黑头萨福克绵羊胚胎玻璃化快速冻胚移植效果分析

本试验应用玻璃化胚胎冷冻方法进行黑头萨福克绵羊胚胎冷冻和移植,比较了受体羊卵巢上黄体数量、受体羊的体况、移植胚胎的数量对受体受胎率的影响。受体羊卵巢上有一个黄体的移植受胎率42.7%与有2~3个黄体受体羊移植受胎率44.4%无显著差异;受体的体况对受胎率有显著影响,中上等(含中等)体况水平的受体的受胎率47.2%显著高于中下等的受体的受胎率43.0%(P0.05);使用玻璃化胚胎冷冻法的冷冻解冻胚胎移植受胎率54.2%显著高于常规胚胎冷冻法的冻胚移植受胎率44.0%(P0.05);移植1枚桑葚胚(1M)的受胎率47.5%略高于移植1枚囊胚(1B)的受胎率44.3%(P0.05)。因此,受体羊黄体数、冷冻桑葚胚和囊胚对胚胎移植受胎率没有显著影响,而受体中上等(含中等)体况水平和玻璃化胚胎冷冻法冷冻解冻胚胎移植受胎率显著提高。     

影响奶牛胚胎移植效果的主要因素分析

本研究分析了不同移植地点、受体牛来源、受体牛黄体位置、移植季节以及对受体牛实施尾椎硬膜外麻醉等对胚胎移植受胎率的影响。2013年9月~2015年3月,在内蒙古和北京地区移植奶牛胚胎745枚,平均受胎率为57.2%。内蒙古地区的A牛场胚胎移植受胎率(50.3%)低于北京地区的B牛场(65.5%)和C牛场(61.7%),且差异显著(P0.05),而同一地区的B牛场和C牛场之间差异不显著(P0.05);不同来源受体牛受胎率比较,新西兰荷斯坦牛受胎率(57.4%)略低于澳大利亚荷斯坦牛(65.4%)和中国荷斯坦牛(65.5%),但差异不显著(P0.05),而澳大利亚荷斯坦牛与中国荷斯坦牛受胎率差异也不显著(P0.05);受体牛不同黄体位置受胎率比较,左侧黄体受体牛受胎率(60.4%)略高于右侧(54.7%),但差异不显著(P0.05);移植季节对胚胎移植受胎率影响,以春季受胎率最高(71%),其次是冬季(63.2%),最低是秋季(60.6%),但不同移植季节的胚胎移植受胎率没有显著差异(P0.05);受体牛实施尾椎硬膜外麻醉的受胎率(66.7%)略高于未实施麻醉的受体牛(62.4%),但差异不显著(P0.05)。     

奶牛冷冻胚胎移植受胎率影响因素的探讨

为了提高奶牛冷冻胚胎移植受胎率,笔者对移植季节、加入胚胎细胞团、胚胎发育阶段、移植技术水平等因素进行了试验研究,研究结果表明：7、9、12月移植,受胎率分别为50．9％、38．4％、57．9％,7、12月差异不显著（P〉0．05）,但与9月份差异极显著（P〈0．01）;移植时加入胚胎细胞团与对照组的受胎率分别为52％、69．23％,差异极显著（P〈0．01）;胚胎发育阶段不同,受胎率不同,桑葚胚、早期囊胚、囊胚、扩张囊胚的受胎率分别是56．25％、58．82％、0、0,桑葚胚和囊胚之间差异不显著（P〉0．05）,桑葚胚、囊胚与早期囊胚、扩张囊胚差异极显著（P〈0．01）;技术水平对受胎率的影响,高水平和一般水平的移植受胎率分别是52．86％、17．86％,差异极显著（P〈0．01）。     

