野生香蕉叶片总RNA提取方法研究

采用TRIZOL试剂盒法、RNAsio试剂法和改良CTAB法提取香蕉叶片总RNA,并通过凝胶电泳、紫外分光光度法检测提取的RNA样品的质量。研究结果表明：改良CTAB法提取的RNA具有28SrRNA和18SrRNA两条清晰的条带,OD260／OD280在1.80-1.95之间,OD260／OD230在1.75-2.10之间,具有较高的纯度;其它两种方法获得的RNA纯度不够,降解严重。将提取的RNA分别逆转录成cDNA,经RT-PCR扩增,只有改良CTAB法出现清晰的条带,进一步证明改良CTAB法提取的RNA具有很高的纯度,可以满足进一步分子生物学研究的要求。     

改良CTAB-LiCl法提取枣总RNA体系的建立

本试验以枣树田间枝条的枝皮及组培苗为材料,应用改进的CTAB法进行了总RNA的提取。针对枣组织中富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用β－巯基乙醇和PVP去除酚类,KAc及无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜的方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,A260/A280介于1.8~2.0之间,A260/A230均大于2.0,证明得到的RNA纯度、完整性和产率均较高,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底。结果表明,本试验建立的改良CTAB-LiCl法适于进行枣总RNA的提取     

干湿交替条件下磷镉交互作用在油菜上的生物学效应研究

采用温室土培盆栽方法，研究了干湿交替条件下磷镉交互作用对油菜的生物学效应。结果表明，Cd处理间和P处理间以及磷镉交互处理之间油菜地上部生物量差异都是显著的，油菜根部生物量P处理间差异显著，而Cd处理间和磷镉交互之间无显著性差异。P促进了油菜地上部生物量的积累，而Cd却阻碍了油菜地上部生物量的积累。油菜地上部和根部生物量最大值出现在Cd0P100处理，最小值出现在Cd30P0处理。Cd处理间油菜地上部和根部Cd浓度差异是显著的，而P处理间和磷镉交互之间差异不明显。随着施Cd量的增加油菜吸收Cd的总量增加，高P处理的油菜吸收Cd的总量也随着施P量的增加而增加。P处理间油菜地上部和根部P浓度有显著性差异， Cd处理间和磷镉交互处理之间油菜地上部P浓度差异都不显著，而油菜根部P浓度在Cd处理间和磷镉交互之间差异都显著，各处理地上部P浓度总是小于对应处理的根部P浓度。     

毕节地区马铃薯施肥效果研究

通过马铃薯施有施肥试验,得出毕节地区马铃薯６６７ｍ＾２施有机肥１２００ｋｇ,化肥最佳施用量：Ｎ８．７８ｋｇ,Ｐ２．４５ｋｇ,Ｋ５．９５ｋｇ,Ｎ：Ｐ：Ｋ为１：０．２８：０．６４。对不同海拔、不同土壤养分马铃薯Ｎ、Ｐ、Ｋ施用量可进行调整,在低海拔地区Ｐ、Ｋ比例可适当降低,高海拔地区Ｐ、Ｋ比例可适当提高。试验表明,了佳施一及氮、磷钾配合施用增产效果显著,肥料利用率高,经济效益最好。     

大豆氮磷钾吸收动态及模式的研究

根据２年对２个大豆品种的测定结果,大豆叶片、叶柄、茎秆、荚皮的Ｎ、Ｐ２Ｏ５、Ｋ２Ｏ百分含量随生育进程呈明显的下降趋势。籽粒中Ｎ的百分含量在成熟前２周达到最大值,尔后下降;Ｐ２Ｏ５含量比较稳定;Ｋ２Ｏ稍呈下降趋势。大豆单株的Ｎ、Ｐ２Ｏ５和Ｋ２Ｏ绝对含量的积累可用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ曲线方程加以表达,拟合良好。大豆植株吸收各种养分最快的时间：Ｎ约在出苗后第９￣１０周,Ｐ２Ｏ５在第１０周前后,Ｋ２Ｏ约在第８     

