蛹虫草菌丝体液体发酵培养条件的优化研究

以蛹虫草菌丝体发酵液中的菌丝体干重和粗多糖产量为指标,筛选出液体培养基的最适碳源为蔗糖,最适氮源为黄豆粉。通过四因素三水平的正交试验,优化出液体发酵培养基的最佳配方为马铃薯20%,蔗糖5%,黄豆粉2%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.1%,维生素B10.01%。并确定了摇瓶最优发酵工艺条件为装液量100 mL·250mL-1三角瓶,菌龄为72 h,接种量为15%,起始pH 6.0,温度24℃,摇床转速150 r·min-1,最适发酵周期为120 h。     

蛹虫草液体发酵培养中菌丝体、分生孢子及虫草素变化规律初探

探究蛹虫草液体发酵培养过程中菌丝体、分生孢子及虫草素三者之间的相互关系,并确定胞外虫草素生成量最高值的培养时间。采用菌丝干重法、血球计数法和高效液相色谱法分别测定菌丝体、分生孢子及虫草素的含量。蛹虫草菌丝生物量在发酵培养第26 d之后趋于稳定,而胞外虫草素产量不断积累并在40 d达到峰值。     

不同配方下固体培养蛹虫草活性成分含量比较

以蚕蛹、黄豆、玉米糁、蛋白胨为原料固体栽培蛹虫草,研究不同配方培养基对蛹虫草虫草素、腺苷、多糖、虫草酸含量的影响。结果表明,配方5下蛹虫草虫草素含量最高,配方1下腺苷含量最高,配方4下多糖、虫草酸含量最高,在纯蛹培养基中添加适量黄豆、玉米糁、蛋白胨有利于蛹虫草活性物质的提高。     

人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化

近年,随着人工栽培蛹虫草面积逐年扩大,迫切需求大规模培育蛹虫草菌种,尤其是液体菌种来满足日益扩大的再生产的需要。采用正交试验设计,选取pH值、温度、通气量3个因素,每个因素设置3个水平,进行液体菌种发酵工艺试验,分析蛹虫草子实体生长影响及生物转化率变化情况。通过试验得到人工栽培蛹虫草液体菌种发酵的最佳组合条件。不同处理对蛹虫草子实体生长有明显变化,3种因素对蛹虫草的生物转化率影响为:温度通气量pH值,其最优组合为温度20℃、pH值5.5、通气量2 L/min。     

蛹虫草发酵菌丝体培养条件研究

[目的]对蛹虫草菌丝生长条件进行优化,为发酵工业中液体深层发酵生产蛹虫草的药用有效成分提供参考。[方法]通过单因素试验,改变碳源、氮源、接种菌龄、培养基起始pH、培养周期、培养温度、摇床速度、接种量和装液量来确定蛹虫草菌丝生长最佳条件。[结果]最佳发酵条件为：碳源为蔗糖,浓度为2％,氮源为蛋白胨,浓度为1％,接种菌龄为36h,培养基起始pH值为6．5,培养周期为6d,培养温度为24℃,摇床速度为200r／min,在250ml锥形瓶中的装液量为150ml;在此条件下,菌丝体干重最大。[结论]该方法获得了蛹虫草C-7发酵菌丝体的最佳培养条件,为蛹虫草的进一步开发利用提供依据。     

蛹虫草子实体中类胡萝卜素的提取工艺优化

以蛹虫草中类胡萝卜素的提取得率为考察指标,分别运用酸热提取法、超声提取法、酸热超声提取法、微波提取法、酸热微波提取法、丙酮提取法提取类胡萝卜素,比较6种方法的提取得率,得出酸热超声提取法是较好的提取方法。采用酸热超声提取法,设盐酸浓度、酸浸时间、沸水浴时间、超声功率、超声温度和超声时间等6个单因素试验,结合L27(313)正交试验设计,优化提取工艺参数。得出酸热超声提取法最优提取条件为盐酸浓度2.25 mol/L,酸浸时间30 min,沸水浴时间6 min,超声功率400 W,超声温度25℃,超声时间25 min,类胡萝卜素提取得率可达1 134.88μg/g;影响提取得率大小的因素依次为超声功率、酸浸时间、盐酸浓度、沸水浴时间、超声温度、超声时间。     

蛹虫草活性成分分析

本研究对实验室分离的虫草菌种进行了鉴定,确定其为蛹虫草,经测定其主要活性成分为虫草多糖11.870g/100g、虫草素0.33g/100g、虫草酸9.9g/100g,含量均高于天然冬虫夏草。     

