产志贺毒素大肠杆菌stx2a和stx2b的血清和牛奶抗体检测

于新桥医院采集健康人群血清535份,两个屠宰场采集商品猪血清415份,5家奶牛场和1家奶站采集新鲜牛奶326份,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清（牛奶）中的stx2a和stx2b抗体．用P／N〉2．1作为阳性判定标准,535份健康人群血清检测到stx2a抗体阳性和stx2b抗体阳性血清各21份（3．93％）;415份商品猪血清检测到stx2a抗体阳性血清4份（0．96％）,stx2b抗体阳性血清2份（0．48％）;326份新鲜牛奶检测到stx2a抗体阳性血清25份（7．46％）,stx2b抗体阳性血清21份（6．44％）．牛奶中stx2抗体阳性率最高,健康人群血清次之,商品猪血清的阳性率最低．由此表明重庆市STEC菌株中携带stx2基因．     

襄阳市规模化猪场猪圆环病毒2型抗体水平研究

[目的]了解襄阳市规模化猪场猪2型圆环病毒的免疫水平。[方法]2013年1~12月对襄阳市27家规模化猪场已接种PCV2疫苗的母猪和保育猪采集1 150份血样,采用ELISA方法对猪群血清中PCV2的抗体水平进行检测。[结果]在检测的1 150份血样中,阳性数814份,总体阳性率为70.8%。其中,抗体弱阳性样本456份,占39.7%;抗体强阳性样本有358份,占31.1%。[结论]应对襄阳市猪群PCV2免疫程序进行优化,提高PCV2的血清抗体浓度,从而控制猪群PCV2的疫情。     

出血性大肠杆菌O157：H7的Tir与stx1／2B融合基因的构建和表达

为了更好防治由出血性大肠杆菌O157：H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗．其中亚单位疫苗具有很大优势。方法：构建表达tir和stxb的融合基因。将tir基因中间295个氨基酸残基（Tir295）与stxB亚基基因72个氨基酸串联。构建pET28a—stx2b—Tir295-stx1b重组质粒,将其转化于BL21（DE3）,用IPTG进行诱导表达,经SDS--PAGE电沫检测,该融合蛋白获得了高效表达。结果：薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30％左右。结论：由于该融合蛋白由Tir、stx1b和stx2b三部分抗原组成．可刺激机体产生针时转位紧密素受体（Tir）和志贺毒素（stx）的抗体,在EHEC0157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。     

新疆南疆地区犬蜱传伯氏疏螺旋体血清流行病学调查

了解新疆南疆地区犬伯氏疏螺旋体感染的情况及流行特点,本研究采用酶联免疫吸附试验法对从新疆南疆采集的160份犬血清进行抗伯氏疏螺旋体IgG抗体检测,比较不同来源及不同性别犬伯氏疏螺旋体抗体阳性率的差异,采用巢式PCR方法扩增伯氏疏螺旋体rrf(5S)~rrl(23S)rRNA间隔区片段进行血清样本的病原学检测。结果表明,160份被检血清中18份抗伯氏疏螺旋体IgG抗体阳性,阳性率为11.25%,其中,农村饲养犬的阳性率为21.81%(12/55),城市家养犬的阳性率为5.71%(6/105),差异极显著(P0.01);雄性犬和雌性犬的抗体阳性率依次为11.63%(10/86)和10.81%(8/74),差异不显著(P0.05)。巢式PCR检测到2份阳性样品,测序结果表明犬感染伯氏疏螺旋体属于B.garinii.基因型。     

ELISA方法检测猪和羊血清中甲型流感抗体的研究

目的:用ELISA方法检测来自安徽铜陵市、凤阳县及蚌埠市养殖场所采集的91份羊与91份猪的血清中甲型流感阳性抗体,以确定其中阳性血清和其所占总量中的比例。方法:采集的样品在实验室经过冷冻离心机来分离血清,并且用ELISA法对这些血清样品进行检测分析,以此检测猪和羊血清中甲型流感的抗体水平。结果:在91份羊血清样品中检测到3份甲型流感阳性抗体,占血清总数的3.3%;在91份猪血清样品中检测到21份甲型流感阳性抗体,占血清总数的23.1%。结论:说明在安徽地区,甲型流感属部分感染且在猪中的感染率高于羊。     

