奶牛半胚裸露冷冻保存试验报告

本试验研究了不同冷冻方法、半胚冷冻前不同培养时间及不同冷冻保护液对奶牛7日龄半胚裸露冷冻效果的影响。结果以10％（V／V）甘油＋10％（W／V）葡聚糖（T－500）＋0．1M蔗糖／20％FCS－PBS溶液为冷冻保护液，裸露冷冻冻前培养1．0小时的半胚，获得了82．4％（14／17）的较高存活率，试验结果表明，半胚冷冻前培养时间及不同保护淮对奶牛半胚裸露冷冻有显著影响。     

奶牛胚胎分割与半胚裸露冷冻保存试验

本试验研究了①Ａ、Ｂ、Ｃ三个质量等级胚胎的分割效果；②五种不同冷冻方法冷冻裸露半胚的存活情况；③冻前培养３．０、１．５～２．０、１．０小时的裸露半胚存活率。结果①Ａ、Ｂ、Ｃ级胚胎的分割成功率分别为９５．８％（９２／９６）、７且．４％（７０／９８）、３０％（６／２０），三者间差异极显著（Ｐ＜０．０１）；②半胚冷冻前以２０％ＦＣＳ－ＰＢＳ液培养３．０小时后，以五种不同冷冻方法冷冻，均未获得存活半胚；③半胚冷冻前培养３．０、１．５～２．０、１．０小时后，以添加１０％而聚糖的１０％甘油＋０．１Ｍ蔗糖／ＰＢＳ液冷冻，分别获得了０％（０／４５）、６８．８％（１１／１６）、７５．０％（９／１２）的存活率。结果表明，胚胎质量是影响胚胎分割成功率的关键因素，半胚冷冻前的培养时间是影响裸露半胚存活的重要因素。     

奶牛裸露冷冻半胚移植试验

对以１０％甘油＋１０％葡聚糖（Ｔ－５００）＋０．１ｍｏｌ／Ｌ蔗糖／２０％ＦＣＳ－ＰＢＳ液裸露冷冻的奶牛半胚进行了移植试验。移植妊娠率为３９．４％（２８／７１），并获得移植犊牛。试验结果表明，移植单枚或１对半胚的妊娠率无显著差异；在受体牛发情后８～１２ｈ肌注ＬＲＨ－Ａ３４００μｇ，获得５０％的移植妊娠率，极显著地高于对照组（３８．５％～４０％）。此外，移植妊娠率具有随着胚胎发育阶段升高而增高的趋势。     

奶牛冷冻胚胎分割和分割后半胚冷冻技术

用简易分割方法,分割奶牛冷冻胚胎16枚,获得半胚32枚,分割成功率为100％(16/16),可移植半胚29枚,移植于16头受体牛,到第3个情期未返情者经直肠检查有6头妊娠,妊娠率为37.5％(6/16)。其中,在分割前或者分割后经恢复培养0.5～2h再移植的10头受体牛,5头妊娠;而未经恢复培养,分割后直接移植的6头受体牛中,只有1头妊娠。移植后3个月,直肠检查确定2头流产。已有1头受体黄牛生出1头奶牛牛犊(母)和1头受体奶牛产1头奶牛牛犊。其余的2头妊娠受体牛将于9月份产犊。此外,用简易分割法分割奶牛胚胎5枚,得到半胚10枚,裸半胚直接冷冻,解冻后回收可移植半胚5枚,移植于4头受体牛,无一头妊娠。结果表明,冷冻胚胎的分割半胚优于分割后冷冻半胚移植效果;冷冻胚胎分割前或者分割后恢复培养移植优于未经恢复培养而直接移植;简易分割法可应用于冷冻胚胎的分割。     

鲜整胚及分割双半胚移植试验研究

本试验结合我省胚胎移植的现状,用7头纯种西门塔尔牛作供体,46头杂交牛作受体,进行同期发情和超数排卵,获得鲜整胚59枚,双半胚32枚;用鲜整胚22枚,双半胚24枚进行移植,研究鲜整胚与分割双半胚的移植效果。结果表明:鲜整胚单枚移植妊娠率为27.3%(6/22),分割双半胚移植妊娠率为54.2%(13/24),鲜整胚单枚移植妊娠率比分割双半胚移植妊娠率低26.9个百分点,经t检验差异显著(P<0.05)。     

乳牛体内胚与体外胚移植经济效益分析

近年来，在奶牛生产中胚胎移植技术得到较快的推广，对加快我国奶牛良种的扩繁起到了积极作用。在胚胎移植中，体外胚的利用受到关注，也有不同的观点，我们认为在现实国情下，实施体外胚移植是可行的。     

进口优质肉牛胚胎的整胚和分割后半胚移植试验

进口优质肉牛胚胎的整胚和分割后半胚移植试验李树静余文莉乌兰张立（内蒙古家畜改良站呼和浩特０１００１０）吴德国（中国科学院遗传研究所）目前我国肉牛业发展滞后的主要原因之一是牛群品质差,良种覆盖率低。因此,急需从国外引进种源,改良我国牛群,以提高牛的个体...     

