鹅副黏病毒甘肃地方毒株的分离和初步鉴定

鹅副黏病毒病是一种由鹅传播的新型急性传染病,该病与鸡感染新城疫具有相类似的临床症状和病理变化。2019年1月从甘肃某鹅场病鹅体内分离到一株副黏病毒,将病料处理后接种10日龄鸡胚,进行血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI),最后进行动物试验。结果表明:该病毒具有血凝活性,可以用标准的新城疫阳性血清抑制血凝活性,可能导致未接种新城疫免疫鸡胚的100%死亡。动物试验证明该病毒对鸡具有100%的发病率和致死率。     

鸡新城疫及其在某鸡场鸡群发病样本的实验室检查

新城疫是一种高度接触性传染病，鸡、火鸡、野鸡易感，经呼吸道和消化道传播，病原为新城疫病毒，以发病急、呼吸困难、头冠紫黑、下痢等为主要症状，分为最急性、急性或慢性三型，病理变化为腺胃和肌胃交界处出血，扁桃体肿大、溃汤等为主，通过血凝试验、血凝抑制试验等进行诊断，可通过抓好饲养管理、防疫、加强新城疫抗体的监测进行防制。2013年2月10日沛县魏庙镇某鸡场饲养的罗曼蛋鸡疑似发生新城疫，通过采集部分病死鸡的气管、肺、脑等组织，用含特定抗生素的磷酸盐缓冲液（PBS）制成10%的组织悬液，离心取上清液接种5枚10日龄SPF鸡胚，接种胚于接种后48~72小时之间死亡，胚体全身出血。收获尿囊液，通过血凝试验与血凝抑制试验进行病毒鉴定，确定分离到的病毒为新城疫病毒，根据以上结果确诊该鸡群发生新城疫。     

兰藤注射液体外抗新城疫病毒的实验研究

采用鸡胚培养法和血凝抑制试验测定了兰藤注射液对新城疫病毒的抑制作用.结果表明,中药对鸡胚无毒性作用;在药物与病毒同时接种后,可抑制新城疫病毒在鸡胚中的增殖.     

中药炎康注射液体外抗鸡新城疫病毒的实验研究

采用鸡胚培养法和血凝抑制试验,测定了2种中药配方对新城疫病毒的抑制作用。结果表明,在药物与病毒同时接种情况下,均可抑制新城疫病毒在鸡胚中的增殖,但1号配方明显好于2号配方。     

用微量及平板HA,HI试验诊断鸡新城疫的研究

用微量ＨＡ，ＨＩ试验及平板ＨＡ，ＨＩ试验检测病鸡肝，脾，脑组织中的新城疫病毒。肝脏的检出率为７３．２％，３脾脏为８８．２％，脑的检出率为０。平板ＨＡ试验与微量ＨＡ试验的结果呈平行关系。血凝作用可被ＮＤ阳性血清所抑制。结果表明，直接用ＨＡ及ＨＩ试验检测组织中的病毒，具有较高的检出率和特异性，可望成为一种快速，简便，准确诊断ＮＤ的方法。     

非免疫鸡禽流感、新城疫感染情况检测方法

目前全国各省、市、县动物疾控中心所做的血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验所需的红细胞均需自己配置,饲养非免疫鸡是获取红细胞的主要途径,红细胞是否感染特定病毒直接影响试验结果,本实验方法就是为大家提供非免疫鸡,是否感染禽流感、新城疫鉴别诊断最简单有效的方法.     

鸡胚中沉积的尿酸盐对血凝试验的影响

在新城疫La Sota半成品检验过程中,发现接种后培养120 h的活胚,经过-20℃低温速冻1 h,有的鸡胚尿囊液中有尿酸盐产生,且出现的几率比较大,而经过2~8℃低温冷冻24 h的鸡胚,产生白色尿酸盐的几率相对小一些。凡是有尿酸盐产生的鸡胚,均没有血凝现象产生。但用含有尿酸盐的尿囊液接种鸡胚,继续增殖,会有病毒大量复制,试验说明有新城疫病毒存在的尿囊液中,若有尿酸盐沉淀,则血凝现象会被遮盖。     

影响血凝试验结果的主要因素

血凝和血凝抑制试验是新城疫、禽流感等疾病的诊断和研究工作中普遍应用的方法。某些病毒（如禽流感病毒和新城疫病毒）能凝集禽类的红细胞,这个现象称为病毒的血凝,可以用来检测样品中病毒的有无和含量的多少,并排特异性反应。因此,血凝和血凝抑制试验可用于鉴定病毒,流行病学调查,检测血清中抗体效价．动物群体疫情的监测等。     

中药炎康注射液体外抗鸡新城疫病毒的实验研究

采用鸡胚培养法和血凝抑制试验,测定了2种中药配方对新城疫病毒的抑制作用.结果表明,在药物与病毒同时接种情况下,均可抑制新城疫病毒在鸡胚中的增殖,但1号配方明显好于2号配方.     

