药敏试验方法在兽医临床中的应用

在兽医临床中,为了合理准确的掌握抗菌药物的作用和用药剂量,通常离不开药敏试验。常用的药敏试验有以下3种方法:1药敏纸片法药敏纸片法是最常用的一种试验方法,能直接体现出抗菌药物的抗菌效用,优点是直观明显、对     

PCR、SPA-ELISA、GDT3种方法检测猪伪狂犬病毒的效果比较

为了比较临床中常用的猪伪狂犬病诊断方法的检测效果,试验采用常规方法对猪伪狂犬病毒进行不同浓度梯度的稀释,分别通过聚合酶链式反应(PCR)、葡萄球菌A蛋白-酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)、琼脂扩散试验(GDT)3种方法对猪伪狂犬病毒进行检测,并对各种方法的敏感性、可重复性、经济性、简便性进行综合分析。结果表明:SPA-ELISA法和PCR法的灵敏度都远远高于GDT法,并且二者的敏感性相当;PCR法和SPA-ELISA法适用于实验室对PRV的确诊;GDT法所耗费的材料较少、经济、操作简便,适合于临床大规模的检测和初次检测猪伪狂犬病毒的存在。     

沙葱多糖除蛋白方法的研究

试验采用L9(3)3正交试验设计,以蛋白去除率和多糖损失率为指标分别研究了Sevage法和三氯乙酸法除蛋白的最佳工艺参数,并对两种方法进行了比较。试验结果表明,Sevage法除沙葱多糖溶液中蛋白质的最佳工艺参数为:Sevage试剂添加量为沙葱多糖溶液体积的1/4,氯仿与正丁醇的比例为3:1,振摇时间为30 min。在此条件下,沙葱多糖的除蛋白率为43.82%,多糖损失率为4.67%;三氯乙酸法除沙葱多糖溶液中蛋白质的最佳工艺参数为:三氯乙酸浓度为15%,添加量是沙葱多糖溶液体积的1倍,即1:1添加,振摇时间为20 min。此时的除蛋白率为87.33%,多糖损失率为55.59%。     

超滤法脱除麻疯树籽饼粕毒蛋白的研究

本试验采用超滤技术以麻疯树籽饼粕为原料,以毒蛋白的脱除量为指标,通过L9(34)正交试验研究了不同超滤时间、压力、温度及超滤液浓度对其毒蛋白脱除量的影响.结果表明.超滤法脱除麻疯树籽饼粕中毒蛋白的最佳工艺为:超滤时间为60 min、超滤压力0.14 Mpa、超滤温度45℃及超滤液浓度0.5 C0(C0=6.47 mg/mL).在此工艺下,脱除麻疯树籽饼粕中的毒蛋白为63.12 mg.     

鸡凝血细胞计数的两种测定方法比较

本试验随机选取20只50日龄的蛋公鸡,用草酸铵法和许汝和法两种测定凝血细胞的方法,分别对20只鸡的凝血细胞进行直接计数,其目的是为了比较这两种方法测定结果有无差异。试验结果表明:两种测定方法的结果差异不显著(P>0.05)。     

蚕桑资源多元化利用讲座(5)

正4.2蚕蛹蛋白的利用4.2.1蚕蛹蛋白质的提取蚕蛹蛋白较大规模的生产方法一般采用等电点法。(1)蛋白质的溶解将脱脂干蚕蛹,适度粉碎,用40目筛筛分。用1%氢氧化钠溶液,以1∶8的浴比,在40℃温度下,搅拌提取6 h。滤渣再用1%氢氧化钠溶液在相同的浴比下提取3 h,过滤,合并滤液。(2)沉淀用纱布(滤布)过滤提取液,弃滤渣,收集滤液。在滤液中加入1∶1盐酸,调节pH至等电点,使蛋白质沉淀。蚕蛹蛋白的等电点约为pH 3.8~4.0。     

动物性饲料和饲料原料粗脂肪含量测定中两种过滤方法比较

为了使动物性饲料中粗脂肪测定方法更加便捷准确高效,试验以17种饲料为样本,在粗脂肪提取流程中,分别采用直接过滤法(A)和布氏漏斗抽滤法(B)进行过滤,并对两种过滤方法的测定结果进行了比较.结果表明:17种饲料中只有1种饲料在2种过滤法间差异显著(P<0.05),其余16种均差异不显著(P>0.05);17种饲料整体比较差异不显著(P>0.05).说明两种过滤方法均可用于动物性饲料粗脂肪的测定过程中,而直接过滤法比布氏漏斗抽滤法操作简单、工作效率更高.     

