赖氨酸对肉鸡生长性能、免疫器官发育及免疫相关基因表达的影响

试验旨在探讨赖氨酸对肉鸡生长性能、免疫器官发育及免疫相关基因表达的影响。将360只体重相近,健康的1日龄肉鸡雏,随机分为3个处理,每处理6个重复,每个重复20只个体。3个处理试验鸡分别饲喂赖氨酸水平为0.60%(LL)、1.00%(ML)、1.40%(HL)的日粮,试验期3周。结果显示,LL组显著地降低肉鸡平均日增重(ADG),平均日采食量(ADFI)、胸肌率、腿肌率、和胸腺指数(P0.05),显著地升高料重比(F/G)、心脏指数和肌胃指数(P0.01);HL组显著地降低肉鸡平均日增重(P0.05),显著地升高肝脏指数和料重比(P0.05)。LL组白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素18(IL-18)、干扰素-γ(IFN-γ)、Toll样受体4(TLR-4)、趋化因子配体12(CXCL12)的mRNA表达量显著下调(P0.01),白细胞介素4(IL-4)、抗菌肽1(CATH1)、白细胞介素10(IL-10)、抗菌肽3(CATH3)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素13(IL-13)、趋化因子受体4(CXCR4)的mRNA表达量显著上调(P0.01);HL组IL-6、IL-18、IL-10、CXCL12、CXCR4 mRNA表达量显著下调(P0.01),CATH1、CATH3、IFN-γ、TLR4 mRNA表达量均极显著上调(P0.01)。结果表明,日粮中赖氨酸缺乏或过量都会导致肉鸡生长性能下降和一些免疫器官发育受阻,并显著影响脾脏中多种细胞因子、抗菌肽CATH1和CATH3、趋化因子CXCL12及其受体CXCR4的表达,进而影响肉鸡的免疫机能。     

乳酸菌发酵诃子对大肠杆菌诱导大鼠乳腺炎的治疗效果

研究旨在探讨乳酸菌发酵诃子对大肠杆菌诱导大鼠乳腺炎的治疗效果。研究构建了大鼠乳腺炎模型,并将126只建模成功的大鼠随机分为6组,分别为模型组、未发酵诃子组、乳酸菌组、乳酸菌发酵诃子低剂量组、乳酸菌发酵诃子中剂量组和乳酸菌发酵诃子高剂量组,每组3个重复,每个重复7只大鼠,将21只正常大鼠作为对照组,每天灌胃给药1次,持续给药21 d。采用酶联免疫吸附试验测定血清炎性因子含量。结果显示：乳酸菌发酵诃子高剂量组具有较高的治疗效果,治愈率为90.48%。模型组大鼠血清中促炎因子白细胞介素-12 (IL-12)、白细胞介素-17 (IL-17)、白细胞介素-18 (IL-18)、白细胞介素-23 (IL-23)和白细胞介素-34 (IL-34)含量均极显著高于对照组和给药组(P<0.01);与乳酸菌发酵诃子低剂量组相比,中、高剂量组大鼠血清中IL-12、IL-17、IL-18、IL-23、IL-34含量明显升高。模型组大鼠血清中白细胞介素-35 (IL-35)含量均极显著低于乳酸菌发酵诃子低、中和高剂量组(P<0.01)。研究表明,乳酸菌发酵诃子对大肠杆菌乳腺炎具有治疗效果,机制可能...     

白细胞介素

第二届国际淋巴因子专题会议(1979)规定,联系白细胞间相互作用的细胞因子称为白细胞介素(interleukin,IL),同时确定了具不同生物活性的 IL-1、IL-2和 IL-3。1986年以来,IL-4、IL-5。IL-6和 IL-7一组新的白细胞介素也已得到举世公认。     

鸡IL-6和IL-18基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

本研究旨在建立鸡白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素18(IL-18)基因实时荧光定量PCR(Realtime FQ-PCR)检测方法。应用RT-PCR方法扩增鸡外周血淋巴白细胞(peripheral blood leukocytes,PBLs)的IL-6和IL-18基因片断,分别克隆至pGM-T载体上,将浓度梯度的IL-6和IL-18基因的重组质粒DNA进行实时荧光定量PCR,并建立相应的标准曲线。经PCR、双酶切和测序分析显示,成功地构建了重组克隆质粒pGM-T-IL-6和pGM-T-IL-18。标准曲线分析显示,IL-6和IL-18基因标准曲线的Ct值与其标准品浓度的对数值之间有良好的线性关系,IL-6和IL-18检测的灵敏度均达到10拷贝/μL。为下一步应用实时荧光定量PCR技术检测IL-6和IL-18基因的转录水平奠定了基础。     

