叶绿体型转昆虫抗冻蛋白基因烟草的耐寒性

根据已构建的大豆叶绿体表达载体pJY01,设计特异性引物,将昆虫抗冻蛋白基因MpAFP149插入此载体中构成叶绿体表达载体pJY01-MpAFP149,利用基因枪轰击法转化烟草,经壮观霉素筛选获得4株叶绿体型转抗冻蛋白基因烟草株系。PCR和PCR-Southern结果显示外源基因已整合至烟草叶绿体基因组中但同质化水平不高,RT-PCR结果也表明昆虫抗冻蛋白基因已发生了转录。将野生型烟草、叶绿体型转抗冻蛋白基因烟草及核转化T₁代转抗冻蛋白基因烟草(pCAMBIA1302- MpAFP149)于–1℃低温处理3 d,观察耐寒表型及测定相对电导率。结果表明, 叶绿体型转基因烟草的耐寒表型优于野生型烟草,但与核转化的T₁代转抗冻蛋白基因烟草无显著差异。处理3 d时,叶绿体型转基因烟草和T₁代转抗冻蛋白基因烟草的电导率分别为39.2%和38.2%,而野生型烟草已达73.7%。本实验获得的异质化转叶绿体抗冻蛋白基因烟草与转核基因烟草的耐寒力无差异。     

胡萝卜与黄粉虫抗冻融合基因在拟南芥中的表达与抗冻性分析

抗冻蛋白(antifreeze protein, AFP)是一类能控制冰晶生长和抑制冰晶之间发生重结晶的蛋白质,能在低温结冰条件下保护生物体不受伤害。抗冻蛋白具有2种明显不同的抗冻活性--热滞(thermal hysteresis, TH)活性和重结晶抑制(recrystallizationinhibition, RI)活性。鱼类和昆虫抗冻蛋白的特征是高TH低RI活性,而植物抗冻蛋白的特征是低TH高RI活性。为了获得高TH、高RI活性的抗冻蛋白(antifreeze protein, AFP),克隆得到胡萝卜抗冻蛋白基因(DcAFP)和黄粉虫抗冻蛋白基因(TmAFP)cDNA全序列。通过重叠延伸PCR,将2个基因前后串联构建融合基因Dc-TmAFP和Tm-DcAFP,并构建了植物表达载体,通过农杆菌介导转化模式植物拟南芥,成功获得4个基因的转基因拟南芥植株。对转基因拟南芥植株进行抗冻试验处理,并进行了存活率统计和叶片黄化率统计分析。分析结果表明,不同功能的抗冻蛋白对植物的抗冻性有不同的帮助,热滞效应高效的黄粉虫抗冻蛋白对植物降低冰点方面效果大,而在植物遭受较长时间冻害时,抑制重结晶效应高效的胡萝卜抗冻蛋白对植物质外体中流体保持稳定性作用较大,从而提高植物的耐冻能力。     

浙江大学学者发现褐飞虱的“祛黑奥秘”

<正>体色对于自然界中的生物具有重要的意义,起到了拟态、保护、警戒等作用。昆虫的体色也存在遗传性和可塑性,造就了千姿万态的昆虫世界。褐飞虱是我国和许多亚洲国家当前水稻上的首要害虫,这种昆虫通常虫体体色为黄褐色,但也经常会出现黑色个体,在维持其多样性和生态适应性方面可能起着重要作用。     

昆虫抗冻蛋白基因转化烟草的抗寒性

将准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPAFP149亚克隆至pCAMBIA1302中,构建成单价植物表达载体pCAMBIA1302-MPAFP149,转化至农杆菌EHA105中,利用叶圆盘法转化烟草。通过PCR、PCR-Southern及RT-PCR检测表明抗冻蛋白基因已整合至烟草基因组中,并发生了转录。对T0代转基因烟草以－1℃处理48 h,转基因烟草的相对电导率和表型明显优于野生型烟草。室温恢复试验验证转基因烟草可存活并恢复生长,而野生型烟草受到了不可逆的低温冻害。研究证明转化后携带昆虫抗冻蛋白基因的烟草比野生型烟草具有明显的抗寒能力,该结果为减轻冷敏感经济作物在春季遭受霜害提供了理论依据和应用基础。     

新型昆虫生长调节剂氟酰脲市场发展及趋势述评

正氟酰脲是新型含氟昆虫生长调节剂,可阻止昆虫生长过程中蜕皮阶段的几丁质合成,从而影响昆虫蜕皮,使得害虫在蜕皮时不能形成新的表皮,导致虫体呈畸形而死亡。此外,还能调节昆虫的生长发育,抑制蜕皮变态以及抑制害虫的吃食速度,具有很高的杀卵活性……     