两种方法纯化免抗绵羊肺炎支原体IgG的比较

目的:比较两种方法纯化兔抗绵羊肺炎支原体IgG的效果。方法:采用饱和硫酸铵和辛酸-硫酸铵两种方法分离纯化兔抗绵羊肺炎支原体抗体,并用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、分光光度计和琼脂扩散(AGP)试验对纯化产物进行相对分子质量、蛋白质含量及免疫活性进行鉴定。结果:纯化后抗体的蛋白含量基本相同;产物纯度和效价以辛酸-硫酸铵法较高。结论:辛酸硫酸铵法是一种简便、快速、高效的抗体纯化方法。     

动物性饲料中尿素含量的测定方法

1 范围本标准规定了一种测定动物饲料中尿素含量的方法。2 参考ISO 6498:1983,动物饲料——试验样品的制备。3 定义尿素含量:用本国际标准所规定的程序测定的物质的部分质量,用质量的百分数表示。4 原理试验样品脱色之前悬浮在水中,搅拌悬浮液,然后过滤。向滤液中加入4-二甲基胺基苯甲醛(4-DMAB),并在420nm 波长下测定     

不同测定方法对饲料粗蛋白测定结果影响的研究

试验采用国标法、凯氏定氮仪法、强碱直接蒸馏法、双氧水测定法对鱼粉、玉米蛋白、豆粕三种饲料原料的粗蛋白含量进行分析测定,旨在探讨4种方法的测定误差,以期找到最好的测定方法。试验结果表明,4种方法的测定结果差异不显著（P〉O．05）,均可用于粗蛋白的测定;其中强碱直接蒸馏法测定是最好的,可以节省试剂,减少实验经费,在一般饲料质量检测中可进行推广。     

脾虚模型小鼠肾脏中Bcl-2、Bax和Fas蛋白表达研究

目的:采用灌胃法诱导SD清洁级小鼠脾虚动物模型,造模完成后检测小鼠肾脏中Bcl-2、Fas和Bax蛋白表达的改变,并探讨其意义。方法:采用大承气汤诱导小鼠脾虚模型,H.E染色后光镜下观察肾脏局部形态,SP法检测Bcl-2、Fas和Bax蛋白在肾脏细胞中的表达。结果:脾虚组小鼠肾小球部位出现炎症,肾近曲小管和远曲小管部位出现凝固性坏死;肾脏细胞中Bax和Fas蛋白的表达率升高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.05)。结论:脾虚会引发肾脏发生病理变化,同时会使Bax和Fas蛋白的表达升高,Bcl-2蛋白的表达下降,增加了肾脏细胞发生凋亡的机率。     

几株饲用乳酸菌益生性能的研究

对实验室保存的10株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐试验,筛选出3株有效菌。采用牛津杯法研究3株乳酸菌对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌机理,即取乳酸菌发酵液、发酵滤液、菌体体外抑制病原菌及经碱处理、乳酸脱氢酶处理的发酵滤液体外抑制致病菌。结果表明:3株乳酸菌都有抑菌能力,菌液及发酵滤液的抑菌能力无明显区别,菌体无抑菌能力。发酵滤液经碱处理后抑菌能力下降,经乳酸脱氢酶处理后抑菌能力无明显影响。     

铬鞣皮渣脱铬及其在肉鸡饲养中的应用

本研究采用了物理、化学方法对铬鞣皮渣进行不同处理,根据脱铬效果、蛋白回收率及工艺流程的实用性筛选出最理想脱铬方法。然后,用脱铬皮渣溶解滤液和骨粉以1:2(脱铬皮渣:骨粉;干物质计)制成含蛋白42.6％的脱铬皮渣骨粉,饲喂罗曼肉鸡。通过饲养、代谢试验研究了铬鞣皮渣和脱铬皮渣骨粉的营养与经济价值。结果表明:用5％Ca(OH)_2对铬鞣皮渣进行30分钟煮沸处理是理想脱铬方法,脱铬率达99.99％,蛋白回收率达74.95％。脱铬皮渣骨粉可代替肉鸡饲粮中的全部鱼粉(6％),以代替鱼粉量的60％效果最好,此时饲料成本低,鸡增重快,经济效益也高。铬鞣皮渣不经脱铬处理直接饲喂肉鸡,其在饲粮中含量为3％(饲粮此时铬含量为230.81ppm)时,即影响鸡的生长发育,不仅增重慢,且有5.1％的鸡出现铬中毒,随着饲粮中铬鞣皮渣的增多,鸡所受危害加大。     

IL-4、VCAM-1、VEGF与VEGFR2在MDCK细胞中的表达分布

目的:研究IL-4、VCAM-1、VEGF和VEGFR2四种蛋白在MDCK细胞中的表达与分布,探讨四种蛋白与MDCK细胞成瘤性的相关性。方法:采用免疫组化SP(streptavidin-perosidase)法观察四种蛋白在MDCK细胞中的表达分布特点。结果:IL-4、VCAM-1、VEGF与VEGFR2四种蛋白在MDCK细胞中均有表达。结论:IL-4定位于MDCK细胞胞浆中,在胞核及胞质中表达,呈弥漫性分布;VCAM-1、VEGF与VEGFR2三种蛋白定位于MDCK细胞胞膜上,在胞膜及胞质中表达。IL-4、VCAM-1、VEGF和VEGFR2蛋白均为细胞因子并参与细胞成瘤进程,可能与MDCK细胞成瘤性存在相关联系。     

