栀子苷对小鼠急性肺损伤保护机制的研究

为了探究栀子苷能否对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤发挥保护作用及其潜在的作用机制。雄性Balb/c小鼠,于鼻腔滴注LPS前1 h腹腔注射栀子苷(50 mg/kg)或者地塞米松注射液(5 mg/kg),滴注LPS 24 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6和IL-10的浓度。通过细胞分类计数法分析BALF中细胞总数、巨噬细胞和中性粒细胞的变化。采用蛋白印迹法(Western-blot)分析核转录因子-κB（NF-κB）信号转导通路激活的程度。腹腔注射栀子苷可降低小鼠肺干湿比（W/D值）;改善肺组织病理学结构,减少肺泡出血和炎性细胞浸润且伴有髓过氧化物酶活性下降;抑制促炎性细胞因子TNF-α和IL-6分泌,促进抗炎性细胞因子IL-10生成。栀子苷通过缓减炎症反应保护LPS致小鼠急性肺损伤,其机制可能与阻止NF-κB信号转导通路的激活有关。     

β-谷甾醇对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用研究

为了探究β-谷甾醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用及其可能的机制,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定β-谷甾醇对RAW 264.7细胞产生肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。给BALB/c小鼠鼻腔滴注LPS(0.5mg/kg)构建小鼠急性肺损伤模型,滴鼻24 h后检测各指标。ELISA检测小鼠肺泡灌洗液中(BALF)的炎性细胞因子含量;称重法检测肺组织湿/干重比和肺含水量;HE染色法观察肺组织病理形态学变化;应用蛋白印迹法(western blot)检测小鼠肺脏中核转录因子-κB (NF-κB)信号转导通路中相关蛋白的含量变化。结果表明,β-谷甾醇能剂量依赖性降低RAW 264.7细胞上清及ALI小鼠BALF中TNF-α和IL-6的表达水平。肺脏称重结果和病理形态学结果显示β-谷甾醇可明显减轻LPS诱导的肺水肿和炎症反应。另外,western blot结果表明β-谷甾醇不仅能够下调NF-κB p65 的活化,还抑制了NF-κB阻断剂IκBα的磷酸化。β-谷甾醇对LPS所致的小鼠急性肺损伤有较好的保护作用,其保护机制可能与阻止炎症因子(TNF-α、IL-6)的释放和下调NF-κB信号转导通路的活化有关。     

脂多糖诱导奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤的研究

为了初步探讨大肠杆菌型奶牛子宫内膜炎发生机制,进而为后续筛选出作用于关键信号通路靶点的药物奠定基础。试验通过组织块培养法和传代培养分离纯化得到奶牛子宫上皮细胞(Bovine endometrial epithelial cell,bEEC)。30μg/mL的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激bEEC 12 h后,收集细胞用于奶牛子宫内膜上皮细胞体外炎性损伤模型的研究。通过荧光定量RT-PCR检测LPS作用于bEEC 2、6、9、12 h后细胞内IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达,然后通过Western-blot检测LPS诱导bEEC NF-кB和MAPKs相关蛋白的表达。结果表明：30μg/mL的LPS作用b EEC细胞2、6、9、12 h可极显著(P<0.01)诱导IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达。LPS可上调MAPKs相关蛋白P38、ERK、JNK的磷酸化水平(P<0.01),促使NF-κB抑制蛋白IκBα的降解(P<0.05)。说明LPS可激活MAPKs和NF-кB信号通路,诱导大量炎症介质的...     