影响水牛体细胞克隆胚胎移植的因素

从不同发情方式、不同胚胎类型、不同胚龄以及不同季节来探讨影响水牛体细胞克隆胚胎移植的效率。结果显示,自然发情与同期发情方法对水牛体细胞克隆胚胎的移植受胎率有显著影响。鲜胚和冻胚移植后受胎率没有显著差异,其受胎率分别是9.79%、14.5%。在移植中,不论是鲜胚还是冻胚,6日龄胚胎移植受胎率最高。而且不同日龄(5、6、7、8～10d)克隆胚胎移植受胎率差异不显著(鲜胚P=0.260 7,冻胚P=0。065 2)。克隆胚胎在秋季移植时受胎率最高,受胎率是16.06%,比其他季节高,且差异显著(P<00.05).其次是春季,但夏季和冬季克隆胚胎移植后受胎率差异不显著(P>0.05)。结果表明,水牛体细胞克隆胚胎在胚胎移植中是可行的,但效率比较低。     

绵羊胚胎移植受胎率影响因素的研究

为研究探索绵羊胚胎移植受胎率的影响因素,针对不同体况受体、供受体发情时间差、胚胎质量、单侧卵巢黄体数量及移植胚胎数量等进行试验研究。结果表明:体况较好组、体况中等组、体况较差组受胎率分别为67.62%、63.44%、52.08%,三组之间差异不显著(P>0.05);发情同步差在0h、±6h、±12h的受胎率分别为72.73%,68.18%,66.67%,三组之间差异不显著(P>0.05);移植A级胚胎的受胎率(67.24%)高于B级胚胎的受胎率(42.86%),差异显著(P<0.05);1个黄体的受胎率为61.76%,2个黄体的受胎率比1个黄体的高出3.69%,两者之间差异不显著(P>0.05);移植两枚胚胎的受胎率(69.77%)高于移植一枚胚胎的受胎率(62.5%),但差异不显著(P>0.05)。     

黄体数量对绵羊胚胎移植成功率的影响

黄体对胚胎移植的妊娠率起着至关重要的作用,黄体质量好坏对妊娠率的影响已多有报道,但黄体数量对鲜胚和冻胚妊娠率的比较研究鲜有见报道。本实验在相同季节、饲养管理、同期发情和胚胎移植条件基本相同的情况下,进行了受体移植侧黄体数量对鲜胚和冻胚移植妊娠率影响的研究,实验结果表明,(1)受体移植侧3个黄体对鲜胚移植妊娠率高于2个黄体和1个黄体,妊娠率分别为56.60%、56.32%和62.50%,但各组间差异不显著(P0.05),移植侧1～3个黄体对鲜胚妊娠率稳定;受体移植侧黄体数量1或2个对冻胚移植妊娠率分别为42.24%和45.19%,无显著影响(P0.05),但2个黄体妊娠率高于1个黄体,移植侧1～2个黄体对冻胚移植妊娠率稳定;(3)只要黄体质量好,移植侧1～3个黄体都可以进行移植,本研究进一步量化了移植侧黄体数量对鲜胚和冻胚移植妊娠率的影响。     

不同胚胎移植方法对天祝白牦牛受胎率的影响

为提高胚胎移植技术在牦牛上的运用效果,选用51头甘肃省天祝县健康黑牦牛作为受体,以纯种天祝白牦牛作为供体生产胚胎,分别对同期发情处理和自然发情的受体牛进行鲜胚和冻胚移植试验。结果,同期发情处理的受体牛鲜胚移植的受胎率显著高于冻胚移植的受胎率(P0.05),分别为52%和38.5%;在自然发情受体牛的胚胎移植中也得到了相似结果,鲜胚和冻胚的移植受胎率分别为60%和50%,同期发情处理牛的平均妊娠率则低于自然发情受体牛的平均妊娠率(P0.05),二者分别为47.5%和54.5%。结论,牦牛鲜胚移植的受胎率明显高于冻胚移植的受胎率,而且自然发情受体牛的受胎率高于同期发情处理牛。     