原子吸收法和原子发射法测定奶粉中钠的比较

根据GB5009中测定食品中钠的方法,在波长为330.2nm下分别用原子吸收法和原子发射法测定奶粉中钠的含量,并进行了2种方法的对比试验。结果表明,2种方法的灵敏度和检出限接近,吸收法灵敏度稍高。2种方法的精密度和准确度接近,均可满足日常食品检验的要求。2种方法的回收率在92%～102%之间,从整体看,原子吸收法略优于原子发射法。     

猪不同肉质样品内参蛋白表达情况研究

为了揭示猪不同肉质样品内参蛋白表达的稳定性,试验测定了北京黑猪宰后24小时pH值、肉色(L~*)值以及72小时滴水损失(drip loss,DL)值,并根据测定结果挑选出PSE(pale soft and exudative)及RFN(red firm and non-exudative)2种肉样,采用Western-blot方法检测2种肉样中3种内参蛋白β-Actin、Gapdh及β-Tubulin的表达情况。结果表明:3种内参蛋白在2种肉样中均能稳定表达,但与β-Tubulin相比,β-Actin和Gapdh的表达丰度更高。说明β-Actin、Gapdh及β-Tubulin均适合作为量化猪不同肉质样品蛋白表达的内参蛋白。     

3种荧光标记根瘤菌数量测定方法比较

试验以绿色荧光蛋白标记的中华苜蓿根瘤菌菌株Sm1021为试验材料,将平板涂布法、膜过滤法、流式细胞术3种微生物计数方法测得结果进行对比,以平板涂布法为基准,观察膜过滤法与流式细胞术的准确性。结果表明:利用膜过滤法测定根瘤菌数量可获得与平板涂布法相近的结果,但在操作层面上具有一定制约,且测定成本较高,只有在某些特定情况下具有应用优势;流式细胞术测定的结果与平板涂布法所得结果间存在显著的差异,但由于菌类的数量基数较大,可进行粗略的统计估算。此外,当菌液中菌量较大时,流式细胞术的准确性增加(P=0.495)。     

防止饲料霉变的方法

饲料生虫和霉变后,不能继续饲喂畜禽,如果丢弃又会造成浪费,直接影响经济效益。那么如何防止饲料霉变,成了许多业者关注的问题。根据笔者多年的实践经验,将防饲料霉变的方法总结如下。1　喷雾法　将饲料丙酸以饲料重量的0 .2 5 %～0 .4 5 %均匀喷于饲料中,防止霉变的有效期达3个月以上。2　搅拌法　以饲料总重量的0 .3%～0 .7%备好丙酸钙或丙酸钠,先与少量的饮料拌匀,然后再搅拌到所有饲料中,其防止霉变的有效期为3个月以上。将大蒜剥去外皮,放入消过毒的研钵中,加入等量的凉开水,研磨成细浆,经3层消毒纱布过滤后,将滤液按3%的比例均匀拌入…     

两种动物组织DNA提取方法的比较

本试验以猪耳组织为试验样本,采用酚-氯仿抽提方法[1]和DNA提取试剂盒方法进行DNA提取的对比试验,并通过核酸蛋白定量仪测量了DNA浓度和纯度,并进行了PCR扩增实验。试验表明,两种提取方法都可以进行PCR扩增试验,但采用试剂盒提取方法提取DNA可以直接进行PCR扩增,而酚-氯仿提取法需放置一段时间后效果好,并且采用试剂盒提取的DNA纯度高、速度快、节省耗材、结果稳定、重复性强,适合大量DNA提取试验。     

水溶性氯化物含量测定方法比较

测定饲料中的水溶性氯化物主要有国标法和快速滴定法两种,本实验用两种方法对配合饲料和鱼粉样品进行了分析。1 材料和方法 本试验用鱼粉和配合饲料两种样品各10个,分别采用国标法和快速滴定法测定其水溶性氯化物含量。国际法:称取样品3g左右,准确至0.0002g,准确加入硫酸铁溶液（60g/L）50mL、氨水100mL,搅拌数分钟,放置10min,用干的快速滤纸过滤。准确吸取滤液50.00mL于100mL容量瓶中,加浓硝酸10mL、硝酸银标准溶液25.00mL,用力振荡使沉淀凝结,用水稀释至刻度,摇匀,静置5min,干燥过滤入150mL干锥形瓶中或静置（过夜）沉化,吸取滤液（澄清液）50.00mL,加