FABP4转基因牛的分子生物学鉴定

【目的】对前期获得的3头转基因牛进行分子生物学评价,包括转基因阳性鉴定、基因及蛋白表达水平的检测,旨在进一步为转基因牛的安全评价提供一些科学依据。【方法】根据GenBank上公布的牛FABP4基因（GenBank登录号：NM_174314）mRNA序列,利用兼并密码子对现有FABP4基因进行突变,并构建了pEGFP-C1-FABP4真核表达载体、通过细胞转染、体细胞核移植、胚胎移植技术获得3头转基因牛;分别采集了1号转基因牛不同组织样,2、3号转基因牛与野生型个体8、10、12、14月龄的血液样本,利用RT-PCR技术对所获转基因个体的阳性与否进行了鉴定;同时利用荧光定量PCR技术检测了1号转基因牛不同组织中外源性FABP4基因的表达情况,并分析了2、3号转基因牛在8-14月龄之间,外源性FABP4基因、内源性FABP4基因的变化趋势,并通过叠加转基因牛外源与内源性FABP4基因的表达量,分析了转基因牛和非转基因牛FABP4基因的整体表达水平差异;通过Western blotting技术分析了3头转基因牛外源性FABP4基因的蛋白表达水平。【结果】①对所获得的3头转基因牛RT-PCR检测发现,3头转基因个体各样本均在205 bp处产生条带,而妊娠母牛及阴性对照在205 bp处均未有条带出现,初步表明3头转基因牛均为转基因阳性。②实时定量PCR检测表明,1号转基因牛的外源性FABP4基因在多数组织均有较高表达,其中脂肪组织表达量最高、肾脏和背最长肌次之,肺部的相对表达量极低。3号转基因牛外源性FABP4基因的表达水平高于2号转基因牛,且2、3号转基因牛外源性FABP4基因的表达水平随月龄变化均呈现先上升后下降趋势;在内源性FABP4基因表达水平检测中发现,外源性FABP4基因的转入抑制了转基因牛体内内源性FABP4基因的表达,且随月龄变化转基因牛体内内源性FABP4基因表达水平均呈现上升趋势;野生型牛内源性FABP4基因的表达水平随着月龄变化逐步下降,而转基因牛体内内源性FABP4基因的表达量均低于野生型牛;通过对2、3号转基因牛外源与内源性FABP4基因相对表达量的叠加分析发现,转基因牛FABP4基因整体表达量较野生型大幅升高。③蛋白表达检测结果与mRNA检测结果基本一致,外源性FABP4基因在1号转基因牛除肺部外的各个组织均检测到外源FABP4基因的蛋白表达,其中背最长肌表达量最高;3号转基因牛蛋白表达水平高于2号转基因牛。【结论】获得的3头牛均为FABP4阳性转基因牛,且外源性FABP4基因在体内能够正常表达,转基因牛FABP4表达量较野生型大幅升高,同时外源性FABP4基因的转入抑制了内源性FABP4基因的表达。     

中药活性小分子5-羟甲基糠醛生物活性研究进展

鉴于5-羟甲基糠醛生物活性的研究备受关注,总结了5-羟甲基糠醛的性质,归纳了其毒副作用及药理作用,提出5-羟甲基糠醛可能是一种隐藏在中药背后新的活性成分,有很好的开发前景,值得进一步研究。     

circRNA的生物学功能及其在家畜动物上的研究进展

环状RNA（circRNA）是一类内源性的环状非编码RNA。目前circRNA的研究主要集中在癌症、肿瘤等方面,在家畜动物中的研究较少且主要集中在circRNA的信息挖掘。本文对circRNA的生成方式、分类、研究方法及生物学功能等方面进行了总结,对其在家畜动物肌肉发育、脂肪沉积等方面的研究进展进行了归纳,对目前家畜动物circRNA研究中存在的问题进行了分析总结,并对其未来的研究方向进行了展望。     

胸腺肽生物学功能的研究进展

对胸腺肽生物学功能的研究进展作一综述,包括胸腺肽对免疫系统、生殖系统及脂类代谢的调节作用和与神经内分泌系统的相互调节作用,并提出今后胸腺肽在农业中的研究重点。     

植物角质层结构组成、生物学功能及分离方法研究进展

角质层包括角质和蜡质,是覆盖在花、叶和非木质茎等植物地上部分器官的一层疏水性脂类物质,具有限制植物体内水分过度散失、抵御紫外辐射、防止病虫害入侵等功能,在植物生长发育和适应生物与非生物逆境过程中起到重要保护作用。角质层结构以及化学组成是影响其生物学功能的主要原因,具有十分重要的研究价值。综述了植物角质层的结构组成、生物学功能及其常用分离方法,并对已有研究中存在的问题进行了探讨,以期为今后角质层生理作用及其生物学功能方面研究提供理论参考。     

