苦荞麦中芦丁提取及体外抑菌活性研究

采用乙醇回流法提取苦荞麦中的芦丁,并进行TLC检测、紫外光谱和红外光谱检测。将芦丁对两种供试菌进行体外最小抑制浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)、半数抑菌浓度(IC50)测定。结果表明,其对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.40mg/mL和0.20mg/mL;MBC分别为0.50mg/mL和0.20mg/mL;IC50分别为0.2605mg/mL和0.1607mg/mL。     

航天苜蓿中黄酮提取工艺及抑菌活性研究

用索氏回流进行正交提取航天苜蓿中的黄酮,以510nm最大吸光度进行可见光谱检测,测定黄酮含量,并对两种供试菌进行体外抑菌活性测定。结果表明,通过单因素实验确定的各因素影响能力大小为:pH>浸泡时间>料液比,含量最高为10.04%;对大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC为0.40mg/mL和0.70mg/mL。     

唐古特白刺中黄酮类化合物正交提取工艺与体外抗菌活性研究

用索氏回流法正交提取唐古特白刺中的黄酮类化合物,用黄酮类化合物最大吸光度（吸收波长510 nm）对提取物进行可见光谱检测,测定黄酮类化合物的含量。以芦丁标准品做对照,对比选取最佳提取工艺;并对两种供试菌进行体外最小抑制浓度（MIC）测定。结果表明,乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、超声功率、超声时间的不同对唐古特白刺中黄酮的提取均有影响。其最佳工艺参数为：乙醇浓度65%、乙醇体积250 mL（唐古特白刺10.0 g）、回流时间1 h、超声功率70%、超声时间40 min;对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.35 mg/mL和0.50 mg/mL。     

黄花倒水莲总黄酮的超声提取工艺及其抗菌抗炎效果研究

试验旨在确定黄花倒水莲总黄酮超声提取的最佳条件及其体内抗炎、体外抗菌效果。采用响应面法优化黄花倒水莲总黄酮提取工艺，建立芦丁标准曲线，测定黄花倒水莲总黄酮的吸光度，以黄酮得率为指标，采用单因素、Plackett-Burman试验和Box-Behnken响应面法优化试验条件；通过二甲苯诱导的小鼠耳肿胀评估黄花倒水莲总黄酮的抗炎效果，微量稀释法测定黄花倒水莲总黄酮最小抑菌浓度(MIC)。结果表明，超声提取黄花倒水莲总黄酮的最优提取条件为：超声时间95 min,料液比1∶25,超声功率225 W,乙醇浓度75%;此条件下，验证黄花倒水莲总黄酮得率为6.632 mg/g。黄花倒水莲总黄酮中剂量组对小鼠耳肿胀抑制率达56.46%,对金黄色葡萄球菌4590菌株的MIC值为12.5 mg/mL。本研究为进一步开发黄花倒水莲的药用价值可提供一定试验基础。     

超声辅助紫萼玉簪根多糖提取工艺及抑菌研究

为了筛选紫萼玉簪根多糖的最佳提取条件,并研究紫萼玉簪根多糖抑菌活性,试验采用超声辅助法提取多糖,用硫酸苯酚法测定多糖含量,在料液比、超声次数、超声功率单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面设计法建立数学模型,以确定最佳提取工艺;并测定紫萼玉簪根多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:紫萼玉簪根多糖在超声辅助提取中最佳提取工艺为超声功率390 W(52%),料液比1∶93,超声次数128次(6 min 40 s),多糖得率为23.6%,与理论值相差0.2百分点;紫萼玉簪根多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的MIC分别为18.75 mg/mL、37.5 mg/mL、75 mg/mL。     

牡荆总黄酮提取工艺优化及其对产气荚膜梭菌抑菌活性研究

【目的】 探究牡荆总黄酮的提取工艺，并探讨牡荆提取物对产气荚膜梭菌的抑菌活性。【方法】 以芦丁作为对照品，采用分光光度法对牡荆中的总黄酮含量进行测定；以总黄酮含量为考察指标，先通过单因素试验研究乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比4个单因素对牡荆总黄酮提取量的影响，确定单因素情况下最佳工艺的水平范围；在单因素试验基础上，通过设计L9（3⁴）正交试验，利用NaNO₂-AL （NO₃）₃-NaOH显色法对牡荆总黄酮含量进行测定，绘制标准曲线，计算回归方程，通过精密度、稳定性、重复性、加样回收率进行方法学考察，验证标准曲线。通过将试验所得数据代入标准曲线，比较得出牡荆总黄酮的最佳制备工艺，并在此基础上通过微量二倍稀释法考察其提取物对产气荚膜梭菌的抗菌活性。【结果】 牡荆总黄酮最佳提取工艺条件为：乙醇浓度60%、提取温度50 ℃、提取时间2.5 h、料液比1：35。在此最优提取条件下，牡荆总黄酮含量最高（43.17 mg/g）。其因素影响顺序为料液比>提取时间>乙醇浓度>提取温度，料液比对牡荆总黄酮含量影响最大。最佳工艺下的牡荆提取物对产气荚膜梭菌的最小抑菌浓度（MIC）值为7.81 μg/mL。【结论】 在乙醇浓度60%、提取温度50 ℃、提取时间2.5 h、料液比1：35的条件下提取的牡荆总黄酮含量最高，所制备提取物对产气荚膜梭菌具有较强的抑菌作用，为生产高质量的牡荆提取物提供了理论依据。     