荣昌猪白细胞介素-2和白细胞介素-4基因的克隆与序列分析

将荣昌猪外周血淋巴细胞在刀豆素A(ConA)的刺激下培养24~70 h后,提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-4(IL-4)cDNA,克隆到pMD18-T载体并测序。结果表明:克隆的IL-2 cDNA全长为522个碱基,ORF为465个碱基,编码154个氨基酸,与GenBank公布的猪IL-2比对同源性均为99.8%;克隆的IL-4 cDNA全长411个碱基,ORF为402个碱基,编码133个氨基酸,与GenBank公布的猪IL-4比对同源性均在98.0%以上,从而证实成功克隆了荣昌猪IL-2和IL-4基因cDNA。     

替米考星对内毒素炎症小鼠存活率和细胞因子的影响

替米考星按20 mg/kg剂量经灌胃给药后,观察其对内毒素(LPS)炎症小鼠的保护率,并通过不同时间段眼球采血,分离血清,应用试剂盒用酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assy,ELISA)法测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1(IL-1β)的水平.结果表明,替米考星明显提高了内毒素炎症小鼠的存活率,死亡率由100%降低为50%(P<0.05).LPS(20 mg/kg)能提高血清中TNF-α、IL-10、IL-6和IL-1β的水平,替米考星能够显著抑制TNF-α、IL-6和IL-1β的释放,而明显提高IL-10的水平.     

单月桂酸甘油酯对蛋鸡生产性能、蛋品质、肠道形态和肠道黏膜基因表达的影响

试验旨在研究单月桂酸甘油酯对蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道屏障功能的影响。选用66周龄罗曼灰蛋鸡20 000只，随机分为2组，每组10个重复，每个重复1 000只。对照组饲喂基础日粮，试验组在日粮中添加1 000 mg/kg单月桂酸甘油酯，试验期21 d。结果表明：与对照组相比，单月桂酸甘油酯可降低蛋鸡料蛋比和次品蛋率（P<0.05），提高产蛋率、平均蛋重、蛋白高度、蛋黄颜色和哈氏单位（P<0.05）；降低了蛋鸡空肠隐窝深度，提高了空肠绒隐比（P<0.05）；单月桂酸甘油酯添加组血清及空肠黏膜白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等促炎细胞因子含量低于对照组（P<0.05），抑炎细胞因子白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量高于对照组（P<0.05）；日粮添加单月桂酸甘油酯降低了空肠黏膜Toll样受体2、Toll样受体4、髓样分化因子88、IL-1β和TNF-α的基因表达量（P<0.05），提高了IL-4、黏蛋白2(Muc-2)和闭合蛋白（Occludin）的基因表达量（P&l...     

慢性冷应激对断尾阿勒泰羔羊细胞因子mRNA表达量的影响

为了研究慢性冷应激对断尾阿勒泰羔羊IL-1(白细胞介素1)、IL-6(白细胞介素6)、IL-12(白细胞介素12)和IFNγ(γ-干扰素)mRNA表达量的影响。试验设置常温对照组(10～20℃)、温度一(-20～-10℃)和温度二(-30～-20℃),每组3只羔羊,分别在4、12、24 d后采集外周血液白细胞和脾脏组织。用荧光定量PCR技术对IL-1、IL-6、IL-12和IFNγmRNA含量变化情况进行检测。结果表明:冷应激后IL-6、IL-12 mRNA的表达量在外周血液白细胞和脾脏中上升。IL-1、IFNγm RNA的表达量在脾脏中上升,在-30～-20℃下外周血液白细胞中上升。说明断尾阿勒泰羔羊在寒冷环境下,体内细胞因子含量总体出现上升趋势,冷应激会造成断尾阿勒泰羔羊机体内出现炎症等损伤。     

肿节风有效成分迷迭香酸对哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子水平的影响

为了探讨肿节风有效成分迷迭香酸对小鼠哮喘模型Th1/Th2细胞因子的调节作用,试验将50只雌性Balb/c小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、迷迭香酸单药组、OVA哮喘模型组、迷迭香酸治疗组、地塞米松治疗组,采用ELISA方法对支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL-13)和γ干扰素(IFN-γ)水平进行了研究。结果表明:与正常对照组比较,OVA哮喘模型组小鼠BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平极显著升高(P0.01),IFN-γ水平极显著降低(P0.01),IL-4/IFN-γ比例极显著升高(P0.01);与OVA哮喘模型组比较,迷迭香酸治疗组和地塞米松治疗组显著抑制了IL-4、IL-5和IL-13水平(P0.05),显著降低了IL-4/IFN-γ比值(P0.05)。说明肿节风有效成分迷迭香酸具有抑制哮喘Th2细胞因子和调节免疫平衡的作用。     