侵染南瓜的西瓜花叶病毒和黄瓜花叶病毒CP基因的克隆和序列分析

采用RT-PCR的方法,用马铃薯Y病毒属病毒3′-末端序列的简并引物和黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus, CMV）外壳蛋白（CP）基因的特异引物,对采自山东聊城的一表现花叶、黄化、蕨叶及果实畸形的南瓜样品进行了检测,同时扩增到了西瓜花叶病毒（Watermelon mosaic virus, WMV）和CMV 2种病毒的基因组片段,说明该样品受到WMV和CMV 2种病毒的复合侵染。这2个病毒分离物分别被命名为WMV-liaocheng和CMV-liaocheng。序列测定及分析结果表明,它们与其它相应病毒分离物CP基因核苷酸序列的同源性分别为91.2-98.0%和77.0-97.9%,推导的氨基酸序列同源性分别为96.4-98.5%和81.2-99.1%。根据完整CP 基因核苷酸序列构建的系统进化树显示：18个WMV分离物可分为3组,其中WMV-liaocheng 与HLJ、CHN及Habenaria等分离物表现出较近的亲缘关系,形成Ⅲ组;30个CMV分为两个亚组,其中CMV-liaocheng属于亚组I,CMV-liaocheng可能发生过重组。     

提高柑橘果实品质的NPK平衡施肥研究

针对贵红壤、黄壤、紫色土3种成年柑橘园的土训类型进行影响柑橘果实品质的N，P，K平衡施肥研究，结果表明：N，P，K3种肥料的施用量和比例不同，影响柑橘果实品质的各侧重面也不同。提出红壤园的最佳施肥为：N0.2kg P2O50.2kg K2O0.2kg／(株．年），黄壤园为：LN0.2kg P2O50.3kg K2O0.4kg／(株．年），常色土园为：N0.2kg P2O50.4kg K2O0.3kg／(株．年），叶分析其综合标准值为：氮2．65％，磷0．20％，钾1．20％。     

高粱总RNA的提取

介绍一种高粱总RNA的提取方法。该方法以CTAB为主要提取试剂,成功地提取出了高粱叶片的总RNA。获得的RNA条带清晰,A260/A280在1.8~2.0。这些结果表明提取的总RNA质量好,完整性好,可用于cDNA文库的构建、差异表达等工作。     

中棚番茄产量的氮磷钾效应模式及最优施肥参数的确定

采用三因素二次饱和Ｄ－最优设计方案,对中棚番茄氮磷钾最优化施肥问题进行了定量研究,建立了中棚番茄产量形成的肥料反应模式,利用回归模型对最优化施肥量,各种肥料要素的单独产量的效应规律及其互作效应的进行了探讨。     

草莓果实总RNA提取方法的比较

为建立草莓果实总RNA的提取方法,针对草莓成熟果实中富含多糖、多酚和色素等次级代谢物质,总RNA提取难度大的特点,比较改良的EASYspin 植物RNA提取试剂盒法和改良的CTAB法提取草莓果实中总RNA的质量。通过琼脂糖凝胶电泳和核酸蛋白测定仪(NanoDrop 2000)检测2 种方法提取总RNA的浓度、纯度及完整性等。改良的EASYspin 植物RNA提取试剂盒法和改良的CTAB法都能够完成草莓果实总RNA 的提取,电泳检测在28S 和18S 处呈2 条清晰的条带,OD260/OD280值和OD260/OD230值均在2.0 左右;改良的EASYspin 植物RNA提取试剂盒法成本较高,且提取总RNA质量劣于改良的CTAB法,但是EASYspin植物RNA提取试剂盒法操作简便,安全可靠,节省时间。通过RT-PCR验证,2种方法所获得的草莓果实总RNA质量较好,可达到分子生物学试验对RNA质量的要求。     

可口革囊星虫体壁总RNA提取的有效方法

为了从可口革囊星虫体壁中提取高质量的RNA,以便深入开展分子生物学研究。采用改良Trizol法、Trizol法和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法3种方法提取可口革囊星虫体壁中总RNA,并通过琼脂糖凝胶电泳比较不同方法提取总RNA的效果。结果表明:改良Trizol法提取的总RNA经电泳后能看到清晰完整的28S r RNA、18S rRNA和5S rRNA条带,无拖尾现象;而Trizol法和CTAB法提取的总RNA电泳条带完整性较差,缺少28S rRNA。传统的Trizol法和CTAB法不适用于可口革囊星虫体壁总RNA的提取;改良Trizol法提取的总RNA电泳条带清晰、完整性好,质量符合cDNA合成、RT-PCR扩增等后续实验要求,适用于提取可口革囊星虫体壁总RNA。     

