黄酮类化合物的提取纯化技术

黄酮类化合物是蜂胶中的主要功效成分,不仅结构多样,而且还有多种不同的生物学活性,是天然产物研究中的热点之一。本文综述了国内外黄酮类化合物的提取及纯化技术研究进展,重点介绍了一些新兴技术,包括双水相萃取法、半仿生法、高压脉冲电场法,膜分离法、柱层析法等,旨在为蜂胶黄酮的研究应用提供参考。     

壳聚糖纯化黄芩黄酮工艺研究

目的：确定壳聚糖对黄芩黄酮浸提液纯化的优化工艺条件。方法：通过正交试验设计考察壳聚糖添加量、料液温度和pH值对黄芩黄酮浸提液纯化效果。结论：壳聚糖对黄芩黄酮浸提液具有较好的纯化作用,最佳工艺条件为A3B2C2,即药液温度50℃、壳聚糖加入量为2%、pH值为5。     

蜂胶黄酮提取纯化的工艺研究

为确定蜂胶黄酮提取纯化的最佳工艺条件.以蜂胶黄酮的得率和绝对提取率为指标,采用正交法优化乙醇提取蜂胶黄酮的工艺条件,考察乙醇浓度、液固比、水浴温度和水浴时间对蜂胶黄酮得率和绝对提取率的影响,再通过大孔吸附树脂对蜂胶黄酮进行纯化.结果表明,最佳提取纯化工艺条件为:乙醇浓度为60%,液固比为18ml/g,水浴温度为55℃,水浴时间为5h,上述工艺条件下,黄酮纯度为72.2%.最优树脂为D101,吸附速度为1.0ml/min,洗脱剂先采用40%乙醇2BV体积洗脱洗去杂质,再用80%乙醇5BV体积洗脱获得黄酮成分,此条件下层析得到的蜂胶黄酮纯度90.2%.     

桑叶黄酮含量测定及提取工艺研究进展

本文对从桑叶提取黄酮类化合物的各种方法,如醇提法、微波法、超临界CO2萃取和大孔树脂吸附法等进行系统的叙述;同时对桑叶中黄酮类化合物的分析方法,包括分光光度法与荧光光度法、高效液相色谱法（HPLC）、高效毛细管电泳法（HPCE）和微乳薄膜层析法进行概述和比较。     

苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参总碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参总碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h,并采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为每毫升1．0g生药时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9-11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、合理、可行。     

苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h。采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为1．0g生药／mL时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9～11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、可行,可用于苦参碱的工业化提取。     

紫花苜蓿肌动蛋白基因的提取

选取紫花苜蓿叶片为材料,提取总RNA,利用蒺藜状苜蓿的肌动蛋白基因设计特异性引物,扩增出目的基因的cDNA进行测序,测序结果在NCBI基因库中利用Blast与其他高等植物肌动蛋白基因序列进行了比对、分析,结果证明所提取的基因为紫花苜蓿肌动蛋白基因的片段。     

超声波辅助提取苜蓿黄酮工艺的研究

通过超声波提取方法,对不同浓度乙醇、不同料液比及不同提取时间和提取次数进行单因素实验,并在此基础上对各因素进行正交实验,筛选出苜蓿黄酮超声波提取的最佳提取工艺。正交实验结果表明:各因素水平差异极显著,固液体积比和乙醇浓度是影响提取量的主要因素,提取时间和其他影响较小;最佳提取条件为40%的乙醇,苜蓿草粉50倍量,超声波提取3次,每次40 min,对单因素实验的各因素的最佳条件进行了优化。     

蚕沙中黄酮类化合物的提取工艺

采用L9(3^4)正交试验设计对浙江海宁蚕沙中黄酮类化合物的热回流提取工艺进行了优化，所得出最佳工艺条件为；乙醇浓度为30％，料液比1：30，提取时间3h。     

白花蛇舌草多糖提取与纯化工艺研究进展

白花蛇舌草多糖具有抗肿瘤、抗菌等多种生物活性。目前,白花蛇舌草多糖的提取方法有超声波法、微波法、热水提取法等,此外,其纯化主要体现在脱蛋白、除色素等。笔者等就近年来国内的白花蛇舌草多糖提取与纯化的研究进展进行综述,并对其提取与纯化方法进行展望。     