中药单味药及复方对嗜水气单胞菌的体外抑菌作用

本试验用煎煮法提取中药有效成分,采用琼脂平板扩散法探讨了黄连、五倍子、大黄、诃子等中药单味药及中药复方对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的体外抑菌作用,测定了抑菌圈大小.采用双倍试管稀释法测得了最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).试验结果表明,16种中药提取物对嗜水气单胞菌有不同程度的抑制作用,其中五倍子、黄连、诃子、大黄的水提物的抑菌效果最好,MIC值分别为7.81 mg/mL、15,63 mg/mL、31.25 mg/mL、62.50 mg/mL.五倍子作为主药,分别与诃子、黄连、大黄接一定比例组成的复方的MIC分别为3.906 mg/mL、7.813 mg/mL、15.625 mg/mL.通过对筛选的复方与市场上销售的3种成品复方的体外抑菌活性的比较,发现本实验室筛选的复方对嗜水气单胞菌的体外抑菌活性更强.     

响应面法优化玉米须中芦丁的提取工艺及检测

为探讨玉米（Zea mays）须中芦丁提取工艺和检测条件,本试验选取乙醇体积分数、液料比、回流时间和超声时间4个因素,采用响应面法优化玉米须中芦丁的提取工艺,并将最佳工艺条件提取的芦丁样品进行紫外光谱和红外光谱测定。结果表明,玉米须中芦丁的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数49%、液料比30 mL∶1 g、回流时间1.7 h以及超声时间36 min。在该工艺条件下,玉米须芦丁含量为12.152 mg·g-1,且经紫外、红外光谱测定,其主要官能团吸收峰显著,HPLC检测重现性好。说明该工艺对玉米须中芦丁的提取优化效果显著,为玉米须深层次研究提供了一定参考。     

树莓叶黄酮提取的正交试验和响应曲面法工艺优化对比

旨在为树莓叶黄酮的开发应用提供数据参考,通过正交试验与响应曲面法设计改良乙醇提取工艺,并通过HPLC建立树莓叶黄酮的色谱分离条件为:Agilent ZorBax SB色谱柱,流动相为1mg/mL乙酸-乙腈=72.5∶27.5,等度分离,柱温30℃,检测波长:257nm,完成树莓叶黄酮的初步分离,以及黄酮中芦丁含量的准确测定和验证。最佳提取工艺为:646mL/mL乙醇,料液比1∶12.5,41.9℃加热回流173.3min,最佳工艺所得提取率1.127%,响应曲面法最佳工艺提取率略高于正交试验法,且其工艺条件均较优于正交试验所得工艺,可为后期研发树莓叶芦丁兽用中药制剂提供理论参考。     

加减银翘散提取工艺的优化

为优化加减银翘散的提取工艺,以乙醇浓度、提取次数、提取时间、提取方法为因素,以浸膏率和最小抑菌浓度(MIC)为量化指标进行L9(34)正交试验.结果表明,以70％的乙醇作为溶媒,提取2次,每次提取1h,采用超声波与索氏提取相结合的方法提取效果最好,浸膏率达到60.61％,对鸡大肠杆菌的MIC为0.125g/mL,对猪链球菌的MIC为0.177g/mL.     