肺气虚证小鼠模型造模方法及其对小鼠免疫功能的影响

为筛选肺气虚证小鼠模型最佳造模方法并验证其免疫功能变化，分别选用SO2法、SO2＋寒冷因素刺激法、香烟烟熏法和香烟烟熏＋寒冷因素刺激法重建肺气虚证小鼠模型，检测其体重、肺脏剖检及病理组织变化等指标，筛选最佳造模方法，并测定其腹腔巨噬细胞活性、体外B细胞抗体分泌能力、血清NO含量、淋巴细胞增殖能力及细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量、肺匀浆中sIgA、sIgM水平。结果显示，香烟烟熏＋寒冷因素刺激法小鼠造模完成后出现严重的肺出血、肺组织坏死及炎性细胞浸润等病变，且与对照组小鼠相比，其体重、脾脏指数、胸腺指数分别显著下降18．35％，37．12％，19．69％，肺脏指数显著升高12．73％；小鼠腹腔巨噬细胞活性（P＜0．01）、血清NO水平下降（P＜0．05）；T、B淋巴细胞增殖能力显著升高；细胞因子IL-2（P＜0．01）、IFN-γ、IL-4含量升高（P＜0．05），IL-6含量下降（P＜0．05）；sIgA、sIgM水平均极显著升高。表明，香烟烟熏＋寒冷因素刺激法是肺气虚小鼠模型最佳造模方法，且其免疫功能受损。     

绿原酸对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析绿原酸(CHA)对小鼠脾脏淋巴细胞增殖、分泌功能的影响。无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入诱导剂刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)以及0、40、80、160 μg/mL不同浓度的CHA,经过不同时间培养后,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的增殖,ELISA和Griess法分别检测淋巴细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果表明：低浓度和中浓度CHA提高ConA/LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖和存活,而高浓度CHA明显抑制其细胞增殖转化;CHA促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞分泌NO;CHA对T淋巴细胞分泌TNF-α影响不大,中浓度CHA可显著促进脾脏B淋巴细胞分泌TNF-α,高浓度反而抑制其分泌;CHA促进环磷酰胺处理的小鼠脾脏T和B淋巴细胞体外增殖,但对其NO分泌量影响不明显。结果提示CHA可能通过影响淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而表现免疫调节作用。     

蟾酥注射液对小鼠免疫细胞影响的实验研究

为了观察蟾酥注射液对小鼠的免疫细胞增殖及其分泌细胞因子的作用,采用中药免疫药理学方法,选择不同浓度的蟾酥注射液作为试验组,分别与小鼠的脾淋巴细胞以及LPS或者ConA共同孵育48 h,检测细胞增殖水平的变化;将蟾酥注射液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养,检测蟾酥注射液对巨噬细胞吞噬中性红能力的影响;将蟾酥注射液与自然杀伤细胞共培养,检测蟾酥注射液对NK细胞杀伤能力的影响;取脾细胞与蟾酥注射液共培养上清,ELSIA法检测蟾酥注射液对几种重要的细胞因子（IFN-γ、IL-2、IL-12）分泌水平的变化。结果显示蟾酥注射液在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原（Con A或LPS）作用能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖能力（P〈0.05或P〈0.01）;蟾酥注射液单独作用可以显著提高巨噬细胞吞噬中性红的能力;蟾酥注射液能够显著提高小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤活性;同时蟾酥注射液能够显著增强小鼠脾淋巴细胞分泌Th1型细胞因子。说明蟾酥注射液在体外能够显著提高几种主要免疫细胞的增殖和功能,研究结果显示蟾酥注射具有显著的非特异性免疫增强作用。     

蟾酥注射液对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用

摘要：本实验研究蟾酥注射液对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。采用药理免疫学方法制造免疫低下的动物模型,测定脾脏重量并计算脾脏指数;ELISA方法检测IgG,IgG1,IgG2b抗体水平;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应;ELISA方法检测细胞因子（IFN-γ、IL-4、IL-10）水平。测定结果表明,蟾酥注射液能够增强免疫低下小鼠脾脏指数,提高抗体水平;在ConA或者LPS刺激下提高脾细胞增殖率,促进淋巴细胞分泌细胞因子,说明蟾酥注射液在一定剂量下能够缓解氟苯尼考引起的免疫抑制。     

