银杏叶提取物对体外培养心肌膜微血管内皮细胞分泌NO和ET-1的影响

研究银杏叶提取物(EGb761)对微血管内皮细胞分泌NO和ET-1的影响。采用体外培养大鼠心肌膜微血管内皮细胞(RMMMVECs)模型,测定其一氧化氮(硝酸还原酶法)和内皮素-1(ELISA法)分泌量的变化。EGb761能显著性提高RMMMVECsNO和ET-1的分泌量,且NO/ET-1值没有显著性变化。     

五种中药有效成分诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ的研究

为了探讨抗病毒中药有效成分能否诱导肠黏膜微血管内皮细胞(IMMVECs)表达IFN-γ,本实验采用双夹心ELISA方法检测了穿心莲内酯、人参皂苷Rb1、苦参碱、绿原酸和甘草次酸等5种中药有效成分对体外培养的大鼠IMMVECs表达IFN-γ的影响。结果表明：一定浓度的穿心莲内酯、人参皂苷Rb1、苦参碱、绿原酸和甘草次酸均可以诱导大鼠IMMVECs表达IFN-γ,与空白对照组相比都具有极显著意义(P<0.01)。在同一个时间段内, 5.0 mg/L穿心莲内酯组IFN-γ的表达量高于10.0 mg/L穿心莲内酯组,20.0 mg/L人参皂苷Rb1组IFN-γ的表达量高于40.0 mg/L人参皂苷Rb1组,20.0 mg/L苦参碱组IFN-γ表达量高于40.0 mg/L 苦参碱组,5.0 mg/L 绿原酸组IFN-γ的表达量高于10.0 mg/L绿原酸组,5.0 mg/L甘草次酸组IFN-γ的表达量均高于10.0 mg/L甘草次酸。本结果提示：穿心莲内酯、人参皂苷Rb1、苦参碱、绿原酸和甘草次酸均可以激活MVECs诱生IFN-γ,而IFN-γ的表达可能与中药的抗病毒作用有直接或间接的关系。     

内毒素对肠黏膜微血管内皮细胞内分泌一氧化氮和内皮素的影响

目的是研究内毒素（lipopolysaccharide; LPS）导致肠黏膜微血管内皮细胞损伤的作用机制。将所培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为空白对照组和LPS组，每组按时间分为4个亚组：3h、6h、9h、12h。空白对照组加维持培养液，LPS组加1μg/ml LPS培养液，在CO2培养箱内静置培养。结果表明，一氧化氮（NO）分泌明显升高，3h后达到高峰，随后逐渐降低，而内皮素（endothelin; ET）分泌急剧升高，9h后达到高峰，随后又开始逐渐降低，但一直保持在较高的水平。所以引起了NO和ET的升高可能是LPS导致肠黏膜微血管内皮细胞的损伤机制。     

脂多糖对肠黏膜微血管内皮细胞表达TLR2和TLR4的影响

为研究TLR2、TLR4在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致肠黏膜微血管内皮细胞(RIMECs)损伤中的作用,以体外培养的肠黏膜微血管内皮细胞为模型,用浓度为1、5、10μg/mL的LPS刺激RIMECs3、6、9、12、24h后,采用半定量RT-PCR法检测细胞表面TLR2和TLR4的表达情况;再以浓度为1、5、10μg/mL的LPS刺激RIMECs9h后,半定量RT-PCR法检测细胞TLR2和TLR4的表达情况。结果发现：与对照组比较,不同浓度LPS刺激均能引起RIMECs表面TLR2和TLR4mRNA表达增加。不同浓度LPS刺激不同时间后,RIMECs表面TLR2和TLR4mRNA表达基本均在9h达到峰值,且无时间依赖性。用LPS刺激RIMECs9h,5μg/mL的LPS对细胞表达TLR2mRNA作用最强且无剂量依赖性,10μg/mLLPS对细胞表达TLR4mRNA作用最强且呈剂量依赖性。TLR2和TLR4在LPS损伤RIMECs的过程中起到重要作用。     

口蹄疫146S对乳鼠心肌膜微血管内皮细胞分泌IL-6的影响

研究口蹄疫146S病毒粒子抗原（FMDV 146S）对乳鼠心肌膜微血管内皮细胞（RMMVECs）分泌IL-6的影响,为解决现有口蹄疫疫苗的不足提供数据。体外培养乳鼠心肌膜微血管内皮细胞,用ELISA方法检测FMDV 146S处理后细胞上清液中IL-6浓度。乳鼠心肌膜微血管内皮细胞（RMMVECs）在正常状态下低水平分泌IL-6;FMDV 146S刺激后IL-6的分泌量显著增加,且呈剂量和时间依赖性,在刺激24 h后分泌量达到峰值。MVECs在FMDV 146S诱导的免疫与炎症反应中起着重要作用。     