新疆一枝蒿口服液的制备工艺优化研究

为了探究新疆一枝蒿口服液的最佳制备工艺,采用水提醇沉法提取新疆一枝蒿中的总黄酮,经单因素、响应面试验获取最佳的制备工艺参数,并通过薄层层析与含量限度测定对新疆一枝蒿口服液建立初步的质量控制。结果表明：新疆一枝蒿最佳制备工艺为料液比1:14,煎煮时间为1.5 h,醇沉浓度为50%。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,含量限度测定黄酮含量范围在28.67～29.59 mg/mL,平均值为29.10 mg/mL,最低限度为23.28 mg/mL。     

桑叶中黄酮化合物的提取工艺及不同品种不同时期的含量变化

探讨了不同单因子对桑叶中黄酮成分浸提效果的影响。用80%乙醇作溶剂,原料质量浓度50.00 g/L,于70℃、pH 8的条件下浸提3 h并抽提2次的提取效果较好。以毛细管电泳仪测定、分析了不同品种、不同时期桑叶中的芦丁、槲皮素等成分,湖桑9001叶片中的芦丁含量高,湖桑32号的槲皮素含量高,10月份采摘桑叶中的芦丁和槲皮素的含量最高。芦丁、槲皮素等成分在桑叶中的动态变化:以10 mmol/L磷酸二氢钠-20 mmol/L的硼砂溶液(pH 8.62)作缓冲液,在25℃,20 kV的压力下电泳,245 nm波长处检测,线性关系良好,在8 m in内完全分离。     

Improved Biotin Detection Method of Enduracidinmold

The national standard pinella mildew element biological detection method was improved, using dry filter paper method instead of cylinder plate method, the potassium content of different samples of pinella mold were determined,and the extract composition, extraction time, the concentration of bacteria test and other factors influence on the test results of the established enramycin between concentration and the antibacterial circle diameter of linear equations was studied. The results showed that using acetone extraction liquid acetone (A:1 mol/mL HCl:water =35:12:56, pH value was adjusted to 3.0 with 1 mol/mL HCl) leaching provided sample, extraction time of 3.5 h could fully immersed test of enramycin. Use of biological indicator bacteria CMCC (B) 63501 spore count of 3.4×10⁷ per mL of the measurement of living flat dish, the formation of the inhibitory circle edge rule was clear, good accuracy. Using dry filter paper method could effectively eliminate the extraction or dilute acidic fluid itself to detect strains inhibitory effect, and the utility model had the advantages of simple operation, good repeatability. It could be used for large quantities of samples of enramycin content determination.Enramycin standard solution at concentrations for 150~500 U/mL and its bacteriostatic circle diameter and valence have good linear regression.The resulting regression equation was Y=0.00944X+11.55344, the correlation coefficient was R=0.9962, the final effective range was 0.75~2.5 U, the measured results were more close to the true value.It could be used as an efficient enduracidin determination method, worthy of promotion and use.     

辣蓼黄酮中芦丁、槲皮素与槲皮苷的含量分析

前期研究中运用大孔吸附树脂法对辣蓼黄酮进行分离纯化并对其抗氧化活性进行初步试验,获得令人满意的结果。为了获得质量稳定的辣蓼黄酮,为工业化生产中的质量控制提供实验依据,通过高效液相色谱法,以芦丁、槲皮素与槲皮苷为对照品对辣蓼总黄酮进行目标成分含量测定。结果表明,运用高效液相色谱法测定辣蓼黄酮乙酸乙酯部分(FEA)中芦丁、槲皮素与槲皮苷的含量分别为281.97、160.98、83.31 mg/g,辣蓼黄酮正丁醇部分(FNB)中芦丁、槲皮素与槲皮苷的含量分别为150.33、147.51、73.82 mg/g。该方法简单、准确、灵敏,精密度、重复性好,可作为辣蓼黄酮中芦丁、槲皮素与槲皮苷含量分析的参考方法。     

恩拉霉素生物检测方法的改进

试验对国家标准中恩拉霉素的生物检测方法进行了改进,以干燥滤纸片法代替管碟法对不同样品中的恩拉霉素含量进行了测定;并研究了浸提液组成、浸提时间、检定菌浓度等因素对检测结果的影响,建立了恩拉霉素浓度与抑菌圈直径之间的线性方程。研究结果表明,利用丙酮浸提液A（丙酮：1 mol/mL HCl：水=35：12：56,用1 mol/mL HCl将pH调至3.0）浸提供试品,浸提时间3.5 h,可以充分浸提供试品中的恩拉霉素;使用生物测定指示菌CMCC（B）63501芽孢数为3.4×10⁷个/mL的平皿,形成的抑菌圈边缘规则清晰,准确度好;使用干燥滤纸片法可有效消除浸提液或酸性稀释液本身对检测菌株的抑制作用,且操作简单、重复性好,可以同时对大批量的样品进行恩拉霉素含量的测定。恩拉霉素标准溶液在浓度为150~500 U/mL的范围内,其产生的抑菌圈直径与效价有较好的线性回归性,所得回归方程：Y=0.00944X+11.55344,相关系数R=0.9962,最终有效区间是0.75~2.5 U,测得的结果更接近真实值,可作为一种高效、快速的恩拉霉素含量测定方法,值得推广和使用。     