铜的生物学功能及其应用

铜是动物必需的微量元素之一,在动物生长代谢过程中发挥重要作用。文章就铜的生物学功能及高铜的促生长作用机理进行综述。     

农业生物多样性的内涵与功能及其保护

概述农业生物多样性的内涵与功能,阐述农业生物多样性保护的必要性,综述农业生物多样性保护的研究概况。     

脂溶性维生素的生物学功能及其应用

脂溶性维生素参与动物体内的多种化学反应,维持机体组织、细胞功能和结构的完整性。饲料中脂溶性维生素缺乏或过量会引起动物的一些代谢病,影响生产性能。文章综述了脂溶性维生素的生物学功能及其应用。     

硒的生物学功效及富硒果品研究进展

综述硒的重要生物学功能、硒与疾病的关系、人体对硒的安全摄入量以及富硒果品的研究现状及其开发。     

生物入侵机理研究进展

综述生物入侵机理的生态学研究、生理学研究、分子生物学研究,并展望今后的研究方向。     

莽草酸的制备及其生物学功能研究进展

文章综述了莽草酸的理化性质、制备途径及生物学功能,重点探讨了莽草酸的来源,提取分离和纯化方法以及在抗菌抗肿瘤、抗心血管疾病、抗炎镇痛、抗禽流感等方面的应用。     

病程相关5蛋白功能机理研究进展

介绍了病程相关5（PR-5）蛋白的结构特征、功能与机理,指出其在植物抵御真菌类病害中具有重要作用,并对其应用于转基因研究进行了展望。     

蜂胶的生物学功能及其在养猪生产中的应用

我国是养蜂大国,蜂胶资源丰富。研究发现,蜂胶具有抗菌消炎、增强机体免疫力、抗氧化、调节血糖和血脂及保护肝脏等功效,且蜂胶应用于养猪生产能够带来很好的经济效益。文章综述了蜂胶的生物学功能及蜂胶在养猪生产中的应用。     

生物入侵生态学研究进展

概述了生物入侵的过程和途径、入侵机理及其生态学效应,在此基础上,提出了相关对策。     

灰霉病菌(Botrytis cinerea)生物防治研究进展

综述了国内外利用相关拮抗微生物防治作物灰霉病菌的研究历史与现状，介绍了国内外用于防治灰霉病菌的几类主要微生物；阐述了灰霉病生物防治的主要机理；讨论了目前生物防治中存在的主要问题，并就应用前景作了评述，认为生物防治在未来作物灰霉病的防治和人类安全问题中将发挥重要的作用。     

松多酚生物活性研究进展

松多酚是一种来源广泛、资源价值极高的天然产物,具有一系列独特的化学性质和生物活性,可广泛应用于食品、医药、化妆品、保健品及高分子材料等领域。通过对松多酚抗氧化、降血糖、降血脂、降血压、抗癌、抗茵、抗炎及抗辐射等方面的研究进展进行综述,进一步为松多酚的应用提供理论依据。     

酸化剂的生物学功能及其在断奶仔猪中的应用

随着人们对饲料的研究深入以及对动物生产性能要求,各种饲料添加剂应运而生,而酸化剂以无污染、无残留、快速吸收及绿色环保的优点成为与益生素、酶制剂等并列的重要添加剂。酸化剂可以降低饲料pH、促进对矿物质元素的吸收、增加饲料适口性、提高畜禽的免疫力和抗应激反应。文章综述了酸化剂的定义、分类、生物学功能、研究现状以及应用前景。     

菊科植物生物活性研究概述

综述了近年来菊科植物生物活性的研究,主要从其在医药、保健品、化妆品及农药等方面活性成分的研究情况进行概述,并分析了其发展方向及前景。     

真菌毒素生物防治研究进展

真菌毒素是一类由丝状真菌在适宜的条件下产生的有毒次级代谢产物,可在作物收获前和贮藏期间广泛污染油料作物、禾谷类作物、豆类作物、坚果类及其加工品,不仅导致产量降低、品质下降,而且对人类和动物的健康也造成严重危害。评述了主要真菌毒素的种类、危害、限量及其生物防治研究现状,介绍了黄曲霉毒素和镰刀菌毒素生防微生物及活性物质的筛选新模型,提出了我国真菌毒素生物防治研究的政策与重点领域。     

共轭亚油酸的生物学功能及对猪生产性能和肉品质的影响

共轭亚油酸(Conjugated Linoleic Acids,简称CLA)是一系列含有共轭双键、具有位置和构象异构的十八碳二烯酸的总称,是必需脂肪酸、亚油酸的异构体。共轭亚油酸具有抗癌、降低脂肪沉积、增强免疫能力等许多生理活性。本文对CLA的来源与合成、主要生物学功能、降低动物脂肪沉积的机理以及对猪肉品质的影响等进行了综合论述。