香菇原生质体单核体杂交方法试验

本试验通过三种方法收集菌丝体 ,经原生质体制备与再生后得到其单核体 ,将不同菌株的单核体杂交配对后得到了不同于亲本的杂交后代     

香菇孢子单核体与原生质体单核体遗传差异分析

本研究利用RAPD技术，对香菇孢子单核体和原生质体单核体的遗传差异变化进行了分析。9个随机引物共扩增出79条DNA带，在此基础上分析并构建了遗传相关聚类图。结果表明以交配型基因为标记的孢子单核体遗传变异大于原生质体单核体，同种交配型的孢子单核体遗传相似性分别为66．3％和71．7％，而原生质体单核体的遗传相似性为98．7％、93．7％。     

杏鲍菇工厂化栽培品种杂交育种研究

采用钩悬法和弹射法进行单孢子收集、菌丝体融合、酯酶同工酶分析的杂交育种方法,将光滑型(S型)和粗糙型(R型)杏鲍菇的优良性状集中表达,获得性状优良的杂交子。结果表明:利用单核菌丝进行杏鲍菇种间杂交育种的方法是可行的;杂交子S6×R84表现出优于父本的良好生产性状,经过生产适应性驯化,极可能成为性状优良的工厂化生产品种新资源。     

黑木耳原生质体制备、再生及单核体荧光鉴定

利用正交试验研究了黑木耳原生质体制备、再生的最佳条件,结果表明,原生质体制备最佳条件是酶解温度31℃、酶浓度1．0％、菌龄5d、酶解时间4h,原生质体再生的最佳条件是酶解温度27℃、酶解时间4h、酶浓度1．5％、菌龄11d。稳渗剂种类对黑木耳原生质体再生率的试验结果表明,采用0．5mol／L蔗糖为稳渗剂,各黑木耳菌株的原生质体再生率最高。HW2号菌株原生质体经核染色其单核化比率最高;在荧光显微镜下观察菌丝核相,单、双核清晰可辨。     

采用原生质体单核体杂交技术创新香菇种质资源

以野生香菇和国内主栽菌株‘931’‘168’"荷香1号"为亲本材料,采用原生质体单核杂交育种方法选育香菇新菌株,并研究了杂交菌株与亲本菌丝长势、长速、产量和子实体形态等农艺性状的关系。结果表明:杂交菌株LNX3、LNX5和LNX6在农艺性状、产量和品质上均较亲本有明显优势,具有进一步开发的潜力。     

杏鲍菇单孢诱变杂交及其子代的鉴定

将杏鲍菇单核菌丝进行紫外诱变,挑选优良单核菌株杂交配对,获得47个长势较好的子代菌株。通过拮抗试验与脂酶同工酶分析预测子代菌株杂种优势,筛选出有异于亲本的7个杏鲍菇新菌株。     

浅谈香菇单核原生质体杂交亲本的选择及后代性状分析

香菇菌种选育的主要手段有引种驯化、杂交育种、细胞工程育种及基因工程育种四种。当前应用最普遍的是引种驯化和杂交育种,在杂交育种中有单孢杂交、单双核杂交、单核原生质体杂交等方式,但是无论采用哪种方式杂交,亲本的选择都是不可缺少的,而且是十分重要的环节。近年来我们每年都选用不同亲本进行大量的杂交配对及杂交菌株的筛选工作。本文就1992年采用单核原生质体进行杂交得到的后代,从亲本选择、不同栽培方式的生物学效率、菇的质量诸方面进行分析评价。 我们选择了8个菌株做亲本(表1),其中包括2个栽培种,6个野生种。从大量的杂交后代中选择了138个组合,采用人造菇木和塑料袋栽培两种方式进行筛选,根据亲本的不同来源、遗传和生态特征,设计了三种组合类型(表2)。即栽培种×野生种、野生种×野生种、栽培种×栽培种,在栽培种×野生种的组合中,野生种又分别选用了在人工栽培条件下出菇和不出菇两种类型作为亲本。     

香菇原生质体单核体杂交后代性状变异初探

以香菇菌种939和本所实验菌株中19为亲本,进行原生质体单核体分离和配对杂交。对杂交组合和亲本菌株的菌盖直径、厚度,菌柄长度、直径等性状进行考察。结果表明,10个杂交组合在子实体外观形态上与亲本存在明显的差异,且原生质体单核体杂交后代的农艺性状表现规律与亲本交配型的类型存在一定的关联。     

香菇原生质体单核体的再生与交配型的关系

在８个香菇菌株原生质体单核体交配型的测定中,有４个菌株测定出两种交配型,其余４个菌株只测得一种交配型。在得到两种交配型的菌株中,其交配型比例也不是１∶１。进一步的实验表明,产生这一现象的主要原因与两种交配型原生质体单核体的再生能力不同有关。在申香２号菌株１０７个单核体中,ＡｘＢｘ交配型只有２６个,而且都是在再生阶段的前期产后的,后期出现的单核体则都是ＡｙＢｙ型菌落。     

香菇孢子单核体原生质体的制备和再生的研究

本研究以香菇四种交配型的孢子单核本为材料,用酶解的方法制备出高得率的具四种交配型的原生质体,且均可再生。研究表明：四种交配型原生质体的再生率大小,与原生质体的得率高低并不是一致的,但与菌丝生长速度、再生菌落出现的时间以及交配型之间有一定的关系。这为原生质体的再生能力是受交配型基因控制的推断提供了实验证据。单一交配型的单核原生质体的大量获得也为蕈菌遗传学提供了一种新的研究材料。     

灰色关联度法在杏鲍菇优良杂交菌株筛选中的应用

以杏鲍菇(Pleurotus eryngii ) 6号和ACCC50894为亲本,分别采用单孢杂交和原生质体单核体杂交方式获得65和37个杂交子,观测杂交子及亲本菌丝体生长情况,选择长势好及生长快速的杂交子进行栽培出菇试验.采用灰色关联度分析法对15个生长势较强的杂交子从7个性状方面进行综合评价,结果表明,单孢杂交获得的杂交子D12、D18、D20、D30、D19、D31、D17和D48关联度排名先于两亲本,农艺性状和子实体性状表现较好;原生质体单核体杂交菌株Y29和Y30关联度排名介于两亲本之间.     