家禽密切接触人群禽流感和新城疫血清学调查

为了评估家禽密切接触人群感染新城疫和禽流感病毒的风险,分别采集21份规模化养禽场和20份从事禽产品加工的屠宰场工作人员血清样品,采用微量中和试验检测人血清样品中新城疫和禽流感(H5和H9亚型)病毒抗体。结果发现,养禽场工作人员新城疫病毒抗体阳性率为33.3%,禽流感(H5和H9亚型)病毒抗体均为阴性;屠宰场工作人员新城疫病毒抗体阳性率为5%,禽流感(H5和H9亚型)病毒抗体均为阴性。结果表明新城疫病毒能够感染人,而目前国内流行的禽流感病毒感染人群的可能性较小。但是,由于禽流感病毒很容易发生变异和持续进化,有必要对家禽密切接触人群进行血清学监测。     

豫北地区猪圆环病毒2型感染的血清学调查

[目的]明确河南省豫北地区PCV2感染的流行情况,以便控制PCV2感染的流行。[方法]从河南省豫北地区安阳、鹤壁、新乡、濮阳4市的猪场采集不同日龄猪群血清样品338份,用间接ELISA方法进行猪圆环病毒2型(PCV2)感染的血清抗体检测。[结果]结果表明:PCV2血清抗体阳性率:哺乳仔猪为16.0%(8/50);断奶仔猪为49.5%(53/117);生长肥育猪为51.4%(36/70);种公猪为18.1%(4/22);后备母猪为20.6%(7/34);经产母猪为54.5%(29/55);阳性率为70.4%(19/27),338份血清总阳性率为40.6%(137/338)。[结论]河南省豫北地区养猪业已受到猪圆环病毒2型的感染,应引起高度重视。     

泰州地区宠物弓形虫感染流行现状调查与防治

为调查泰州地区宠物犬猫弓形虫感染流行现状,随机采集泰州地区不同来源犬与猫的血液样本,采用弓形虫抗体ELISA试剂盒与弓形虫抗体胶体金试纸条2种方法对该地区犬猫弓形虫感染情况进行流行病学调查,并开展治疗试验。结果表明,该地区597份宠物血清样本经ELISA试剂盒与胶体金试纸条2种方法检测出的弓形虫抗体阳性率分别为12.06%(犬8.05%,猫19.34%)、11.60%(犬7.79%,猫18.40%);且农村散养犬和猪与流浪犬和猫的血清弓形虫抗体阳性率最高;成年犬和猫的弓形虫抗体阳性率明显高于幼年犬和猫;春季采集的犬和猫血清样本弓形虫抗体阳性率最高;阳性样本宠物主人血清弓形虫抗体阳性率为8.57%;对于具有临床症状的感染犬猫通过综合治疗措施,治愈率达81.82%。同时数据显示,ELISA试剂盒检测敏感性高于胶体金试纸条,但两者差异不显著。     

贵州省家畜布氏杆菌病血清学检测

为了解贵州省各地区布氏杆菌病流行情况,采用试管凝集试验对部分地区牛血清(706份)、羊血清(180份)、猪血清(720份)共计1606份进行了试验检测.结果表明:牛阳性血清7份,阳性率0.99%(7/706);羊阳性血清2份,阳性率1.11%(2/180);猪阳性血清3份,阳性率0.42%(3/720).贵州部分地区存在布氏杆菌病感染的可能.     