Content Determination of Total Flavonoids from Rosa laevigata Michx. Fruits and Optimization of Cellulase-assisted Extraction

To determine the content of total flavonoids from Rosa laevigata Michx. fruits, and optimize the process of cellulase-assisted extraction, the content of total flavonoids from Rosa laevigata Michx. fruits were determined with a double-wavelength spectrophotometry with detection wavelength were 500 nm and 580 nm as the reference, using rutin as a standard material, and the process of cellulase-assisted extraction designed by orthogonal test was optimized with the yield of flavonoids as the evaluation index, and the effects of extraction temperature, concentration of ethanol, cellulase dosage, ratio of liquid to material and other 4 factors on the content of total flavonoids were investigated. It showed a good linearity (r=0.9981) between absorbance difference(ΔA) and the rutin mass ranging of 19.90 to 398.00 μg, the standard curve equation was y=0.0008x-0.0047, and the yield of total flavonoids was 87.94 mg/g, the average recovery and RSD were 98.23% and 8.77%, respectively. And the optimumcellulase-assisted extraction conditions of total flavonoids from Rosa laevigata Michx. fruits by orthogonal array design were extraction temperature of 80℃, concentration of ethanol of 40%, cellulase dosage of 0.5%, ratio of liquid to material of 40:1, extraction time of 90 min, pH of 6.0, and extraction numbers of 2. Various factors affecting extracting yield were in a order of extraction temperature > cellulase dosage > ratio of liquid to material > concentration of ethanol. In this condition of extraction, yield of total flavonoids from Rosa laevigata Michx. fruits was (93.35±3.15) mg/g. Therefore, it was suggested that extraction of total flavonoids from Rosa laevigata Michx. fruits by cellulase-assisted extraction was feasible, and the yield of total flavonoids was higher and its conditions was mild.     

金樱子总黄酮的含量测定及酶提工艺优化

为了测定金樱子中的总黄酮含量,并对其纤维素酶辅助提取工艺进行优化,本研究以芦丁为对照品,采用双波长分光光度法,确定测定波长500 nm,参比波长580 nm,对金樱子中的总黄酮含量进行测定;以总黄酮得率为评价指标,考察提取温度、乙醇浓度、纤维素酶用量、液料比等4个因素对总黄酮得率的影响,正交优化纤维素酶辅助提取金樱子总黄酮的工艺。结果表明,在19.90~398.00 μg范围内,芦丁的质量与吸光度差值ΔA呈良好的线性关系（r=0.9981）,标准曲线方程为y=0.0008x-0.0047,该方法下测得其得率为87.94 mg/g,平均加样回收率98.23%,相对标准偏差为8.77%;正交试验优化的纤维素酶法辅助提取金樱子总黄酮的最佳工艺条件为：提取温度80℃、乙醇浓度40%、纤维素酶用量0.5%、液料比40：1、提取时间90 min、pH为6.0、提取次数2次,且各因素对金樱子总黄酮提取得率的影响顺序为：提取温度 > 纤维素酶用量 > 液料比 > 乙醇浓度;在该提取条件下,金樱子总黄酮得率为（93.35±3.15）mg/g。因此,纤维素酶法辅助提取金樱子总黄酮可行,得率较高,条件温和。     

响应面法优化秃疮花中生物碱提取工艺及抑菌活性研究

以秃疮花为研究对象,在单因素水平测定的基础上,通过响应面法优化其提取工艺,并使用响应面法提取浓缩液进行抑菌活性测定,以大肠埃希氏杆菌为研究对象,进行透射电镜观察。结果显示,秃疮花生物碱最佳提取工艺条件为:液料比15 mL/g、超声时间35 min、回流时间2.5 h、乙醇浓度65%,在此工艺下秃疮花生物碱含量为9.33%;其响应面法提取浓缩液对大肠埃希氏杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌的最小抑菌浓度分别为0.20,0.15和0.35 mg/mL,最低杀菌浓度分别为0.15,0.10和0.30 mg/mL;在透射电镜下观察到对大肠埃希氏杆菌抑制效果显著。表明响应面法对秃疮花生物碱提取工艺的优化比较合理。     

勿忘我花中总黄酮含量测定

目的：建立勿忘我花中总黄酮含量的测定方法。方法：以芦丁为标准品,用比色法在512 nm波长处测定勿忘我花中总黄酮含量。结果：芦丁在4-24μg/mL范围内呈现良好的线性关系,回归方程为A=0.0121C-0.0011,R=0.9999,总黄酮含量为1.3%,平均回收率为99.65%,RSD为2.4%。结论：本方法稳定可靠,重复性良好,灵敏度高。