速眠新对大鼠原代肝细胞CYP3A1、CYP2E1的影响

胶原酶二步灌流法获取原代大鼠肝细胞,用不同浓度的速眠新和保定宁处理,Western blot法测定肝细胞中细胞色素酶P450 3A1（CYP3A1）和细胞色素酶P4502E1 (CYP 2E1)的表达水平。结果表明：通过胶原酶灌流法,每只大鼠可获得2-4×108个肝细胞,成活率约为95%。用速眠新、保定宁处理后,肝细胞CYP3A1和CYP 2E1的表达随速眠新、保定宁浓度的增加和处理时间的延长而呈升高的趋势。原代大鼠肝细胞可用于速眠新药物代谢分子机制的研究,为其临床上合理地应用提供了理论依据。     

转Cry1Ac+Cry2Ab抗虫棉对3种害虫的存活、生长发育及中肠相关酶活性的影响

 以转Cry1Ac基因棉花和常规非转基因棉花为对照,系统研究了转Cry1Ac+Cry2Ab基因棉花对棉铃虫、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾的存活、生长发育及中肠酶活性的影响。研究结果表明,与常规棉对照相比,转Cry1Ac+Cry2Ab基因棉花和转Cry1Ac基因棉花叶片对3种害虫的慢性毒性差异较大,对每种害虫的抗性程度也有一定的差异;饲喂转Cry1Ac+Cry2Ab基因棉花和转Cry1Ac基因棉花叶片的3种害虫幼虫生长发育进度明显缓慢、体重明显减轻,相关酶活性也有不同程度的变化,但每种酶的变化有一定的差异。     

Mechanism of Influence of the Explosive Blast on the Permeability of the Pulmonary Microvascular Endothelial Cells Monolayer

The influence of the explosive blast with different pressure on the permeability of the pulmonary microvascular endothelial cells monolayer (PMECM) has been observed by using the model of the explosive blast wounded the endothelial cells monolayer in vitro The mechanism of the effect of the blast on PMECM permeability has also been explored in pathology and cytoskeleton. The results show that the explosive blast with about 100 kPa pressure can increase the permeability of PMECM in conductance detection, and the explosive blast with lower than 350 kPa pressure can mainly cause the increasing of the gap between endothelial cells, and explosive blast with higher than 600 kPa pressure can exfoliate the endothelial cells monolayer. The occurrence mechanism of PMECM permeability changes caused by explosive blast is related to the change of the cytoskeleton myosin.     

热应激诱导猪肾小管上皮(LLC-PK1)细胞线粒体凋亡相关因子的时效表达

拟探讨热应激诱导LLC-PK1细胞线粒体凋亡相关因子的表达和活性情况,以及激活线粒体凋亡通路的时间。采用qRT-PCR方法和Caspase活性检测试剂盒分别检测42℃热应激处理后0,2,4,8,16 h以及37℃培养的LLC-PK1细胞中HSP72、Bcl-2、Bax、AIF和Cyt.c的基因表达以及Caspase-9和Caspase-3的活性。结果显示,42℃热应激1 h,LLC-PK1细胞Bcl-2/Bax(P0.05)和AIF(P0.01)基因表达以及Caspase-3(P0.01)活性从0 h开始升高(P0.01),到2 h达到最高(P0.01);HSP72基因表达和Caspase-9活性0 h即达到最高(P0.01);Cyt.c基因表达在2 h开始极显著升高(P0.01),并且此时最高,8 h以后全部因子恢复到正常水平。结果表明,42℃热应激1 h即激活LLC-PK1细胞线粒体凋亡通路,且热应激后的0~8 h线粒体凋亡通路处于活化状态,其中2 h时最为活跃。     

茄红素可藉由调降NF-kB及Sp1并降低基质金属蛋白酶-9表现而抑制人类肝癌细胞株SK-Hep-1侵袭(英文)