细胞因子IL-2和IL-4对病毒保护性抗原基因真核表达影响的研究

如何提高和改善疫苗的免疫效果是目前疫苗研究的热点,近年来许多研究发现与DNA疫苗联合应用的细胞因子可通过不同的环节调节和增强DNA疫苗免疫效应,白细胞介素作为免疫佐剂能协同DNA疫苗能取得较好的免疫效果。细胞因子是动物体内特异高效调控免疫细胞和协调免疫应答重要的信号分子,它主要包括淋巴毒素(LT)、肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(INF)、白细胞介素(IL,如IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-12)和集落刺激因子(GM-CSF)等。其中IL-2和IL-4对病毒保护性抗原基因真核表达影响的研究较多。主要综述了IL-2和IL-4作为免疫佐剂对病毒保护性抗原基因真核表达的影响,以期为更深入地进行IL-2和IL-4对DNA疫苗免疫增强作用的深入研究提供参考。     

贵州白香猪白细胞介素4全基因的克隆与序列分析

为获得贵州白香猪白细胞介素4的基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增全长猪白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)基因,并克隆到pM D18-T Simple Vector载体后测序。测序结果表明:IL-4基因的ORF为402 bp,可编码133个氨基酸,其中前24个为信号肽序列,后109个氨基酸为成熟肽,具有3个潜在的N-糖基化位点;贵州白香猪除与AF493991(99.4%),L12991(98.1%)氨基酸一致性相对较低外,与其他猪源IL-4基因氨基酸一致性均为100%,而与其他种属动物的IL-4基因氨基酸一致性则较低,为37.2%~82.7%。     

白细胞介素18及其在禽类中的研究进展

白细胞介素18 (Interleukin- 18,IL-18)主要由单核-巨噬细胞系分泌,在结构上属于IL-1家族[1],在功能上与IL-12相似,而且与IL-12有协同效应,是重要的调节先天性免疫和获得性免疫的因子.IL-18除了能够明显诱导Th1、NK及NKT细胞产生IFN-γ外,还可诱导诸如IL-2、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及肿瘤坏死因子(TNF-α)等其它多种细胞因子的产生[2].     

黄芪多糖对猪瘟疫苗体液免疫和细胞免疫的影响

为查明黄芪多糖对猪瘟疫苗体液免疫IgG抗体与猪白细胞介素-4(IL-4)、猪干扰素-γ(IFN-γ)、猪肿瘤坏死因子α(TNF-α)三种细胞免疫因子的影响,选用黄芪多糖注射液直接稀释高效猪瘟活疫苗(细胞源)的方法进行了免疫试验。证实了黄芪多糖直接稀释猪瘟活疫苗不但可以提高猪瘟疫苗IgG抗体水平,还可以提高猪干扰素-γ(IFN-γ)、猪肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,降低猪白细胞介素-4(IL-4)浓度,证明在使用猪瘟疫苗免疫防控中添加黄芪多糖可增强猪群免疫力,为控制猪瘟流行提供了依据。     

冷应激对湖羊血清因子及热休克蛋白70 mRNA表达的影响

为研究冷应激对湖羊免疫系统及热休克蛋白70(heat stress proteins 70,Hsp70)的影响,试验分别采用实时荧光定量PCR和ELISA方法检测冷应激前后湖羊肝脏、肺脏、脾脏、淋巴结组织中Hsp70mRNA表达量及血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)浓度。结果显示,与冷应激前相比,冷应激后湖羊肝脏、肺脏及脾脏组织中Hsp70mRNA表达量均极显著增加(P0.01),其中肝脏的表达量尤为显著;冷应激后湖羊血清中IL-2、IL-4的浓度均呈下降趋势,其中IL-4浓度下降尤为显著(P0.01)。结果表明,冷应激条件下湖羊各组织中Hsp70mRNA表达增强,可提高动物机体的自我保护机能,增强对外界不良刺激的抵抗力,但细胞因子IL-2和IL-4的浓度下降,表明冷应激抑制机体免疫系统。     

广西巴马小型猪IL-4和IL-10基因的克隆和序列分析

为研究猪白细胞介素4（IL-4）和白细胞介素10（IL-10）在机体免疫应答中的作用,从ConA刺激的巴马小型猪的外周血淋巴细胞提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出IL-4和IL-10基因,将其分别克隆到PMD18-T 载体上,进行序列分析.结果表明,克隆的IL-4和IL-10基因的核苷酸和氨基酸序列与GenBank上登录的其它猪种的IL-4和IL-10基因的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.8%～100%、97.0%～99.3%和99.2%、97.7%.     

