外源硒对鸡腿菇菌丝生长及合成主要营养素的影响

以1株鸡腿菇菌株Cc-900为试材,采用平板培养和液体发酵培养的方法,研究不同浓度的外源硒对鸡腿菇菌株Cc-900的生长、富硒效果和菌丝合成蛋白质和多糖的影响,以期为富硒鸡腿菇的栽培和产品的开发提供参考依据。结果表明：鸡腿菇菌丝可耐受10 mg·kg^-1硒浓度的固体培养基和最大硒浓度为3 mg·L^-1的液体培养基,高浓度硒对菌丝活性损伤较大;当液体培养基中硒浓度为3 mg·L^-1时,菌丝干质量可达1.97 g·L^-1,菌丝干粉的硒含量为38.24 mg·kg^-1,其硒富集系数可达12.75,菌丝中粗蛋白和多糖含量分别为2.58%和3 081.82μg·g^-1,发酵液中可溶性蛋白质和多糖含量分别为50.98μg·mL^-1和266.38μg·mL^-1。液体发酵培养中硒浓度在3 mg·L^-1以下可促进鸡腿菇菌丝的生长和硒的富集,同时促进菌丝中蛋白质的合成和释放,但会抑制菌丝中多糖的合成。     

苦参碱对茶树炭疽菌的抑菌作用研究

研究了苦参碱(Matrine)对茶树5种炭疽菌：松针刺盘胞菌(Colletotrichum fioriniae)、胶胞炭疽菌(C. gloeosporioides)、重庆炭疽菌(C. chongqingense)、喀斯特炭疽菌(C. karstii)、山茶炭疽菌(C.camelliae)的抑制作用，发现苦参碱对5种茶树炭疽菌均具有较好的抑菌效果，其半最大效应浓度(concentration for 50%of maximal effect)分别为5.856、6.557、3.038、7.963和4.397 mg·mL^-1。苦参碱对不同菌种的抑菌活性有明显差异，在低浓度(1～8 mg·mL^-1)时，其对C. chongqingense与C. camelliae具有较好抑菌效果；浓度增加至22 mg·mL^-1时，对5种炭疽菌的抑菌率均达95%以上。显微镜检发现，苦参碱对5种炭疽菌的菌丝和分生孢子存在明显影响，部分菌丝出现不规则膨大现象，分生孢子数随苦参碱浓度增大而减少，部分分生孢子形态出现扭曲变形。对病原菌进行生物活性测定发现...     

蓝莓内生真菌BB01抗菌活性的研究

以贵州省麻江县蓝莓种植基地的"粉蓝"蓝莓为试材,通过分离纯化、生物学鉴定、对峙试验、菌丝生长试验及刃天青微量平板稀释试验等方法,研究了蓝莓内生真菌BB01的抗菌活性,以期为开发绿色生物保鲜剂提供参考依据。结果表明:蓝莓健康组织(茎、叶、果实)中分离纯化出41株内生真菌,其中BB01、BL22、BF27、BB01及BF41可抑制全部4种病害菌生长;发酵培养BB01获得肉汤乙酸乙酯粗提取物(broth ethyl acetate extract,BE)、菌丝体正己烷萃取物(cell hexane,CH)和菌丝体乙酸乙酯萃取物(cell ethyl acetate,CE)。提取物CH对青霉孢子抑制效果最好,最小抑菌浓度为64μg·mL^-1;提取物BE对枝孢菌、尖小丛壳菌及葡萄孢菌孢子抑制效果最好,最小抑菌浓度分别为16、256、128μg·mL^-1,同时,提取物BE终浓度500μg·mL^-1时,可有效抑制4种病害菌菌丝生长(抑菌率分别为98.067302%±3.813437%、92.187892%±0.828473%、94.251883%±0.368539%、96.909029%±5.769104%)。采用PCR扩增内生真菌基因组rDNA-ITS序列构建系统发育树鉴定BB01为枝孢菌属。     