紫花苜蓿叶总黄酮提取及抗氧化性

研究紫花苜蓿（Medicago sativa L.）叶总黄酮的最优提取工艺及体外抗氧化能力。在单因素试验的基础上设计正交试验,通过方差分析和多重比较确定最优提取工艺。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH）清除率测定法及还原力测定法评价苜蓿黄酮类化合物体外抗氧化活性。最佳提取工艺条件是：乙醇体积分数70%、提取温度60℃、提取时间30 min、超声功率180 w,总黄酮得率为6.43 mg·g^-1。苜蓿叶总黄酮在一定的质量浓度范围具有较明显的抗氧化活性,并随着质量浓度的增加活性增强。苜蓿叶总黄酮具有较强的还原力,清除DPPH自由基的半数抑制质量浓度（IC₅₀值）为0.608 mg·mL^-1。超声提取是一种高效的提取紫花苜蓿叶总黄酮方法。超声优化的苜蓿叶总黄酮提取工艺经济、稳定、合理可行。     

航天苜蓿中黄酮提取工艺及抑菌活性研究

用索氏回流进行正交提取航天苜蓿中的黄酮,以510nm最大吸光度进行可见光谱检测,测定黄酮含量,并对两种供试菌进行体外抑菌活性测定。结果表明,通过单因素实验确定的各因素影响能力大小为:pH>浸泡时间>料液比,含量最高为10.04%;对大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC为0.40mg/mL和0.70mg/mL。     

Effect of Alfalfa Flavonoids on Growth Performance and Serum Indexes of Sheep

This experiment was conducted to evaluate the effect of alfalfa flavonoids (Medicago sativa) on growth performance and serum indexes of sheep.This experiment was performed with hybrid F1 sheep of Suffolk sheep×Small-tailed Han sheep.Twenty-eight sheep with the body weight of (27.02±3.03) kg were randomly divided into 4 groups with 7 replicates in each group and 1 sheep per replicate.Sheep in different groups were fed diets with 0 (group Ⅰ), 0.1% (group Ⅱ), 0.2%(group Ⅲ) and 0.4% (group Ⅳ) alfalfa flavonoids, respectively.The experiment was cosisted of 7-day-preliminary trial and 41-day-formal trial.The results showed as follows:① Dietary supplementation of alfalfa flavonoids had no significant effects on growth performance of sheep(P>0.05).② Dietary supplementation of alfalfa flavonoids had significant effects on the contents of GLB, ASP, BUN, HDL and P in serum (P<0.05).Serum GLB content at the 1st day in group Ⅲ was significantly lower than that in groupsⅠand Ⅱ(P<0.05), serum ASP contents at the 1st and 21th days in group Ⅳ were significantly lower than those in group Ⅰ(P<0.05), serum BUN content at the 1st day in group Ⅳ was significantly lower than that in group Ⅰ(P<0.05), serum HDL content at the 21th day in group Ⅱ was significantly lower than that in groups Ⅰ and Ⅲ (P<0.05), serum P content in group Ⅳ at the 21th day was significantly lower than that in groups Ⅱ and Ⅲ (P<0.05).In conclusion, dietary supplementation of alfalfa flavonoids might modulate lipid metabolism, improve nitrogen utilization, maintain energy metabolic and balance Ca and P contents, and have the potential function for promoting growth and no adverse effect on liver.The results suggested that the appropriate supplemental level of alfalfa flavonoids for sheep was 0.2%.     

苜蓿黄酮对绵羊生长性能和血清指标的影响

试验旨在研究苜蓿黄酮对绵羊生长性能和血清指标的影响。选择体重为(27.02±3.03)kg的萨福克羊×小尾寒羊杂交F1代公羊28只,采用单因素随机区组试验设计,分成4组,每组7个重复,每个重复1只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加0(对照组)、0.1%、0.2%、0.4%苜蓿黄酮。预试期7 d,正试期41 d。结果表明:①日粮中添加苜蓿黄酮对绵羊生长性能无显著影响(P>0.05)。②日粮中添加苜蓿黄酮对绵羊血清中球蛋白(GLB)、天冬氨酸(ASP)、尿素氮(BUN)、高密度脂蛋白(HDL)、磷(P)含量有显著影响(P<0.05),其中Ⅲ组GLB含量在第1天时显著低于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05);Ⅳ组ASP含量在第1和21天时显著低于Ⅰ组(P<0.05),BUN含量在第1天时显著低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组HDL含量在第21天时显著低于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05);Ⅳ组P含量在第21天时显著低于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05)。综上所述,日粮中添加苜蓿黄酮可调节绵羊脂类代谢,提高氮的利用率;维持体内能量代谢及平衡Ca、P含量;具有潜在的促生长功能;对肝脏功能无不良影响。建议绵羊日粮中苜蓿黄酮的适宜添加量为0.2%。     