奶牛半胚移植于农户黄牛试验

<正> 近几年来,我们和一些单位相继移植奶牛胚胎到黄牛获得成功。实践证明,在我国当前缺少奶牛,牛奶供应不足的情况下,利用胚胎移植技术开发丰富的黄牛资源是加速发展我国奶牛业的有效途径之一。如果结合胚胎分割技术,把1个胚胎分割成两个,使原有的胚胎数增加1倍,移植后就可以获得更多的奶牛。这样更利于生产上应用和推广。我国奶牛多集中在城郊或国营农牧场。而黄牛大都在边远地区或分散饲养在农民家中,交通不便,给胚胎分割后尽快移植带来很大困难。本试验目的在于探索在农牧场分割的奶牛半胚移植给远处的农户黄牛的可能性。     

超低温冷冻对奶牛胚胎超微结构的影响

奶牛冷冻胚胎移植成活率较鲜胚移植明显低.为明确低温冷冻造成胚胎损伤的机理、为冷冻保存方法的进一步改进提供理论依据,利用透射电子显微镜观察了奶牛胚胎常规冷冻和玻璃化冷冻前后的超微结构变化.结果表明,奶牛鲜胚细胞分为两种类型:一种位于内细胞团(ICM)外层,胞质电子致密度低而着色浅,并含有大量的线粒体和内质网;另一种位于ICM中心区域,着色较深,溶酶体的数量多,其余细胞较较少.常规冷冻后,透明带和卵周隙明显变宽,细胞间接触变得松散.囊胚中含有退化的胞核和凋亡小体,内质网变大、变粗,脂滴明显增多.玻璃化冷冻后,ICM细胞的结构发生破坏,部分细胞发生崩解,细胞碎片大量分布于细胞间隙和卵周隙中,并可见大量的脂滴,凋亡细胞和凋亡小体增多.冷冻过程对早期胚胎细胞器的损伤可能是移植后成活率下降的主要原因.     

奶牛流通领域的检疫措施

近些年来 ,齐齐哈尔地区的奶牛饲养业得到长足的发展 ,其中城区奶牛饲养量已超过４．５万余头 ,每年都有上千头奶牛销往省内外。为深入地贯彻“预防为主”的方针 ,更好地发挥检疫把关的职责作用 ,我站对即将进入流通领域的奶牛 ,开展了健康检查和检疫工作。凡符合健康标准并检疫合格的奶牛 ,均按规定出具全国统一使用的检疫合格证明。既保证了对外提供健康牛源 ,又客观地达到了督促淘杀慢性病畜的目的 ,为奶牛饲养业的发展提供了保障性措施。１材料和方法１．１牛型提纯结核菌素、布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原及其阴性和阳性血清 ,均为黑龙…     

奶牛乳腺炎病原学比较研究

针对大型奶牛场和部分散养户的奶牛,对乳腺炎阳性和阴性乳汁进行细菌分离培养计数和生化鉴定,对分离到的病原菌做药物敏感性试验。试验中分离出的细菌主要是葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、棒状杆菌和酵母菌。经过生化鉴定,乳腺炎阳性乳分离得到的细菌大多数是明显溶血的,凝固酶反应呈阳性的强致病菌,细菌计数也高于乳腺炎阴性组,差异极显著;而乳腺炎阴性乳中所分离得到的细菌大多是环境中条件性致病菌,致病性不强。     

奶牛乳腺炎病原学比较研究

针对大型奶牛场和部分散养户的奶牛,对乳腺炎阳性和阴性乳汁进行细菌分离培养计数和生化鉴定,对分离到的病原菌做药物敏感性试验.试验中分离出的细菌主要是葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、棒状杆菌和酵母菌.经过生化鉴定,乳腺炎阳性乳分离得到的细菌大多数是明显溶血的,凝固酶反应呈阳性的强致病菌,细菌计数也高于乳腺炎阴性组,差异极显著;而乳腺炎阴性乳中所分离得到的细菌大多是环境中条件性致病菌,致病性不强.     