涉县柴胡茎叶总黄酮提取优化及其抗氧化性

以涉县柴胡茎叶为试材，采用单因素试验和四因素三水平的正交实验设计，研究优化了总黄酮乙醇回流浸提工艺，并分析测定提取物及与维生素C复配后的抗氧化活性，以期为涉县柴胡的进一步开发利用提供参考依据。结果表明：1)涉县柴胡茎叶总黄酮最佳提取工艺为料液比1:20g·mL^-1，提取时间2h，提取温度70℃，乙醇浓度60%;2)最优条件下涉县柴胡茎叶总黄酮对DPPH·、·OH、■的半抑制浓度分别为0.223、0.413mg·mL^-1和0.445mg·mL^-1;3)与维生素C复配后表现出一定协同作用，试验组内复配液（1:3）协同作用最强。综上可知，涉县柴胡茎叶中总黄酮具有很好的抗氧化能力。     

不同培养方式下硒对平菇生长的影响

以平菇为试材，采用平板培养、液体培养及袋料栽培等不同培养方式，研究了添加不同浓度的硒对平菇生长的影响，以及在液体、袋料培养中平菇对硒的富集能力，探讨3种培养方式的最佳添加硒浓度，以期为平菇栽培的各环节提供参考依据。结果表明：平板培养试验中，硒浓度低于10μg·mL^-1时长势较好，菌丝浓密、整齐，随着硒浓度的增加，菌丝生长缓慢，在1μg·mL^-1时生长速度最快；液体培养试验中，随着硒浓度的升高，菌丝生长受到抑制，平菇菌丝硒含量增加，添加硒浓度为20～30μg·mL^-1时，菌丝体生长量和富硒量最佳。袋料栽培试验中，硒元素添加量对袋料栽培平菇菌丝生长的影响不显著，生物学效率随着添加硒元素浓度的增加而增加，平菇硒含量整体呈现上升趋势，最佳添加硒浓度为100 mg·kg^-1,平菇硒含量达到最大，菌丝生长最快，生物学效率最高，且各茬平菇硒含量存在差异。     

不同质量浓度镉处理对茶树菇菌丝体生长的影响

为探究镉胁迫对茶树菇菌丝生长的影响,了解茶树菇菌丝对镉的耐受性及富集情况,通过添加不同质量浓度的镉对茶树菇菌丝进行胁迫试验,测定其菌丝的生长速度、镉含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性等。结果表明,不同质量浓度的镉处理对茶树菇菌丝生长有着不同程度的影响,当镉的质量浓度为0～0.1 mg·mL^-1时,茶树菇菌丝中SOD、POD、CAT的酶活性增强;当镉的质量浓度大于0.1 mg·mL^-1时,菌丝受重金属镉的毒害较大,超过了茶树菇自我保护的限值,且镉富集量超过了国家规定的含镉限值(≤0.2 mg·kg^-1)。此次研究结果可为人工控制茶树菇重金属镉含量提供参考,同时为茶树菇的质量安全检测提供理论参数。     

红阳猕猴桃褐斑病病原菌鉴定与室内药剂筛选

为了明确红阳猕猴桃褐斑病主要病原菌及适宜的防治药剂,采集贵州省六盘水市水城区红阳猕猴桃褐斑病的标样,通过组织分离、纯化,致病性检测,形态学观察,分子检测及系统发育分析确定病原菌种类,并采用菌丝生长速率法测定6种药剂对该病原菌生长的抑菌效果。结果显示：分离纯化得到的病原菌的形态特征与多主棒孢菌Corynespora cassiicola形态特征相似,将分离菌株rDNA-ITS序列与GenBank中相关菌株的ITS序列进行同源性比对,发现该菌株与黄瓜多主棒孢霉菌的相似性达到96%以上。室内药剂筛选结果表明：50%多菌灵可湿性粉剂对病原菌的抑制效果最好,最低浓度可抑制菌丝生长;其次为40%戊唑醇悬浮剂、80%乙蒜素乳油、30%吡唑嘧菌酯乳油和80%代森锰锌可湿性粉剂,抑菌效果较好,EC₅₀值分别为0.000 2、0.074 3、0.087 1、和0.502 5 mg/L。红阳猕猴桃褐斑病主要由多主棒孢菌Corynespora cassiicola侵染引起,以上5种药剂均可作为防治红阳猕猴桃褐斑病的有效药剂。     