不同培养时间对杏鲍菇酯酶同工酶酶谱的影响

以‘杏鲍菇1号’和‘杏鲍菇2号’为试验菌株,在24℃条件下分别培养5、7、9、11、13、15d,分析2个菌株酯酶同工酶酶带变化情况。结果表明:‘杏鲍菇1号’和‘杏鲍菇2号’均在培养13d时酶带最多并且最为清晰,说明13d为杏鲍菇酯酶同工酶最佳的培养时间。     

白背毛木耳杂交育种及杂交子选育

为了获得性状优良的毛木耳新品种,进行了杂交育种。实验以钩悬法收集毛木耳"丰2"子实体单孢子并培养获得其单核菌丝。采用单孢杂交(两点法)进行杂交培养,镜检"锁状联合"初选杂交子;通过与亲本的拮抗实验和酯酶同工酶电泳酶谱比对分析确认杂交子,并经出耳试验验证其结实性。实验结果显示,种内杂交的不同单核菌丝较易亲和并产生具结实能力的杂交子。     

百合杂交后代ISSR鉴定

 使用筛选出的5对ISSR引物, 对由东方百合优良品种‘Sorbonne’、‘Tiber’‘Cobra’为亲本的4对杂交组合获得的40个杂交后代指纹进行了分析, 利用NTSY Spc软件UPGMA聚类构建的遗传关系能够较好地反映其亲缘关系。其中, 编号为P23和P21的引物是本试验中鉴定的分辨率较高的ISSR引物。     

灵芝原生质体融合子的SRAP分子标记鉴定

为验证新型SRAP分子标记技术用于灵芝(Ganoderma lucidum)原生质体融合子鉴定的可行性,通过亲本菌株赤芝05、06对153个SRAP引物组合进行筛选,应用经过初筛和复筛得到的4个清晰稳定、且含有两个亲本各自特异扩增条带的SRAP引物组合,对2个亲本菌株、2个只与亲本05有拮抗的融合子、2个只与亲本06有拮抗的融合子、30个与双亲均有拮抗的融合子进行SRAP扩增.结果表明,2个只与亲本05有拮抗的融合子仅扩增出06的特异条带,2个只与亲本06有拮抗的融合子仅扩增出05的特异条带,30个与双亲均有拮抗的融合子中,有7个融合子同时扩增出05和06的特异条带,证明此7个融合子应是05和06融合产生的菌株,也证明SRAP标记可以用于灵芝原生质体融合子的鉴定.     

白灵菇杂交子的筛选及鉴定

以白灵菇2个品种"中农1号"和"中农翅鲍"为亲本,采用镜检、拮抗、酯酶同工酶及原基诱导等方法,研究了150对杂交组合菌株特性。结果表明:150对杂交组合菌株中,99个菌株生长较快,有锁状联合,75个与2个亲本有明显拮抗线,且具与2个亲本菌株的典型酯酶同工酶条带,确定是杂交菌株,其中50个杂交子具有出菇能力。     

香菇单孢杂交及杂交菌株分子鉴定

采用单孢杂交育种技术,以香菇(Lentinula edodes)栽培品种"大山18"和云南野生香菇"11-1"为亲本,选育香菇优良新品种。通过单孢分离和配对杂交,共获得84个杂交菌株。用ISSR分子标记对杂交菌株与亲本条带进行鉴定,有45个菌株包含了两亲本的所有遗传条带,最终证明了这45个菌株是真正的杂合子。本研究表明了利用ISSR标记可以有效地对早期菌丝体阶段的香菇杂交菌株的真实性进行鉴定。     

利用EST同工酶鉴定天麻品种及亲缘关系的研究

目的：鉴定3种天麻品种及其亲缘关系。方法：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对三种天麻菌株酯酶(EST)同工酶进行研究。结果：天麻不同菌株之间酯酶同工酶活性不同，酶谱条带数在4～5条，且具有特征谱带。B、G的酶谱条带数基本相同；R、B、G的酶谱条数依次分别为4条，5条，4条；其中基本酶带有3条；G号菌株与B号菌株的相似度指数为0．89，说明这两个菌株间亲缘关系最近。G号菌株与R菌株的相似度指数为0．75，反映它们之间的亲缘关系相对较远。     

羊肚菌菌种鉴定及生长条件优化

以12株羊肚菌菌株为试材,采用拮抗试验和分子鉴定技术,研究了供试菌株的亲缘关系及不同碳、氮源、pH对菌丝生长情况的影响,以期规范羊肚菌命名及初步筛选最佳生长条件。结果表明：YD3、YD10、YD12亲缘关系较近,YD1、YD2、YD4、YD5、YD7、YD8、YD9、YD11亲缘关系较近,YD6与其它11个菌株亲缘关系较远;最佳碳源是乳糖和麦芽糖,最佳氮源是硫酸铵和硝酸钾,最适pH为7和9。     

香菇单孢杂交及杂合子鉴定的研究

以香菇栽培品种"大山18"和云南野生香菇"11-1"为亲本,通过单孢杂交获得84个杂交菌株。用ISSR分子标记对杂交菌株进行真假鉴定,证明有45个菌株是真正的杂合子。本研究也表明了用ISSR标记可以对香菇杂合子的真实性进行早期鉴定。