五倍子单宁酸对1～21日龄黄羽肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响

试验旨在探究五倍子单宁酸(HGT)对1～21日龄黄羽肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响。选取健康且体重相近的1日龄黄羽肉鸡288只,随机分成4组,每组6个重复,每个重复12只,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮的基础上分别添加150、300、450 mg/kg HGT。试验期为21 d。结果表明：饲粮中添加150 mg/kg HGT可以降低21日龄黄羽肉鸡的耗料增重比(P<0.05);不同剂量HGT对黄羽肉鸡脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数均无显著影响;随着HGT添加剂量的增加,血清免疫球蛋白M(IgM)含量呈线性升高(P<0.05),但各组间血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)和免疫球蛋白A(IgA)含量均差异不显著;各HGT组肝脏的总抗氧化能力(T-AOC)活性以及谷胱甘肽(GSH)、超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)含量与对照组均差异不显著。因此,饲粮中添加HGT可显著提高黄羽肉鸡生长前期的饲料利用效率...     

杂交猪IL-2和IL-6全基因克隆及序列分析

为研究杂交猪白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素6(IL-6)在机体免疫应答中的作用,将杂交猪外周血淋巴细胞在伴刀豆球蛋白A(Con A)的刺激下进行体外培养后,提取淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR技术扩增出杂交猪淋巴细胞IL-2和IL-6的cDNA,克隆到pMD18-T载体上并测序.测序结果表明:杂交猪IL-2基因核苷酸序列与参考序列的同源性为100%;IL-6基因核苷酸序列与GenBank登录的参考序列的核苷酸同源性在99.8%～100%之间,推导氨基酸同源性在99.1%～100%之间.     

基于家兔模型的纳米蜂胶黄酮对PPV灭活疫苗免疫应答的研究

为了观察纳米蜂胶黄酮对猪细小病毒(PPV)灭活疫苗免疫应答的影响,试验以家兔为模型动物,并以油乳剂为对照,将30只家兔随机均分为3组,第1~2组分别背部皮下注射0.5 m L纳米蜂胶黄酮和油乳剂猪细小病毒灭活疫苗,第3组为对照组注射0.5 m L生理盐水,检测血清抗体效价并观察对体液免疫的影响,测定淋巴细胞增殖及白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)含量并评价对细胞免疫的影响。结果表明:纳米蜂胶黄酮、油乳剂均能提高家兔对PPV灭活疫苗的免疫应答能力,油乳剂提高抗体的效果好于纳米蜂胶黄酮,纳米蜂胶黄酮促进T淋巴细胞增殖和提高细胞因子含量的效果优于油乳剂。说明纳米蜂胶黄酮能增强猪细小病毒灭活疫苗的免疫效果,是一种效果良好的疫苗佐剂。     

犬白细胞介素18基因的克隆与序列分析

为研究犬白细胞介素18(IL-18)的生物学功能,从犬外周血中分离白细胞,经Con A刺激后,提取总RNA,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增犬IL-18基因,连接pMD19-T simple vector,转化DH5α感受态细胞,经双酶切鉴定,获得阳性重组质粒后进行序列分析。结果表明,获得的犬IL-18基因全长为582bp,编码氨基酸194个。将犬与GenBank中牛、猫、羊、猪、鼠、兔、狐、貉IL-18基因进行同源性比较,发现犬IL-18与红狐和貉IL-18的同源性最高,氨基酸序列同源性分别达96.4%、91.2%,与其他物种则存在较大种属差异。     

不同马立克氏病抗性鸡攻毒后IL-18基因的差异表达

本试验致力于评价鸡白细胞介素-18(IL-18)基因的表达模式与马立克氏病抗性遗传性状的相关性。MDV-1分别感染7日龄普通品系和抗性品系的霞烟鸡,攻毒后第4、7、10、14、21、28、35天采集外周血并分离外周血淋巴细胞,利用实时定量PCR技术对外周血淋巴细胞中IL-18转录水平进行相对定量分析。结果表明,普通霞烟鸡外周血淋巴细胞中具有相对高水平的IL-18mRNA,而马立克氏病抗性霞烟鸡外周血淋巴细胞中则具有相对低水平的IL-18mRNA。结果显示,鸡IL-18基因的表达模式与马立克氏病(MD)抗性遗传性状可能相关。