47种植物提取物对3种柑桔常见贮藏病害病原菌活性抑制作用研究

采用菌丝生长速率法测定了白附子等47种植物提取物对柑桔青霉菌Penicillium italicum、柑桔绿霉菌P.digitatum和柑桔酸腐病菌Oospora citri-aurantii等3种柑桔常见贮藏期病原真菌的离体抑菌活性。结果表明,以10mg/mL处理3天时,对柑桔青霉菌抑制作用较强的是川芎(又名川芎藁木)Ligusticumchuanxiong、侧柏Platycladus orientalis、苍耳Xanthium sibiricum和五加皮(又名五加)Acanthopanax gracilistylus的提取物,抑菌率均在97%以上;对柑桔绿霉菌抑制作用较强的是五加皮和侧柏的提取物,抑菌率分别为99.66%和98.33%;对柑桔酸腐病菌抑制作用较强的是独活(又名毛当归)Angelica pubescens、羌活Notopterygiumincisum和川芎的提取物,抑菌率分别为95.24%、94.38%和77.41%。其中,独活、川芎和五加皮的提取物对柑桔青霉病菌、柑桔绿霉病菌和柑桔酸腐病菌的抑菌活性显著高于其他植物的提取物,作用明显,且提取物气味芬芳。植物提取物抑菌活性的发现为植物源保鲜剂的研发奠定了基础。     

金莲花总生物碱分离及其活性研究

以金莲花为试材,使用响应面法优化总生物碱提取分离工艺,并分析测定金莲花总生物碱抗氧化和抑菌活性,以期为金莲花的深入开发和综合利用提供参考依据。结果表明：最佳提取分离工艺为90%乙醇,液料比39∶1 mL·g^-1,超声功率400 W,超声32 min,总生物碱得率为0.844 mg·g^-1;对DPPH、ABTS自由基及超氧阴离子清除率的IC₅₀(半抑制浓度)值分别为0.016、0.036、4.404 mg·mL^-1;对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为1.990 mg·mL^-1和1.330 mg·mL^-1。该研究初步证实金莲花富含生物碱类物质,且具有较强的抗氧化和抑菌活性。     

甜瓜枯萎病病原菌鉴定及高效低毒化学防治农药筛选

以吉林省甜瓜枯萎病重度发生区域采集的发病果实为试材，采用组织分离法对其病原菌进行分离，同时利用形态学和分子生物学鉴定，以及科赫氏法则进行致病性验证；并通过菌丝生长速率法测定了8种生产中常用的化学药剂原药对该致病菌的毒力作用，研究了高效低毒化学农药对甜瓜枯萎病室内防治效果，以期为利用高效低毒化学农药田间防治甜瓜枯萎病提供参考依据。结果表明：拟轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)是吉林省甜瓜枯萎病的一种新的致病菌，供试的8种化学药剂中咪鲜胺对F.verticillioides XT1的抑制作用最好，毒力作用最强，EC₅₀值为0.029 5μg·mL^-1,其次为戊唑醇和氟硅唑，其EC₅₀值分别为0.146 7μg·mL^-1和0.190 1μg·mL^-1;咪鲜胺、戊唑醇和氟硅唑的最小抑菌药物稀释浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)值分别为0.048、1.2μg·mL^-1和0.8μg·mL     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。     

响应面法优化六妹羊肚菌液体种培养基配方

以六妹羊肚菌(Morchella sextelata)GZCC0287菌株为试材,采用单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、响应面法,研究了碳源、氮源、无机盐、CMC-Na对六妹羊肚菌丝生物量及菌丝球浓度的影响,以期为羊肚菌液体菌种生产、栽培种、工业化生产提供参考依据。结果表明:红糖、酵母粉、KH₂PO₄、MgCl₂·6H₂O为最佳碳源、氮源和无机盐,最佳培养基配方为红糖50.49g·L^-1、酵母粉10g·L^-1、KH₂PO₄1g·L^-1、MgCl₂·6H₂O 2.37g·L^-1、CMC-Na 10.11g·L^-1,菌丝生物量达到(5.21±0.45)g,菌丝球浓度达到(2567±127)个·mL^-1,以1000个·mL^-1浓度接种栽培种,发菌快,长势好,满袋时间10~15d。     