蛹虫草活性成分分析

本研究对实验室分离的虫草菌种进行了鉴定,确定其为蛹虫草,经测定其主要活性成分为虫草多糖11．870g／100g、虫草素0．33g／100g、虫草酸9．9g／100g,含量均高于天然冬虫夏草。     

不同培养基对蛹虫草子实体中虫草素和腺苷含量的影响

采用不同种类培养基栽培蛹虫草,以虫草素和腺苷含量为指标,筛选出培养蛹虫草的最优培养基。结果表明,最佳栽培培养基配方为3号培养基(大米40 g+纯柞蚕蛹),以3号培养基栽培获得的蛹虫草子实体中虫草素和腺苷含量均为最高,分别达到15 986.3 mg/kg和2176.5 mg/kg,与其它实验组结果的差异达到极显著水平。     

蛹虫草液体发酵培养基的优化

采用统计学方法对1株蛹虫草Cordyceps militaris DY-1菌株进行液体发酵配方优化,以期得到适合蛹虫草生长的最佳培养基配方。以菌丝体干质量浓度为指标,首先采用单次单因子方法筛选出培养基中的最优碳源、氮源及无机盐和正交试验方法得出最佳的碳氮比(C/N);然后采用Plackett-Burman(BP)设计筛选出影响菌丝体干质量浓度的关键因素,通过中心组合和响应面法确定关键因素的最佳浓度,从而得到出菌株DY-1的液体发酵最佳培养基配方为:葡萄糖16.40 g·L-1,酵母浸膏粉5.00 g·L-1,硝酸钾1.00 g·L-1,硫酸镁0.20 g·L-1,磷酸二氢钾1.80 g·L-1,硫酸亚铁0.02 g·L-1。经验证,菌丝体干质量浓度为32.11 g·L-1,与模型的预测值基本一致。运用最佳培养基配方进行液体发酵,菌丝体干质量浓度较基础培养基提高了4.12倍。     

蛹虫草孢子粉活性成分分析

蛹虫草是虫草属的模式种,也是冬虫夏草的近缘种。其活性成分和医疗保健功效与冬虫夏草相近。由于冬虫夏草寄主专一、生境特殊,人工培养尚未完全成功,以致货源稀缺,价格高昂,人们便将研究开发的重点放在蛹虫草上。目前蛹虫草已开发出发酵菌丝体、米饭子实体、蚕蛹草和蚕虫草等品种,但蛹虫草的孢子粉尚未引起人们关注。同属珍贵药用菌的灵芝,人们在开发子实体的同时注重灵芝孢子粉的研究开发,使灵芝孢子粉成为灵芝系列产品的重要品种。为此,我们对蛹虫草孢子粉的活性成分进行分析检测,并与蛹虫草进行对比,以期为研究开发蛹虫草孢子粉提供科学依据。     

人工培养长座线虫草子实体及其菌丝体的挥发性成分分析

首次采用同时蒸馏萃取法(SDE)提取了人工培育的长座线虫草子实体及摇瓶菌丝体的挥发性成分,并用气相色谱质谱联用仪（GC-MS）进行了分析。结果表明,不同培养方式对长座线虫草挥发性物质的数目和含量有较大影响,对挥发性成分的类型影响较大,液体摇瓶菌丝体挥发性物质种类主要有：酮类、醇类、烷烃类、烯烃类、醌类和醚类化合物;子实体中挥发性物质种类主要有：醇类、醛类和酚类。液体摇瓶菌丝体鉴定出20种挥发性物质,以1-辛烯-3-醇(37.70%)为主,人工培养子实体鉴定出6种挥发性物质,以1-辛烯-3-醇（51.93%）和2,6-二叔丁基对甲苯酚（38.37%）为主。2种人工培养物挥发性物质的共有成分为共有成分1-辛烯-3-醇、2,6-二叔丁基对甲苯酚在菌丝体中占51.66%,在子实体的挥发性成分中占90.30%。     

微波真空干燥制备蛹虫草发酵菌丝体的研究

通过正交试验设计,以蛹虫草发酵菌丝体的水分去除率为指标,测定真空度(A)、微波时间(B)、微波功率(C)、物料质量与底盘面积比(D)4个因素对结果的影响。各因素对水分去除率的影响程度依次为因素D>B>C>A,确定了最佳工艺条件为A2B3C3D1,即物料质量与底盘面积比为0.5、微波时间为7 min、微波功率为1 200 W、真空度为0.08 MPa,使菌丝体原料中水分去除率达89.27%。     