一种适合葡萄多种组织的总RNA提取方法

为了解决葡萄组织中总RNA提取难度大的问题,以感染葡萄卷叶病毒-3的葡萄品种‘蛇龙珠’为试验材料,采用CTAB结合SDS法对总RNA提取方法进行了研究,建立了一套适合葡萄叶片、叶柄及韧皮部等多种组织总RNA提取的方法。结果表明,该方法在多种组织中均能获得高质量的RNA,OD260/OD280=1.8~1.9,电泳结果表明,所得RNA完整性好,无降解。同时用所得RNA进行了GLRaV-3的检测,电泳结果表明该法所得RNA可满足葡萄病毒病RT-PCR检测的质量要求。该方法操作简单,结果稳定,对其他富含多酚、多糖类植物组织总RNA的提取具有借鉴意义。     

苏云金芽胞杆菌不同分化发育时期总RNA的有效分离

将苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）8010在LB液体培养基30℃、230r／min下振荡培养,通过生长曲线测定（OD600）和显微镜观察,分别在8、30、39、42h和46h取样得到营养生长期、孢子囊期和裂解期样品来提取总RNA。通过对试剂提取方法的改进,找到一种方法可以很有效的提取Bt3个不同分化发育时期（营养生长期、孢子囊期和裂解期）的总RNA。提取的总RNA质量很好,可以进行cDNA合成、RT-PCR和转录组学研究等下游实验。     

花生总RNA提取方法比较研究

通过对2种RNA提取方法（改良CTAB法和Trizol法）和2种RNA提取试剂盒（AXYGEN总RNA提取试剂盒和TIANDZ总RNA提取试剂盒）进行比较研究,以期获得质量较好的花生不同器官的总RNA,为后续分子生物学实验奠定基础。实验结果表明,与TRIZOL法及2种RNA提取试剂盒相比,改良CTAB法提取的花生总RNA完整性好,得率高,稳定性好,并且无DNA污染,可以进一步满足半定量RT-PCR等实验需要。     

一种有效的菊花总RNA提取方法

菊花组织或器官中含有大量的酚类、多糖、蛋白质等次生代谢物质,影响了菊花总RNA的提取质量。本研究用改良TRIZOL法提取菊花不同器官总RNA,并用凝胶电泳、紫外分光光度计对提取的总RNA质量和完整性进行检测,并对叶片总RNA进行反转录,通过RT-PCR扩增了菊花管家基因Actin的部分片断。结果表明,采用改良TRIZOL法提取的RNA条带清晰、完整性好、质量高,其中A260/A280比值在2.08~2.19。通过RT-PCR从叶片中扩增出了目的基因cDNA片断。该方法是一种快速、有效的提取菊花总RNA的方法;该方法适用于根、茎、叶、花等器官或组织总RNA的提取,可作为菊花不同组织和器官总RNA提取的通用方法。     

板栗子叶总RNA提取方法研究?

为了获得板栗子叶总RNA提取的理想方法,为后续的分子生物学研究打下基础,以板栗幼果子叶为材料,采用改良CTAB法、硼砂-CTAB法、酚-SDS法、皂土法和2种植物总RNA提取试剂盒共6种方法提取板栗子叶总RNA。结果表明,除硼砂-CTAB法外,其他5种方法均能获得板栗子叶总RNA。但是,与酚-SDS法、皂土法和2种植物总RNA提取试剂盒相比较,改良CTAB法提取的板栗子叶总RNA完整性好,纯度高,且无DNA污染,能够满足cDNA-AFLP等分子生物学研究的要求。     

一种适宜棉花microRNA实时定量分析的总RNA提取方法

为满足棉花组织micro RNA结构与功能研究的需要,建立了棉花高质量的总RNA提取方法.以陆地棉纤维和胚珠为供试材料,采用改良的异硫氰酸胍-硫氰酸铵-酸酚法提取总RNA,利用stem-loop RT-qPCR法鉴定成熟的miRNA.结果表明此方法能得到高质量的总RNA,并且miRNA的回收率较高,足以满足mi-croRNA水平的实时定量分析.     

芸芥（E.Sativa Mill.）柱头总RNA提取方法比较研究

本文在常规异硫氰酸胍法的基础上,改进并确立了一种适合芸芥柱头总RNA的提取与纯化方法。结果表明,该方法所提取的芸芥柱头总RNA不但完整性好、纯度高, 消除了DNA、蛋白质、多糖和多酚类物质的污染,可用于cDNA合成、mRNA差异显示和Northern杂交等分子生物学研究,而且操作简单,经济,实验结果稳定,重复性好,还适合于较多材料RNA的提取。