影响绵羊胚胎移植妊娠率的因素分析

试验旨在研究影响绵羊胚胎移植妊娠率的关键因素。试验选取64只供体绵羊,对其进行超数排卵处理,同时选取370只受体绵羊,进行同期发情处理。采集胚胎分析其质量、数量及发育阶段,观察受体卵巢黄体数对妊娠率的影响。对试验数据进行卡方检验分析。结果表明,A级桑葚胚妊娠率(72.3%)显著高于B级桑葚胚的妊娠率(60.0%),P0.05;移植1枚A级桑葚胚妊娠率(71.8%)显著低于移植2枚A级桑葚胚妊娠率(82.4%),P0.05;移植1枚B级桑葚胚妊娠率(48.2%)显著低于移植2枚B级桑葚胚妊娠率(58.3%),P0.05;胚胎发育阶段和黄体数对妊娠率无显著性影响(P0.05)。综上所述,胚胎等级、移植胚胎数是影响绵羊胚胎移植妊娠率的主要因素。     

受体牛重复使用对同期发情效果和胚胎移植受胎率的影响

为了探讨受体牛重复使用对同期发情和胚胎移植受胎率的影响,对部分地区2003～2004年的数据进行分析.结果表明:两次同期率为77.4%和72.7%,黄体合格率为64.6%和62.3%,二者之间差异都不显著(P＞0.05);两次移植受胎率为71.8%和67.7%,差异不显著(P＞0.05).     

自然发情与诱导发情对绵羊胚胎移植受胎率的影响

以小尾寒羊为受体,通过试情和诱导发情的方法为萨福克、无角道塞特和边区莱斯特品种羊的冷冻胚胎提供受体,从而对比自然发情和诱导发情受体羊对胚胎移植受胎率的影响,结果显示,自然发情受体羊与诱导发情受体羊胚胎移植利用率为96.5%和94.0%,差异不显著(P0.05);移植受胎率分别为59.6%和55.2%,差异显著(P0.05);胚胎利用率分别为45.0%和42.2%,差异显著(P0.05)。     

胚胎移植受体牛同期发情及受胎效果的研究

本试验分别采用CIDR+E2法和两次PGF2α子宫输注法,对胚胎移植受体牛做同期发情处理,鲜胚移植观察其妊娠情况。试验结果表明两种处理方法的受体牛在24~48h发情率分别为85.5%和51.6%,两者之间差异显著(P<0.05)。移植前对受体牛进行黄体检查,黄体合格率分别为79.3%和77.8%,差异不显著(P>0.05);受胎率分别为45.8%和42.4%,差异不显著(P>0.05)。24h后观察发情,6.5d直检,黄体A、B级者用于移植。     

受体牛营养对黄体的影响及黄体等级对冻胚移植受胎率影响的试验研究

为了探讨受体牛黄体形成的影响因素及黄体质量对胚胎移植受胎率的影响,2004-2005年利用冷冻胚胎移植受体的受胎结果与受体牛黄体等级之间的关系进行分析.结果表明,营养是影响受体牛黄体等级的主要因素,饲喂全价饲料和单一饲料的黄体合格率为61.2%、35.4%,差异极显著(P《0.01).A、B级黄体受体移植受胎率为71.7%、63.9%,二者之间差异不显著(P》0.05).     

胚胎因素对肉羊胚胎移植效果的影响

为提高肉羊胚胎移植的妊娠率,研究了胚胎发育阶段、胚胎体外保存时间和移植胚胎数对肉羊胚胎妊娠率的影响。结果表明:发育阶段对妊娠率有显著影响,在移植胚胎数量相同的情况下,囊胚的受胎率(58.7%)高于桑椹胚(56.4%)(P<0.05);胚胎体外保存0～10 min、10～30 min、30～60 min、60 min以上的妊娠率分别为66.7%、65.0%、60.0%、63.3%,四者间均没有显著差异(P>0.05);移植胚胎的数量对受胎率有显著影响,移植2枚囊胚的受胎率(67.7%)显著高于移植2枚桑椹胚(61.2%)、1枚囊胚(58.7%)、1枚桑椹胚的受胎率(56.4%)(P<0.05)。     