液体菌种栽培蛹虫草的技术研究

通过菌种的选取、分离纯化、定期复壮得到性状稳定的优质菌种,采用单级液体发酵装置、摇瓶法、无菌水刮洗斜面菌种、稀疏大米培养基原种等方法制备蛹虫草液体菌种。以大米、玉米等复合培养基和蚕蛹为培养基或寄主,采用液体菌种接种,经过菌丝培养、转色催蕾、除草管理等程序栽培蚕蛹虫草。     

不同添加物对蛹虫草液体发酵虫草素的影响

为探讨8种微量添加物(维生素B1、核黄素、烟酰胺、腺嘌呤、D-泛酸钙、叶酸、钴胺素以及甘氨酸与腺嘌呤混合物)对蛹虫草菌发酵液虫草素产量的影响,筛选提高虫草素产量的最佳方法,将不同质量浓度的微量添加物单独加入蛹虫草液体发酵培养基中,以HPLC法测定发酵液的虫草素产量。结果表明:甘氨酸和腺嘌呤的混合物、腺嘌呤、核黄素、D-泛酸钙均能显著促进虫草素的生物合成,适宜添加质量浓度为:甘氨酸14g/L和腺嘌呤2g/L的混合物、腺嘌呤2g/L、核黄素1g/L、D-泛酸钙2g/L;维生素B1和钴胺素均能促进虫草素的生物合成,适宜添加质量浓度均为2和2g/L;而烟酰胺和叶酸均抑制虫草素的生物合成。其中,添加甘氨酸14g/L和腺嘌呤2g/L的混合物对发酵液虫草素产量的提高作用最显著,比对照提高了103%。当甘氨酸与腺嘌呤的质量浓度比为7∶1时,两者通过协同互补过程促进虫草素合成的作用最为显著;此外,本研究认为甘氨酸和腺嘌呤分别由从头合成和补救合成途径共同促进了虫草素的生物合成。     

液体发酵条件对蛹虫草产虫草素的影响

采用摇瓶培养方法,研究不同发酵条件(培养温度、装液量、初始pH值)对蛹虫草产虫草素的影响。在单因素试验的基础上采用L_9(3~4)正交试验优化发酵培养条件,结果表明:优化后的发酵条件为:培养温度26℃,300 mL三角瓶装液量100 mL,培养液初始pH值6.5。     

蛹虫草菌液体发酵工艺的研究

通过恒温振荡液体培养法,研究了蛹虫草菌合理的发酵条件及其对各营养物质的利用情况。采用正交实验,应用方差分析法,确定了合理的发酵条件:22℃、150 r/m in、pH 6~7、接种量10%、培养时间6d;筛选出合理的液体培养基:蔗糖4.0%、玉米汁3.0%、麸皮3.0%、全脂牛奶粉1.0%、蛋白胨0.5%、VB10.01%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%。     

高产活性成分蛹虫草菌株的筛选

对7株不同的蛹虫草菌株进行比较分析,以期筛选得到高产活性成分的优质蛹虫草菌株。通过对7株蛹虫草菌株子实体的形态、产量、子实体中活性成分(虫草素、虫草酸、腺苷、虫草粗多糖)的含量等进行对比研究。结果表明,菌株H05综合品质最好,子实体产量可达20.4g·瓶-1,虫草素含量为0.523%、腺苷含量为0.556%、虫草酸含量为4.97%,虫草粗多糖含量为9.89%。此菌株子实体产量高,活性成分含量也较高,经济价值高,值得开发利用。     

用响应面法优化人工蛹虫草子实体中虫草素的超声提取工艺

为优化人工蛹虫草子实体中虫草素的超声提取工艺,在单因素试验基础上,利用响应曲面法考察提取温度、超声提取时间以及液料比对虫草素提取率的影响,并对提取工艺进行优化.结果表明:人工培养蛹虫草子实体中虫草素超声提取的优化工艺条件为超声温度50℃,超声提取时间47min,液料比30mL/g,提取次数3次.在此工艺条件下,虫草素提取率的理论值为1.057％.     

桑黄子实体与菌丝体营养成分的比较分析

对桑黄子实体与菌丝体的营养成分进行了分析比较。结果表明,一般营养成分中。除灰分两者相差不大。而菌丝体中粗蛋白、粗脂肪、多糖、还原糖、总糖的含量均明显高于子实体;在所测定的17种氨基酸中,菌丝体总氨基酸的含量明显高于子实体。两者必需氨基酸占氨基酸总量的质量分数比例基本一致;菌丝体总脂肪酸含量比子实体稍高,主要是饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的含量稍高。