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1(pH=6.0),分化率可达77.78%;生根最适培养基为1/2MS+活性炭2.0g·L^-1(pH=6.0),生根率可达70.00%。     

食用玫瑰烈火组培快繁关键技术研究

【目的】研究食用玫瑰烈火的组培快繁技术,建立组培快繁技术体系,解决烈火食用玫瑰种苗工厂化生产的瓶颈问题。【方法】通过对比试验,筛选外植体最佳的消毒药剂及处理时间组合;通过正交试验,筛选芽苗增殖培养最佳的植物生长调节剂种类及浓度水平,筛选最佳的生根基本培养基、植物生长调节剂种类及浓度水平。【结果】(1)食用玫瑰烈火的外植体消毒以0.1%HgCl2处理8 min,外加6%次氯酸钠溶液处理3～6 min效果最佳;(2)芽苗增殖最优培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+TDZ 0.06 mg·L^-1,增殖系数达3.47;(3)芽苗生根最佳培养基为改良1/2MS+NAA0.2 mg·L^-1+IBA0.01 mg·L^-1,生根率达89.44%,根系健壮。【结论】通过外植体消毒对比试验,芽增殖、生根培养正交试验所建立起的食用玫瑰烈火组培快繁技术体系,可为烈火食用玫瑰种苗工厂化生产提供技术支撑,促进食用玫瑰在农业上的推广应用。     

甜瓜自交系‘羊角蜜’植株再生及遗传转化体系的建立

组培再生体系是进行植物遗传转化、开展功能基因组学研究的前提条件,然而目前甜瓜的组培再生及遗传转化体系仍不成熟,限制了该领域基因的功能研究和育种应用。本研究以薄皮甜瓜(Cucumis melo L.)自交系‘羊角蜜(YJM)’为试材,系统比较和分析了外植体类型、基础培养基、激素浓度、抗生素和农杆菌菌株等因素对其组培再生和遗传转化的影响。结果表明播种后2 d子叶节的不定芽分化率显著高于5 d后子叶节和下胚轴;相较B5、N6、WHITE和SH四种诱导培养基,外植体在MS或LS上具有更高的愈伤诱导率及不定芽分化率;当培养基中6-BA浓度为0.5 mg L^-1时,不定芽诱导率最高、生长状态最好;据此提出‘YJM’播种后2 d子叶节的最佳诱导培养基配方为(MS/LS基础培养基+0.5 mg·L^-1 6-BA+1 mg·L^-1 ABA+30 g·L^-1蔗糖+9 g·L^-1 Agar)。随后,我们比较了三种生根培养基(MS+9 g·L^-1 Agar、MS+0.5 mg·L...     

侧柏茎段培养快速繁殖技术研究和黄帝手植柏克隆

以3个不同年龄段的侧柏茎段为外植体,探讨基本培养基、植物生长调节剂、大量元素对侧柏茎段培养快繁的影响,研究侧柏茎段培养快速繁殖技术,并分析年龄对培养各阶段的影响,进而建立了黄帝手植柏克隆繁殖技术体系。结果表明,在试验范围内,各年龄段的侧柏茎段消毒效果均随消毒时间延长而提升,黄帝手植柏最佳升汞消毒时间为8 min;各年龄段的侧柏外植体在不同培养基上启动率均大于90%,选择MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 6-BA作为黄帝手植柏适宜启动培养基,启动率可达100%;50 a侧柏适宜在较高激素浓度的增殖培养基上培养,800、3 000 a侧柏适宜在中等激素水平的培养基上培养,黄帝手植柏适宜增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 6-BA,30 d增殖系数为2.52;随着侧柏年龄增大,茎段生根更加困难,800、3 000 a侧柏在培养基MS+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA上有较好的生根效果,黄帝手植柏适宜生根培养基为MS+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA。本研究初步建立了黄帝手植柏茎段培养技术体系,为黄帝手植柏的克隆和种质资源保存奠定了技术基础。     

野生五叶草莓的组织培养繁殖技术研究

为了建立野生五叶草莓茎尖培养组培快繁技术,为其再生离体诱导及离体染色体加倍等技术奠定基础,以采挖于秦巴山地的野生五叶草莓(F. pentaphylla Lonzink.)匍匐茎的茎尖为材料进行初始离体培养,获得无菌苗,并以此无菌苗为材料筛选五叶草莓增殖培养基及生根培养基。结果表明:利用野生五叶草莓匍匐茎茎尖在MS+0.5 mg·L^-1 6-BA培养基上获得无菌苗,适合五叶草莓快繁的培养基为MS+0.4 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1NAA,增值倍数为8.150;适合其生根的培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1NAA,株诱导根数多,诱导根粗、长度长,有利于有利于获得壮苗。     