不同受体羊同期发情及胚胎移植效果的研究

对湖羊和小尾寒做同期发情处理,研究其同期性和胚胎移植效果。选择湖羊和小尾寒羊各60只,采用"CIDR+PG+PMSG"和"CIDR+PG"2种同期发情方案,观察其发情效果、黄体质量,并对同期发情效果好的受体羊进行鲜胚移植。同期发情处理后湖羊组和小尾寒羊组的发情率分别为88.33%(52/60)和85%(50/60),两者差异不显著(P0.05),同期发情方案I和方案II的发情率分别是90%(54/60)和80%(48/60),两者差异显著(P0.05)。选择发情最集中在25~48h,黄体合格的受体羊进行胚胎移植,湖羊组和小尾寒羊组受胎率分别为67.57%(25/37)和65.63%(21/32),两者差异不显著(P0.05)。[结论]甘肃陇东地区舍饲湖羊和小尾寒羊均可作为引进肉羊的胚胎移植受体羊,为陇东肉羊胚胎移植提供科学依据。     

非繁殖季节胚胎移植受体绵羊妊娠效果影响因素的研究

在非繁殖季节应用CIDR法和Progestagen Sponge法对受体绵羊进行同期发情处理后,进行冷冻胚胎移植,研究不同同期发情处理方法、卵巢状况、胚龄、移植方法和移植时间对冷冻胚胎移植妊娠率的影响,以期为当地实现绵羊胚胎移植产业化提供理论依据和技术参考。结果表明:经同期发情处理后,绵羊在去栓后24~72 h集中发情,在去栓后36~48 h发情最为集中;CIDR法和Progestagen Sponge法的同期发情率分别为91.11%和87.78%(P>0.05),同期发情绵羊移植利用率分别为82.93%和78.48%(P>0.05);单侧卵巢上含有1个和2个黄体其妊娠率分别为46.07%和48.78%(P>0.05);桑椹胚和囊胚的妊娠率分别为49.25%和42.11%(P>0.05);腹腔镜法和手术法的妊娠率分别为45.16%和48.52%(P>0.05);11月和12月进行冷冻胚胎移植的妊娠率分别为50.76%和43.08%(P>0.05),该试验的绵羊冻胚移植妊娠率为46.92%,基本接近国内冻胚移植水平,但低于目前国内羊鲜胚移植妊娠率(50%~60%)。由此可以得出,不同同期发情处理方法、卵巢状况、胚龄、移植方法和移植时间对胚胎移植妊娠率的影响均无显著性差异(P>0.05),大规模群体羊同期发情时,可选价格便宜的Progestagen Sponge法;只要受体绵羊黄体质量好即可移植胚胎;为了减轻受体绵羊的应激反应,降低术后子宫粘连的发病率,可广泛应用腹腔镜法进行胚胎移植;该试验的绵羊冻胚移植妊娠率低于目前国内羊鲜胚移植妊娠率,通过筛选高效低毒的抗冻保护剂,以及提高基层技术人员操作水平,则有望进一步提高绵羊冷冻胚胎移植妊娠率。     

不同繁殖季节规模化胚胎移植受体羊同期发情处理研究

为了研究繁殖与非繁殖季节大规模羊胚胎移植最优同期发情处理方法,依据繁殖季节与非繁殖季节每个处理成本及结果对现有主要绵羊同期发情方法进行了对比。结果表明:在繁殖季节,海绵栓+PMSG250U+PG组获得同期发情率最高93.33%,与海绵栓组差异显著(P0.05),移植受胎率各组间差异不显著(P0.05),但成本较高。2次PG处理组鲜胚移植受胎率最高68.68%,与海绵栓+PG组、海绵栓+PMSG250U+PG组差异不显著(P0.05)。在非繁殖季节,海绵栓+PMSG500U+PG处理方法获得同期发情率最高91.36%,与海绵栓+PMSG250U+PG、海绵栓+PMSG500U组差异极显著(P0.01),鲜胚移植受胎率差异不显著(P0.05)。结果提示:在繁殖季节2次PG注射法效果较优,非繁殖季节海绵栓+PMSG500U+PG法结果较好。     