蟾酥注射液对小鼠淋巴细胞影响的研究

为了研究蟾酥注射液对机体淋巴细胞免疫功能的影响,选择不同浓度的蟾酥注射液作为试验组,分别与小鼠的脾淋巴细胞共同孵育48 h,检测细胞增殖水平的影响;用ELSIA法检测蟾酥注射液对几种重要的细胞因子(IFN-γ、IL-2和IL-12)分泌的影响;应用流式细胞技术检测蟾酥注射液对小鼠脾中T淋巴细胞CD4/CD8表达和细胞周期的影响。结果显示,蟾酥注射液在一定剂量范围内能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖能力;能够显著增强IFN-γ、IL-2和IL-12分泌;能够显著提高小鼠脾中CD4+ CD8-和CD4- CD8+表型的T淋巴细胞亚群百分率;能够显著提高小鼠脾中淋巴细胞进入S期的百分率。表明蟾酥注射液在体外能够显著提高淋巴细胞的增殖及功能,说明蟾酥注射能显著地增强机体特异性免疫功能。     

TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

TRAIL具有选择性杀伤肿瘤细胞而对大多数正常细胞没有明显毒性,可通过TRAIL胞外及胞内凋亡通路发挥诱导肿瘤细胞凋亡作用,而正常细胞则通过NF-κB介导、诱骗受体及c-FLIP调节来逃逸TRAIL诱导的凋亡。TRAIL与基因治疗、抗死亡受体的单克隆抗体、化疗、放疗药物及蛋白酶体抑制因子的联合使用能明显提高肿瘤治疗的敏感性,同时还可以逆转肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象。因此TRAIL作为新一代抗肿瘤药物有望应用于临床治疗。     

滑子菇黄酮醇提工艺及抗氧化活性研究

通过单因素试验与正交试验优化了滑子菇黄酮的超声波辅助提取工艺,并利用D-101型大孔树脂分离纯化,对滑子菇黄酮进行抗氧化活性研究。结果表明,最佳提取工艺条件为乙醇体积分数70%,料液比1∶5(g:mL),超声功率480 W,提取时间2 h,得率为2.989%;精制黄酮后,含量为41.47%;滑子菇黄酮对羟基自由基的清除率为5.60%,对DPPH自由基的清除率为78.09%,对大肠杆菌有一定的抑菌效果。     

乌拉尔甘草离体根尖培养方法的建立

建立甘草的离体根尖培养体系有助于研究甘草的根系营养、形态建成以及某些次生代谢产物的合成、代谢等。为建立乌拉尔甘草的离体根尖培养体系,对影响乌拉尔甘草离体根尖生长的培养基、激素以及维生素等因素进行了研究,并对其中的药用有效成分进行分析。结果表明：在培养基中附加0．10mg／L的IBA,可诱导乌拉尔甘草离体根尖伸长并产生较多的侧根;B,大量元素＋B5微量元素和1/3MS大量元素＋1／3MS微量元素适宜乌拉尔甘草离体根系的生长。表现为主根和侧根发达而均匀,具有较强的生长活力;培养基中附加0．50mg/L的VB1可显著促进乌拉尔甘草离体根系鲜重的增加;液体悬浮培养适于乌拉尔甘草离体根尖的培养。在悬浮培养条件下甘草离体根中甘草总黄酮物质的含量为0．75％,但没有检测到甘草酸的产生。     

中药复方宫净对奶牛子宫内膜上皮细胞抗炎作用研究

为探讨中药复方的疗效和调控机制,本试验利用脂多糖建立奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤模型,通过MTT法筛选出脂多糖最佳作用时间浓度时100 ?g/mL,12 h;中药复方宫净的最佳作用浓度为2 mg/mL。利用Real-time PCR技术检测对照组、模型组、中药组在3、6、12 h时细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8 mRNA的表达变化。结果表明：与对照组相较,6、12 h模型组：IL-1β、IL-6、IL-8极显著升高(P<0.01);3 h：IL-1β、IL-8显著升高(P<0.05);中药组与模型组相较,3 h时IL-1β、IL-6显著下降(P<0.05);6 h时 IL-6、IL-8极显著下降(P<0.01),12 h时IL-8     