红阳猕猴桃的组培快繁研究

以红阳猕猴桃的新梢幼嫩茎段做组培试材,研究了不同植物生长调节剂种类和浓度对猕猴桃增殖和生根的影响。结果表明:红阳猕猴桃最适茎段增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3,平均增殖数3.76;接种后最佳诱导生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA,生根率78.57%,平均诱导生根数10.61条。     

无刺刺梨茎段快繁体系的建立

以“无刺2号”当年生营养枝为外植体，采用不同浓度的植物生长调节剂进行组培试验，研究了不同消毒方式、激素浓度对外植体消毒效果、初代培养、增殖培养及生根培养的影响，以期建立较为成熟的无刺刺梨组织培养体系。结果表明：外植体经清水冲洗后用75%的酒精消毒15 s,以0.1%的升汞消毒8 min,存活率为85.28%;受污染后的植株在超声洗涤液中洗涤，洗涤液中添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1,同时配置培养基时添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1是最佳处理；适合“无刺2号”初代培养的培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,萌芽率达92.04%;增殖培养基为MS+0.2 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数为3.9;在1/2MS+0.1 mg·L^-1 IBA+20 g·L^-1蔗糖+0.5...     

杭州芦笋茎枯病病原鉴定与防治

2018—2020年,杭州佳慧芦笋种植基地疑似发现芦笋茎枯病危害,为了明确病原菌种类,将采集的病样进行致病菌分离纯化和鉴定,明确该病害为芦笋茎枯病,根据病原菌形态特征、通用引物及特异性引物扩增序列比对结果,该病原菌与天门冬拟茎点霉〔Phomopsis asparagi(Sacc.)Bubak〕同源性为100%,鉴定为天门冬拟茎点霉。生物学活性测定结果表明,25%吡唑醚菌酯悬浮剂对该病菌菌丝完全抑制,75%百菌清可湿性粉剂对菌丝的抑制作用次之,EC₅₀为0.13 μg · mL^-1。盆栽试验验证,25%吡唑醚菌酯悬浮剂对茎枯病防治效果最好,达94.56%,可作为防治芦笋茎枯病高效药剂。     

桂枝主要抑菌活性成分对15种植物病原菌的室内毒力测定

利用菌丝生长速率法,以柑桔意大利青霉菌Penicillium italicum、猕猴桃灰霉菌Botrytis cinerea、西瓜尖镰孢菌Fusarium oxysporumf.sp.niveum等15种常见植物病原菌为指示菌种,测定了中药材桂枝的两种主要抑菌活性成分肉桂醛和肉桂酸的室内毒力。结果表明,在15种供试菌种范围内,肉桂醛对猕猴桃拟茎点霉菌Phomopsis sp.的抑制效果最好,EC50为0.017 9mg/mL,对柑桔指状青霉菌Penicillium digitatum的抑制效果最差,EC50为0.755 1 mg/mL;肉桂酸对枣拟茎点霉菌Phomopsis mauritiana和葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea的抑制效果最好,EC50均为0.006 1mg/mL,对柑桔指状青霉菌的抑制效果最差,EC50为0.994 5mg/mL。     

金针菇、杏鲍菇菌丝对四种重金属耐受和富集特性的研究

以金针菇和杏鲍菇菌为试材,在平板培养基和液体发酵培养基中添加不同浓度梯度Pb、Cd、As、Hg重金属,通过测量菌丝日均生长速度、菌丝体干质量、菌丝体及发酵液中重金属含量等指标,进行重金属富集模型建模,研究不同菌类对不同种类重金属耐受及富集特征,以期为菌类富集重金属机理提供参考依据。结果表明:重金属Pb、Cd、As、Hg对菌丝生长及菌丝球量表现为低浓度(低于1mg·L^-1)促进、高浓度(高于5mg·L^-1)抑制,适宜浓度(1～5mg·L^-1浓度)的重金属Pb、Cd、As对菌丝的生长有一个明显前期抑制后期菌丝恢复正常生长的现象。金针菇和杏鲍菇菌丝体均表现为对重金属Cd和Pb高度富集,最大富集量分别达到Cd 619、424mg·kg^-1 DW以及Pb 449、844mg·kg^-1 DW,对重金属As和Hg富集量较小,最大富集量分别为As 49、21 mg·kg^-1 DW以及Hg 44、40mg·kg^-1 DW。不同菌类菌丝体对同一种重金属的富集饱和点不同,如金针菇菌丝体对Pb的富集饱和点是452 mg·kg^-1 DW,杏鲍菇菌丝体对Pb的富集饱和点是902mg·kg^-1 DW。同一菌类对不同重金属的富集饱和点差异较大,如杏鲍菇对Cd的富集饱和点为429mg·kg^-1 DW,对As的富集饱和点为22.4mg·kg^-1 DW。     