逆境胁迫下植物 DNA甲基化及其在抗旱育种中的研究进展

DNA甲基化作为一种重要的表观遗传现象,通过多种甲基转移酶的作用,能够在不改变DNA序列的情况下调节植物基因组的功能。此外,DNA甲基化能够对多种环境刺激做出迅速的反应,帮助植物应对不同的环境胁迫。由于DNA甲基化的变异可以遗传给后代,这种类似于经典遗传学的特性使其为植物育种中的应用提供了可能。对植物DNA甲基化的特点和变异的发生以及DNA甲基化在植物多种逆境胁迫下的研究进展等方面进行了总结和综述,并探讨了DNA甲基化在植物抗旱性育种中的应用前景。在将来的研究中可利用DNA甲基化/去甲基化抑制剂处理创造突变材料,创造抗旱性新种质;同时深入开展植物DNA甲基化与抗旱机制研究,开发新型甲基化分子标记用于抗旱分子育种实践。     

金线鱼鱼皮抗冻蛋白包埋工艺的研究

为了提高金线鱼鱼皮抗冻蛋白的热稳定性,采用多孔变性淀粉对金线鱼鱼皮抗冻蛋白进行包埋,对其包埋工艺和热稳定性进行研究。分别研究多孔变性淀粉壁芯材比、包埋温度和包埋时间等对金线鱼鱼皮抗冻蛋白包埋率的影响,并对其热滞活性进行了测定。结果表明,多孔变性淀粉包埋金线鱼鱼皮抗冻蛋白的最佳工艺条件为:壁芯材比为30:1、包埋温度为39℃、包埋时间为120 min,在此条件下,包埋率可达(85.12±1.10)%。各因素对抗冻蛋白包埋率的影响程度大小依次为:包埋温度壁芯材比包埋时间;热稳定性分析表明,多孔变性淀粉对抗冻蛋白起到了保护作用,提高了抗冻蛋白的热稳定性。     

昆虫越冬虫态及耐寒策略概述

昆虫作为生物界种物种多样性最丰富的类群之一,在长期进化过程中形成了各种提高耐寒能力和适应低温变化的策略,以度过不良环境、完成生活史和繁衍后代。为了全面深入了解昆虫的越冬耐寒性特点,本研究总结了昆虫的越冬虫态和昆虫在行为及生理生化方面的耐寒策略。重点分析归纳了昆虫如何调节体内含水量、形成体内冰核物质、改变代谢途径、积累抗冻小分子物质、产生与耐寒相关的蛋白、构成抗冻物质系统以抵御寒冷的策略等方面的研究进展,为未来昆虫耐寒性研究提供了详细全面的理论依据。     

马铃薯不同株系之间的DNA甲基化变异研究

为探究马铃薯不同株系之间DNA甲基化变异情况,利用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术对来源于同一马铃薯品种的3个株系进行分析。结果表明:筛选出6对引物组合,3个株系(3-4,17-1,9)MSAP比率分别为31.7%,38.1%和36.4%,全甲基化率分别为19.2%,23.7%和21.5%。株系之间的甲基化变化模式包括甲基化和去甲基化变异。在甲基化变化类型中,偏向于产生由全甲基化到过甲基化的变化;而在去甲基化变化类型中,偏向于由全甲基化到无甲基化和由过甲基化到无甲基化。研究结果证实不同马铃薯株系之间DNA甲基化变化存在差异,为马铃薯新株系选育提供理论依据。     

巴西橡胶树DNA甲基化的MSAP分析

本文采用"甲基化敏感扩增多态性"(Methylation Sensitive Amplification Polymorphism,MSAP)的分析方法,在全基因组水平检测巴西橡胶树DNA甲基化位点,确定巴西橡胶树基因组DNA甲基化模式和水平。结果表明:16对MSAP引物选择性扩增,共扩增262条带,其中甲基化位点87个,甲基化比例为33.21%,其中,半甲基化位点为32个,比例为12.22%;全甲基化位点为55个,比例为20.99%。对部分巴西橡胶树基因组甲基化位点进行回收,最终分离了18条存在甲基化的基因组DNA序列。BLAST比对后,同源分析表明巴西橡胶树基因组中包括转录因子、蛋白激酶等在内的多种类型的DNA序列中均存在甲基化现象。本研究为深入研究巴西橡胶树的DNA甲基化奠定基础。     