桑白皮总黄酮的提取工艺优化及不同方法获取桑白皮的总黄酮提取效果

桑白皮中含有的黄酮类化合物具有多种药用活性。以总黄酮提取率为考察指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验设计对桑白皮总黄酮提取工艺条件进行优化。在最佳提取工艺条件下,比较华南地区大面积种植的4个广东桑桑品种及采用3种取材方法获取的桑白皮的总黄酮提取率。优化的提取工艺条件为:乙醇体积分数60%,提取温度60℃,原料质量浓度25 g/L,浸提时间45 min,提取次数1次。桑品种及桑白皮的取材方法对总黄酮的提取率影响十分明显:同一桑品种用去木质部保留外表黄皮和整根切片2种方法获取的桑白皮中总黄酮提取率都明显大于除去外表黄皮及木质部取材的桑白皮;用去木质部保留外表黄皮和整根切片2种方法取材时,不同桑品种间桑白皮总黄酮的提取率差异较大,但用除去外表黄皮及木质部的方法取材时,不同桑品种间桑白皮总黄酮的提取率差异不明显。桑品种塘10和粤椹大10分别用去木质部保留外表黄皮及整根切片2种取材方法获取的桑白皮中总黄酮的含量较高,分别达到6.87、7.37 mg/g。     

苜蓿总甙提取工艺的研究

笔者研究了苜蓿总甙的提取工艺,通过乙醇浓度、固液比、提取次数、提取温度4个单因素设定L9（3^4）正交试验,确定苜蓿总甙最佳提取工艺：乙醇浓度70％、固液比1：10、提取2次、提取温度80℃。     

大孔树脂纯化苜蓿总黄酮及纯化前后抗氧化能力比较

为了探讨苜蓿(Medicago sativa L.)总黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化特性,本研究以苜蓿干粉为试验材料,采用静态和动态试验,考察树脂种类、上样液pH值和体积、上样液总黄酮质量浓度对苜蓿总黄酮吸附和解吸附性能的影响,确定最佳纯化工艺条件,比较纯化后苜蓿总黄酮的抗氧化能力。结果表明,D101大孔树脂纯化苜蓿总黄酮效果较好,上样液pH值为3、体积为2 BV、质量浓度为0.8mg·mL^-1纯化参数条件下,吸附率和解析率分别为92.72%和75.99%,此条件下苜蓿总黄酮纯度为31.46%。纯化后的苜蓿总黄酮质量浓度为0.8mg·mL^-1时,对二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸、羟自由基和超氧自由基的清除率分别为92.46%,92.23%,87.79%和86.73%,羟自由基的清除能力高于Vc,其它3种自由基清除能力较Vc有所降低,纯化后苜蓿总黄酮抗氧化能力明显增强。     

紫花苜蓿中芦丁的提取及抗菌活性研究

本研究通过正交试验优选了紫花苜蓿中芦丁的提取工艺,以510nm最大吸光度进行可见光谱检测,测定芦丁含量,并对两种供试菌进行了体外抑菌活性测定.结果表明,通过单因素试验确定的各因素影响能力大小为：料液比＞乙醇浓度＞超声提取时间,含量最高为10.04mg/g;大肠埃希氏杆菌的MIC为0.40mg/mL,金黄色葡萄球菌的MIC为0.70mg/mL.     

狗舌草总黄酮的提取及其毒性试验

从狗舌草中提取分离到黄酮类化合物并测定其含量 ,用改良寇氏法测定总黄酮的小鼠LD50 为 ( 1392 52± 94 6 2 )mg/kg ,属于中等毒范围。初步表明其与临床牧区的狗舌草中毒病相关不大 ,可能与狗舌草的抗癌、抑癌作用有关     

山楂黄酮提取工艺的研究

本文以芦丁标准液绘制标准曲线,利用比色法测定山楂提取液中黄酮的含量,从提取温度、提取时间、乙醇浓度、料液比四个方面出发,采用单因素试验分析了各因素对山楂黄酮提取率的影响,并通过正交试验对山楂黄酮的乙醇热回流提取工艺条件进行了优化,结果表明:用体积40倍于其重量的70%乙醇溶液浸泡,70℃作用2h为较佳提取工艺参数,可得到较高产量的山楂黄酮。