目的:近年来许多研究显示,摄取较多富含茄红素的食物可降低摄护腺癌以及肝癌的发生率。虽然茄红素被证实具有抑制癌症转移的能力,但目前为止其作用机制仍不清楚。因此,本研究的主要目的在于探讨茄红素的抗癌转移作用及机制。我们提出的假说为:茄红素具有抑制癌转移的能力,其机制可能与调降基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9;MMP-9)的表现有关。试验方法:将高侵袭能力的肝癌细胞株SK-Hep-1以茄红素预培养2h,以磷酸盐类缓冲溶液清洗后并继续培养24h,之后进行各种分析,包括:以transwell分析癌细胞侵袭能力;以同功酵素图谱(zymography)及西方墨点法个别分析MMP-9的酵素活性及蛋白表现;另外,利用电泳移动偏移分析(electrophoreticmobilityshiftassay;EMSA)检测转录因子NF-kB、AP-1以及Sp1对MMP-9启动子(promoter)的结合能力。结果:茄红素具有抑制肝癌细胞侵袭的能力,而抑制效果与剂量关系呈钟型曲线,亦即以5mmol/L剂量的抑制效果最好(抑制率达63%,P<0.001);同时,在抑制MMP-9的活性及蛋白表现上也呈相同趋势。此外,茄红素也会降低转录因子NF-kB及Sp1对MM-9启动子的结合能力。结论:茄红素具有抑制癌细胞侵袭的能力,其机制可能与降低转录因子NF-kB和Sp1结合至MMP-9启动子的能力以及减少MMP-9蛋白的表现有关。本研究增加了对茄红素抑制癌转移作用机制的了解,将有助于茄红素作为保健食品上的实用基础。     

化学杀雄剂SQ-1诱导青海高原春小麦雄性不育的初步研究

为了研究化学杀雄剂SQ-1对青海高原春麦区的杀雄效果及不同春小麦品种对SQ-i反应的遗传差异,采用时期为主区、剂量为副区、小麦品种为亚副区的三因素裂区设计方法,对化学杀雄剂SQ-1诱导青海高原春小麦雄性不育的效果进行了研究.结果表明,在Feekes 8.0～Feekes 8.5时期,5.0 kg/hm2剂量下,参试品种均能被诱导产生大于95%的雄性不育率.对参试品种进行人工饱和授粉,其结实率均能达到90%以上,证明SQ-1对雌蕊无明显影响.     

Glu-B1位点亚基色谱鉴定及7OE对面团强度的影响

准确鉴定高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)及探讨其对面团特性的影响是小麦品质研究的重要内容。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对62份品种(系)的HMW-GS组成进行鉴定。结果表明,结合SDS-PAGE和RP-HPLC两种方法可以对Glu-B1位点,尤其是Glu-B1(7 8)进行有效鉴定。选用13份姊妹系为材料,使用RP-HPLC和凝胶色谱(SE-HPLC)方法,研究了Glu-B1al(7OE 8*)以及贮藏蛋白组分含量对面团强度的影响。结果表明,Glu-B1al(7OE 8*)可显著提高HWM-GS总量和面团强度,7OE可作为优质亚基用于强筋小麦育种。相关性分析表明,谷蛋白总量、HWM-GS、LMW-GS以及x-HMW含量与最大抗阻力呈1%显著正相关,相关系数分别为0.76、0.76、0.77和0.72。SDS-不溶性谷蛋白大聚体(UPP)占谷蛋白聚合体总量的百分比与揉面仪峰值时间、粉质仪形成时间和稳定时间以及最大抗阻呈1%或0.1%显著正相关,相关系数分别为0.77、0.90、0.89和0.87。醇溶蛋白与谷蛋白含量的比值与揉面仪峰值时间呈1%显著负相关,相关系数为-0.69;与粉质仪稳定时间和最大抗阻呈5%显著负相关,相关系数分别为-0.58和-0.64。HPLC可有效分离和量化HWM-GS,并作为小麦品质育种有效的辅助手段。     

镉对大蒜根生长和根尖细胞超微结构的影响

研究了不同浓度氯化镉溶液对大蒜（Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）根生长和根尖细胞超微结构的影响。结果表明,在一定Ｃｄ＾２＋浓度的范围内（１０＾－５～１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ）,随Ｃｄ＾２＋浓度增加和处理持续时间的延长,根的生长速率递减或停止;Ｃｄ处理出现最明显的特征是在１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ浓度处理组中,细胞质中沉积许多电子稠密颗粒,这些颗粒大小不等,包部着色较深,中心部分较浅,多分布于细胞质中大、小液泡周围;大部分细胞核中的核质高度凝集;出现质壁分离现象;细胞器严重受损;大部分细胞液泡化程度提高。Ｘ－射线微区分析结果表明,这些电子稠密颗粒中均未含有Ｃｄ＾２＋。扫描电镜观察表明,高浓度Ｃｄ＾２＋（１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ）处理的根尖表皮细胞呈板结状,细胞壁明显增厚,细胞壁表面沉积许多分泌物。