光波和光强对几种重要农业害虫趋光性的影响

为探明几种常见农业害虫的趋光行为间的差异,以及为灯光诱捕器类产品研发改进提供理论依据,通过室内比较研究在不同波长或光强的荧光灯刺激下,几种常见农业害虫的趋光行为,结果表明：（1）在CK光源(335.09~359.95 nm,408.66~432.83 nm),灯诱距离为1 m的条件下各种昆虫的趋光率的高低次序为：棉铃虫Helicoverpa armigera (Hübner)＞斜纹夜蛾Prodenia litura (Fabricius)＞粘虫Leucania loreyi (Duponchel)＞朽木夜蛾Axylia putris (Linnaeus)＞喙丽金龟Adoretus sinicus (Burmeister)＞小地老虎Agrotis ypsilon (Rottemberg)＞稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis (Guenée)＞鳃金龟Holotrichia lata (Brenske)＞甜菜夜蛾Spodoptera exigua (Hübner)。（2）20种不同波长光源中4个光源对棉铃虫诱集率较高。（3）在CK光源3个不同水平的光照度条件下(1.18、0.6、0.24 lx),棉铃虫、斜纹夜蛾和鳃金龟都表现出趋光率随光强增强而增高的趋势。（4）棉铃虫、斜纹夜蛾和鳃金龟都在19:30—20:30和22:45—次日7:00 2个时间段内趋光率最高。（5）采用CK光源在室外灯诱的鳞翅目昆虫中,雄虫数量明显高于雌虫,且雌虫有较高的携卵率;蓝紫色光波能够引诱更多的昆虫,而绿色或黄绿色的光波引诱效果不佳。     

两类枣园昆虫群落结构的比较分析

2009年3~4月初步研究了山西农业大学枣园（记作Ⅰ）和山西省农科院果树研究所枣园（记作Ⅱ）的早春昆虫群落结构特征。结果表明：枣园?昆虫有34种,分别隶属8个目27个科,其中网目拟地甲(Opatrum subaratum Faldermann),,蒙古拟地甲(Gonocephalum mongolicum Reitter),菱蝗科(Tettigidae)和中华广肩步甲(Calosoma maderae chinense Kirby)是群落优势种。枣园Ⅱ昆虫有55种,分别隶属6个目39个科,其中三点盲蝽(Adelphocoris taeniophorus Reuter),隐翅甲科(Staphilinidae)和花蝽科(Anthocoridae)是群落优势种。枣园Ⅱ中,昆虫群落的丰富度、个体总数、多样性指数、均匀度均高于同时期的枣园Ⅰ,其中捕食性昆虫和寄生性昆虫的比例较高。通过聚类分析得出,两园昆虫群落的时间动态格局较相似,可分为两个阶段:发展初期,物种数和个体总数均较少;上升期,物种数和个体总数都显著增加,昆虫群落的稳定性增强。     

2种不同枣园刺吸式口器害虫群落构成和季节性变化

为了提高枣树害虫综合防治,采用系统调查方法,对太谷地区不同管理模式下枣园的刺吸式口器害虫群落进行调查与分析。结果表明,在不同管理条件下,粗放管理枣园（Ⅰ）刺吸式口器害虫个体数和优势种数均大于精细管理枣园（Ⅱ）,枣园寄主植物丰富度直接影响刺吸式口器害虫群落结构组成与时间动态,但2种枣园刺吸式口器害虫生物多样性（均匀度、优势度）各自的季节变化规律均趋于稳定,说明枣园管理方式不会改变刺吸式口器类害虫在夏秋季节的生物的多样性。因此,在枣树刺吸式口器害虫防治工作中,仅依靠生物防治见效甚微。应在害虫猖獗时,适当结合化学防治,以利于控制虫害发生与发展。     

口蹄疫病毒蛋白与细胞凋亡

口蹄疫病毒在感染细胞的过程中能够根据自己的需要诱导或者阻碍宿主细胞的凋亡,为自己创造最佳的生存环境并在一定程度上逃避宿主细胞的攻击,获得最大的生存能力。本文总结了近年来对FMDV各蛋白与细胞凋亡间的研究,分析其各蛋白在调节细胞凋亡过程中发挥的作用,并对FMDV的持续性感染机制的形成进行初步探讨。     

橡胶树大小橡胶粒子的差速离心分离及其差异表达蛋白质的研究

为了鉴定巴西橡胶树胶乳中大小橡胶粒子之间的差异表达蛋白质以及揭示橡胶生物合成的分子机制,采用差速离心的方法,从橡胶树的新鲜胶乳中分离纯化总橡胶粒子、大橡胶粒子和小橡胶粒子,用扫描电镜和SDS-PAGE以及质谱等方法分别检测和鉴定大小橡胶粒子的分离效果及其差异表达蛋白。结果表明,大小橡胶粒子可用差速离心法得到有效的分离和纯化,它们在SDS-PAGE电泳图谱上表现出差异表达的橡胶粒子蛋白,如分子量为22.0 kDa、24.5 kDa和120 kDa蛋白等,并对其中分子量为24.5 kDa的小橡胶粒子蛋白（SRPP）进行了质谱分析。橡胶树大小橡胶粒子差速离心法的建立,为大小橡胶粒子差异表达蛋白质的分离和鉴定奠定了一定的基础,将进一步促进橡胶树橡胶粒子的起源和发育,以及橡胶生物合成分子机制的研究。     