天津野生山樱花组织培养与再生体系的建立

本试验以天津发现的野生山樱花（Cerasus serrulate L.）幼嫩茎段为试材,设置不同的激素配比、培养基支撑物和移栽基质,筛选适宜不定芽分化增殖、诱导生根和移栽炼苗的最优条件,建立野生山樱花高效组培再生体系。结果表明：丛生芽增殖的最佳培养基为MS+0.50 mg·L^-1 TDZ+1.00 mg·L^-1 GA₃+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数可达3.96,玻璃化率最低（6%）且玻璃化程度轻,叶片嫩绿明显增大,芽苗生长健壮。最佳生根诱导培养基为以水苔为支撑物的1/2MS+0.10 mg·L^-1 IBA+0.10 mg·L^-1 NAA,生根率最高,可达94.59%,单株不定根数为3条,单株侧根数高达10条。最佳移栽基质为蛭石+珍珠岩+草炭（体积比2∶1∶1）,移栽成活率最高为98.21%。最适宜的炼苗时间为水苔支撑生根闭瓶炼苗5 d。本研究建立了天津野生山樱花组织培养与植株再生体系,为北方山樱花野生资源在妥善保护的基础上开发应用提供了依据。     

黑加仑稳定增殖体系的建立

本试验以两年生黑加仑盆栽苗新梢为外植体,探索在不同无机盐含量、蔗糖浓度、不同植物生长调节剂配比的条件下,黑加仑腋芽诱导、萌发的最优条件,并结合试管扦插的方法建立黑加仑稳定增殖体系。结果表明,黑加仑腋芽诱导的最优条件为:1/2 MS+0.5 mg·L^-1 IAA+2.0 mg·L^-1 GA₃+20 g·L^-1蔗糖;在MS+0.25 mg·L^-1 IAA+2.0 g·L^-1活性炭+20 g·L^-1蔗糖的培养基上可获得生长健壮的黑加仑组培壮苗。本试验建立了黑加仑组培稳定增殖体系,可为黑加仑工厂化育种及其相关研究奠定一定基础。     

百花山葡萄组织培养和快速繁殖

百花山葡萄(Vitis amurensis Rupr. var. dissecta)野外仅见一株,是北京市重点保护濒危物种。通过比较不同消毒方法、植物生长调节剂的种类和浓度配比、生根培养基类型,建立百花山葡萄组织培养快速繁殖体系。结果表明,15%的H₂O₂消毒4 min的效果最好,培养基MS+0.6 mg·L^-16-BA+0.3 mg·L^-1NAA为愈伤组织最佳诱导培养基,培养基1/2MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1NAA有利于丛生芽的诱导,在诱导不定根时,使用1/2 WPM + 0.2 mg·L^-16-BA培养基培养效果最好。采用组培快繁技术,已经获得百花山葡萄完整植株,并于室外移栽成活,为百花山葡萄这一极小种群的保存与繁殖提供了保障。     

匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导

为了保护匍茎百合(Lilium lankongense)的野生种质资源并提供简单有效的快繁方法,以匍茎百合为植物材料,建立以鳞茎为外植体的高效再生体系,并利用秋水仙素处理种子,诱导出多倍体植株。通过调节培养基中的植物生长激素和蔗糖的质量浓度,确定了匍茎百合不定芽诱导、小鳞茎膨大和生根的最佳培养基。结果表明：最佳不定芽诱导培养基为MS培养基+6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg·L^-1+萘乙酸(NAA)0.7 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1,不定芽诱导系数为2.33,显著高于其他处理组合;最佳小鳞茎膨大培养基为MS培养基+蔗糖60 g·L^-1,可显著提高小鳞茎的直径和鲜质量;最佳生根培养基为0.5倍浓度的MS培养基+萘乙酸(NAA)0.4 mg·L^-1+吲哚丁酸(IBA)0.1 mg·L^-1,可显著增加根长和根数。用质量分数为0.03%的秋水仙素浸泡18 h,种子的成活率最高,为93.15%,再通过形态学、生理学和流式细胞仪鉴定,最终鉴定出4个四倍体植...     

‘凤丹’牡丹组织培养研究

以‘凤丹’牡丹芽为材料,对其外植体消毒、褐化防治、组培苗扩繁和生根技术进行研究。结果表明:用75% 酒精消毒30 s,0.1% 升汞消毒8 min消毒效果最佳,外植体的污染率和成活率分别为32.31%和64.32%;其最适初代诱导和继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1和MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PIC (毒莠定,Picloram) 1.0 mg·L^-1,增殖系数为4.84;生根培养基为1/2MS+CaCl₂ 220 mg·L^-1+IBA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,生根率为74.30%;低温结合3 mg·L^-1硝酸银培养可使褐化率降至29.15%。     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

优异党参种质“凤党”离体繁殖技术

以“凤党”优株种子离体培养的无菌苗茎段为外植体，研究植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及再分化的影响。结果表明，愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA，芽分化的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-16-BA，生根的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 IBA，愈伤组织诱导率、芽分化率及生根率分别可达91%、100%和97%。建立的离体再生植株快速繁殖体系，为“凤党”优异种质推广利用和工厂化育苗奠定了基础。     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。