陕西省PCV2感染的血清学调查

2004-01~2005-06,从陕西榆林、宝鸡、西安、渭南、汉中、商洛、安康等7个地区的猪场采集不同日龄猪血清样品237份,用间接EL ISA方法进行猪圆环病毒2型(PCV 2)感染的血清抗体检测,并用阻断EL ISA方法对部分血清样品进行了猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因蛋白的抗体检测。结果表明,未断奶仔猪PCV 2血清抗体阳性率为0%(0/40),断奶仔猪为28.6%(2/7),肥育猪为43.7%(31/71),种公猪为7.7%(1/13),后备母猪为15.6%(7/45),经产母猪为60.4%(29/48),临床上有多系统衰竭综合征(PMW S)疑似症状的13头断奶仔猪的阳性率为61.5%(8/13),237份血清的总阳性率为32.9%(78/237);PCV 2与PRV混合感染率为21.7%(5/23)。     

产志贺毒素大肠杆菌stx2基因荧光定量PCR检测方法的建立及应用(英文)

[目的]建立检测产志贺毒素性大肠杆菌(STEC)stx2基因荧光定量PCR方法。[方法]根据GenBank中已发表的STEC stx2基因序列,在保守区域设计PCR引物和探针,构建重组质粒作为阳性模板,优化反应条件,建立荧光定量PCR方法。[结果]利用优化的荧光定量PCR反应体系建立了标准曲线。表明起始模板浓度与Ct值之间线性关系好,相关系数R2均达0.995以上;此方法特异性好,对10种非STEC肠道病菌无特异性扩增;敏感性高,初始模板的检出下限达1.0×102拷贝数/μl;重复性好,批内、指间变异系数均分别小于1%和5%。[结论]该研究成功建立了检测STEC stx2基因的荧光定量PCR方法,为快速检测样品中STEC提供了技术手段。     

Ti/RuO2-SnO2-CeO2/PbO2电极的制备及其电催化性能研究

[目的]通过引入新型三元过渡中间层(RuO_2-SnO_2-CeO_2)对Ti/PbO_2电极进行改性,提高电极活性及使用寿命。[方法]采用溶胶凝胶法制备RuO_2-SnO_2-CeO_2,通过X射线衍射(XRD)测试表征中间层结构及物象成分,并对改性电极进行循环伏安(CV)、电化学阻抗(EIS)、电催化降解4-氯酚及寿命加速等电化学性能测试,研究电极性能。[结果]RuO_2-SnO_2-CeO_2可以形成稳定的固溶体氧化物,对基底起到保护作用,电极寿命延长超过5.5倍,且具有更高的电催化活性。[结论]RuO_2-SnO_2-CeO_2的引入,提高了电极寿命及电催化活性。     

草炭溶解态有机物质与Cu~(2+)、Cd~(2+)、Pb~(2+)、Zn~(2+)络合物的红外光谱

草炭有机质提取物胡敏酸、富里酸、水溶解态有机质的红外光谱研究显示 ,三者的含氧官能团组成相似 ,但基团含量差异较大 .胡敏酸、富里酸、水溶解态有机质与金属离子 (Cu2 +、Cd2 +、Pb2 +、Zn2 + )络合物的红外光谱表明 ,除 -COOH外 ,-OH、C=O、-NH2 等官能团也参与了对金属离子的络合 ,但不能很好地揭示哪种金属离子具有形成络合物的最大倾向     

H2CN2和CaCN2对酿酒葡萄萌芽开花及成熟期的影响

试验于2001年10月-2002年8月在攀枝花进行。处理药剂及其浓度为16.7?CN2、0.5%~2.0%H2CN2、0.5%~2.0%H2CN2 1%吐温80;处理时期为12月25日、1月10日、1月25日。最佳处理时间是1月10日;最佳处理组合是1.0%H2CN2 1.0%吐温80,霞多丽、佳美、梅尔诺、黑虎香分别提前萌芽16、13、11、4d;提前成熟17、13、14、6d;提高萌芽率4%、12%、17%、9%;芽眼成枝率提高40%、29%、37%、12%;提高果枝率为9%、8%、28%、4%,提高结果系数7%、7%、37%、3%。不同品种对处理反应有差异,对照黑虎香有药害现象。     

关于 Pell 方程组 x2-s2(s2-1 )y2 =1 与 y2-Dz2 =4的解

设D=p_1…p_j(1≤j≤3),p_1,…,p_j(1≤j≤3)是互异的奇素数.利用初等方法讨论了Pell方程组x~2-s~2(s~2-1)y~2=1(s∈Z+,s≥2)与y~2-Dz~2=4的解的情况.     