不同氮形态及配比对甘草生长及品质的影响

为了探究氮素形态对甘草生长、产量及品质的影响,并为甘草的优质高产栽培提供氮肥施用依据,本试验采用营养液培养的方法,在不同氮素形态及硝铵配比处理后,比较了甘草生长量、药用成分以及游离氨基酸、可溶性蛋白质等物质含量变化。结果表明：适量的硝铵配比能提高甘草的产量和品质。不同硝铵配比中,NO3--N/NH4+-N为50/50时,根的产量、整株合成的药用成分以及可溶性糖、可溶性蛋白质等含量最高。硝态氮、铵态氮及尿素三种不同氮素形态中,铵态氮最不适宜甘草生长;根的产量上,硝态氮和尿素处理之间没有显著差异;但尿素处理的整株植株合成药用成分的量最大。     

紫外光B辐射增强对小白菜膜脂质过氧化作用的影响

小白菜品种矮脚黄生长在光照培养室内,在以０．０、１３．０ｋＪｍ＾－２ｄ＾－１（模拟氧浓度下降２０％时的ＵＶ－Ｂ强度）的紫外光Ｂ（ＵＶ－Ｂ２８０－３２０ｎｍ）进行４ｄ与７ｄ的照射处理,研究ＵＶ－Ｂ对小白菜叶片内的类黄酮和膜脂质过氧化作用的影响。研究结果表明,ＵＶ－Ｂ辐射诱导了小白菜叶内吸收ＵＶ的类黄酮化合物的积累。同时ＵＶ－Ｂ辐射降低小白菜叶片内抗坏血酸的含量,１３．０ｋＪｍ＾－２ｄ＾－１的ＵＶ－Ｂ     

热处理对尖椒果实贮藏特性及冷害的影响

【研究目的】研究热水处理对尖椒果实贮藏冷害的影响,为尖椒的冷藏提供理论和应用依据。【方法】用热水处理（CK;处理：45℃水中浸泡5min。）尖椒果实。研究热处理对尖椒果实贮藏特性及冷害的影响。【结果】热处理抑制了贮藏过程中尖椒的腐烂率,冷藏30d时处理果的腐烂率仅为对照果实的37.5%。     

草珊瑚乙醇提取物的抗氧化性及其对芒果采后主要病原菌的抑菌活性研究

以无水乙醇为溶剂制备草珊瑚全草提取物,测定其总酚和总黄酮含量,提取物对DPPH自由基与ABTS自由基的清除能力,以及不同浓度草珊瑚乙醇提取物对芒果采后常见3种病原菌的抑菌活性及对病原菌孢子萌发的影响。结果表明：草珊瑚乙醇提取物中的总酚含量为7.62%,总黄酮含量为6.13%;对DPPH自由基和ABTS自由基均有一定的清除能力,在低浓度（0.001 mg/mL）范围内对DPPH自由基的清除能力可超过BHT。草珊瑚乙醇提取物对3种芒果采后病原菌均有一定的抑菌效果,其中对拟茎点霉蒂腐菌的抑制效果最佳,2.5 mg/mL提取物处理即可有效抑菌,处理7 d时抑制率达到50.29%;对胶孢炭疽菌的抑制效果次之,5 mg/mL提取物处理7 d时抑制率为41.25%;对可可球二孢蒂腐菌的抑制效果相对较弱,5 mg/mL提取物处理6 d抑制率仅10.67%。     

贮前抗坏血酸处理对李果实冷害及生理生化的影响

以串红李子为试材,研究了不同浓度的抗坏血酸处理对低温下贮藏的李果实冷害及生理生化的影响。结果表明,与对照相比,贮前抗坏血酸处理能推迟李果实的后熟进程,使着色过程缓慢,呼吸强度与乙烯释放量受到一定的抑制,明显降低冷害指数,抑制李果实贮藏期间冷害的发生,尤其以低浓度（0.2%）的抗坏血酸处理抑制冷害的效果最好,可保持李果实较好的贮藏品质。