产后骨关节炎患牛血液生化指标的研究

通过对产后15~20 d、跗关节炎患牛与正常奶牛血清中蛋白、甲状腺素(T₃、T₄)、维生素、葡萄糖、乳酸、丙酮酸、Ca、P等生化指标的比较,探讨血液生化指标的变化与奶牛骨关节疾病的关系。结果表明,试验组血清白蛋白显著低于对照组(P<0.05),而α-球蛋白显著高于对照组(P<0.05);试验组T₃水平显著高于对照组(P<0.05),T₄显著低于对照组(P<0.05);试验组乳酸和丙酮酸水平显著高于对照组(P<0.05);试验组血糖、VA、VC、VE及Ca、P含量均显著低于对照组(P<0.05),说明产后关节炎过程中T₄、VA、VC的含量降低使关节软骨的胶原及蛋白多糖合成减少,解聚相对增多,引起血清蛋白组成发生变化;而产后血糖水平降低,引起乳酸、丙酮酸含量升高,低血糖又抑制了VC的合成;关节炎过程中可见Ca、P水平降低,可能是通过影响骨质代谢而促进了关节炎的发生。     

黑白花奶牛乳腺上皮细胞冻存方法的研究

试验研究了北方地区黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。采用内蒙古地区健康黑白花奶牛的新鲜乳腺组织,将组织进行Ⅱ型胶原酶消化后原代培养,培养的细胞经5代纯化后将密度调整为1×106个/mL。采用6种处理方法进行冻存,各设3个重复。液氮冻存1个月后,分别将6种不同方法冻存的细胞复苏后测定细胞活性,包括冻存死亡率、贴壁细胞占活细胞的比率、凋亡率等,同时进行形态学观察。结果显示,处理1组与2、3、5组间冻存死亡率存在极显著差异（P〈0.01）,处理1、4、6组间冻存死亡率无显著差异（P〉0.05）,处理2、6组间冻存死亡率存在极显著差异（P〈0.01）;处理4组的贴壁率高于处理2、5、6组,存在极显著差异（P〈0.01）。形态学观察结果发现,处理1、4组细胞较其他组生长状态良好。因此,处理4可作为黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。     

黑白花奶牛乳腺上皮细胞冻存方法的研究

试验研究了北方地区黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。采用内蒙古地区健康黑白花奶牛的新鲜乳腺组织,将组织进行Ⅱ型胶原酶消化后原代培养,培养的细胞经5代纯化后将密度调整为1×106个/mL。采用6种处理方法进行冻存,各设3个重复。液氮冻存1个月后,分别将6种不同方法冻存的细胞复苏后测定细胞活性,包括冻存死亡率、贴壁细胞占活细胞的比率、凋亡率等,同时进行形态学观察。结果显示,处理1组与2、3、5组间冻存死亡率存在极显著差异(P<0.01),处理1、4、6组间冻存死亡率无显著差异(P>0.05),处理2、6组间冻存死亡率存在极显著差异(P<0.01);处理4组的贴壁率高于处理2、5、6组,存在极显著差异(P<0.01)。形态学观察结果发现,处理1、4组细胞较其他组生长状态良好。因此,处理4可作为黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。     

黑白花奶牛乳腺上皮细胞冻存方法的研究

试验研究了北方地区黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法.采用内蒙古地区健康黑白花奶牛的新鲜乳腺组织,将组织进行Ⅱ型胶原酶消化后原代培养,培养的细胞经5代纯化后将密度调整为l×106个/mL.采用6种处理方法进行冻存,各设3个重复.液氮冻存1个月后,分别将6种不同方法冻存的细胞复苏后测定细胞活性,包括冻存死亡率、贴壁细胞占活细胞的比率、凋亡率等,同时进行形态学观察.结果显示,处理1组与2、3、5组间冻存死亡率存在极显著差异(P＜0.01),处理1、4、6组间冻存死亡率无显著差异(P＞0.05),处理2、6组间冻存死亡率存在极显著差异(P＜0.01);处理4组的贴壁率高于处理2、5、6组,存在极显著差异(P＜0.01).形态学观察结果发现,处理1、4组细胞较其他组生长状态良好.因此,处理4可作为黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法.     

奶牛专用脲酶抑制剂复合预混料对奶牛产奶量的影响

对32头健康泌乳奶牛进行了饲喂奶牛专用脲酶抑制剂复合预混料的试验.结果表明,饲喂脲酶抑制剂复合预混料的试验组,泌乳奶牛平均日产标准乳22.81kg/头,对照组泌乳奶牛平均日产标准乳20.12kg/头,产奶量提高13.37%(P＜0.05);饲料转化率提高13.43%(P＜0.05);经济效益提高13.68%,增收效益明显.