猕猴桃授粉方式筛选

以红心猕猴桃为试材,设置了5种不同的授粉方式,研究不同授粉方式对红心猕猴桃坐果率、果实外观性状、内在品质及产量的影响,以期为猕猴桃优质高产技术研究提供参考。结果表明:在5种授粉方式中,人工点粉处理猕猴桃的坐果率和单株产量达到最高值,分别为77.12%和30.50kg;从果实外观来看,3号花粉悬浮液(白砂糖2g·L^-1+硼酸1g·L^-1+琼脂2g·L^-1+0.2g·L^-1吲哚丁酸+花粉2g·L^-1)喷雾授粉果实的横径和单果质量的最大,分别为5.17cm、85.70g;从果实内在品质来看,可溶性固形物含量和可滴定酸含量最高的处理为人工点粉处理,分别为17.2%和0.82%,而总糖含量和维生素C含量最高的处理为1号花粉悬浮液喷雾处理,分别为13.28%和1.12mg·g-1。综合分析可知,利用人工喷雾等器械授粉能更好地节约生产成本,提高猕猴桃的坐果率,增加产量,有效改善果实的外观性状和内在品质,因此认为1号花粉悬浮液(白砂糖2g·L^-1+硼酸1g·L^-1+琼脂2g·L^-1+花粉2g·L^-1)处理更适宜用于猕猴桃大面积大规模生产。     

不同浓度调环酸钙对大葱幼苗生长的影响

以东森寒葱2号为试验材料,通过测定大葱苗期喷施调环酸钙(200、400、600、800 mg·L^-1)处理的形态指标、叶绿素和根系活力等指标,探究不同浓度调环酸钙对大葱种苗质量的影响。结果表明,调环酸钙能有效增加大葱幼苗的假茎粗、假茎长度和叶片叶绿素含量,提高根系活力、促进根系生长,且其适宜浓度为600 mg·L^-1。处理后21 d,与清水对照相比,600 mg·L^-1调环酸钙处理的假茎粗、假茎长和根系活力分别提高了22.0%、66.9%和65.7%;根系、假茎、叶片和全株干质量分别增加38.5%、48.4%、34.6%和37.9%。与200 mg·L^-1矮壮素处理相比,600 mg·L^-1调环酸钙处理的根冠比、壮苗指数和总叶绿素含量分别上升23.0%、37.0%和19.4%。综上,叶面喷施600 mg·L^-1的调环酸钙能有效提高大葱种苗质量。     

“贵长”猕猴桃软腐病病原菌分离鉴定及抑菌药剂筛选

为了明确"贵长"猕猴桃软腐病病原菌种类并筛选有效防治药剂,对贵州修文县部分果园"贵长"猕猴桃软腐病的致病菌株进行了分离、纯化、形态学及分子生物学鉴定,并对分离得到的病原菌开展致病性测定,同时采用菌丝生长速率法测定了20余种杀菌剂对猕猴桃主要致病菌的室内毒力。结果表明:"贵长"猕猴桃软腐病的致病菌株种类为葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)、拟茎点霉菌(Phomopsis sp.)、茎点霉菌(Phonasp.)和链格孢菌(Alternaria alternata),其中葡萄座腔菌和拟茎点霉菌为软腐病的主要致病菌。葡萄座腔菌和拟茎点霉菌室内毒力表明,20余种杀菌剂中以肟菌酯戊唑醇、己唑醇、戊唑醇、异菌脲、苯醚甲环唑对猕猴桃软腐病主要致病菌葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)和拟茎点霉菌(Phomopsis sp.)均表现出较强的抑菌活性,其EC50分别为0.038 0~0.156 8μg·mL~(-1)和0.017 4~0.643 6μg·mL~(-1),推荐作为猕猴桃软腐病的有效防控药剂。