黑萨福克和杜泊羊新鲜和冷冻胚胎移植效率的研究

为提高优质肉用种用绵羊胚胎移植的效率,试验选取76只黑萨福克羊和27只杜泊羊作为供体,采用"CIDR+FSH+PMSG"法进行超数排卵处理。选取384只小尾寒羊为受体,采用"CIDR+PMSG"法进行同期发情处理,以探索供体胚胎发育阶段、胚胎冷冻处理、胚胎体外停留时间以及移植给受体时移植侧黄体数量等因素对胚胎移植妊娠率的影响。结果表明:移植新鲜囊胚的妊娠率极显著高于桑椹胚(P0.01);冷冻/解冻囊胚移植妊娠率极显著低于新鲜囊胚(P0.01),而冷冻/解冻桑椹胚移植妊娠率与新鲜桑椹胚无显著差异(P0.05);此外,移植桑椹胚时,移植侧有1个黄体的受体妊娠率极显著低于有2~3个黄体受体妊娠率(P0.01),但移植囊胚时两者间差异不显著(P0.05)。综上可知,子宫角移植桑椹胚和囊胚时,移植新鲜囊胚、移植冷冻桑椹胚效率较高;将新鲜桑椹胚移植给移植侧有2~3个黄体受体效果好于1个黄体受体。     

提高受体黄牛移植受胎率试验

[目的]为提高受体黄牛移植受胎率,探索合理的饲养管理条件.[方法]本试验将受体牛随机分成为6组,分别为对照、注射亚硒酸钠、VADE、HCG和饲料中增加6%的能量和蛋白,各组均采用两次注射PG的同期发情的方法.[结果]显示:注射亚硒酸钠、VADE、HCG能够提高受体移植受胎率,受胎率分别为57.1±2.45%、58.3±1.61%、59.2±3.13%,与对照组(受胎率为48.3±2.33%)之间差异显著(P＜0.05);在一定营养水平下,饲料中增加5%的能量和蛋白未能提高受体移植受胎率,受胎率分别为 56.9±3.57%、47.6±1.20%,与对照之间差异不显著(P＞0.05).受体牛子宫黄体状况也是影响移植受胎率的重要因素,受体牛的子宫生理状况是A级(移植受胎率达到55.8%)与B级(移植受胎率达到45.9%)差异显著(P＜0.05), A级与C(移植受胎率达到6.7% )级差异极显著(P＜0.01).[结论]全价营养,合理管理,较好的子宫黄体生理状况是影响受胎率的主要因素.     

不同胚胎类型对绵羊胚胎移植效果的影响

为了进一步提高并稳定绵羊胚胎移植的效率,本文对影响绵羊胚胎移植效果的胚胎因素进行了分析。结果表明:三种类型胚胎的移植妊娠率,分别为鲜胚组59.46%、自制冻胚组21.43%、进口冻胚组35.48%,鲜胚组与两冻胚组妊娠率差异均显著(P0.05),两冻胚组差异不显著(P0.05)。在绵羊胚胎移植中,原核胚的移植效果远远低于囊胚移植效果。     

应用体细胞克隆技术和胚胎移植技术生产克隆水牛

为了解决克隆水牛技术在供核细胞、受体细胞中的选用问题,探索不同条件对移植受孕的影响,完善克隆技术的理论体系。试验以摩拉奶水牛的耳成纤维细胞作为供核细胞,本地水牛卵母细胞为受体胞质进行细胞克隆构建重组胚胎;将发育5～10 d的重组胚胎移植于本地水牛、杂交水牛的子宫内,观察不同发情方式、胚胎类型、胚龄及季节对移植受孕的影响。结果表明:水牛的克隆胚胎妊娠率较低,分别为12.05%、12.04%、13.95%。自然发情和同期发情对克隆胚胎移植受胎率的影响差异不显著;鲜胚胎移植186头,受胎22头,受胎率为11.83%(22/186);冻胚胎移植174头,受胎23头,受胎率为13.22%(23/174)。克隆水牛从出生至12月龄体尺增长明显高于本地水牛;水牛克隆胚胎移植受胎在秋季最好,秋季受胎数占全年的53.33%,显著高于其他季节。