过表达ApGSMT2和ApDMT2基因的拟南芥和玉米耐盐性分析

玉米是对土壤盐渍化中度敏感的作物,易受盐碱危害。甘氨酸甜菜碱作为一种主要的渗透保护物质,能够提高植物对多种非生物胁迫(如盐碱、干旱、低温等)的抗性。本工作前期从嗜盐隐杆藻中克隆得到两个参与甘氨酸甜菜碱合成的甲基转移酶基因ApGSMT2和ApDMT2,利用农杆菌介导法,将两个基因分别在拟南芥和玉米中共同过表达,获得转基因阳性株,收获T_1代转基因种子,经自交后得到T_2代种子。以拟南芥T_2代种子为试材,设置0、50、100、150、200 mmol/L NaCl处理,进行种子萌发试验,结果显示,不同盐浓度处理下,转基因拟南芥种子的萌发率显著高于未转基因对照植株,说明过表达ApGSMT2和ApDMT2基因对于提高拟南芥的耐盐性具有显著效果。进一步对T_2代转基因玉米株系幼苗的耐盐性进行试验,结果表明,180 mmol/L NaCl处理后,未转基因对照植株萎蔫,而转基因株系长势良好,其株高、根长、叶片相对含水量和鲜重显著高于对照,说明过表达ApGSMT2和ApDMT2基因显著提高了玉米对盐胁迫的耐受性,为利用基因工程技术创制玉米耐盐种质提供了理论依据。     

Cu~(2+)、Hg~(2+)及其混合胁迫对阿根廷蜈蚣草生理的影响

为寻求水环境中重金属监测的指示植物应用于生产,通过离子溶液浸泡试验,研究Cu~(2+)、Hg~(2+)及其混合胁迫对高等水生沉水植物阿根廷蜈蚣草可溶性蛋白质含量、可溶性糖含量和MDA(丙二醛)含量、CAT(过氧化氢酶)活性等生理生化指标的影响。结果表明:1)可溶性蛋白质和可溶性糖含量随胁迫强度的增加而持续下降,当Cu~(2+)、Cu~(2+)+Hg~(2+)混合处理浓度≤1 mg/L时,可溶性蛋白质含量上升;2)MDA含量与受胁迫强度呈正相关关系;3)在胁迫处理24h内,CAT活性逐渐升高,而后随时间延长活性下降,直至出现抑制现象;4)同浓度处理对阿根廷蜈蚣草生理胁迫强度为Cu~(2+)Hg~(2+)Cu~(2+)+Hg~(2+)。     

猪圆环病毒Ⅱ型ZZ株ORF2基因的扩增、测序

合成一对猪Ⅱ型圆环病毒（PCV-2）ORF2基因特异性引物,对郑州分离株（ZZ）猪圆环病毒PCV-2型的ORF2基因进行了扩增。经测序后,并在GeneBank注册。     

蛋白核小球藻对铅、镉和汞吸附速率及其影响因素的研究

通过吸附时间、藻细胞密度和重金属浓度等参数条件的变化,研究蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)对海水中Pb2+、Cd2+和Hg2+的吸附.结果表明,蛋白核小球藻对pb2+、Cd2+和Hg2+的吸附率分别在2～4 d内快速升高后趋于平衡,而吸附量在第1d达到最大值后逐渐变小.藻细胞密度为1×106 ...