血凝试验和血凝抑制试验的操作细节经验浅析

高致病性禽流感和新城疫诊断技术有:血凝试验或血凝抑制试验、ELISA试验和分子生物学检测(PCR)等。其中,血凝试验和血凝抑制试验操作简便、快捷、准确和实用,是基层兽医实验室常用的检测禽流感及新城疫抗体效价的试验方法。虽然GBAT18936-2003和GB/T16550-2008分别对高致病性禽流感和新城疫的诊断技术进行了详细的规定,但是本试验的细节需要完善,才会增加血凝试验和血凝抑制试验的判定准确性。笔者结合自身参加实验室能力验证的实践经验,将试验的注意事项按以下思路来进行详细的分析。简言之就是“思”“看”“做”三点。将此思路贯穿到此试验的前、中、后3个时期中,对其需要注意的操作细节进行了解析。     

中药蟾酥注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒的试验研究

采用鸡胚培养法和血凝抑制试验,测定了2种中药配方对新城疫病毒的抑制作用。试验共5组,第1组接种病毒尿囊液与中药1号混合液,HA滴度0。第2组接种病毒尿囊液与中药2号混合液,HA滴度2 log2。第3组接种病毒尿囊液与金刚烷胺,HA滴度2 log2。第4组接种病毒尿囊液与生理盐水,HA滴度7.5log2。第5组不接种病毒尿囊液,不用药,HA滴度0。结果表明,中药1号配方好于2号配方,中药2号配方与金刚烷胺效果相同。     

浅谈血凝抑制试验中存在的问题及处理方法

某些病毒(如新城疫病毒、禽流感病毒等)具有凝集某种动物红细胞的现象,这种现象可被特异性免疫血清所抑制,即为红细胞的血凝抑制.血凝抑制试验可用于病毒的鉴定、病毒性疾病的诊断及免疫抗体效价的测定.     

对血凝试验用鸡红细胞保存条件的探讨

对血凝试验所用的鸡红细胞的保存条件进行了比较。在新鲜红细胞液中加入甘油或尿素可以延缓细胞破裂溶血。鸡红细胞经戊二醛处理后，于4℃保存9个月，其凝集特性未发生变化，同时在醛化红细胞中加入甘油更能稳定血凝活性。在4℃、室温和37℃条件下将制备的新鲜红细胞和醛化红细胞用作血凝试验的指示剂，不影响新城疫病毒抗原血凝滴度。结果表明，所制备的醛化鸡红细胞的甘油悬液可以替代新鲜红细胞用于临床实践中新城疫的血凝和血凝抑制试验测定。     

鸡传染性支气管炎病毒血凝抑制试验研究

用A型魏氏梭菌滤液处理鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株,使其产生血凝性,成功建立IBV血凝抑制试验方法(IBV-HI).血凝效价为1:256～1:1024.抗原在2～8℃的保存期至少为5个月.用该抗原对IBV标准阳性血清、SPF鸡血清、其它鸡病标准阳性血清以及含M41株病毒的灭活苗免疫的鸡血清进行检测,证明IBV-HI试验具有很好的特异性.结果表明,该方法简便、快速、特异性强,可用于疫苗质量控制和疫苗免疫效力测定.     

猪源新城疫病毒的分离鉴定

从发生呼吸道症状的病猪鼻腔中分离到1株病毒，经电镜观察、血凝和血凝抑制试验，确定为新城疫病毒。经对鸡胚平均致死时间、鸡胚半数致死量、对鸭胚和鸡、鸭的致死性测定及荧光PCR检测，证明分离毒为温和型毒株。     

浅谈血凝抑制试验中存在的问题及解决方法

<正>某些病毒(如新城疫病毒、禽流感病毒等)具有凝集某种动物红细胞的现象,这种现象可被特异性免疫血清所抑制,即为红细胞的血凝抑制。血凝抑制试验可用于测定免疫抗体效价、辅助诊断病毒性疾病等方面。     

浅谈影响禽流感血凝抑制试验的因素

血凝抑制试验可用于测定免疫抗体效价、辅助诊断病毒性疾病等方面。在基层工作中血凝抑制试验(HI)最常用于新城疫、禽流感等免疫抗体的检测。血凝抑制试验由于特异性好、能进行大量样本的分析、节省试剂和易于操作等优点,对实际生产中     

两种血凝抑制试验检测鸡新城疫病毒抗体效价结果的比较分析

用常量法和微量法血凝抑制(HI)试验检测了130份鸡血清样本中的鸡新城疫病毒(NDV)抗体效价,经统计学方法分析表明,用两种方法测得的抗体效价差异不显著(P>0.05)。     

鸡传染性支气管炎病毒血凝谱的研究

用家兔A型魏氏梭菌培养液处理的6株鸡传染性支气管炎病毒,以方阵试验分别与人O型红细胞及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、麻雀、小鼠等8种动物的红细胞作血凝试验,结果证明,鸡传染性支气管炎病毒H_(120)株和M_(41)株均能凝集人O型以及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、小鼠的红细胞,而不能凝集麻雀的红细胞;GIBV株和Connecticut株能凝集人O型以及免、鸡、鹌鹑、麻雀的红细胞,而不能凝集猪、羊、鸭、小鼠的红细胞;Gray株能凝集兔、鸡、鹤鹑的红细胞,不能凝集人O型以及猪、羊、鸭、麻雀、小鼠的红细胞;而经家兔A型魏氏梭菌培养液处理的T株和未经处理的6株病毒对人O型以及8种动物的红细胞都没有凝集性。试验还证明,M_(41)株和H_(120)株对人O型及8种动物的血凝活性水平有差异。     

用微量及平板HA、HI试验诊断鸡新城疫的研究

用微量ＨＡ、ＨＩ试验及平板ＨＡ、ＨＩ试验检测病鸡肝、脾、脑组织中的新城疫（ＮＤ）病毒。肝脏的检出率为７３２％，脾脏为８８２％，脑的检出率为０。平板ＨＡ试验与微量ＨＡ试验的结果呈平行关系。血凝作用可被ＮＤ阳性血清所抑制。结果表明，直接用ＨＡ及ＨＩ试验检测组织中的病毒，具有较高的检出率和特异性，可望成为一种快速、简便、准确诊断ＮＤ的方法。