2个群体秀丽白虾生物学特征及基于RAPD的遗传多样性研究

对太湖和巢湖2个群体秀丽白虾的生物学特征和基于RAPD的遗传多样性进行了研究。结果表明,6月份太湖秀丽白虾的体长优势组为40-50mm（占样本数的69.3%）,体重优势组为0.5-2.0g（占样本数的83.4%）,体长（L/mm）、体重(W/g)的关系式为：W=2.6E-05L2.8777;6月份巢湖秀丽白虾的体长优势组为45-55mm（占样本数的73.8%）,体重优势组为1.5-2.5g（占样本数的69.0%）,体长（L/mm）、体重(W/g)的关系式为：W=2.8E-05L2.8471。15个随机引物的RAPD研究结果表明,太湖群体多态位点比例为49.16%,巢湖群体多态位点比例为48.78%;太湖、巢湖2个群体内遗传相似系数分别为0.8817和0.8735, 2个群体之间的遗传距离为0.0311,群体间没有发生明显的遗传分化。     

大樱桃传粉昆虫的调查研究

为了探明大樱桃传粉昆虫的种类和数量。在山西省大樱桃主产区以样地调查法与定点网捕方式调查绛县申王坡村、史村的大樱桃花期传粉昆虫。结果表明：（1）采集标本3290头,经鉴定共分为4个目15个科26个种。在传粉昆虫中膜翅目占64.83%~74.81%,膜翅目传粉昆虫中以蜜蜂科为主;（2）β多样性分析显示,平川区和山区2个调查样地传粉昆虫群落相似性系数为0.63,沿着从山区到平川区环境梯度的变化,物种有相对减少趋向;（3）9:00-11:00为昆虫采集活动高峰时段,按一天中采集昆虫数量排序依次为蜜蜂、地蜂、食蚜蝇和条蜂;气温10℃时,开始有昆虫活动,最早出巢活动的昆虫为蜜蜂。大樱桃访花昆虫种类较多,膜翅目昆虫是大樱桃花期的主要传粉昆虫,山区传粉昆虫的物种较平川丰富。     

福建地区储粮害虫防治经济阈值调研与分析

通过对福建7个储备粮承储企业159个仓廒89.17万吨库存粮食害虫防治经济性调研与分析,分别研究了害虫蛀食性和粉食性、小麦和玉米、熏蒸杀虫温度等情况下储粮害虫防治与其经济阈值的初步关系。主要结果包括:①蛀食性害虫的经济阈值小于粉食性害虫,同等条件下处理蛀食性害虫挽回的经济损失要大于付出的成本;②小麦和玉米品种的经济阈值小于稻谷,在同样的条件下,出现同样的害虫,处理小麦和玉米所付出的代价比挽回的经济损失要小;③熏蒸杀虫时,粮温在20℃以上,经济阈值较小,当粮温在15℃以下及35℃以上时,害虫防治的经济阈值较大。     

太湖秀丽白虾形态性状对体重影响的通径分析

随机选取了521尾太湖秀丽白虾,分别测定腹部长（X1）、腹部宽（X2）、体长（X3）、头胸甲长（X4）、头胸甲宽（X5）、尾扇长（X6）、额剑长（X7）、尾扇宽（X8）和体重（Y）9个指标。采用相关分析和通径分析的方法,计算了秀丽白虾以形态性状为自变量对体重(y)的相关系数、通径系数和决策系数,进而对各性状对体重影响进行分析。结果表明,太湖秀丽白虾各形态性状与体重的相关性均达到极显著(P<0.01)水平。秀丽白虾的腹部长（X1）、体长（X3）和额剑长（X7）的通径系数达到了极显著的水平(P<0．01);除体长（X3）外,各形态性状对体重（Y）的间接影响均大于直接影响。体长（X3）对体重（Y）的直接影响最大,其次为腹部长（X1）和额剑长（X7）,其它形态性状对体重（Y）的直接影响很小,主要通过体长（X3）和腹部长（X1）间接影响体重; 决策系数分析结果表明,体长（X3）、腹部长（X1）和额剑长（X7）的决策程度最大。决策系数分析结果与通径分析的结果一致。剔除与体重多元相关不显著的形态性状,建立了腹部长（X1）、体长（X3）、额剑长（X7）与体重（Y）的多元回归方程Y=-2.768+0.046X1+0.066X3+0.025X7。     

植物LEA 蛋白及其功能

干旱、盐碱和冻害是限制植物生长发育的主要逆境因子,胚胎晚期丰富蛋白（LEA）是一类重要的植物细胞脱水保护蛋白,在抵御干旱等非生物胁迫过程中发挥着重要功能。本文介绍了植物LEA蛋白的种类、结构及其表达特性,并综述了该类蛋白在提高植物抗旱、耐盐及抗冻能力等方面的研究进展。